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生鳖甲与醋鳖甲抗肝纤维化有效部位的HPCE 指纹图谱分析
作者:陈凯
来源:《中国民族民间医药·上半月》2014年第01期
【摘要】目的:分析生鳖甲与醋鳖甲抗肝纤维化有效物质部位HPCE 指纹图谱。方法:通过毛细管区电泳法,57cm×75μm的熔融未涂层石英毛细管,100mmol/L三氰甲基氨基甲烷-20mmol/L磷酸氢二钠的运行缓冲液,18KV 的分离电压,254nm 的检测波长,20℃的柱温,分别构建10批醋鳖甲与生鳖甲有效物质部位HPCE 指纹图谱,以此进行相关对比分析。结果:17个生鳖甲指纹图谱共有峰,094以上的HPCE 图谱相似度;19个醋鳖甲指纹图谱共有峰,0.93以上的HPCE 图谱相似度; 但对照10批醋鳖甲与生鳖甲指纹图谱,两批相似度下降,为086-093。此外,10批生鳖甲与醋鳖甲指纹图谱相似度也下降,为086~092。结论:炮制鳖甲前后含量与化学成分都会发生变化,而且在炮制后会有新有效成分产生。
【关键词】 鳖甲,指纹图谱,HPCE ,有效成分
【中图分类号】R2841【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517(2014)01-0009-01 鳖甲为鳖科动物鳖的背甲,具有软坚散结、滋阴潜阳以及除蒸退热功效,常用于治疗肝纤维化,入药一般为醋制鳖甲[1]。中医认为,生鳖甲具有非常强的潜阳熄风与养阴清热功效,主要用于虚风内动、内伤虚热或者热病伤阴等病症。
1实验材料
5000型BeckmanP/AsystemHPCE仪;FD-1A-50冷冻干燥机;78-1型磁力加热搅拌器;KQ-250B 超声波清洗器。水为双蒸水,鳖甲药材来自浙江衢化医院,其中所选10批醋鳖甲是根据《中华药典》由10批生鳖甲炮制而成。
2方法与结果
21供试品溶液的制备称取25g 生鳖甲粉,加水200ml 进行20min 的超声提取,抽滤,所留残渣加10ml 水,超声10min ,合并滤液,抽滤,冷冻,取冻干粉,加入少量水进行溶解,并放在透析膜中,200ml 的纯水膜外溶液,2次透析,5h/次,合并膜外溶液,同时冷冻干燥。对50mg/ml冻干粉水溶液进行精密称取,在通过022μm的滤膜进行过滤,根据鳖甲供试品相同炮制方法,对醋鳖甲供试品溶液进行炮制。
22有效组分对照组与对照品溶液的制备从本实验中鳖甲有效抗肝纤维化物质中所分离出的活性五肽,进行01mg/ml浓度水溶液的配制,并将其视为对照品溶液; 同时把实验中药理筛
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生鳖甲与醋鳖甲抗肝纤维化有效部位的HPCE 指纹图谱分析
作者:陈凯
来源:《中国民族民间医药·上半月》2014年第01期
【摘要】目的:分析生鳖甲与醋鳖甲抗肝纤维化有效物质部位HPCE 指纹图谱。方法:通过毛细管区电泳法,57cm×75μm的熔融未涂层石英毛细管,100mmol/L三氰甲基氨基甲烷-20mmol/L磷酸氢二钠的运行缓冲液,18KV 的分离电压,254nm 的检测波长,20℃的柱温,分别构建10批醋鳖甲与生鳖甲有效物质部位HPCE 指纹图谱,以此进行相关对比分析。结果:17个生鳖甲指纹图谱共有峰,094以上的HPCE 图谱相似度;19个醋鳖甲指纹图谱共有峰,0.93以上的HPCE 图谱相似度; 但对照10批醋鳖甲与生鳖甲指纹图谱,两批相似度下降,为086-093。此外,10批生鳖甲与醋鳖甲指纹图谱相似度也下降,为086~092。结论:炮制鳖甲前后含量与化学成分都会发生变化,而且在炮制后会有新有效成分产生。
【关键词】 鳖甲,指纹图谱,HPCE ,有效成分
【中图分类号】R2841【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517(2014)01-0009-01 鳖甲为鳖科动物鳖的背甲,具有软坚散结、滋阴潜阳以及除蒸退热功效,常用于治疗肝纤维化,入药一般为醋制鳖甲[1]。中医认为,生鳖甲具有非常强的潜阳熄风与养阴清热功效,主要用于虚风内动、内伤虚热或者热病伤阴等病症。
1实验材料
5000型BeckmanP/AsystemHPCE仪;FD-1A-50冷冻干燥机;78-1型磁力加热搅拌器;KQ-250B 超声波清洗器。水为双蒸水,鳖甲药材来自浙江衢化医院,其中所选10批醋鳖甲是根据《中华药典》由10批生鳖甲炮制而成。
2方法与结果
21供试品溶液的制备称取25g 生鳖甲粉,加水200ml 进行20min 的超声提取,抽滤,所留残渣加10ml 水,超声10min ,合并滤液,抽滤,冷冻,取冻干粉,加入少量水进行溶解,并放在透析膜中,200ml 的纯水膜外溶液,2次透析,5h/次,合并膜外溶液,同时冷冻干燥。对50mg/ml冻干粉水溶液进行精密称取,在通过022μm的滤膜进行过滤,根据鳖甲供试品相同炮制方法,对醋鳖甲供试品溶液进行炮制。
22有效组分对照组与对照品溶液的制备从本实验中鳖甲有效抗肝纤维化物质中所分离出的活性五肽,进行01mg/ml浓度水溶液的配制,并将其视为对照品溶液; 同时把实验中药理筛