一. 名词解释
1.核酸的分子杂交 :存在互补序列的不同来源的核酸分子,以碱基配对方式相互结合形成
DNA-DMA或DNA-RNA杂交体的过程。
2.核小体: 组成真核细胞染色体的基本结构单位,由组蛋白和大约200个bp的DNA组成
的直径约10nm的球形小体。其核心由H2A、H2B、H3和H4四种组蛋白各两
个分子组成八聚体构成。
3.启动子 : DNA链上能指示RNA转录起始的DNA序列称为启动子。是DNA分子可以与
RNA聚合酶特异结合的部位,也就是使转录开始的部位。在基因表达的调控中,转录的开始是个关键。常常因为某个基因是否应当表达决定在特定的启动子起始
过程。
4.RNA编辑 :是在mRNA水平上改变遗传信息的过程。指细胞核中初级转录产物hnRNA
的序列改变,使C变为U或者A变为G,结果一个基因表达产生不止一种蛋
白质,增加了遗传信息容量。5.S-D序列:即原核生物mRNA的核糖体结合
位点,它是位于AUG上游8-13核苷酸处的一个短片段。
6.分子伴侣 :帮助新生多肽链折叠成天然空间构象的一类保守蛋白质(如热休克蛋白),
在原核细胞和真核细胞中广泛存在。
7.弱化子或衰减子:位于结构基因上游前导区调节基因表达的功能单位,前导区转录的前导
RNA通过构象变化终止或减弱转录。
8.反式作用因子:指真核基因的转录调节蛋白,包含DNA结合结构域和转录激活结构域。
它们与顺式作用元件、RNA聚合酶相互作用、以及转录因子之间相互协同或者拮抗,反式调控另一基因的转录。
二.论述题
1. 试比较转录与复制的区别。
答:(1)目的不同,所使用的酶、原料及其它辅助因子不同,转录是合成RNA,复制是合成DNA;
(2)方式不同:转录是不对称的,只在双链DNA的一条链上进行,只以DNA的一条链为模板,复制为半不连续的,分别以DNA的两条链为模板,在DNA的两条链上进行;
(3)复制需要引物,转录不需要引物;
(4)复制过程存在校正机制,转录过程则没有;
(5)转录产物需要加工,复制产物不需要加工;
(6)复制与转录都经历起始、延长、终止阶段,都以DNA为模板,新链按碱基互补原则,5'→3’方向合成。
2.蛋白质合成可分四个步骤,以大肠杆菌为例说明。
答 (1)氨基酸的活化:游离的氨基酸必须经过活化以获得能量才能参与蛋白质合成,由氨酰-tRNA合成酶催化,消耗1分子ATP,形成氨酰-tRNA。
(2)肽链合成的起始:由起始因子参与,mRNA与30S小亚基、50S大亚基及起始甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAt)形成70S起始复合物,整个过程需GTP水解提供能
(3)肽链的延长:起始复合物形成后肽链即开始延长。首先氨酰-tRNA结合到核糖体的A位,然后,由肽酰转移酶催化与P位的起始氨基酸或肽酰基形成肽键,tRNAf或空载tRNA仍
留在P位.最后核糖体沿mRNA5’→3’方向移动一个密码子距离,A位上的延长一个氨基酸单位的肽酰-tRNA转移到P位,全部过程需延伸因子EF-Tu、EF-Ts,能量由GTP提供
(4)肽链合成终止,当核糖体移至终止密码UAA、UAG或UGA时,终止因子RF-1、RF-2识别终止密码,并使肽酰转移酶活性转为水解作用,将P位肽酰-tRNA水解,释放肽链,合成终止。
3、真核生物mRNA的转录后加工方式有哪些
答:(1)5端加帽和3端多聚腺苷酸化的调控意义:5端加帽和3端多聚腺苷酸化是保持mRNA稳定的一个重要因素,它至少保证mRNA在转录过程中不被降解。
(2)、mRNA选择性剪接对基因表达调控的作用
(3)、mRNA运输的控制
4.色氨酸操纵子的调控方式? ,,,,
答:负责色氨酸的生物合成,当培养基中有足够的色氨酸时,这个操纵子自动关闭,缺乏时操纵子打开,trp基因表达,色氨酸或与其代谢有关的某种物质在阻遏过程中起作用。由于trp体系参与生物合成而不是降解,它不受葡萄糖或cAMP-CAP的调控。
弱化作用:当色氨酸达到一定浓度、但还没有高到能够活化R使其起阻遏作用的程度时,产生色氨酸合成酶类的量已经明显降低,而且产生的酶量与色氨酸的浓度呈负相关。先导序列起到随色氨酸浓度升高降低转录的作用,这段序列就称为衰减子或弱化子。在trp操纵元中,对结构基因的转录阻遏蛋白的负调控起到粗调的作用,而衰减子起到细调的作用。
5、真核生物基因表达的调控的特点或多层次性是什么?(选择其中之一)
答:真核生物与原核细胞在结构上就有着诸多不同,这决定了二者在运行方面的迥异途径。真核生物比原核生物复杂,转录与翻译不同时也不同地,基因组与染色体结构复杂,因而有着更为复杂的调控机制。
1、 多层次。真核生物的基因表达可发生在染色质水平、转录起始水平、转录后水平、翻译水平以及翻译后水平。
2、 无操纵子和衰减子。
3、 大多数原核生物以负调控为主,而真核生物启动子以正调控为主。
4、 个体发育复杂,而受环境影响较小。真核生物多为多细胞生物,在生长发育过程中,不仅要随细胞内外环境的变化调节基因表达,还要随发育的不同阶段表达不同基因。前者为短期调控,后者属长期调控。从整体上看,不可逆的长期调控影响更深远。
一. 名词解释
1.核酸的分子杂交 :存在互补序列的不同来源的核酸分子,以碱基配对方式相互结合形成
DNA-DMA或DNA-RNA杂交体的过程。
2.核小体: 组成真核细胞染色体的基本结构单位,由组蛋白和大约200个bp的DNA组成
的直径约10nm的球形小体。其核心由H2A、H2B、H3和H4四种组蛋白各两
个分子组成八聚体构成。
3.启动子 : DNA链上能指示RNA转录起始的DNA序列称为启动子。是DNA分子可以与
RNA聚合酶特异结合的部位,也就是使转录开始的部位。在基因表达的调控中,转录的开始是个关键。常常因为某个基因是否应当表达决定在特定的启动子起始
过程。
4.RNA编辑 :是在mRNA水平上改变遗传信息的过程。指细胞核中初级转录产物hnRNA
的序列改变,使C变为U或者A变为G,结果一个基因表达产生不止一种蛋
白质,增加了遗传信息容量。5.S-D序列:即原核生物mRNA的核糖体结合
位点,它是位于AUG上游8-13核苷酸处的一个短片段。
6.分子伴侣 :帮助新生多肽链折叠成天然空间构象的一类保守蛋白质(如热休克蛋白),
在原核细胞和真核细胞中广泛存在。
7.弱化子或衰减子:位于结构基因上游前导区调节基因表达的功能单位,前导区转录的前导
RNA通过构象变化终止或减弱转录。
8.反式作用因子:指真核基因的转录调节蛋白,包含DNA结合结构域和转录激活结构域。
它们与顺式作用元件、RNA聚合酶相互作用、以及转录因子之间相互协同或者拮抗,反式调控另一基因的转录。
二.论述题
1. 试比较转录与复制的区别。
答:(1)目的不同,所使用的酶、原料及其它辅助因子不同,转录是合成RNA,复制是合成DNA;
(2)方式不同:转录是不对称的,只在双链DNA的一条链上进行,只以DNA的一条链为模板,复制为半不连续的,分别以DNA的两条链为模板,在DNA的两条链上进行;
(3)复制需要引物,转录不需要引物;
(4)复制过程存在校正机制,转录过程则没有;
(5)转录产物需要加工,复制产物不需要加工;
(6)复制与转录都经历起始、延长、终止阶段,都以DNA为模板,新链按碱基互补原则,5'→3’方向合成。
2.蛋白质合成可分四个步骤,以大肠杆菌为例说明。
答 (1)氨基酸的活化:游离的氨基酸必须经过活化以获得能量才能参与蛋白质合成,由氨酰-tRNA合成酶催化,消耗1分子ATP,形成氨酰-tRNA。
(2)肽链合成的起始:由起始因子参与,mRNA与30S小亚基、50S大亚基及起始甲酰甲硫氨酰-tRNA(fMet-tRNAt)形成70S起始复合物,整个过程需GTP水解提供能
(3)肽链的延长:起始复合物形成后肽链即开始延长。首先氨酰-tRNA结合到核糖体的A位,然后,由肽酰转移酶催化与P位的起始氨基酸或肽酰基形成肽键,tRNAf或空载tRNA仍
留在P位.最后核糖体沿mRNA5’→3’方向移动一个密码子距离,A位上的延长一个氨基酸单位的肽酰-tRNA转移到P位,全部过程需延伸因子EF-Tu、EF-Ts,能量由GTP提供
(4)肽链合成终止,当核糖体移至终止密码UAA、UAG或UGA时,终止因子RF-1、RF-2识别终止密码,并使肽酰转移酶活性转为水解作用,将P位肽酰-tRNA水解,释放肽链,合成终止。
3、真核生物mRNA的转录后加工方式有哪些
答:(1)5端加帽和3端多聚腺苷酸化的调控意义:5端加帽和3端多聚腺苷酸化是保持mRNA稳定的一个重要因素,它至少保证mRNA在转录过程中不被降解。
(2)、mRNA选择性剪接对基因表达调控的作用
(3)、mRNA运输的控制
4.色氨酸操纵子的调控方式? ,,,,
答:负责色氨酸的生物合成,当培养基中有足够的色氨酸时,这个操纵子自动关闭,缺乏时操纵子打开,trp基因表达,色氨酸或与其代谢有关的某种物质在阻遏过程中起作用。由于trp体系参与生物合成而不是降解,它不受葡萄糖或cAMP-CAP的调控。
弱化作用:当色氨酸达到一定浓度、但还没有高到能够活化R使其起阻遏作用的程度时,产生色氨酸合成酶类的量已经明显降低,而且产生的酶量与色氨酸的浓度呈负相关。先导序列起到随色氨酸浓度升高降低转录的作用,这段序列就称为衰减子或弱化子。在trp操纵元中,对结构基因的转录阻遏蛋白的负调控起到粗调的作用,而衰减子起到细调的作用。
5、真核生物基因表达的调控的特点或多层次性是什么?(选择其中之一)
答:真核生物与原核细胞在结构上就有着诸多不同,这决定了二者在运行方面的迥异途径。真核生物比原核生物复杂,转录与翻译不同时也不同地,基因组与染色体结构复杂,因而有着更为复杂的调控机制。
1、 多层次。真核生物的基因表达可发生在染色质水平、转录起始水平、转录后水平、翻译水平以及翻译后水平。
2、 无操纵子和衰减子。
3、 大多数原核生物以负调控为主,而真核生物启动子以正调控为主。
4、 个体发育复杂,而受环境影响较小。真核生物多为多细胞生物,在生长发育过程中,不仅要随细胞内外环境的变化调节基因表达,还要随发育的不同阶段表达不同基因。前者为短期调控,后者属长期调控。从整体上看,不可逆的长期调控影响更深远。