572
血清肌钙蛋白与肌红蛋白联合检测对心肌梗死
的诊断价值
常玉梅
(解放军第252医院, 河北保定071000)
[关键词]心肌梗死; 肌钙蛋白; 肌红蛋白; 特异性; 敏感性
[中图分类号]R542. 2+2 [文献标识码]B [文章编号]167125098(2008) 0520572202 急性心肌梗死(AMI) 是冠心病病死率增高的重要原因之一,AM I 是一系列称为急性冠状动脉综合征的最终事件, 它从无症状的冠状动脉疾病开始, 经过稳定或不稳定心绞痛, 进入无Q 波心机梗死, 大量的临床实践发现, 约有25%的AM I 患者发病早期可没有典型的临床症状[1], 因此在临床上强调
A M I 早期诊断及早期治疗的重要性。多年来我们测定CK MB
一直认为是判断心肌损伤的检测手段, 具有一定的诊断价值,
但此酶测定诊断特异性差, 早期诊断6h 内灵敏度不高, 诊断窗口时间较短等不足之处, 国内外学者在不断的寻找一些能克服上述不足的新指标。近年来新的心脏标志物的研究发展, 如血清肌钙蛋白、肌红蛋白应用于临床诊断, 二者联合检测起到优势互补作用, 并具有敏感性和特异性强、诊断率高等优点, 特做出以下综述。
1 生物特性
肌钙蛋白是横纹肌收缩的主要蛋白, 有三个亚单位:Tnc 、
TnI 、TnT, 在心肌细胞膜完整的状态下TnI 、TnT 不能透过细胞
膜进入血循环, 几乎难以检测, 故健康人血内不含或含极低量
的cTnT 、cTnI 。肌钙蛋白I 与T 区分在于它的敏感性与特异性, cT n I 检测对AM I 诊断敏感性要大于cTnT, cT nT 其特异性尚不如cT n I, 也有文献报道, cTnI 显示出较低的初始灵敏度[2]。cTnI 分子质量为235k D , 分子质量较小, 比CK 2MB 分子量小, 它的N 端比骨骼肌多了31个氨基, 其一特性使得cTnI 的特异性。
肌红蛋白(MB ) 肌红蛋白是一种含铁朴啉的红色蛋白, 肌红蛋白分子由分子量约17000的一条肽链组成, 含153个氨基酸残基。每个肌红蛋白分子含有一个血红素辅基。是肌肉组织中特有的一种蛋白质。其功能为运输或储存氧, 参与葡萄糖氧化[3]。存在于心肌及骨骼肌细胞的低分子蛋白, 约占肌肉总量的0. 1%～0. 2%。
2 检测方法学
2. 1 心肌肌钙蛋白/肌红蛋白免疫比浊法 采用特异抗体结
合于胶乳颗粒表面。标本与胶乳试剂在缓冲液中混合, 标本中的cTn I/MB 与胶乳颗粒表面的抗体结合, 使相邻的胶乳颗粒彼此交联, 在500n m ～600n m 附近测量溶液浊度的增强,
其增强的程度与标本的cTn I/MB 浓度相关。胶乳增强免疫
比浊法, 是新一代免疫测定技术。它大大提高了免疫比浊技术的敏感性、特异性, 达到了ng/ml 水平, 具有测定快速、准确、重复性好、操作简便、试剂稳定、价格较低等优点。
2. 2 肌钙蛋白I /肌红蛋白联检胶体金标法(定性) 采用基
因工程技术和现代免疫学技术, 克隆并纯化了肌红蛋白和肌钙蛋白I , 然后制备了其单克隆与多克隆抗体, 应用双抗体夹
心一步法原理, 以胶体金作为指示标记, 交联抗肌红蛋白和肌钙蛋白I 单克隆抗体, 以相对应的多克隆抗体作为捕获抗体, 与血液中的肌红蛋白和肌钙蛋白I 结合并显色。
2. 3 血清肌红蛋白激光化学免疫法 针对MB 不同表位的2
株单克隆抗体, 一株包被发光微粒, 另一株进行生物素化, 与包被有链霉亲合素的感光微粒共同构成检测性能, 在化学发光仪中检测光信号, 根据光信号的强度计算得出样品的MB 的浓度[4]。
以上方法根据实验室条件采纳应用。3 联合检测价值
A M I 是急性胸痛的常见原因, 早期确定胸痛原因, 明确A M I 的诊断, 对患者的预后有重要影响, 有研究指出心肌梗死
患者发病时, 若迟1h 救治, 每1000例中就有16例死亡[5]。因此越早确定病因, 成功救治机会越高。在以往以CK 和CK 2
MB 作为AM I 的诊断指标, 其漏诊的比例很大, 但如果心肌酶
5项:磷酸肌酸激酶(CK ) 、磷酸肌酸激酶同功酶(CK MB ) 、天
冬氨酸氨基转移酶(AST ) 、乳酸脱氢酶(LDH ) 、a 2羟丁酸脱氢
酶(H BDH) 测定均升高, 特异性和阳性预测值均达到100%, 可是在心绞痛患者无一例是5项均升高的, 可见敏感性太低, 容易漏诊。cTnI 、Mb 是近年来发展起来的一种高度灵敏、高度特异性地反映心肌损伤的血清标志物, 它们以检测简便快速准确而备受关注。在早期诊断急性心肌梗死(AM I) 患者过程中, 肌红蛋白敏感性较高, 但特异性较低, cTn 特异性高, 但早期敏感性较低[6]
。
cTnI 是肌钙蛋白复合体中亚单位之一, 参与钙离子诱导的肌肉收缩, 存在于心肌细胞内壁上, 少部分为可溶性, 游离于胞浆内, 大部分以结构蛋白形式固定与肌源纤维上, 为不可溶性[7]。它的N 端比骨骼肌多了31个氨基, 因此cTnI 仅表达于心肌纤维, 目前所知人的骨骼肌组织在任何阶段都不表达cTnI, 故cTnI 的心肌特异性很高[8], 为心肌特异型的肌钙蛋白, 其敏感性和特异性比传统CK 2MB 高。当人体处于正常情况时, 人体血清中几乎难以测到cT n I 存在, 含量一般低于0. 5μg/L。一旦心肌细胞缺血缺氧, 心肌细胞发生可逆性损伤时, 游离的cTnI 从被损的细胞膜释放入血液, 造成短暂而迅速升高, 如发生不可逆性损伤时, 结合部分的cTnI 从肌纤维上降解下来, 不断释放, 导致血中cTnI 持续升高。cTn I 在血中出现的时间早(3h ～5h ) , 持续时间长(5d ～8d ) 。因此, 测定cTn I 是了解心肌有无损伤的一个特异指标[9]。
M b 是横纹肌组织所特有的一种蛋白质, 正常人血清中含
量甚微, 当心肌和骨骼肌受损伤时, 可最早从受损肌细胞释放至血中, 所以, 肌红蛋白在心肌受损早期敏感性最高[10], 但持
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血清肌钙蛋白与肌红蛋白联合检测对心肌梗死
的诊断价值
常玉梅
(解放军第252医院, 河北保定071000)
[关键词]心肌梗死; 肌钙蛋白; 肌红蛋白; 特异性; 敏感性
[中图分类号]R542. 2+2 [文献标识码]B [文章编号]167125098(2008) 0520572202 急性心肌梗死(AMI) 是冠心病病死率增高的重要原因之一,AM I 是一系列称为急性冠状动脉综合征的最终事件, 它从无症状的冠状动脉疾病开始, 经过稳定或不稳定心绞痛, 进入无Q 波心机梗死, 大量的临床实践发现, 约有25%的AM I 患者发病早期可没有典型的临床症状[1], 因此在临床上强调
A M I 早期诊断及早期治疗的重要性。多年来我们测定CK MB
一直认为是判断心肌损伤的检测手段, 具有一定的诊断价值,
但此酶测定诊断特异性差, 早期诊断6h 内灵敏度不高, 诊断窗口时间较短等不足之处, 国内外学者在不断的寻找一些能克服上述不足的新指标。近年来新的心脏标志物的研究发展, 如血清肌钙蛋白、肌红蛋白应用于临床诊断, 二者联合检测起到优势互补作用, 并具有敏感性和特异性强、诊断率高等优点, 特做出以下综述。
1 生物特性
肌钙蛋白是横纹肌收缩的主要蛋白, 有三个亚单位:Tnc 、
TnI 、TnT, 在心肌细胞膜完整的状态下TnI 、TnT 不能透过细胞
膜进入血循环, 几乎难以检测, 故健康人血内不含或含极低量
的cTnT 、cTnI 。肌钙蛋白I 与T 区分在于它的敏感性与特异性, cT n I 检测对AM I 诊断敏感性要大于cTnT, cT nT 其特异性尚不如cT n I, 也有文献报道, cTnI 显示出较低的初始灵敏度[2]。cTnI 分子质量为235k D , 分子质量较小, 比CK 2MB 分子量小, 它的N 端比骨骼肌多了31个氨基, 其一特性使得cTnI 的特异性。
肌红蛋白(MB ) 肌红蛋白是一种含铁朴啉的红色蛋白, 肌红蛋白分子由分子量约17000的一条肽链组成, 含153个氨基酸残基。每个肌红蛋白分子含有一个血红素辅基。是肌肉组织中特有的一种蛋白质。其功能为运输或储存氧, 参与葡萄糖氧化[3]。存在于心肌及骨骼肌细胞的低分子蛋白, 约占肌肉总量的0. 1%～0. 2%。
2 检测方法学
2. 1 心肌肌钙蛋白/肌红蛋白免疫比浊法 采用特异抗体结
合于胶乳颗粒表面。标本与胶乳试剂在缓冲液中混合, 标本中的cTn I/MB 与胶乳颗粒表面的抗体结合, 使相邻的胶乳颗粒彼此交联, 在500n m ～600n m 附近测量溶液浊度的增强,
其增强的程度与标本的cTn I/MB 浓度相关。胶乳增强免疫
比浊法, 是新一代免疫测定技术。它大大提高了免疫比浊技术的敏感性、特异性, 达到了ng/ml 水平, 具有测定快速、准确、重复性好、操作简便、试剂稳定、价格较低等优点。
2. 2 肌钙蛋白I /肌红蛋白联检胶体金标法(定性) 采用基
因工程技术和现代免疫学技术, 克隆并纯化了肌红蛋白和肌钙蛋白I , 然后制备了其单克隆与多克隆抗体, 应用双抗体夹
心一步法原理, 以胶体金作为指示标记, 交联抗肌红蛋白和肌钙蛋白I 单克隆抗体, 以相对应的多克隆抗体作为捕获抗体, 与血液中的肌红蛋白和肌钙蛋白I 结合并显色。
2. 3 血清肌红蛋白激光化学免疫法 针对MB 不同表位的2
株单克隆抗体, 一株包被发光微粒, 另一株进行生物素化, 与包被有链霉亲合素的感光微粒共同构成检测性能, 在化学发光仪中检测光信号, 根据光信号的强度计算得出样品的MB 的浓度[4]。
以上方法根据实验室条件采纳应用。3 联合检测价值
A M I 是急性胸痛的常见原因, 早期确定胸痛原因, 明确A M I 的诊断, 对患者的预后有重要影响, 有研究指出心肌梗死
患者发病时, 若迟1h 救治, 每1000例中就有16例死亡[5]。因此越早确定病因, 成功救治机会越高。在以往以CK 和CK 2
MB 作为AM I 的诊断指标, 其漏诊的比例很大, 但如果心肌酶
5项:磷酸肌酸激酶(CK ) 、磷酸肌酸激酶同功酶(CK MB ) 、天
冬氨酸氨基转移酶(AST ) 、乳酸脱氢酶(LDH ) 、a 2羟丁酸脱氢
酶(H BDH) 测定均升高, 特异性和阳性预测值均达到100%, 可是在心绞痛患者无一例是5项均升高的, 可见敏感性太低, 容易漏诊。cTnI 、Mb 是近年来发展起来的一种高度灵敏、高度特异性地反映心肌损伤的血清标志物, 它们以检测简便快速准确而备受关注。在早期诊断急性心肌梗死(AM I) 患者过程中, 肌红蛋白敏感性较高, 但特异性较低, cTn 特异性高, 但早期敏感性较低[6]
。
cTnI 是肌钙蛋白复合体中亚单位之一, 参与钙离子诱导的肌肉收缩, 存在于心肌细胞内壁上, 少部分为可溶性, 游离于胞浆内, 大部分以结构蛋白形式固定与肌源纤维上, 为不可溶性[7]。它的N 端比骨骼肌多了31个氨基, 因此cTnI 仅表达于心肌纤维, 目前所知人的骨骼肌组织在任何阶段都不表达cTnI, 故cTnI 的心肌特异性很高[8], 为心肌特异型的肌钙蛋白, 其敏感性和特异性比传统CK 2MB 高。当人体处于正常情况时, 人体血清中几乎难以测到cT n I 存在, 含量一般低于0. 5μg/L。一旦心肌细胞缺血缺氧, 心肌细胞发生可逆性损伤时, 游离的cTnI 从被损的细胞膜释放入血液, 造成短暂而迅速升高, 如发生不可逆性损伤时, 结合部分的cTnI 从肌纤维上降解下来, 不断释放, 导致血中cTnI 持续升高。cTn I 在血中出现的时间早(3h ～5h ) , 持续时间长(5d ～8d ) 。因此, 测定cTn I 是了解心肌有无损伤的一个特异指标[9]。
M b 是横纹肌组织所特有的一种蛋白质, 正常人血清中含
量甚微, 当心肌和骨骼肌受损伤时, 可最早从受损肌细胞释放至血中, 所以, 肌红蛋白在心肌受损早期敏感性最高[10], 但持