·１４７４·，，，国际检验医学杂志年月第卷第期·检验技术与方法·
新生儿血型检测的结果分析＊
孙爱农２，孙雯婷３蔡旭清１，
（广东省中山火炬开发区医院，中山市中心血站，广东中山５广东中山５１．２８４３７；２．２８４０３；
）中山市石岐区安监分局，广东中山５３．２８４００
目的 了解新生儿Ａ研究提高新生儿血型测定准确性的方法。方法 用传统试管法检测当地ＢＯ正反定型符合率， 摘 要：
抗－Ｂ、新生儿Ａ以微柱凝胶卡和改良试管法、增强剂法及常规试管法、纸片法、微板法、聚凝胺法等７种方法检测抗－Ａ、ＢＯ血型，／；检测１并进行新生儿血型检测比较。结果 新生儿Ａ抗－Ｂ、抗－Ｄ抗体的效价，ＢＯ正反定型符合率为８３％（９１３１１００）５份抗－Ａ、 最差的是纸片法，新生儿标本检测结果类似。结论 Ａ敏感性最高是改良试管法和增强剂法，抗－Ｄ抗体的效价，ＢＯ正反定型应增加血浆（血清）量并延长孵育时间或选用增强剂，从而提高新生儿血型检测的准确性。
（血型；关键词：新生儿；ＢＯ血型；ｈＤ） 脐带血； Ａ Ｒ 正反定型：／ＯＩ１０．３９６９．ｉｓｓｎ．１６７３１３０．２０１４．１１．０４３４Ｄ－ｊ
文献标识码：Ａ
（）文章编号：６７３１３０２０１４１１４７４２１４１０－－－
＊
Ａｎａｌｓｉｓｏｆｎｅｏｎａｔａｌｂｌｏｏｄｔｅｓｔｉｎ ｙｇ
１２３
ＣＸＳＡＳＷａｉｕｉｎｕｎ ｉｎｏｎｕｎ ｅｎｔｉｎ ｑｇ，ｇ，ｇ
（１．ＺＴＤＺＨＺＧＣ２．ＢＣｏＺＣｈｏｎｓｈａｎ ｏｒｃｈ ｅｖｅｌｏｍｅｎｔｏｎｅ ｏｓｉｔａｌ，ｈｏｎｓｈａｎ，ｕａｎｄｏｎ２８４３７，ｈｉｎａ；ｌｏｏｄ ｅｎｔｅｒｈｏｎｓｈａｎ ｉｔ ｆ ｇｐｐｇｇｇ５ｇｙ，ｈｏｎｓｈａｎ，ｕａｎｄｏｎ２８４０３；３．ｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｒｋａｅｔｈｉｉｉｓｔｒｉｃｔ，ｈｏｎｓｈａｎ，ｕａｎｄｏｎ２８４００，ｈｉｎａ）ＺＧＡｏＷＳｏＳＤＺＧＣ ｇｇｇ５ｆｙｑｇｇｇ５ｆ ｆ
：ｂｓｔｒａｃｔＯｂｅｃｔｉｖｅｏｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｔｈｅｎｅｏｎａｔａｌＡＢＯｔｅｏｓｉｔｉｖｅａｎｄｒｅｖｅｒｓｅｔｉｎｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔｒａｔｅａｎｄｔｏｉｍｒｏｖｅｔｈｅａｃｃｕＡ Ｔ －ｐｙｐｐｙｐｇｊ
ｒｏｆｔｈｅｍｅｔｈｏｄｓｏｆｎｅｏｎａｔａｌｂｌｏｏｄ．ＭｅｔｈｏｄｓｈｅｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｔｕｂｅｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｌｏｃａｌｎｅｏｎａｔａｌＡＢＯｂｌｏｏｄ．Ｔｈｅａｃ Ｔ ｙ
，，，，，ｌｍｅｔｈｏｄｏｆｍｉｃｒｏｅｌｃａｒｄｓｉｍｒｏｖｅｄｔｕｂｅｍｅｔｈｏｄｅｎｈａｎｃｅｒａｎｄｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｔｕｂｅｍｅｔｈｏｄａｅｒｍｉｃｒｏａｔｅｏｌｂｒｅｎｅｍｅｔｈｏｄｔｏｄｅ－ｐ－ ｇｐｐｐｐｙ，ｅｃｔａｎｔｉＡ，ａｎｔｉＢ，ａｎｔｉＤｔｉｔｅｒａｎｄｎｅｏｎａｔａｌｂｌｏｏｄｄｅｔｅｃｔｉｏｎｃｏｍａｒａｔｏｒ．ＲｅｓｕｌｔｓｅｏｎａｔａｌＡＢＯｏｓｉｔｉｖｅａｎｄｎｅａｔｉｖｅｓｔｅｒｅｏｔｅｓｔ Ｎ ｐｐｇｙｐ
／），；ｗａｓｉｍｒｏｖｅｄｉｎｔｅｎｓｉｆｉｅｒｔｕｂｅｃｏｍｌｉａｎｃｅｒａｔｅｗａｓ８３％（９１３１１００Ｄｅｔｅｃｔｉｎ１５ｃｏｉｅｓｏｆａｎｔｉＡ，Ｂ，Ｄｔｉｔｅｒｔｈｅｈｉｈｅｓｔｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔ ｐｐｇｙｐｇ ｍｅｔｈｏｄａｎｄｔｈｅｗｏｒｓｔｉｓｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｆａｅｒ．Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｏｆｎｅｏｎａｔａｌｓｅｃｉｍｅｎｓｗａｓｗｉｔｈｔｈｅｓｉｍｉｌａｒｒｅｓｕｌｔｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＡＢＯ ｐｐｐ
，＂ｅｔｈｅｎｏｓｉｔｉｖｅａｎｄｎｅａｔｉｖｅｓｔｅｒｅｏｔｅｓｓｈｏｕｌｄｂｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｌａｓｍａ（ｓｅｒｕｍ）ｌｅｖｅｌｓａｎｄｅｘｔｅｎｄｉｎｔｈｅｉｎｃｕｂａｔｉｏｎｔｉｍｅｏｒｕｓｉｎ－ ｇｐｇｙｐｙｐｇ ，＂ｏｏｆｔｈｅｎｅｗｂｏｒｎｂｌｏｏｄｔｅｓｔｉｎ．ｉｍｒｏｖｉｎｔｈｅａｃｃｕｒａｃｔｈｅｒｅｂａｎｃｅｒｆｔｈｉｓｓｔｕｄｈ ｙｇｐｇｙｙ
：；；；；ＫｅｗｏｒｄｓｎｅｗｂｏｒｎｓｍｂｉｌｉｃａｌｃｏｒｄｂｌｏｏｄＢＯｂｌｏｏｄｔｅｈ（Ｄ）ｂｌｏｏｄｔｅｏｓｉｔｉｖｅａｎｄｒｅｖｅｒｓｅｔｉｎ ｕ Ａ Ｒ ｐ ｙｐｙｐｙｐｇｙ 是保证输血安全的首ＢＯ和Ｒｈ血型的正确检测， 人类Ａ
要和必要条件。输血或换血技术是新生儿抢救与治疗的重要措施，临床上新生儿患者输血后产生溶血性输血不良反应的发生率相对较高，提示新生儿血型的正确鉴定的重要性。血型血清学试验检测方法有多种，常见有盐水试管法、纸片法、微板法——微柱凝胶卡法，国内曾有文以及近些年正在推广的新技术—
［］献对新生儿ＡＢＯ血型检测结果做过简单分析１。本课题组研制出一种国内尚未报道的抗原抗体反应增强剂，可提高新生
使用瑞士Ｈ１．３ 主要器材 标本和试剂加样，ａｍｉｌｔｏｎ公司ＴＡＲ全自动加样仪及芬兰Ｌａｂｓｓｔｅｍｓ公司Ｆｉｎｎｉｅｔｔｅ牌加Ｓｙｐｐ
微量板采用样器；离心机，试管法为日本久保田ＫＡ２００型，２－），德国贺氏（凝胶卡使用戴安娜专用离心机；微量板ｏｔｉｎａ３５Ｒ ；混匀使用德国Ｈｅｉｄｏｌｈ振荡仪（ｉｔｒａｍａｘ１０１）６孔Ｕ型底Ｔ９ ｐ
微量塑料板由深圳市金灿华实业有限公司生产，微孔最大容量血型卡纸由为３５０μＬ，１２ｍｍ×７５ｍｍ普通玻璃试管为国产，长春博德生物技术有限责任公司生产。１．４ 方法
聚凝胺、凝胶卡操作Ａ１．４．１ 试管和纸片法、ＢＯ正定型和Ｒｈ定型参照试剂说明书进行，ＡＢＯ反定型为５０μＬ试剂红细胞与新生儿５离心，肉眼或低倍镜观察结果。０μＬ血浆等量混匀，改良试管法：将传统试管法血清（血浆）用量４倍，同时红细胞。与血清（血浆）孵育时间延长到６～１０ｍｉｎ
标本）红细胞与３０μＬ试剂（０μＬ血浆１．４．２ 微量板法 ３（／，试剂）混合，振荡仪上混匀后１观察０００ｒｍｉｎ离心１ｍｉｎ 结果。
红细胞与血清及增１．４．３ 增强剂法 在常规试管法上改进，强剂等量混匀，其他操作同上。凝胶０．０％，１．４．４ 各种方法所需的红细胞浓度 纸片法为１卡用０．试管和微量板等其他方法用４．８％～１．０％，０％。１．５ 抗体效价测定 将ＡＢＯ和Ｒｈ抗体用生理盐水倍比稀
儿血型检测试验的敏感性和准确性，现将相关研究报道如下。１ 资料与方法
０１３年１～１２月来源于中山火炬开发区医１．１ 一般资料 ２院及其他医院的新生儿脐带血或静脉ＥＤＴＡ－Ｋ２抗凝血标本。抗－Ｂ及抗－Ｄ抗体（均为单克隆抗体）由北京１．２ 试剂 抗－Ａ、金豪制药股份有限公司和上海血液生物医药有限责任公司生血型检测及中性和抗球蛋白凝胶卡产，ＲＢＯ正定型、ｈ（Ｄ）Ａ（戴安娜）来自西班牙Ｇｒｉｆｏｌｓ公司；ＡＢＯ试剂红细胞来自上海血液生物医药有限责任公司和长春博德生物技术有限责任公司；聚凝胺试剂盒由珠海贝索生物技术有限公司提供，试剂均有国家批准文号并在有效期内。抗原抗体反应增强剂，由本课题组自主研制，它是一种新的改良聚凝胺介质，其主要成分是聚凝胺和鱼精蛋白、氯化钠，专用于新生儿标本血型检测，旨在
２］。提高试验敏感性［
＊
）。 作者简介：基金项目：中山市医学科研基金资助项目（蔡旭清，女，主管检验技师，主要从事医学检验工作。０１３Ａ０２０１５９２
，，，国际检验医学杂志年月第卷第期·１４７５·
释，与对应抗原为阳性的试剂红细胞反应，测其效价，以最高稀释度且凝集为１＋及以上者为效价终点。同时用该试剂红细胞与Ａ作为阴性对照试验。Ｂ型献血者血清反应，
１．６ 红细胞凝集强度计分标准 采用Ｗａｒｓｈ方法：４＋（８
、、、、、（。分）３＋（６分）２＋（４分）１＋（２分）Ｗ＋（１分）００分）采取ｔＰＳＳ１７．０统计软件进行分析，１．７ 统计学处理 利用Ｓ检验进行组间比较，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。２ 结 果２．１ 中山地区新生儿ＡＢＯ正反定型结果比较 采用传统试管法，对１结果有１００例新生儿血液标本进行ＡＢＯ血型检测， 正反定型符合率８１３例正反定型一致，３％。９
改良法等与传统方法的敏感性比较 随机选择２．２ 凝胶卡、一批献血者血浆和市售Ｉ合计１Ｍ抗－Ｄ抗体，５份作为待检标ｇ
本，其中，抗－Ａ、抗－Ｄ抗体３份，分别用凝胶抗－Ｂ抗体各６份，卡和改良试管、增强剂及常规试管、纸片、微板、聚凝胺，检测这些标本中抗－Ａ、结果显示抗－Ｂ、抗－Ｄ抗体的效价并进行统计，敏感性（凝集强度积分）最高的是增强剂法和改良试管法（均为））），，、、凝胶卡法略低（其次是聚凝胺法（试管法（微３７３３３０２９）
），），板法（最差的是纸片法（阴性对照试验均符合；改良试２８２３管法与增强剂和凝胶卡法比较，差异无统计学意义（Ｐ＞，）试管法、微板法、纸片法比较，差异均有统与聚凝胺法、０５０．
）。计学意义（０５Ｐ＜０．２．３ 新生儿红细胞抗原检测比较 随机选择１００份新生儿标
本，采用凝胶卡和改良试管法、增强剂法及常规试管法、纸片法、微板法、聚凝胺法，平行检测其红细胞Ａ上的血ＢＯ、Ｒｈ（Ｄ）型抗原，若以改良试管法作为标准，则ＡＢＯ血型正确率由高／）／、、到低分别是增强剂１凝胶卡９试００％（１００１００４％（９４１００）／）、／、／，管８微板８纸片３聚６％（８６１００５％（８５１００）８％（３８１００）凝胺正定型出现较多假阳性反应而失去统计意义，血型ｈ（Ｄ）Ｒ／）。所有方法正确率均为１００％（１００１００
２．４ 新生儿血浆抗体检测比较 仍选择上述１００份新生儿标本，采用凝胶卡和改良试管法、增强剂法及常规试管法、纸片法、微板法、聚凝胺法，平行检测其血浆中ＡＢＯ抗体（ＢＯ反Ａ
，定型）结果，若以改良试管法作为标准，ＡＢＯ血型正确率分别／、／、是增强剂１凝胶卡９试管８００％（１００１００）２％（９２１００）２％（／、／、／、微板８聚凝胺８纸片８２１００）１％（８１１００）１％（８１１００）／）。７％（３７１００３
２．５ 新生儿出生半个月内ＡＢＯ血型检测结果 选择４０例新
生儿，分别于出生后第１～１每隔３ｄ采集微量血液标本，６天，，用凝胶卡进行正反定型（标本和试剂均取半量）共采集６次，
新生儿Ａ结果，ＢＯ血型正反定型符合率分别为４７．５％、
新生儿标本中Ａ５２．５％、５７．５％、６２．５％、６５．０％、７２．５％；ＢＯ抗体效价分别为４２．５％、５０．０％、５２．５％、５７．５％、６０．０％、与Ａ７５．０％，ＢＯ正反定型符合率呈正相关。
同时采集对应新生儿血２．６ 脐带血检测 取２２０份脐带血，标本，分别以凝胶卡和改良试管法及常规试管法进行ＡＢＯ、Ｒｈ（血型检测，结果表明，无论是红细胞上Ａ抗原检Ｄ）ＢＯ、Ｒｈ（Ｄ）
测，还是血浆中Ａ三种方法的脐带血和新生儿ＢＯ抗体检测，血标本检测结果均一致。用抗球蛋白凝胶卡进行直接抗球蛋，结果上述２白试验（ＡＴ）２０份脐带血和对应新生儿血标本Ｄ结果均一致，凡诊断为新生儿溶血病的患儿，其标本ＤＡＴ结果均为阳性。
３ 讨 论
新生儿血型检测的准确性一直是实验室工作难点和重点，所以有研究人员利用分子生物学技术聚合酶链反应（进ＰＣＲ）
［］
极大地提高了试验正定型）行红细胞抗原（ＤＮＡ基因分型１，
尚未普及，所以敏感性。鉴于血型ＰＣＲ技术成本高操作麻烦，本文研究仍以血型血清学试验为主。当新生儿血液中含有来，自通过胎盘的母亲Ｉ其ＡＧ抗－Ａ（ＢＯ反定型也会受到干Ｂ）ｇ
——假阳性反应。但有学者认为导致新生儿血型鉴定正反扰—
［］
似乎与常规理论相反，原因定型一致的抗体主要为ＩＧ类３，ｇ
待研究。
此次研究显示，中山地区新生儿为ＡＢＯ正反定型符合率，
［］１］
报道的５与天津刘兰婷等［８３％，６．９２％和北京吴涛等４报道
５］
但与南宁钟月华［报道的７的４６．９１％差距较大，０．９％～［］
这些数据差异较７３．３％和深圳雷厉等６报道的８４．２％接近，
大可能与试验方法和新生儿出生日期不同有关。本研究表明，
近一半新生儿出生时血液中已含有Ａ其ＡＢＯ抗体，ＢＯ血型正反定型符合率和新生儿标本中ＡＢＯ抗体随着出生日期增
７］
的研究结果类似。研究中还加呈逐渐递增趋势，这与赵媛等［（发现，新生儿出生时Ｒ抗原已成熟，任何常规方法均可检ｈＤ）出，但由于一些标本ＡＢＯ抗原或抗体弱在常规试管法和纸片
８］
的研究表明，婴幼儿６个月以后仍有部法中有漏检。李萌等［
９］
发现，分弱抗体不易检出。吴涛等［ＢＯ抗原抗体的产生与Ａ
胎龄有关。这次血型抗体效价检测表明敏感性最高的是增强剂法和改良试管法，正定型抗－Ａ、抗－Ｂ抗体商品试剂中含有添
加剂（维持稳定提高活性）干扰聚凝胺试验，所以这种传统聚凝脐胺法不可用于ＡＢＯ正定型。本文脐带血的应用研究显示，（血型检测和Ｄ带血可替代外周血用于新生儿ＡＢＯ、ＲｈＤ）ＡＴ，
０］１这与黎海澜等［且的研究结果一致。由于脐带血容易采集，
避免了对新生儿的伤害，避免了不必要的医患矛盾，值得推广。综上所述，提高新生儿ＡＢＯ血型检测准确性的关键是提高试验敏感性，纸片法敏感性太低完全不能用于新生儿血型检测。参考文献
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（）：］控制方法探讨［中国实验血液学杂志，０１０，１８３９０９２．７Ｊ．２７－［］孙爱农，吴晓燕，曹铁源，等．荧．一种新型试剂红细胞保养液的制２
（）：］备和应用［中国输血杂志，００２，１５６９４９６．３Ｊ．２３－
［］周金安，］何磊，皮兰敢．新生儿血型检测及抗体性质分析［国际３Ｊ．
（）：检验医学杂志，０１３，３４２０６９１６９２．２２２－
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：］全中的应用［临床血液学杂志：输血与检验，０１２，２５（３）３７３Ｊ．２－４０．３
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（）：广西中医学院学报，００９，１２４７８．２２２－
［］雷厉，血型的孟庆宝．应用微柱凝胶法鉴定婴儿Ａ６ＢＯ及ＲＨ（Ｄ）
（）：］分析［中国热带医学，００６，６２２７．２２Ｊ．
［］赵媛，李代红，刘伟．出生１周内新生儿Ａ７ＢＯ血型ＩＭ抗体分析ｇ
（）：［］广东医学，０１１，３２１５０１２０１３．２２Ｊ．２－
［］李萌，冯丽，王晓卫，等．新生儿血型抗体产生情况分析及微柱凝８
］胶法与盐水试管法的结合应用［南京医科大学学报：自然科学Ｊ．（）：版，０１２，３２８１７４１７６．１２１－
［］吴涛，张长虹，周俊，等．９１０１２名新生儿ＡＢＯ及Ｒｈ血型鉴定结果
（）：］中国输血杂志，分析［０１０，２３７０００１．５Ｊ．２５－
［］黎海澜，焦伟，莫柱宁，等．脐带血替代外周血用于新生儿血型和１０
：］直接抗球蛋白试验的效果观察［重庆医学，０１１，４０（２０）Ｊ．２０２５０２６．２２－
（）收稿日期：０１４２５２０１－－
·１４７４·，，，国际检验医学杂志年月第卷第期·检验技术与方法·
新生儿血型检测的结果分析＊
孙爱农２，孙雯婷３蔡旭清１，
（广东省中山火炬开发区医院，中山市中心血站，广东中山５广东中山５１．２８４３７；２．２８４０３；
）中山市石岐区安监分局，广东中山５３．２８４００
目的 了解新生儿Ａ研究提高新生儿血型测定准确性的方法。方法 用传统试管法检测当地ＢＯ正反定型符合率， 摘 要：
抗－Ｂ、新生儿Ａ以微柱凝胶卡和改良试管法、增强剂法及常规试管法、纸片法、微板法、聚凝胺法等７种方法检测抗－Ａ、ＢＯ血型，／；检测１并进行新生儿血型检测比较。结果 新生儿Ａ抗－Ｂ、抗－Ｄ抗体的效价，ＢＯ正反定型符合率为８３％（９１３１１００）５份抗－Ａ、 最差的是纸片法，新生儿标本检测结果类似。结论 Ａ敏感性最高是改良试管法和增强剂法，抗－Ｄ抗体的效价，ＢＯ正反定型应增加血浆（血清）量并延长孵育时间或选用增强剂，从而提高新生儿血型检测的准确性。
（血型；关键词：新生儿；ＢＯ血型；ｈＤ） 脐带血； Ａ Ｒ 正反定型：／ＯＩ１０．３９６９．ｉｓｓｎ．１６７３１３０．２０１４．１１．０４３４Ｄ－ｊ
文献标识码：Ａ
（）文章编号：６７３１３０２０１４１１４７４２１４１０－－－
＊
Ａｎａｌｓｉｓｏｆｎｅｏｎａｔａｌｂｌｏｏｄｔｅｓｔｉｎ ｙｇ
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ＣＸＳＡＳＷａｉｕｉｎｕｎ ｉｎｏｎｕｎ ｅｎｔｉｎ ｑｇ，ｇ，ｇ
（１．ＺＴＤＺＨＺＧＣ２．ＢＣｏＺＣｈｏｎｓｈａｎ ｏｒｃｈ ｅｖｅｌｏｍｅｎｔｏｎｅ ｏｓｉｔａｌ，ｈｏｎｓｈａｎ，ｕａｎｄｏｎ２８４３７，ｈｉｎａ；ｌｏｏｄ ｅｎｔｅｒｈｏｎｓｈａｎ ｉｔ ｆ ｇｐｐｇｇｇ５ｇｙ，ｈｏｎｓｈａｎ，ｕａｎｄｏｎ２８４０３；３．ｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｒｋａｅｔｈｉｉｉｓｔｒｉｃｔ，ｈｏｎｓｈａｎ，ｕａｎｄｏｎ２８４００，ｈｉｎａ）ＺＧＡｏＷＳｏＳＤＺＧＣ ｇｇｇ５ｆｙｑｇｇｇ５ｆ ｆ
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ｒｏｆｔｈｅｍｅｔｈｏｄｓｏｆｎｅｏｎａｔａｌｂｌｏｏｄ．ＭｅｔｈｏｄｓｈｅｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｔｕｂｅｍｅｔｈｏｄｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｌｏｃａｌｎｅｏｎａｔａｌＡＢＯｂｌｏｏｄ．Ｔｈｅａｃ Ｔ ｙ
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要和必要条件。输血或换血技术是新生儿抢救与治疗的重要措施，临床上新生儿患者输血后产生溶血性输血不良反应的发生率相对较高，提示新生儿血型的正确鉴定的重要性。血型血清学试验检测方法有多种，常见有盐水试管法、纸片法、微板法——微柱凝胶卡法，国内曾有文以及近些年正在推广的新技术—
［］献对新生儿ＡＢＯ血型检测结果做过简单分析１。本课题组研制出一种国内尚未报道的抗原抗体反应增强剂，可提高新生
使用瑞士Ｈ１．３ 主要器材 标本和试剂加样，ａｍｉｌｔｏｎ公司ＴＡＲ全自动加样仪及芬兰Ｌａｂｓｓｔｅｍｓ公司Ｆｉｎｎｉｅｔｔｅ牌加Ｓｙｐｐ
微量板采用样器；离心机，试管法为日本久保田ＫＡ２００型，２－），德国贺氏（凝胶卡使用戴安娜专用离心机；微量板ｏｔｉｎａ３５Ｒ ；混匀使用德国Ｈｅｉｄｏｌｈ振荡仪（ｉｔｒａｍａｘ１０１）６孔Ｕ型底Ｔ９ ｐ
微量塑料板由深圳市金灿华实业有限公司生产，微孔最大容量血型卡纸由为３５０μＬ，１２ｍｍ×７５ｍｍ普通玻璃试管为国产，长春博德生物技术有限责任公司生产。１．４ 方法
聚凝胺、凝胶卡操作Ａ１．４．１ 试管和纸片法、ＢＯ正定型和Ｒｈ定型参照试剂说明书进行，ＡＢＯ反定型为５０μＬ试剂红细胞与新生儿５离心，肉眼或低倍镜观察结果。０μＬ血浆等量混匀，改良试管法：将传统试管法血清（血浆）用量４倍，同时红细胞。与血清（血浆）孵育时间延长到６～１０ｍｉｎ
标本）红细胞与３０μＬ试剂（０μＬ血浆１．４．２ 微量板法 ３（／，试剂）混合，振荡仪上混匀后１观察０００ｒｍｉｎ离心１ｍｉｎ 结果。
红细胞与血清及增１．４．３ 增强剂法 在常规试管法上改进，强剂等量混匀，其他操作同上。凝胶０．０％，１．４．４ 各种方法所需的红细胞浓度 纸片法为１卡用０．试管和微量板等其他方法用４．８％～１．０％，０％。１．５ 抗体效价测定 将ＡＢＯ和Ｒｈ抗体用生理盐水倍比稀
儿血型检测试验的敏感性和准确性，现将相关研究报道如下。１ 资料与方法
０１３年１～１２月来源于中山火炬开发区医１．１ 一般资料 ２院及其他医院的新生儿脐带血或静脉ＥＤＴＡ－Ｋ２抗凝血标本。抗－Ｂ及抗－Ｄ抗体（均为单克隆抗体）由北京１．２ 试剂 抗－Ａ、金豪制药股份有限公司和上海血液生物医药有限责任公司生血型检测及中性和抗球蛋白凝胶卡产，ＲＢＯ正定型、ｈ（Ｄ）Ａ（戴安娜）来自西班牙Ｇｒｉｆｏｌｓ公司；ＡＢＯ试剂红细胞来自上海血液生物医药有限责任公司和长春博德生物技术有限责任公司；聚凝胺试剂盒由珠海贝索生物技术有限公司提供，试剂均有国家批准文号并在有效期内。抗原抗体反应增强剂，由本课题组自主研制，它是一种新的改良聚凝胺介质，其主要成分是聚凝胺和鱼精蛋白、氯化钠，专用于新生儿标本血型检测，旨在
２］。提高试验敏感性［
＊
）。 作者简介：基金项目：中山市医学科研基金资助项目（蔡旭清，女，主管检验技师，主要从事医学检验工作。０１３Ａ０２０１５９２
，，，国际检验医学杂志年月第卷第期·１４７５·
释，与对应抗原为阳性的试剂红细胞反应，测其效价，以最高稀释度且凝集为１＋及以上者为效价终点。同时用该试剂红细胞与Ａ作为阴性对照试验。Ｂ型献血者血清反应，
１．６ 红细胞凝集强度计分标准 采用Ｗａｒｓｈ方法：４＋（８
、、、、、（。分）３＋（６分）２＋（４分）１＋（２分）Ｗ＋（１分）００分）采取ｔＰＳＳ１７．０统计软件进行分析，１．７ 统计学处理 利用Ｓ检验进行组间比较，以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。２ 结 果２．１ 中山地区新生儿ＡＢＯ正反定型结果比较 采用传统试管法，对１结果有１００例新生儿血液标本进行ＡＢＯ血型检测， 正反定型符合率８１３例正反定型一致，３％。９
改良法等与传统方法的敏感性比较 随机选择２．２ 凝胶卡、一批献血者血浆和市售Ｉ合计１Ｍ抗－Ｄ抗体，５份作为待检标ｇ
本，其中，抗－Ａ、抗－Ｄ抗体３份，分别用凝胶抗－Ｂ抗体各６份，卡和改良试管、增强剂及常规试管、纸片、微板、聚凝胺，检测这些标本中抗－Ａ、结果显示抗－Ｂ、抗－Ｄ抗体的效价并进行统计，敏感性（凝集强度积分）最高的是增强剂法和改良试管法（均为））），，、、凝胶卡法略低（其次是聚凝胺法（试管法（微３７３３３０２９）
），），板法（最差的是纸片法（阴性对照试验均符合；改良试２８２３管法与增强剂和凝胶卡法比较，差异无统计学意义（Ｐ＞，）试管法、微板法、纸片法比较，差异均有统与聚凝胺法、０５０．
）。计学意义（０５Ｐ＜０．２．３ 新生儿红细胞抗原检测比较 随机选择１００份新生儿标
本，采用凝胶卡和改良试管法、增强剂法及常规试管法、纸片法、微板法、聚凝胺法，平行检测其红细胞Ａ上的血ＢＯ、Ｒｈ（Ｄ）型抗原，若以改良试管法作为标准，则ＡＢＯ血型正确率由高／）／、、到低分别是增强剂１凝胶卡９试００％（１００１００４％（９４１００）／）、／、／，管８微板８纸片３聚６％（８６１００５％（８５１００）８％（３８１００）凝胺正定型出现较多假阳性反应而失去统计意义，血型ｈ（Ｄ）Ｒ／）。所有方法正确率均为１００％（１００１００
２．４ 新生儿血浆抗体检测比较 仍选择上述１００份新生儿标本，采用凝胶卡和改良试管法、增强剂法及常规试管法、纸片法、微板法、聚凝胺法，平行检测其血浆中ＡＢＯ抗体（ＢＯ反Ａ
，定型）结果，若以改良试管法作为标准，ＡＢＯ血型正确率分别／、／、是增强剂１凝胶卡９试管８００％（１００１００）２％（９２１００）２％（／、／、／、微板８聚凝胺８纸片８２１００）１％（８１１００）１％（８１１００）／）。７％（３７１００３
２．５ 新生儿出生半个月内ＡＢＯ血型检测结果 选择４０例新
生儿，分别于出生后第１～１每隔３ｄ采集微量血液标本，６天，，用凝胶卡进行正反定型（标本和试剂均取半量）共采集６次，
新生儿Ａ结果，ＢＯ血型正反定型符合率分别为４７．５％、
新生儿标本中Ａ５２．５％、５７．５％、６２．５％、６５．０％、７２．５％；ＢＯ抗体效价分别为４２．５％、５０．０％、５２．５％、５７．５％、６０．０％、与Ａ７５．０％，ＢＯ正反定型符合率呈正相关。
同时采集对应新生儿血２．６ 脐带血检测 取２２０份脐带血，标本，分别以凝胶卡和改良试管法及常规试管法进行ＡＢＯ、Ｒｈ（血型检测，结果表明，无论是红细胞上Ａ抗原检Ｄ）ＢＯ、Ｒｈ（Ｄ）
测，还是血浆中Ａ三种方法的脐带血和新生儿ＢＯ抗体检测，血标本检测结果均一致。用抗球蛋白凝胶卡进行直接抗球蛋，结果上述２白试验（ＡＴ）２０份脐带血和对应新生儿血标本Ｄ结果均一致，凡诊断为新生儿溶血病的患儿，其标本ＤＡＴ结果均为阳性。
３ 讨 论
新生儿血型检测的准确性一直是实验室工作难点和重点，所以有研究人员利用分子生物学技术聚合酶链反应（进ＰＣＲ）
［］
极大地提高了试验正定型）行红细胞抗原（ＤＮＡ基因分型１，
尚未普及，所以敏感性。鉴于血型ＰＣＲ技术成本高操作麻烦，本文研究仍以血型血清学试验为主。当新生儿血液中含有来，自通过胎盘的母亲Ｉ其ＡＧ抗－Ａ（ＢＯ反定型也会受到干Ｂ）ｇ
——假阳性反应。但有学者认为导致新生儿血型鉴定正反扰—
［］
似乎与常规理论相反，原因定型一致的抗体主要为ＩＧ类３，ｇ
待研究。
此次研究显示，中山地区新生儿为ＡＢＯ正反定型符合率，
［］１］
报道的５与天津刘兰婷等［８３％，６．９２％和北京吴涛等４报道
５］
但与南宁钟月华［报道的７的４６．９１％差距较大，０．９％～［］
这些数据差异较７３．３％和深圳雷厉等６报道的８４．２％接近，
大可能与试验方法和新生儿出生日期不同有关。本研究表明，
近一半新生儿出生时血液中已含有Ａ其ＡＢＯ抗体，ＢＯ血型正反定型符合率和新生儿标本中ＡＢＯ抗体随着出生日期增
７］
的研究结果类似。研究中还加呈逐渐递增趋势，这与赵媛等［（发现，新生儿出生时Ｒ抗原已成熟，任何常规方法均可检ｈＤ）出，但由于一些标本ＡＢＯ抗原或抗体弱在常规试管法和纸片
８］
的研究表明，婴幼儿６个月以后仍有部法中有漏检。李萌等［
９］
发现，分弱抗体不易检出。吴涛等［ＢＯ抗原抗体的产生与Ａ
胎龄有关。这次血型抗体效价检测表明敏感性最高的是增强剂法和改良试管法，正定型抗－Ａ、抗－Ｂ抗体商品试剂中含有添
加剂（维持稳定提高活性）干扰聚凝胺试验，所以这种传统聚凝脐胺法不可用于ＡＢＯ正定型。本文脐带血的应用研究显示，（血型检测和Ｄ带血可替代外周血用于新生儿ＡＢＯ、ＲｈＤ）ＡＴ，
０］１这与黎海澜等［且的研究结果一致。由于脐带血容易采集，
避免了对新生儿的伤害，避免了不必要的医患矛盾，值得推广。综上所述，提高新生儿ＡＢＯ血型检测准确性的关键是提高试验敏感性，纸片法敏感性太低完全不能用于新生儿血型检测。参考文献
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（）收稿日期：０１４２５２０１－－