关键词
QuEChERS 前处理 UHPLC目标
关键词：
赛默飞世尔科技（中国）有限公司
基于啶虫脒在茶叶中的使用、对人体健康的危害和欧盟出台的新标准，本文 QuEChERS 前处理 UHPLC 拟通过高效液相色谱法结合QuEChERS前处理技术建立一种简便、准确、快
目标：
速测定茶叶中啶虫脒的方法。
基于啶虫脒在茶叶中的使用、对人体健康的危害和欧盟出台的新标准，本文拟通过高效液相色谱法结合QuEChERS前处理技术建立一种简便、准确、快速测定茶叶中啶虫脒的方法。 引言
引言
啶虫脒(Acetamipdd)，化学名称：[E]-N-[(6-氯吡啶)-3-基]-N-腈基-N-甲基乙酰胺, 别名吡虫清、乙虫脒、莫比朗，是一种新型杀虫剂，属硝基亚甲基杂环类化合物，其结构式见图1。啶虫脒作用于昆虫神经系统突触部位的烟碱
测定茶叶中啶虫脒的方法主要有：气相色谱法和高效液相色谱法，以高效液相色谱法为主。对于农残的测定，前处理是关键，尤其是样品的净化。对于茶叶中啶虫脒
啶虫脒(Acetamipdd)，化学名称：[E]-N-[(6-氯吡啶)-3-基]-N-腈基-N-甲基乙酰胺, 别乙酰胆碱受体引起神，干扰昆虫神经系统的刺激传导，
名吡虫清、乙虫脒、莫比朗，是一种新型杀虫剂，属硝基亚甲基杂环类化合物，其结构经系统通路阻塞，导致昆虫麻痹、最终死亡
。作为一种的测定，常用的净化法主要有：基质固相分散、层析法
新烟碱类杀虫剂，啶虫脒具有内吸性强、杀虫谱广、作和固相萃取等。QuEChERS 是国内外近年来测定农残较为式见图1。啶虫脒作用于昆虫神经系统突触部位的烟碱乙酰胆碱受体，干扰昆虫神经系
用速度快等特点，广泛用于蔬菜、果树、茶叶的蚜虫、简便、有效的净化技术。QuEChERS 是Quick、Easy Cheap、统的刺激传导，引起神经系统通路阻塞，导致昆虫麻痹、最终死亡。作为一种新烟碱类
鳞翅目等害虫的防治，防效在90％以上。欧盟国家对茶Effective、Rugged、Salty的缩写，即为：简易、廉价、“快速、杀虫剂，啶虫脒具有内吸性强、杀虫谱广、作用速度快等特点，广泛用于蔬菜、果树、
有效、稳定、安全"的萃取方法。该方法是Anastassiades茶叶的蚜虫、鳞翅目等害虫的防治，防效在90％以上。欧盟国家对茶叶中啶虫脒的限量
等于2002年首先在EPRW会议提出，并于2003年正式发要求越来越严格，2013年啶虫脒的检测限量为0.1mg/kg ，而在2014年EU87法规中规定
啶虫脒的检测限量为0.05mg/kg。
叶中啶虫脒的限量要求越来越严格，2013年啶虫脒的检测限量为0.1mg/kg ，而在2014年EU87法规中规定啶虫脒
的检测限量为0.05mg/kg。
表的一个用于农产品中多农药残留分析的前处理方法。该方法是利用乙腈萃取样品中的农药残留，氯化钠和无水硫酸镁盐析分层，萃取液经无水硫酸镁和PSA(N-丙基乙二胺)分散固相萃取净化后，用GC、GC/MS等进行多
啶虫脒结构式图图1. 1. 啶虫脒结构式
残留分析。
基于QuEChERS方法的优势、啶虫脒的特点以及样品基质的考虑，本文拟采用高效液相色谱法，结合QuEChERS前
测定茶叶中啶虫脒的方法主要有：气相色谱法和高效液相色谱法，以高效液相处理技术，对茶叶中啶虫脒进行快速、准确、灵敏的测定，
以满足欧盟对茶叶中啶虫脒提出的限量要求。色谱法为主。对于农残的测定，前处理是关键，尤其是样品的净化。对于茶叶中啶
仪器
样品加标
Thermo ScientificTM DionexTM UltiMateTM 3000RS四元梯度系统,称取其中的一份茶叶 1 g,加入0.5 mL 浓度为20 mg/L 啶虫包括：
脒标准溶液和4.5 mL 含1%乙酸的乙腈溶液，与样品进行– LGP-3400RS 四元分析泵（具备溶剂脱气功能）同步前处理，得到的理论加标浓度为2 mg/L。– WPS-3000TRS RS自动进样器（配置100 μL 定量环）色谱条件
– TCC-3000RS 柱温箱（具备控温功能）
色谱柱：Acclaim 120, C18, 2.2 µm Analyitcal (2.1×100 mm)
– DAD-3000RS 二极管阵列检测器（检测池体积 2.5 μL）(P/N 068982 )
Thermo Scientific Dionex Chromeleon 色谱系统控制软件, 版流动相：乙腈/水(v : v , 30 : 70等度)本6.80 或以上进样体积：1 µL试剂与标准品流速：0.3 mL/min试剂
柱温：30 ℃
去离子水，18.2 MΩ–cm (Thermo Scientific GenPure Pro UV-TOC，检测：紫外吸收， λ246 nmP/N 50131948)
结果与讨论乙腈(CH3CN)，HPLC级 (Fisher Chemical，P/N AC610010040)样品前处理的优化
标准品
基于QuEChERS方法具有简单、方便，且在农残中广泛应啶虫脒标准品购买于上海安谱科学仪器有限公司。用的特点，本文将该方法应用于茶叶中啶虫脒的提取和净化。一般采用乙腈作为萃取溶剂，但是由于啶虫脒偏标准溶液的制备
碱性，因此采用含1%乙酸的乙腈溶液作为提取试剂。分别称取0.01 g啶虫脒标准品，用乙腈定容至10 mL，得到浓度均为1000 mg/L的标准储备液，用乙腈逐级稀释成重现性、线性和检出限
标准曲线所需的浓度。为考察方法的重现性，本文采用八次连续进样浓度为5 mg/L的啶虫脒标准溶液，得到的保留时间和峰面积样品前处理的相对标准偏差（RSD）都分别小于0.11%和0.33%，样品
说明该方法具有良好的重现性，见图2。目标化合物分别称取1 g四种不同的茶叶于离心管中，加入5 mL 含1%在0.025-500 mg/L 内都具有良好的线性，以浓度为横乙酸的乙腈溶液，浸泡30 min后，以4500 r/min速率离心坐标，以峰面积为纵坐标，得到的标准曲线方程为5 min，取2 mL上清液于放有0.5 g QuEChERS粉末的离心管Y=0.301X+0.2055（r=0.9996）；以三倍信噪比计算得到中，涡旋2 min，以12000 r/min 离心2 min，过滤后进样。
的方法检出限为0.007 mg/L。
图2. 连续八次重复进样5 mg/L 啶虫脒标准品的叠加色谱图
2
样品的测定
为考察啶虫脒在茶叶中的残留情况，本文选用了四种不同茶叶进行测试。结果表明，啶虫脒在所选的四种茶叶中均无检出。另外，为考察方法的回收率，本文进行了加标实验，加标的理论浓度为2 mg/L, 实际测得的浓度为1.48 mg/L，回收率为74%，说明该方法适用于茶叶中啶虫脒的测定。
Application Notes_C_LC-63
图3. 1-标准品（2 mg/L）、2-空白、3-样品、4-样品加标的叠加色谱图
论
结论
本文采用高效液相色谱法，结合简便的QuEChERS 前处理技术，以乙腈和水作为流动相在等度条件下，5 min 内即可完成茶叶中啶虫脒的测定，是一种快速、灵敏、准确测定茶叶
本文采用高效液相色谱法，结合简便的QuEChERS 前处理技术，以乙腈和水作为流动相在等度条件下，5 min 内即可完成茶叶中啶虫脒的测定，是一种快速、灵敏、准确测定茶叶中啶虫脒的有效方法，能满足
中啶虫脒的有效方法，能满足2014年欧盟新标准EU 87的相关要求。 2014年欧盟新标准EU 87的相关要求。
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基于啶虫脒在茶叶中的使用、对人体健康的危害和欧盟出台的新标准，本文 QuEChERS 前处理 UHPLC 拟通过高效液相色谱法结合QuEChERS前处理技术建立一种简便、准确、快
目标：
速测定茶叶中啶虫脒的方法。
基于啶虫脒在茶叶中的使用、对人体健康的危害和欧盟出台的新标准，本文拟通过高效液相色谱法结合QuEChERS前处理技术建立一种简便、准确、快速测定茶叶中啶虫脒的方法。 引言
引言
啶虫脒(Acetamipdd)，化学名称：[E]-N-[(6-氯吡啶)-3-基]-N-腈基-N-甲基乙酰胺, 别名吡虫清、乙虫脒、莫比朗，是一种新型杀虫剂，属硝基亚甲基杂环类化合物，其结构式见图1。啶虫脒作用于昆虫神经系统突触部位的烟碱
测定茶叶中啶虫脒的方法主要有：气相色谱法和高效液相色谱法，以高效液相色谱法为主。对于农残的测定，前处理是关键，尤其是样品的净化。对于茶叶中啶虫脒
啶虫脒(Acetamipdd)，化学名称：[E]-N-[(6-氯吡啶)-3-基]-N-腈基-N-甲基乙酰胺, 别乙酰胆碱受体引起神，干扰昆虫神经系统的刺激传导，
名吡虫清、乙虫脒、莫比朗，是一种新型杀虫剂，属硝基亚甲基杂环类化合物，其结构经系统通路阻塞，导致昆虫麻痹、最终死亡
。作为一种的测定，常用的净化法主要有：基质固相分散、层析法
新烟碱类杀虫剂，啶虫脒具有内吸性强、杀虫谱广、作和固相萃取等。QuEChERS 是国内外近年来测定农残较为式见图1。啶虫脒作用于昆虫神经系统突触部位的烟碱乙酰胆碱受体，干扰昆虫神经系
用速度快等特点，广泛用于蔬菜、果树、茶叶的蚜虫、简便、有效的净化技术。QuEChERS 是Quick、Easy Cheap、统的刺激传导，引起神经系统通路阻塞，导致昆虫麻痹、最终死亡。作为一种新烟碱类
鳞翅目等害虫的防治，防效在90％以上。欧盟国家对茶Effective、Rugged、Salty的缩写，即为：简易、廉价、“快速、杀虫剂，啶虫脒具有内吸性强、杀虫谱广、作用速度快等特点，广泛用于蔬菜、果树、
有效、稳定、安全"的萃取方法。该方法是Anastassiades茶叶的蚜虫、鳞翅目等害虫的防治，防效在90％以上。欧盟国家对茶叶中啶虫脒的限量
等于2002年首先在EPRW会议提出，并于2003年正式发要求越来越严格，2013年啶虫脒的检测限量为0.1mg/kg ，而在2014年EU87法规中规定
啶虫脒的检测限量为0.05mg/kg。
叶中啶虫脒的限量要求越来越严格，2013年啶虫脒的检测限量为0.1mg/kg ，而在2014年EU87法规中规定啶虫脒
的检测限量为0.05mg/kg。
表的一个用于农产品中多农药残留分析的前处理方法。该方法是利用乙腈萃取样品中的农药残留，氯化钠和无水硫酸镁盐析分层，萃取液经无水硫酸镁和PSA(N-丙基乙二胺)分散固相萃取净化后，用GC、GC/MS等进行多
啶虫脒结构式图图1. 1. 啶虫脒结构式
残留分析。
基于QuEChERS方法的优势、啶虫脒的特点以及样品基质的考虑，本文拟采用高效液相色谱法，结合QuEChERS前
测定茶叶中啶虫脒的方法主要有：气相色谱法和高效液相色谱法，以高效液相处理技术，对茶叶中啶虫脒进行快速、准确、灵敏的测定，
以满足欧盟对茶叶中啶虫脒提出的限量要求。色谱法为主。对于农残的测定，前处理是关键，尤其是样品的净化。对于茶叶中啶
仪器
样品加标
Thermo ScientificTM DionexTM UltiMateTM 3000RS四元梯度系统,称取其中的一份茶叶 1 g,加入0.5 mL 浓度为20 mg/L 啶虫包括：
脒标准溶液和4.5 mL 含1%乙酸的乙腈溶液，与样品进行– LGP-3400RS 四元分析泵（具备溶剂脱气功能）同步前处理，得到的理论加标浓度为2 mg/L。– WPS-3000TRS RS自动进样器（配置100 μL 定量环）色谱条件
– TCC-3000RS 柱温箱（具备控温功能）
色谱柱：Acclaim 120, C18, 2.2 µm Analyitcal (2.1×100 mm)
– DAD-3000RS 二极管阵列检测器（检测池体积 2.5 μL）(P/N 068982 )
Thermo Scientific Dionex Chromeleon 色谱系统控制软件, 版流动相：乙腈/水(v : v , 30 : 70等度)本6.80 或以上进样体积：1 µL试剂与标准品流速：0.3 mL/min试剂
柱温：30 ℃
去离子水，18.2 MΩ–cm (Thermo Scientific GenPure Pro UV-TOC，检测：紫外吸收， λ246 nmP/N 50131948)
结果与讨论乙腈(CH3CN)，HPLC级 (Fisher Chemical，P/N AC610010040)样品前处理的优化
标准品
基于QuEChERS方法具有简单、方便，且在农残中广泛应啶虫脒标准品购买于上海安谱科学仪器有限公司。用的特点，本文将该方法应用于茶叶中啶虫脒的提取和净化。一般采用乙腈作为萃取溶剂，但是由于啶虫脒偏标准溶液的制备
碱性，因此采用含1%乙酸的乙腈溶液作为提取试剂。分别称取0.01 g啶虫脒标准品，用乙腈定容至10 mL，得到浓度均为1000 mg/L的标准储备液，用乙腈逐级稀释成重现性、线性和检出限
标准曲线所需的浓度。为考察方法的重现性，本文采用八次连续进样浓度为5 mg/L的啶虫脒标准溶液，得到的保留时间和峰面积样品前处理的相对标准偏差（RSD）都分别小于0.11%和0.33%，样品
说明该方法具有良好的重现性，见图2。目标化合物分别称取1 g四种不同的茶叶于离心管中，加入5 mL 含1%在0.025-500 mg/L 内都具有良好的线性，以浓度为横乙酸的乙腈溶液，浸泡30 min后，以4500 r/min速率离心坐标，以峰面积为纵坐标，得到的标准曲线方程为5 min，取2 mL上清液于放有0.5 g QuEChERS粉末的离心管Y=0.301X+0.2055（r=0.9996）；以三倍信噪比计算得到中，涡旋2 min，以12000 r/min 离心2 min，过滤后进样。
的方法检出限为0.007 mg/L。
图2. 连续八次重复进样5 mg/L 啶虫脒标准品的叠加色谱图
2
样品的测定
为考察啶虫脒在茶叶中的残留情况，本文选用了四种不同茶叶进行测试。结果表明，啶虫脒在所选的四种茶叶中均无检出。另外，为考察方法的回收率，本文进行了加标实验，加标的理论浓度为2 mg/L, 实际测得的浓度为1.48 mg/L，回收率为74%，说明该方法适用于茶叶中啶虫脒的测定。
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图3. 1-标准品（2 mg/L）、2-空白、3-样品、4-样品加标的叠加色谱图
论
结论
本文采用高效液相色谱法，结合简便的QuEChERS 前处理技术，以乙腈和水作为流动相在等度条件下，5 min 内即可完成茶叶中啶虫脒的测定，是一种快速、灵敏、准确测定茶叶
本文采用高效液相色谱法，结合简便的QuEChERS 前处理技术，以乙腈和水作为流动相在等度条件下，5 min 内即可完成茶叶中啶虫脒的测定，是一种快速、灵敏、准确测定茶叶中啶虫脒的有效方法，能满足
中啶虫脒的有效方法，能满足2014年欧盟新标准EU 87的相关要求。 2014年欧盟新标准EU 87的相关要求。
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