%9a麻黄中麻黄碱.伪麻黄碱和甲基麻黄碱

・２８２・

中草药

ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌ

Ｄｒｕｇｓ第３７卷第２期２００６年２月

肛Ｌ，按上述色谱条件测定丁基苯酞的峰面积，以外标法计算丁基苯酞结果见表ｌ。

表１

Ｔａｂｌｅ１

剂，对提取时间和提取次数进行了考察，本实验采用Ｌ。（３４）正交表，以提取后的丁基苯酞的峰面积和称重的比值（ｓ／ｗ）作为考察指标，进行了９次试验，取药材粉末（４０目）２ｇ，精密称定，按表２操作，考察提取条件。

表２因素水平表

Ｔａｂｌｅ２

Ｆａｃｔｏｒｓａｎｄｌｅｖｅｌｓ

ＪＩＩ芎中丁基苯酞的量（ｎ一３）

ｂｕｔｙｌｐｈｔｈａｌｉｄｅｉｎＲｈｉｚｏｍａ

Ｃｏｎｔｅｎｔｏｆ

ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ锄一３）

批号

０４０９０３０４０９１３０４０９２１

丁基苯酞／％

０．７８６０．８０１０．７９３

批号

０４１０１３０４１０２６

丁基苯酞／％

０．７９８０．７９０

４讨论

４．１实验建立了川芎药材中丁基苯酞的测定方法，应用反相高效液相色谱法，以适当比例的乙腈一醋酸水为流动相，可使丁基苯酞与其他成分获得基线分离，丁基苯酞的分离度＞２，理论塔板数＞５０００，并具有微量、快速、准确、重现性好等特点，可用于川芎中丁基苯酞的量测定。

４．２本实验比较了乙醚回流提取和超声提取两种方法，发现超声提取效率大大高于回流提取。可能是丁基苯酞具有一定的挥发性，受热后损失了一部分。４．３样品提取方法的优选：丁基苯酞为川芎挥发油中的成分，脂溶性较强，因此选用乙醚作为提取溶

［３３［２３

Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：

Ｌ１ｊ

ｏｆＣｈｉｎｅｓｅＰｒｅｐａ—

ｒａｔｉｏｎ（汉方制刺分析技术）［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：Ｐｅｏｐｌｅ’ａＭｅｄｉｃａｌ

ＨｕＢＨ．Ｔｒａｎｓｌａｔｅ．ＴｈｅＡｎａｌｙｓｉｓ７■ｃ＾ｎｉｃｓＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＨｏｕｓｅ，１９８６．

ＳｈｉＬＦ，ＤｅｎｇＹＳ，ＷｕＢＳ．Ｓｔｕｄｉｅｓ

ｓｔｉｔｕｅｎｔｓ

ｏｎ

ｃｈｅｍｉｃａｌ

ｃｏｎ—

ａｎｄｔｈｅｉＳｒｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｆｒｏｍｄｒｙｒｈｉ—

Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ

ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ

ｚｏｍｅ

ＥＪ］．ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍ

Ａｎａｌ（药物分析杂志），１９９５，１５（３）：２６．

ＸｕＨ

ｓｉｓ

Ｌ，ＦｅｎｇＹＰ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆ３－ｂｕｔｙｌｐｈｔｈａｌｉｄｅｏｎｔｈｒｏｍｂｏ－ｆｏｒｍａｔｉｏｎａｎｄｐｌａｔｅｌｅｔｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｒａｔｓ［Ｊ］．ＡｃｔａＰｈａｒｍ

ｏｆ

Ｈｏｒｔ

５抽（药学学报），２００１，３６（５）：３２９—３３３．

［４］ＺｈａｏＣＸ，ＣｕｉＳＭ，ＬｉｕＸＨ，ｅｔａ１．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅ

ｃｏｎｔｅｎｔ

ｓｏｍｅｓｂｙＲＰ—ＨＰＬＣ

ａｎｄｔｈｅｒｅｌａｔｅｄｓｕｂｓｔａｎｃｅｓｏｆ３－ｂｕｔｙｌｐｈｔｈａｌｉｄｅｉｎｌｉｐｏ—

ＥＪ］．ＪＳｈｅｎｙａｎｇＰｈａｒｍＵｎｉｖ（沈阳药

科大学学报），２００４，２４（１）：２４—２７．

ＲＰ—ＨＰＬＣ法测定麻黄中麻黄碱、伪麻黄碱和甲基麻黄碱

林凯１，范琦ｈ，杨成钢２，邓开英２

（１．重庆医科大学药学系，重庆４０００１６；２．重庆市药品检验所，重庆４０００１５）

麻黄是常用中药，性温、味辛、微苦，具发汗解表、宣肺平喘、利水消肿的功效。麻黄碱（ｅｐｈｅｄｒｉｎｅ，Ｅ）、伪麻黄碱（ｐｓｅｕｄｏｅｐｈｅｄｒｉｎｅ，ＰＥ）和甲基麻黄碱（ｍｅｔｈｙｌｅｐｈｅｄｒｉｎｅ，ＭＥ）为麻黄药材中３种有效成分。麻黄碱具有中枢神经和交感神经兴奋作用，其发汗平喘、利胆、升血压、收缩血管等作用都比较强；伪麻黄碱具有很强的抗炎和利尿作用，对鼻黏膜肿胀引起的鼻塞症方面疗效确定；甲基麻黄碱对气管平滑肌的扩张作用及镇咳作用与麻黄碱相当，而且具有良好的抗变态反应作用［１］。《中国药典＞＞２００５年版一部收载的麻黄测定项中仅控制了麻黄碱瞳］。笔者经试验研究，建立了分离效果好、重现性好的ＨＰＬＣ法同时测定麻黄药材中麻黄碱、伪麻黄碱和甲基麻

黄碱，方法简便快速，可用于药材质量的控制。１仪器、试药与试剂

１．１

仪器：Ａｇｉｌｅｎｔ１１００高效液相色谱仪（美国

Ａｇｉｌｅｎｔ公司），二极管阵列检测器（ＤＡＤ，美国Ａｇｉｌｅｎｔ公司），ＫＱ３２００超声波清洗器（昆山仪器有限公司）。

１．２

试药与试剂：盐酸麻黄碱（ｅｐｈｅｄｒｉｎｅ

ｈｙ—

ｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）对照品、盐酸伪麻黄碱（ｐｓｅｕｄｏｅｐｈｅ—

ｄｒｉｎｅ

ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）对照品、盐酸甲基麻黄碱

（ｍｅｔｈｙｌｅｐｈｅｄｒｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）对照品均购自中

国药品生物制品检定所；麻黄药材经青海省药品检验所刘海青副主任中药师鉴定，均为麻黄科植物草麻黄Ｅｐｈｅｄｒａ

ｓｉｎｉｃａ

Ｓｔａｐｆ的干燥草质茎，乙腈为色

收稿日期：２００５—０４—０８

作者简介：林凯（１９７８），男，海南省海口市人，重庆医科大学药学系药物分析专业硕士研究生，主要从事中药分析。

Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｉｎＩｉｏｎ３０３５５７３５＠１６３．ｃｏｍ

＊通讯作者范琦Ｔｅｌ：（０２３）６８４８５０４８Ｅ—ｍａｉｌ：ｆａｎｑｉ７８７＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｒｎ

万方数据　

中草菊

ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌ

Ｄｒｕｇｓ第３７卷第２期２００６年２月

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谱纯，水为纯水，其余试剂均为分析纯。

２方法与结果

２．１色谱条件：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘｓｙｎｅｒｓｉ色谱柱（２５０

ｍｍ×４．６ｍｍ，４肛ｍ），流动相为乙腈一０．０２ｍｏｌ／Ｌ

磷酸二氢钾溶液（含０．２％三乙胺，磷酸调ｐＨ值２．７）（２；９８），体积流量１．ｏｍＬ／ｍｉｎ，检测波长２１０ｎｍ，柱温为３０℃，进样量２０肛Ｌ。在此色谱条件下，样品３种生物碱的色谱峰均达到了基线分离（图１）。

１一盐酸麻黄碱

２一盐酸伪麻贾碱

３一盐酸甲基麻黄碱

１一ｅｐｈｅｄｒｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ２一ｐｓｅｕｄｏｅｐｈｅｄｒｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ

３一ｍｅｔｈｙｌｅｐｈｅｄｒｉｎｅｈｙｄｒｏｅｈｌｏｒｉｄｅ

图１麻黄生物碱对照晶（Ａ）和麻黄（Ｂ）的ＨＰＬＣ图谱

Ｆｉｇ．１

ＨＰＬＣ

Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓｏｆｔｈｒｅｅａｌｋａｌｏｉｄｒｅｆｅｒ—

ｅｎｅｅ

ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ（Ａ）ａｎｄ

ＨｅｒｂａＥｐｈｅｄｒａｅ（Ｂ）

２．２对照品溶液的制备：分别精密称取盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和盐酸甲基麻黄碱对照品１０、１０、

１５

ｍｇ，分别用ｌｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇（１：１０）制成

０．１、０．１、０．０３ｍｇ／ｍＬ的溶液，摇匀。分别精密量取

３、２、１

ｍＬ，置同一１０ｍＬ量瓶中，用１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一

２０％乙醇（１：１０）稀释至刻度，摇匀，即得混合对照品溶液。

２．３供试品溶液的制备：取本品细粉约０．２ｇ，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇（１：１０）２０ｍＬ，浸泡１２ｈ，超声处理（功率１２０ｗ，频率４０ｋＨｚ）１ｈ，放冷，滤过，滤液置５０ｍＬ量瓶中，残渣加１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇（１：１０）２０ｍＬ，超声处理１ｈ，放冷，滤过，滤液置同一量瓶中，残渣１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇（１：１０）洗涤数次，滤

过，滤液并入同一量瓶ｒｈ用１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙

醇（１：１０）稀释至刻度，即得。

２．４线性关系：取盐酸麻黄碱对照品溶液（６０弘ｇ／ｍＬ）、盐酸伪麻黄碱对照品溶液（３０ｐｔｇ／ｍＬ）和盐酸甲基麻黄碱对照品溶液（６ｔ－ｔｇ），分别进样１、５、１０、１５、２０肛Ｌ，测定峰面积，以峰面积对进样量进行回归，得回归方程（表１）。

２．５精密度试验：精密吸取３种对照品溶液各ｌｏ肛Ｌ，分别连续进样５次，测定盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和盐酸甲基麻黄碱的峰面积，计算得ＲＳＤ分别为０．８％、０．９％、０．８％。

万　

方数据表１麻黄３种生物碱测定的标准曲线

Ｔａｂｌｅ１

Ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｒｅｅａｌｋａｌｏｉｄｓｉｎ

ＨｅｒｂａＥｐｈｅｄｒａｅ

２．６重现性试验：取同一批样品（样品号１）制备５份供试品溶液，进样２０肛Ｌ，分别测定样品中的盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和盐酸甲基麻黄碱的质量分数，结果ＲＳＤ分别为１．１％、１．３％和１．５％。２．７稳定性试验：取同一供试品溶液分别于０、２、

４、８、１２

ｈ进样２０肚Ｌ，测定盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄

碱和盐酸甲基麻黄碱的峰面积，结果ＲＳＤ分别为０．９％、０．７％和０．７％，表明供试品溶液至少在１２

ｈ

内稳定。

２．８回收率试验：精密称取样品号１的样品粉末０．１

ｇ，共６份，分别精密加入０．７６３ｍｇ／ｍＬ盐酸麻

黄碱对照品溶液、０．３７２ｍｇ／ｍＬ盐酸伪麻黄碱对照品溶液和０．１３６ｍｇ／ｍＬ盐酸甲基麻黄碱对照品溶液各１ｍＬ，制备供试品溶液，测得盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和盐酸甲基麻黄碱的平均加样回收率（咒一６）分别为９７．５％（ＲＳＤ１．３％）、９７．２％（ＲＳＤ１．１％）、９６．８％（ＲＳＤｌ．５％）。

２．９样品测定：精密吸取对照品溶液和供试品溶液各２０弘Ｌ，测定３种生物碱分别以盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和盐酸甲基麻黄碱计算，结果见表２。

表２麻黄中３种生物碱测定结果（ｎ一３）

Ｔａｂｌｅ２

Ｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｔｈｒｅｅａｌｋａｌｏｉｄｓｉｎ

ＨｅｒｂａＥｐｈｅｄｒａｅ（一一３）

３．１

流动相的选择：比较流动相（１）乙腈一０．１％磷

酸溶液（２：９８）［２］、（２）乙腈一含０．１％磷酸和０．１％ｍｏｌ／Ｌ磷（２：９８），结果显示流动相（１）所得待检色谱峰拖尾，３讨论

三乙胺水溶液（２：９８）［３１和（３）乙腈一０．０２酸二氢钾溶液（含０．２％三乙胺，磷酸调ｐＨ值２．７）影响色谱峰的分离；流动相（２）和（３）由于扫尾剂三乙胺的加入，所得色谱峰峰形对称，分离度良好，但

・２８４・

中草菊

ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌ

Ｄｒｕｇｓ第３７卷第２期２００６年２月

流动相（２）色谱峰保留时间不稳定；流动相（３）由于

为１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇溶液（１：１０）；在提取时加入了磷酸二氢钾，能够维持流动相ｐＨ值稳定，实间与次数的考察试验中，结果表明样品浸泡１２ｈ后验重现性良好，故选为本实验流动相。

超声处理２次，每次１ｈ，可将３种生物碱基本提取３．２检测波长的选择：样品中３种生物碱的色谱峰完全。故最终选择以１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇溶液经ＤＡＤ检测，其ＵＶ光谱与各自对照品的ＵＶ光

（１：１０）为提取溶剂，样品浸泡１２ｈ后超声处理２谱一致，均在２１０ｎｍ处接近最大吸收，因此测定波

次，每次１ｈ为最佳提取条件。

长选定为２１０ｎｍ。

Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：

３．３提取条件的考察：在提取溶剂的考察试验中，

［１］ＬｏｕＺＣ．ＳｐｅｃｉｅｓＳｙｓｔｅｍａｔｉｚａｔｉｏｎａｎｄＱｕａｌｉｔｙＥｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆ

ＣｏｍｍｏｎｔｙＵｓｅｄＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＤｒｕｇｓ（常用中药材品种

选择了以甲醇、乙醇、丙酮、５０％甲醇、２０％乙醇、１整理与质量研究）ＥＭ３．ＶｏｌＩ．Ｂｅｉｊｉｎｇ：ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ

ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇溶液（１：１０）为提取溶剂，结

ＭｅｄｉｅａｌＰｒｅｓｓ，１９９８．

Ｅ２３

Ｃｈ

Ｐ（中国药典）［ｓ］．Ｖｏｌ

ｔ．２００５．

果表明２０％乙醇和１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇溶液［３］Ｗａｎｇ

Ｂ

Ｑ．ＳｔｕｄｉｅｓｏｎＱｕａｌｉｔｙＳｔａｎｄａｒｄｏｆＣｈｉｎｅｓｅＨｅｒｂａｌ（１：１０）为提取溶剂效果较好，但由于酸浸泡后生物ＭｅｄｉｃｉｎｅａｎｄＲｅｆｅｒｅｎｃｅＳｕｂｓｔａｎｃｅ（中成药质量标准与标准物

Ｍｅｄｉｃｏ—ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ

碱成盐，可提高其测定的准确度，因此提取溶剂确定

质研究）［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：ＣｈｉｎａａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＨｏｕｓｅ，１

９９４．

ＨＰＬＣ法测定茯苓皮中茯苓酸

段启１，李霞兰２，王少军２，钟铁２，龚千锋３，杨世林２

（１．广东康美药业股份有限公司技术研究中心，广东普宁

５１５３００；２．中药固体制剂制造技术

国家工程研究中心，江西南昌

３３０００６；３．江西中医学院，江西南昌

３３０００６）

茯苓皮为多孔菌科真菌茯苓Ｐｏｒｉａ

ＣＯＣＯＳ

表１茯苓皮药材产地及名称

（Ｓｃｈｗ．）ｗｏｌｆ的干燥菌核的皮，性平，味甘、淡，归

Ｔａｂｌｅ１

ＮａｍｅｓａｎｄｈａｂｉｔａｔｓｏｆＣｏｒｔｅｘ

心、肺、脾、肾经［１］，功能利水渗湿、健脾和胃、宁心安

ＳｃｌｅｒｏｔｉｉＰｏｒｉａｅ

神；主要含有三萜酸类如茯苓酸和多糖等有效成分［２］。《中国药典））２０００年版测定项尚无其化学成分量测定。本研究采用ＲＰ—ＨＰＬＣ法测定安徽、湖北、云南产茯苓皮中茯苓酸，为评价茯苓皮药材质量提供一种准确可靠的分析方法。１仪器与试药

Ａｇｉｅｎｔｌｌ００液相色谱仪，ＵＶ检测器，含在线真空脱气机、四元梯度泵、柱温箱、Ａｇｉｌｅｎｔ化学工作站、超声波清洗仪、ＭＥＴＴＬＥＲＡＥ２４０电子天平；甲ｎｍ；柱温为３０℃。

醇、磷酸和乙腈为色谱纯，水为双蒸馏水；茯苓药材２．２对照品溶液的制备：精密称定茯苓酸对照品

由本课题组采集，经本院鉴定教研室刘贤旺教授鉴１．８１

ｍｇ，置于１０ｍＬ的容量瓶中加甲醇至刻度，摇

定均为《中国药典》规定的多孔菌科真菌茯苓Ｐｏｒｉａ匀即得０．１８１ｍｇ／ｍＬ的对照液。

ＣＯＣＯＳ（Ｓｃｈｗ．）Ｗｏｌｆ，共１０批，见表１。２．３供试样品的制备：精密称定茯苓皮粗粉约２方法与结果

０．２７

ｇ，置１００ｍＬ具塞锥型瓶中，加２０ｍＬ甲醇加

２．１

色谱条件及系统适应性：ＨｙｐｅｒｓｉｌＯＤＳ—Ｃ，。柱

塞称定。于超声仪中提取１５ｍｉｎ，称定，补足质量，（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）；流动相：乙腈一０．５ｏＡ磷酸水

０．４５，ｕｍ微孔滤膜滤过，滤液密封备用。

（７０；３０）；体积流量：０．８ｍＬ／ｍｉｎ；检测波长为２４２

２．４标准曲线的绘制：精密吸取对照品溶液０．２、

收稿日期：２００５—０５—１６

作者简介：段启（１９６９一），男，硕士，主要从事中药及中药饮片质量标准研究。

万　

方数据

RP-HPLC法测定麻黄中麻黄碱、伪麻黄碱和甲基麻黄碱

作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：

林凯， 范琦， 杨成钢， 邓开英

林凯,范琦(重庆医科大学,药学系,重庆,400016)， 杨成钢,邓开英(重庆市药品检验所,重庆,400015)

中草药

CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS2006，37(2)4次

参考文献(3条)

1.Lou Z C 常用中药材品种整理与质量研究 19982.中国药典(一部) 2005

3.Wang B Q 中成药质量标准与标准物质研究 1994

引证文献(4条)

1.张霞.徐力生.侯延辉.张立明.王文苹 HPLC法同时测定麻黄中麻黄碱与伪麻黄碱含量[期刊论文]-西北药学杂志2010(1)

2.祝婧.钟凌云.龚千锋.张的凤 RP-HPLC法测定麻黄及其炮制品中盐酸麻黄碱[期刊论文]-中草药 2009(4)3.钟凌云.祝婧.龚千锋 多指标正交试验法优选麻黄蜜炙工艺[期刊论文]-中药材 2008(8)4.孙艳.周晓兵.谢牧牧 蜂地麻滴眼液的制备及质量控制[期刊论文]-中国现代医学杂志 2008(11)

本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200602047.aspx

授权使用：南方医科大学(nfykdx)，授权号：0d484a45-91a9-458b-97fc-9e700001a4a2

下载时间：2011年1月19日

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中草药

ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌ

Ｄｒｕｇｓ第３７卷第２期２００６年２月

肛Ｌ，按上述色谱条件测定丁基苯酞的峰面积，以外标法计算丁基苯酞结果见表ｌ。

表１

Ｔａｂｌｅ１

剂，对提取时间和提取次数进行了考察，本实验采用Ｌ。（３４）正交表，以提取后的丁基苯酞的峰面积和称重的比值（ｓ／ｗ）作为考察指标，进行了９次试验，取药材粉末（４０目）２ｇ，精密称定，按表２操作，考察提取条件。

表２因素水平表

Ｔａｂｌｅ２

Ｆａｃｔｏｒｓａｎｄｌｅｖｅｌｓ

ＪＩＩ芎中丁基苯酞的量（ｎ一３）

ｂｕｔｙｌｐｈｔｈａｌｉｄｅｉｎＲｈｉｚｏｍａ

Ｃｏｎｔｅｎｔｏｆ

ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ锄一３）

批号

０４０９０３０４０９１３０４０９２１

丁基苯酞／％

０．７８６０．８０１０．７９３

批号

０４１０１３０４１０２６

丁基苯酞／％

０．７９８０．７９０

４讨论

４．１实验建立了川芎药材中丁基苯酞的测定方法，应用反相高效液相色谱法，以适当比例的乙腈一醋酸水为流动相，可使丁基苯酞与其他成分获得基线分离，丁基苯酞的分离度＞２，理论塔板数＞５０００，并具有微量、快速、准确、重现性好等特点，可用于川芎中丁基苯酞的量测定。

４．２本实验比较了乙醚回流提取和超声提取两种方法，发现超声提取效率大大高于回流提取。可能是丁基苯酞具有一定的挥发性，受热后损失了一部分。４．３样品提取方法的优选：丁基苯酞为川芎挥发油中的成分，脂溶性较强，因此选用乙醚作为提取溶

［３３［２３

Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：

Ｌ１ｊ

ｏｆＣｈｉｎｅｓｅＰｒｅｐａ—

ｒａｔｉｏｎ（汉方制刺分析技术）［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：Ｐｅｏｐｌｅ’ａＭｅｄｉｃａｌ

ＨｕＢＨ．Ｔｒａｎｓｌａｔｅ．ＴｈｅＡｎａｌｙｓｉｓ７■ｃ＾ｎｉｃｓＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＨｏｕｓｅ，１９８６．

ＳｈｉＬＦ，ＤｅｎｇＹＳ，ＷｕＢＳ．Ｓｔｕｄｉｅｓ

ｓｔｉｔｕｅｎｔｓ

ｏｎ

ｃｈｅｍｉｃａｌ

ｃｏｎ—

ａｎｄｔｈｅｉＳｒｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｆｒｏｍｄｒｙｒｈｉ—

Ｌｉｇｕｓｔｉｃｕｍ

ｃｈｕａｎｘｉｏｎｇ

ｚｏｍｅ

ＥＪ］．ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍ

Ａｎａｌ（药物分析杂志），１９９５，１５（３）：２６．

ＸｕＨ

ｓｉｓ

Ｌ，ＦｅｎｇＹＰ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆ３－ｂｕｔｙｌｐｈｔｈａｌｉｄｅｏｎｔｈｒｏｍｂｏ－ｆｏｒｍａｔｉｏｎａｎｄｐｌａｔｅｌｅｔｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｒａｔｓ［Ｊ］．ＡｃｔａＰｈａｒｍ

ｏｆ

Ｈｏｒｔ

５抽（药学学报），２００１，３６（５）：３２９—３３３．

［４］ＺｈａｏＣＸ，ＣｕｉＳＭ，ＬｉｕＸＨ，ｅｔａ１．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅ

ｃｏｎｔｅｎｔ

ｓｏｍｅｓｂｙＲＰ—ＨＰＬＣ

ａｎｄｔｈｅｒｅｌａｔｅｄｓｕｂｓｔａｎｃｅｓｏｆ３－ｂｕｔｙｌｐｈｔｈａｌｉｄｅｉｎｌｉｐｏ—

ＥＪ］．ＪＳｈｅｎｙａｎｇＰｈａｒｍＵｎｉｖ（沈阳药

科大学学报），２００４，２４（１）：２４—２７．

ＲＰ—ＨＰＬＣ法测定麻黄中麻黄碱、伪麻黄碱和甲基麻黄碱

林凯１，范琦ｈ，杨成钢２，邓开英２

（１．重庆医科大学药学系，重庆４０００１６；２．重庆市药品检验所，重庆４０００１５）

麻黄是常用中药，性温、味辛、微苦，具发汗解表、宣肺平喘、利水消肿的功效。麻黄碱（ｅｐｈｅｄｒｉｎｅ，Ｅ）、伪麻黄碱（ｐｓｅｕｄｏｅｐｈｅｄｒｉｎｅ，ＰＥ）和甲基麻黄碱（ｍｅｔｈｙｌｅｐｈｅｄｒｉｎｅ，ＭＥ）为麻黄药材中３种有效成分。麻黄碱具有中枢神经和交感神经兴奋作用，其发汗平喘、利胆、升血压、收缩血管等作用都比较强；伪麻黄碱具有很强的抗炎和利尿作用，对鼻黏膜肿胀引起的鼻塞症方面疗效确定；甲基麻黄碱对气管平滑肌的扩张作用及镇咳作用与麻黄碱相当，而且具有良好的抗变态反应作用［１］。《中国药典＞＞２００５年版一部收载的麻黄测定项中仅控制了麻黄碱瞳］。笔者经试验研究，建立了分离效果好、重现性好的ＨＰＬＣ法同时测定麻黄药材中麻黄碱、伪麻黄碱和甲基麻

黄碱，方法简便快速，可用于药材质量的控制。１仪器、试药与试剂

１．１

仪器：Ａｇｉｌｅｎｔ１１００高效液相色谱仪（美国

Ａｇｉｌｅｎｔ公司），二极管阵列检测器（ＤＡＤ，美国Ａｇｉｌｅｎｔ公司），ＫＱ３２００超声波清洗器（昆山仪器有限公司）。

１．２

试药与试剂：盐酸麻黄碱（ｅｐｈｅｄｒｉｎｅ

ｈｙ—

ｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）对照品、盐酸伪麻黄碱（ｐｓｅｕｄｏｅｐｈｅ—

ｄｒｉｎｅ

ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）对照品、盐酸甲基麻黄碱

（ｍｅｔｈｙｌｅｐｈｅｄｒｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）对照品均购自中

国药品生物制品检定所；麻黄药材经青海省药品检验所刘海青副主任中药师鉴定，均为麻黄科植物草麻黄Ｅｐｈｅｄｒａ

ｓｉｎｉｃａ

Ｓｔａｐｆ的干燥草质茎，乙腈为色

收稿日期：２００５—０４—０８

作者简介：林凯（１９７８），男，海南省海口市人，重庆医科大学药学系药物分析专业硕士研究生，主要从事中药分析。

Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｉｎＩｉｏｎ３０３５５７３５＠１６３．ｃｏｍ

＊通讯作者范琦Ｔｅｌ：（０２３）６８４８５０４８Ｅ—ｍａｉｌ：ｆａｎｑｉ７８７＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｒｎ

万方数据　

中草菊

ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌ

Ｄｒｕｇｓ第３７卷第２期２００６年２月

・２８３・

谱纯，水为纯水，其余试剂均为分析纯。

２方法与结果

２．１色谱条件：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘｓｙｎｅｒｓｉ色谱柱（２５０

ｍｍ×４．６ｍｍ，４肛ｍ），流动相为乙腈一０．０２ｍｏｌ／Ｌ

磷酸二氢钾溶液（含０．２％三乙胺，磷酸调ｐＨ值２．７）（２；９８），体积流量１．ｏｍＬ／ｍｉｎ，检测波长２１０ｎｍ，柱温为３０℃，进样量２０肛Ｌ。在此色谱条件下，样品３种生物碱的色谱峰均达到了基线分离（图１）。

１一盐酸麻黄碱

２一盐酸伪麻贾碱

３一盐酸甲基麻黄碱

１一ｅｐｈｅｄｒｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ２一ｐｓｅｕｄｏｅｐｈｅｄｒｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ

３一ｍｅｔｈｙｌｅｐｈｅｄｒｉｎｅｈｙｄｒｏｅｈｌｏｒｉｄｅ

图１麻黄生物碱对照晶（Ａ）和麻黄（Ｂ）的ＨＰＬＣ图谱

Ｆｉｇ．１

ＨＰＬＣ

Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓｏｆｔｈｒｅｅａｌｋａｌｏｉｄｒｅｆｅｒ—

ｅｎｅｅ

ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ（Ａ）ａｎｄ

ＨｅｒｂａＥｐｈｅｄｒａｅ（Ｂ）

２．２对照品溶液的制备：分别精密称取盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和盐酸甲基麻黄碱对照品１０、１０、

１５

ｍｇ，分别用ｌｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇（１：１０）制成

０．１、０．１、０．０３ｍｇ／ｍＬ的溶液，摇匀。分别精密量取

３、２、１

ｍＬ，置同一１０ｍＬ量瓶中，用１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一

２０％乙醇（１：１０）稀释至刻度，摇匀，即得混合对照品溶液。

２．３供试品溶液的制备：取本品细粉约０．２ｇ，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇（１：１０）２０ｍＬ，浸泡１２ｈ，超声处理（功率１２０ｗ，频率４０ｋＨｚ）１ｈ，放冷，滤过，滤液置５０ｍＬ量瓶中，残渣加１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇（１：１０）２０ｍＬ，超声处理１ｈ，放冷，滤过，滤液置同一量瓶中，残渣１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇（１：１０）洗涤数次，滤

过，滤液并入同一量瓶ｒｈ用１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙

醇（１：１０）稀释至刻度，即得。

２．４线性关系：取盐酸麻黄碱对照品溶液（６０弘ｇ／ｍＬ）、盐酸伪麻黄碱对照品溶液（３０ｐｔｇ／ｍＬ）和盐酸甲基麻黄碱对照品溶液（６ｔ－ｔｇ），分别进样１、５、１０、１５、２０肛Ｌ，测定峰面积，以峰面积对进样量进行回归，得回归方程（表１）。

２．５精密度试验：精密吸取３种对照品溶液各ｌｏ肛Ｌ，分别连续进样５次，测定盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和盐酸甲基麻黄碱的峰面积，计算得ＲＳＤ分别为０．８％、０．９％、０．８％。

万　

方数据表１麻黄３种生物碱测定的标准曲线

Ｔａｂｌｅ１

Ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｒｅｅａｌｋａｌｏｉｄｓｉｎ

ＨｅｒｂａＥｐｈｅｄｒａｅ

２．６重现性试验：取同一批样品（样品号１）制备５份供试品溶液，进样２０肛Ｌ，分别测定样品中的盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和盐酸甲基麻黄碱的质量分数，结果ＲＳＤ分别为１．１％、１．３％和１．５％。２．７稳定性试验：取同一供试品溶液分别于０、２、

４、８、１２

ｈ进样２０肚Ｌ，测定盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄

碱和盐酸甲基麻黄碱的峰面积，结果ＲＳＤ分别为０．９％、０．７％和０．７％，表明供试品溶液至少在１２

ｈ

内稳定。

２．８回收率试验：精密称取样品号１的样品粉末０．１

ｇ，共６份，分别精密加入０．７６３ｍｇ／ｍＬ盐酸麻

黄碱对照品溶液、０．３７２ｍｇ／ｍＬ盐酸伪麻黄碱对照品溶液和０．１３６ｍｇ／ｍＬ盐酸甲基麻黄碱对照品溶液各１ｍＬ，制备供试品溶液，测得盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和盐酸甲基麻黄碱的平均加样回收率（咒一６）分别为９７．５％（ＲＳＤ１．３％）、９７．２％（ＲＳＤ１．１％）、９６．８％（ＲＳＤｌ．５％）。

２．９样品测定：精密吸取对照品溶液和供试品溶液各２０弘Ｌ，测定３种生物碱分别以盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和盐酸甲基麻黄碱计算，结果见表２。

表２麻黄中３种生物碱测定结果（ｎ一３）

Ｔａｂｌｅ２

Ｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｔｈｒｅｅａｌｋａｌｏｉｄｓｉｎ

ＨｅｒｂａＥｐｈｅｄｒａｅ（一一３）

３．１

流动相的选择：比较流动相（１）乙腈一０．１％磷

酸溶液（２：９８）［２］、（２）乙腈一含０．１％磷酸和０．１％ｍｏｌ／Ｌ磷（２：９８），结果显示流动相（１）所得待检色谱峰拖尾，３讨论

三乙胺水溶液（２：９８）［３１和（３）乙腈一０．０２酸二氢钾溶液（含０．２％三乙胺，磷酸调ｐＨ值２．７）影响色谱峰的分离；流动相（２）和（３）由于扫尾剂三乙胺的加入，所得色谱峰峰形对称，分离度良好，但

・２８４・

中草菊

ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌａｎｄＨｅｒｂａｌ

Ｄｒｕｇｓ第３７卷第２期２００６年２月

流动相（２）色谱峰保留时间不稳定；流动相（３）由于

为１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇溶液（１：１０）；在提取时加入了磷酸二氢钾，能够维持流动相ｐＨ值稳定，实间与次数的考察试验中，结果表明样品浸泡１２ｈ后验重现性良好，故选为本实验流动相。

超声处理２次，每次１ｈ，可将３种生物碱基本提取３．２检测波长的选择：样品中３种生物碱的色谱峰完全。故最终选择以１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇溶液经ＤＡＤ检测，其ＵＶ光谱与各自对照品的ＵＶ光

（１：１０）为提取溶剂，样品浸泡１２ｈ后超声处理２谱一致，均在２１０ｎｍ处接近最大吸收，因此测定波

次，每次１ｈ为最佳提取条件。

长选定为２１０ｎｍ。

Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ：

３．３提取条件的考察：在提取溶剂的考察试验中，

［１］ＬｏｕＺＣ．ＳｐｅｃｉｅｓＳｙｓｔｅｍａｔｉｚａｔｉｏｎａｎｄＱｕａｌｉｔｙＥｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆ

ＣｏｍｍｏｎｔｙＵｓｅｄＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＤｒｕｇｓ（常用中药材品种

选择了以甲醇、乙醇、丙酮、５０％甲醇、２０％乙醇、１整理与质量研究）ＥＭ３．ＶｏｌＩ．Ｂｅｉｊｉｎｇ：ＰｅｋｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ

ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇溶液（１：１０）为提取溶剂，结

ＭｅｄｉｅａｌＰｒｅｓｓ，１９９８．

Ｅ２３

Ｃｈ

Ｐ（中国药典）［ｓ］．Ｖｏｌ

ｔ．２００５．

果表明２０％乙醇和１ｍｏｌ／Ｌ盐酸一２０％乙醇溶液［３］Ｗａｎｇ

Ｂ

Ｑ．ＳｔｕｄｉｅｓｏｎＱｕａｌｉｔｙＳｔａｎｄａｒｄｏｆＣｈｉｎｅｓｅＨｅｒｂａｌ（１：１０）为提取溶剂效果较好，但由于酸浸泡后生物ＭｅｄｉｃｉｎｅａｎｄＲｅｆｅｒｅｎｃｅＳｕｂｓｔａｎｃｅ（中成药质量标准与标准物

Ｍｅｄｉｃｏ—ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ

碱成盐，可提高其测定的准确度，因此提取溶剂确定

质研究）［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：ＣｈｉｎａａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＨｏｕｓｅ，１

９９４．

ＨＰＬＣ法测定茯苓皮中茯苓酸

段启１，李霞兰２，王少军２，钟铁２，龚千锋３，杨世林２

（１．广东康美药业股份有限公司技术研究中心，广东普宁

５１５３００；２．中药固体制剂制造技术

国家工程研究中心，江西南昌

３３０００６；３．江西中医学院，江西南昌

３３０００６）

茯苓皮为多孔菌科真菌茯苓Ｐｏｒｉａ

ＣＯＣＯＳ

表１茯苓皮药材产地及名称

（Ｓｃｈｗ．）ｗｏｌｆ的干燥菌核的皮，性平，味甘、淡，归

Ｔａｂｌｅ１

ＮａｍｅｓａｎｄｈａｂｉｔａｔｓｏｆＣｏｒｔｅｘ

心、肺、脾、肾经［１］，功能利水渗湿、健脾和胃、宁心安

ＳｃｌｅｒｏｔｉｉＰｏｒｉａｅ

神；主要含有三萜酸类如茯苓酸和多糖等有效成分［２］。《中国药典））２０００年版测定项尚无其化学成分量测定。本研究采用ＲＰ—ＨＰＬＣ法测定安徽、湖北、云南产茯苓皮中茯苓酸，为评价茯苓皮药材质量提供一种准确可靠的分析方法。１仪器与试药

Ａｇｉｅｎｔｌｌ００液相色谱仪，ＵＶ检测器，含在线真空脱气机、四元梯度泵、柱温箱、Ａｇｉｌｅｎｔ化学工作站、超声波清洗仪、ＭＥＴＴＬＥＲＡＥ２４０电子天平；甲ｎｍ；柱温为３０℃。

醇、磷酸和乙腈为色谱纯，水为双蒸馏水；茯苓药材２．２对照品溶液的制备：精密称定茯苓酸对照品

由本课题组采集，经本院鉴定教研室刘贤旺教授鉴１．８１

ｍｇ，置于１０ｍＬ的容量瓶中加甲醇至刻度，摇

定均为《中国药典》规定的多孔菌科真菌茯苓Ｐｏｒｉａ匀即得０．１８１ｍｇ／ｍＬ的对照液。

ＣＯＣＯＳ（Ｓｃｈｗ．）Ｗｏｌｆ，共１０批，见表１。２．３供试样品的制备：精密称定茯苓皮粗粉约２方法与结果

０．２７

ｇ，置１００ｍＬ具塞锥型瓶中，加２０ｍＬ甲醇加

２．１

色谱条件及系统适应性：ＨｙｐｅｒｓｉｌＯＤＳ—Ｃ，。柱

塞称定。于超声仪中提取１５ｍｉｎ，称定，补足质量，（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ）；流动相：乙腈一０．５ｏＡ磷酸水

０．４５，ｕｍ微孔滤膜滤过，滤液密封备用。

（７０；３０）；体积流量：０．８ｍＬ／ｍｉｎ；检测波长为２４２

２．４标准曲线的绘制：精密吸取对照品溶液０．２、

收稿日期：２００５—０５—１６

作者简介：段启（１９６９一），男，硕士，主要从事中药及中药饮片质量标准研究。

万　

方数据

RP-HPLC法测定麻黄中麻黄碱、伪麻黄碱和甲基麻黄碱

作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：

林凯， 范琦， 杨成钢， 邓开英

林凯,范琦(重庆医科大学,药学系,重庆,400016)， 杨成钢,邓开英(重庆市药品检验所,重庆,400015)

中草药

CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS2006，37(2)4次

参考文献(3条)

1.Lou Z C 常用中药材品种整理与质量研究 19982.中国药典(一部) 2005

3.Wang B Q 中成药质量标准与标准物质研究 1994

引证文献(4条)

1.张霞.徐力生.侯延辉.张立明.王文苹 HPLC法同时测定麻黄中麻黄碱与伪麻黄碱含量[期刊论文]-西北药学杂志2010(1)

2.祝婧.钟凌云.龚千锋.张的凤 RP-HPLC法测定麻黄及其炮制品中盐酸麻黄碱[期刊论文]-中草药 2009(4)3.钟凌云.祝婧.龚千锋 多指标正交试验法优选麻黄蜜炙工艺[期刊论文]-中药材 2008(8)4.孙艳.周晓兵.谢牧牧 蜂地麻滴眼液的制备及质量控制[期刊论文]-中国现代医学杂志 2008(11)

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