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．观点与评论．
梅毒检测方法的现状
毛远丽陈霖
梅毒是一种全球分布的系统性性传播疾病。梅毒的病原体是苍白螺旋体（Ｔｒｅｐｏｎｅｍｉａｐａｌｌｉｄｕｍ，ＴＰ）。入
是梅毒的惟一传染源，主要传播途径有性传播、血液传播和母婴传播３种。梅毒可侵犯人体全身器官，临床表现分为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒和潜伏梅毒，既能产生各种各样的症状和体征，又可多年无症状而呈
潜伏状态，对人类健康危害极大‘１Ｊ。据ＷＴＯ估计，全球每年约有１２００万的梅毒新发病例，近年在我国梅毒
发病率也呈逐年升高趋势：１９９３年每１００万人的梅毒总发病数不到２例，而到２００５年每１００万人中仅一期和二期梅毒发病率就可达５７例心Ｊ。２０１０年《新英格兰医学杂志》报道，中国不到１ｈ就增加１例先天性梅
毒‘３Ｊ。这些研究报道已清楚地表明，梅毒的防控形势十分严峻。
加强梅毒诊治防工作的重要环节之一，就是各级医疗机构的临床实验室应开展梅毒检查，提高检测质量，为临床提供规范化治疗梅毒的监测指标，实现梅毒早期发现，及时控制，有效治疗。
一、梅毒的实验室检测方法及存在问题
梅毒的临床实验室检测方法较多，概括起来分为梅毒的病原体检查、梅毒的血清免疫学检查和梅毒的核
酸检查３大类。
（一）病原体检查
即梅毒螺旋体检查，采用暗视野显微镜检查或直接免疫荧光试验（ｄｉｒｅｃｔｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔａｎｔｉｂｏｄｙｔｅｓｔ，ＤＦＡ），
在显微镜下观察梅毒螺旋体的特征性形态和运动方式。该方法是诊断早期现症最直接的方法，但由于受到患者用药、检测仪器状态和检测人员技能等条件的制约，本方法实际检出率并不高ＨＪ。如检测未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性。本方法费时费力，也不适用于梅毒的大规模筛查。
（二）血清免疫学检查ｐ１
１．非梅毒螺旋体抗原血清学试验：检测患者血清中宿主针对机体组织破坏后暴露的脂抗原或者螺旋体
表面的脂质产生的非特异性抗类脂抗原的抗体（反应素）。检测方法包括：快速血浆反应素环状卡片试验
（ｒａｐｉｄ
ｐｌａｓｍａｒｅｇａｉｎｃａｒｄ
ｔｅｓｔ，ＲＰＲ）；甲苯胺红不加热血清试验（ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ
ｄｉｓｅａｓｅｒｅｓｅａｒｃｈｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
ｒｅｄｕｎｈｅａｔｅｄｓｅｒｕｍ
ｔｅｓｔ，ＴＲＵＳＴ）；性
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病研究实验室试验（ｖｅｎｅｒｅａｌ
ｒｅａｇｉｎ
ｔｅｓｔ，ＶＤＲＬ）；不加热血清反应素试验（ｕｎｈｅａｔｅｄ
ｔｅｓｔ，ＵＳＲ）。目前最常用的非梅毒螺旋体抗原血清学试验方法是ＲＰＲ和ＴＲＵＳＴ。
由于在治疗过程中反应素滴度可呈动态变化，非梅毒螺旋体抗原血清学试验常用于临床疗效观察、复发或再感染的检查。同时，由于该方法操作简便、快速，成本低，特别适合基层应用和人群调查。此类方法的缺
点是反映不出既往感染，并且受其他疾病影响较大，易产生假阳性结果。６』。
２．梅毒螺旋体抗原血清学试验：检测患者血中针对梅毒螺旋体特异性抗原蛋白（Ｔｐｌ７、Ｔｐ３７、Ｔｐ４７）产生
的特异性抗体。检测方法包括：梅毒螺旋体颗粒凝集试验（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ
ＴＰＰＡ）；梅毒螺旋体血球凝集试验（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａｐａｌｌｉｄｕｍ验（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ
ｔｒｅｐｏｎｅｍａｌａｎｔｉｂｏｄｙａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ
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ｐａｌｌｉｄｕｍｒａｐｉｄ
ｅｎｚｙｍｅ．１ｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ，ＴＰ－ＥＬＩＳＡ）；化学发光免疫分析法（ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ
ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ，
ＣＬＩＡ）；梅毒免疫层析法一梅毒快速检测（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ
（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａｐａｌｌｉｄｕｍ
ｗｅｓｔｅｒｎ
ｔｅｓｔｓ，ＴＰ—ＲＴ）；梅毒螺旋体蛋白印迹试验
ｂｌｏｔ，ＴＰ．ＷＢ）。梅毒螺旋体抗原血清学试验的共同优点是特异性强，可以作为
非梅毒螺旋体抗原血清试验（如ＲＰＲ等）初筛阳性标本的复检或确证试验。但是，由于感染梅毒螺旋体后，
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ
ｊ．ｉｓｓｎ，１００９－９１５８．２０１３．１０．００６
作者单位：１０００３９北京，解放军第三。二医院临床检验医学中心通信作者：毛远丽，电子信箱：ｍａｏｙｕａｎｌｅｅ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｎ
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一旦梅毒螺旋体抗体试验呈阳性，则患者长时间甚至终身阳性，所以这些方法不能区分既往感染和现症感染，亦不能作为疗效观察的指标。
（三）梅毒螺旋体核酸检查
可对血浆、血清、皮损部位组织液、淋巴穿刺液及脑脊髓液等标本的梅毒螺旋体核酸采用ＰＣＲ进行检测。核酸检查的优点是特异性高，在早期梅毒、神经梅毒、先天梅毒和伴艾滋梅毒等诊断中，以及螺旋体现症感染和既往感染的鉴别诊断中具有一定的价值，也可应用于梅毒螺旋体的耐药性监测、菌株流行病学分型。有报道实时荧光ＰＣＲ检测Ｉ期梅毒敏感性高，但用于Ⅱ期梅毒检测敏感性较低¨１，因此选用实时荧光ＰＣＲ还要注意患者的病程。该方法缺点是成本高，对实验条件要求高并且易受多种因素影响，不宜做疗效观察。
表１列举了梅毒实验室检测各类方法、优缺点以及临床应用范围。
（四）存在的问题
值得注意的是，临床实验室采用梅毒血清学方法检测标本时，由于方法学本身的局限性、患者的特殊情
况、实验条件和试剂或仪器的状况等因素的影响，在结果判读时，可能会出现假阴性或假阳性的情况¨’１…。
１．前带现象：是指临床上符合梅毒体征，但未经稀释血清的ＴＲＵＳＴ或ＲＰＲ实验呈阴性或弱阳性，若将
血清稀释后重复实验，便可出现阳性结果。原因是血清中抗心磷脂抗体过多，抑制了沉淀反应的出现。为避
免此类情况，不能只做原倍血清的检测，可以同时作倍比稀释血清的滴度检测。１…。
２．病程的影响：初期或晚期梅毒患者血清ＴＲＵＳＴ或ＲＰＲ可呈假阴性。原因是感染初期，非特异性心磷
脂抗体迟于特异性抗体出现在血清中，而晚期梅毒非特异性抗体可消失。因此，ＲＰＲ实验不适合一期、三期和治疗后梅毒的诊断¨“。
３．温度的变化：ＲＰＲ是絮状沉淀反应，温度可以改变絮状物形成的速度，可能导致ＲＰＲ假阴性。ｅｌ—
Ｚａａｔａｒｉ和Ｍａｒｔｅｎｓ１１３］报道，１２１０份初筛标本中有１４份假阴性，排除前带现象，可能是由于冷冻离心的原因。
４．特殊人群导致非梅毒螺旋体抗原试验假阳性：多见于系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）、风湿热和系统性硬化等自身免疫性疾病患者，也可见于水痘、麻风和病毒性肝炎等病毒感染性疾病。此外，一些老人和炎症患者亦会出现假阳性的结果，可能和他们特殊的生理免疫状态有关¨４Ｉ。
５．新生儿携带被动抗体导致ＲＰＲ／ＴＰＰＡ检测阳性¨引：由于母体血梅毒螺旋体抗体ＩｇＧ可经胎盘传给胎儿，使患儿血清呈被动阳性。因此，新生儿ＲＰＲ或ＴＰＰＡ阳性时应慎重诊断先天性梅毒，有报道，梅毒孕妇孕期干预后新生儿仍表现ＲＰＲ／ＴＰＰＡ阳性，被误诊为先天梅毒¨…。
表１梅毒检测的实验室方法的比较和临床应用
注：ＲＰＲ示快速血浆反应素环状卡片试验；ＶＤＲＬ示性病研究实验室试验；ＴＰＰＡ示梅毒螺旋体颗粒凝集试验；ＴＰＨＡ示梅毒螺旋体血球凝
集试验；ＴＰ—ＥＬＩＳＡ示梅毒酶联免疫吸附试验；ＴＰ．ＲＴ示梅毒免疫层析法一梅毒快速检测；丌Ａ－ＡＢＳ示荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验；ＣＬＩＡ示化
学发光免疫测定试验；ＴＰ—ＷＢ示梅毒螺旋体蛋白印迹试验
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因此，无论用何种方法检测梅毒，其结果必须与临床实际情况相结合，综合分析各种情况，科学做出诊
断，及时予以治疗。
二、梅毒实验室方法的临床应用及问题
纵观梅毒实验室检测的诸多方法以及目前国内部分临床实验室开展梅毒检测的实际情况，我们可以看到，梅毒的病原体检查和核酸检测对人员、设备、环境和标本的要求较高，临床应用有较大局限性。梅毒的血清免疫学检查方法由于其特异性好，操作简便快捷，可以实现自动化检测，适宜临床大样本高通量筛查，已被
普遍应用于梅毒的临床检测。
采用科学的梅毒血清学筛查诊断流程，不仅能够有效地提高筛查诊断效率，而且对于避免医疗纠纷，减少患者心理压力及家庭矛盾具有重要的意义。目前传统的梅毒检测流程多采用美国ＣＤＣ筛查方案，即血清
标本采用非梅毒螺旋体抗原血清学试验进行初筛，例如ＲＰＲ，若结果阳性再行梅毒螺旋体抗原血清学试验进行验证。该检测流程的目的是发现梅毒螺旋体的现症感染，该筛查方案成本低，与临床符合性好。但是这种检测流程也存在着很大的局限性，如初筛实验特异性不高，不能反映既往感染，需要手工操作和人工主观判读，不适于大批样本的检测。目前我国仅对首次就诊的孕产妇制订了梅毒筛查方案¨７‘，即：首先采用非梅
毒螺旋体抗原血清学试验或梅毒螺旋体抗原血清学试验之一进行初筛，当筛查结果为阳性时，需用另一类试
验进行复检。对一般人群尚无明确的筛查诊断流程。
最近几年，由于临床对梅毒筛查需求的增加以及检测自动化仪器的发展，国内外很多临床实验室采用一
种逆向检测流程，即先行梅毒螺旋体抗原血清学试验初筛，如ＣＬＩＡ或ＥＬＩＳＡ，初筛阳性再行非梅毒螺旋体抗
原血清学试验如ＲＰＲ进行复检。这样的检测流程适应了临床高通量自动化检测的需求，但是当初筛结果为假阳性或与复检结果不符时，往往会给医生和患者造成困扰。例如，ＥＬＩＳＡ（或ＣＬＩＡ）阳性而ＲＰＲ阴性，虽然这种结果可以发生于已治愈的梅毒患者，但是，ＥＬＩＳＡ（或ＣＬＩＡ）假阳性以及ＲＰＲ对早期或潜伏梅毒患者的检测灵敏度不高也有可能导致上述结果。为此，美国ＣＤＣ建议在逆向检测流程中，当初筛阳性而ＲＰＲ阴性时，标本可以采用ＴＰＰＡ进行验证，以排除初筛实验假阳性的可能【ｌ
８Ｉ。
本期发表的陈兰兰等１１９］研究工作《自动化梅毒螺旋体抗体初筛实验的特异性及流程改进探讨》一文，通过对４６９０份血清标本采用化学发光微粒子免疫分析法、ＴＰＰＡ、ＲＰＲ以及ＦＴＡ—ＡＢＳ进行梅毒血清学初筛、复检、确认试验，结果表明，当以化学发光微粒子免疫分析法作为初筛平台时，至少有２７．０８％的假阳性率。因
此，作者提出了对ＴＰ．ＣＭＩＡ作为初筛试验梅毒血清学筛查流程进行改进，即ＴＰ．ＣＭＩＡ筛查阳性的标本，即刻
进行ＴＰＰＡ复检，对于ＴＰＰＡ复查阳性的标本再补做ＲＰＲ检测。同时建议，如果实验室梅毒血清学初筛标本
数量较少，可直接使用ＴＰＰＡ初筛，阳性标本再补做ＲＰＲ检测。无论传统检测流程、逆向检测流程（见图１）
还是陈兰兰等建议的检测流程，各有优缺点，各实验室应根据检测目的、样本量、人员以及仪器设备等实际情况选择制定符合实际的检测流程，将假阴性率和假阳性率降至最低。
总之，在梅毒的检测方法和临床应用中尽管还存在着一些问题，但通过实验室和临床的共同努力正在日趋完善。梅毒的诊治防工作是一项系统的社会工程，而梅毒的实验室检测方法的进步及诊断流程不断优化
必将为梅毒的防治工作提供强有力的医学技术保证。
逆向检测流程
梅毒螺旋体试验（以ＥＬＬＳ＾为倒）
传统检测流程
参考文献
厂——］
阴性
阴性Ｉ阳性
ＥＬＬＳ＾非梅毒螺旋体试验阴性（以ＲＰＲ为例）
ＥＬＩＳＡＢＨ性ＲＰＲ陲］性
擎壁＿性体定子试验
ＴＰＰＡ
厂————］
阳性
ｌｌＲＰＲ阴性非梅毒螺梅毒螺旋体试验旋体定量（以ＥＬＬＳ＾为例）
．［二■］
阳性
ｌＥＬＩＳＡ
ｌＥＬＩＳＡ
非梅毒螺旋体试验
（以ＲＰＲ为例）
阴性
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非梅毒螺旋
？譬坶
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ｊｗ，ＭａｌｅｆｙｔＫＪ，ｅｔａ１．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｃｏｒｎｅａｌｒｅｐａｉｒ
ｔｒａｎｓｆｅｒ
ｏｆ
ｏｐｉｏｉｄ
ｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ
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ｂｙ
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滴度阳性阴性
ＥＬＩＳＡ阴性ＥＬＩＳＡ５Ｈ性ＲＰＲ阴性ＲＰＲ滴度
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图１梅毒的实验室检测流程
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・８８６・
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＂
ｒｅａｌ—ｔｉｍｅＰＣＲｆｏｒｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｓｙｐｈｉｌｉｓ．ＪＣｌｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌ，
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ｔｏ
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Ｂｉｎｎｉｃｋｅｒ
ＭＪ．Ｗｈｉｃｈａｌｇｏｒｉｔｈｍｓｈｏｕｌｄｂｅｕｓｅｄ
ｔｏｓｃｒｅｅｎ
ｆｏｒｓｙｐｈｉｌｉｓ？ＣｕｒｒＯｐｉｎＩｎｆｅｃｔＤｉｓ，２０１２，２５：７９－８５．
引＂明明陈兰兰，邵燕玲，王巧风，等．自动化梅毒螺旋体抗体初筛实验的特异性及流程改进探讨．中华检验医学杂志，２０１３，３６：８９１－８９４．
（收稿日期：２０１３－０４—１６）
（本文编辑：武昱）
．学界与业内新动态．
２０１３全国血液体液学检验室间质量评价
总结暨学术会议在昆明召开
由卫生部临床检验中心主办的“２０１３全国血液体液学检验室间质量评价总结暨学术会议”于８月２０至２２日在云南省昆明市顺利召开。会议对２０１１至２０１２年血液体液学检验专业的全围室问质量评价］二作进行总结，分析存在的问题，同时开展临床实验室质量改进的相关培训和学术交流，以提高血液体液学检验实验室的检测能力。
卫生部临床检验中心副主任彭明婷研究员负责本次会议的策划与组织，主要就当前血液体液学检验存在问题的解决方案、技术要求的研讨以及血液体液学重要检验项目的开展和新方法的应用等设定相关专题，邀请国内外知名专家作专题学术报告。
中华医学会检验分会临床血液体液学组执行组长魏军教授做了“分子诊断对临床血液和体液学检查带来的机遇和挑战”的报告；中华医学会检验分会副主任委员申子瑜研究员解读了“医疗卫生体制改革与临床检验收费政策”；彭明婷研究员对已发布的“血细胞分析参考区间”和“临床血液学检验常规项目分析质量要求”等多项卫生行业标准、“卫生部临床检验中心血液体液学检验质量改进工作进展”以及“Ｄ一二聚体检测现状调查与质量控制”进行了讲解；北京协和医院血液科主任赵永强教授、上海交通大学附属瑞金医院王学锋教授、安徽省立医院吴竞生教授和加拿大麦克马斯特大学Ａｎｔｈｏｎｙ
ＫＣ
胞分析的发展趋势”和“流式细胞分析检测项目的规范化”；上海市医学会检验分会临检组组长李智教授、北京协和医院检验科崔巍副主任和新加坡樟宜医院Ａｗ
Ｔａｒ
Ｃｈｏｏｎ教授分
别作了“体液检验的标准化”、“血细胞分析流程的再认识”和“血小板计数和血小板输注”的报告。卫生部临床检验中心彭明婷研究员、谷小林副主任技师和李臣宾助理研究员分别就２０１１至２０１２年全血细胞计数、凝血试验、形态学检验、尿液化学分析、网织红细胞计数、流式细胞分析、血液流变学检测和血沉测定的全国质评数据和存在的问题进行了分析，并提出了改进建议。
学术报告分别由魏军教授、王学锋教授、王建中教授、吴竞生教授、上海市医学会检验分会副主任委员李莉教授、昆明医科大学附属第一医院陈端教授、云南省临床检验中心牛华主任和昆明医科大学附属第一医院段勇主任担任主持。
来自全国各省医疗机构临床实验室的专业技术人员、专家、企业代表和会务人员共计５１０人参加了会议。与会代表
一致认为，专家讲授内容与临床实验室需解决的问题密切相
关，卫生行业标准的发布与实施，技术要求的讨论对实验室的质量改进有较大帮助；临床诊断重要检验项目和新方法的讨论与应用有助于血液体液学检验学科的发展和人才培养。室间质量评价是临床实验室质量改进的重要环节，质评新项目的开展和正确度验证计划的实施为临床实验室质量改进提供了更有效的服务；质评数据分析与质量改进方法的探讨为临床实验室技术能力的提高发挥着越来越重要的作用。
Ｃｈａｎ教授分别讲授了“易栓症诊断专
家共识（２０ｔ２）解读”、“凝血及纤溶相关标志物检测”、“肝素抗凝治疗与监测、ＨＩＴ的诊断与治疗”和“血友病关怀和罕见出血性疾病新进展”；北京大学第一医院王建中教授和成都军区总医院吴丽娟教授分别报告了“临床血液学一流式细
（周文宾李臣宾）
主堡捡坠匡堂苤查！Ｑ！！至！鱼旦箜堑鲞筮！鱼塑垦！迪』坠！坠鲤：Ｑ！！！！丛垫！ｊ：ｙ尘：堑：堕垒！Ｑ
．观点与评论．
梅毒检测方法的现状
毛远丽陈霖
梅毒是一种全球分布的系统性性传播疾病。梅毒的病原体是苍白螺旋体（Ｔｒｅｐｏｎｅｍｉａｐａｌｌｉｄｕｍ，ＴＰ）。入
是梅毒的惟一传染源，主要传播途径有性传播、血液传播和母婴传播３种。梅毒可侵犯人体全身器官，临床表现分为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒和潜伏梅毒，既能产生各种各样的症状和体征，又可多年无症状而呈
潜伏状态，对人类健康危害极大‘１Ｊ。据ＷＴＯ估计，全球每年约有１２００万的梅毒新发病例，近年在我国梅毒
发病率也呈逐年升高趋势：１９９３年每１００万人的梅毒总发病数不到２例，而到２００５年每１００万人中仅一期和二期梅毒发病率就可达５７例心Ｊ。２０１０年《新英格兰医学杂志》报道，中国不到１ｈ就增加１例先天性梅
毒‘３Ｊ。这些研究报道已清楚地表明，梅毒的防控形势十分严峻。
加强梅毒诊治防工作的重要环节之一，就是各级医疗机构的临床实验室应开展梅毒检查，提高检测质量，为临床提供规范化治疗梅毒的监测指标，实现梅毒早期发现，及时控制，有效治疗。
一、梅毒的实验室检测方法及存在问题
梅毒的临床实验室检测方法较多，概括起来分为梅毒的病原体检查、梅毒的血清免疫学检查和梅毒的核
酸检查３大类。
（一）病原体检查
即梅毒螺旋体检查，采用暗视野显微镜检查或直接免疫荧光试验（ｄｉｒｅｃｔｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔａｎｔｉｂｏｄｙｔｅｓｔ，ＤＦＡ），
在显微镜下观察梅毒螺旋体的特征性形态和运动方式。该方法是诊断早期现症最直接的方法，但由于受到患者用药、检测仪器状态和检测人员技能等条件的制约，本方法实际检出率并不高ＨＪ。如检测未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性。本方法费时费力，也不适用于梅毒的大规模筛查。
（二）血清免疫学检查ｐ１
１．非梅毒螺旋体抗原血清学试验：检测患者血清中宿主针对机体组织破坏后暴露的脂抗原或者螺旋体
表面的脂质产生的非特异性抗类脂抗原的抗体（反应素）。检测方法包括：快速血浆反应素环状卡片试验
（ｒａｐｉｄ
ｐｌａｓｍａｒｅｇａｉｎｃａｒｄ
ｔｅｓｔ，ＲＰＲ）；甲苯胺红不加热血清试验（ｔｏｌｕｉｄｉｎｅ
ｄｉｓｅａｓｅｒｅｓｅａｒｃｈｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
ｒｅｄｕｎｈｅａｔｅｄｓｅｒｕｍ
ｔｅｓｔ，ＴＲＵＳＴ）；性
ｓｅｒｕｍ
病研究实验室试验（ｖｅｎｅｒｅａｌ
ｒｅａｇｉｎ
ｔｅｓｔ，ＶＤＲＬ）；不加热血清反应素试验（ｕｎｈｅａｔｅｄ
ｔｅｓｔ，ＵＳＲ）。目前最常用的非梅毒螺旋体抗原血清学试验方法是ＲＰＲ和ＴＲＵＳＴ。
由于在治疗过程中反应素滴度可呈动态变化，非梅毒螺旋体抗原血清学试验常用于临床疗效观察、复发或再感染的检查。同时，由于该方法操作简便、快速，成本低，特别适合基层应用和人群调查。此类方法的缺
点是反映不出既往感染，并且受其他疾病影响较大，易产生假阳性结果。６』。
２．梅毒螺旋体抗原血清学试验：检测患者血中针对梅毒螺旋体特异性抗原蛋白（Ｔｐｌ７、Ｔｐ３７、Ｔｐ４７）产生
的特异性抗体。检测方法包括：梅毒螺旋体颗粒凝集试验（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ
ＴＰＰＡ）；梅毒螺旋体血球凝集试验（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａｐａｌｌｉｄｕｍ验（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ
ｔｒｅｐｏｎｅｍａｌａｎｔｉｂｏｄｙａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ
ｈａｅｍａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ
ｐａｌｌｉｄｕｍｐａｒｔｉｃｌｅａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ
ｔｅｓｔ，
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ｐａｌｌｉｄｕｍ
ｔｅｓｔ，ＦＴＡ－ＡＢＳ）；梅毒酶联免疫吸附试验（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ
ｐａｌｌｉｄｕｍｒａｐｉｄ
ｅｎｚｙｍｅ．１ｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ，ＴＰ－ＥＬＩＳＡ）；化学发光免疫分析法（ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ
ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ，
ＣＬＩＡ）；梅毒免疫层析法一梅毒快速检测（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ
（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａｐａｌｌｉｄｕｍ
ｗｅｓｔｅｒｎ
ｔｅｓｔｓ，ＴＰ—ＲＴ）；梅毒螺旋体蛋白印迹试验
ｂｌｏｔ，ＴＰ．ＷＢ）。梅毒螺旋体抗原血清学试验的共同优点是特异性强，可以作为
非梅毒螺旋体抗原血清试验（如ＲＰＲ等）初筛阳性标本的复检或确证试验。但是，由于感染梅毒螺旋体后，
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作者单位：１０００３９北京，解放军第三。二医院临床检验医学中心通信作者：毛远丽，电子信箱：ｍａｏｙｕａｎｌｅｅ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｎ
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一旦梅毒螺旋体抗体试验呈阳性，则患者长时间甚至终身阳性，所以这些方法不能区分既往感染和现症感染，亦不能作为疗效观察的指标。
（三）梅毒螺旋体核酸检查
可对血浆、血清、皮损部位组织液、淋巴穿刺液及脑脊髓液等标本的梅毒螺旋体核酸采用ＰＣＲ进行检测。核酸检查的优点是特异性高，在早期梅毒、神经梅毒、先天梅毒和伴艾滋梅毒等诊断中，以及螺旋体现症感染和既往感染的鉴别诊断中具有一定的价值，也可应用于梅毒螺旋体的耐药性监测、菌株流行病学分型。有报道实时荧光ＰＣＲ检测Ｉ期梅毒敏感性高，但用于Ⅱ期梅毒检测敏感性较低¨１，因此选用实时荧光ＰＣＲ还要注意患者的病程。该方法缺点是成本高，对实验条件要求高并且易受多种因素影响，不宜做疗效观察。
表１列举了梅毒实验室检测各类方法、优缺点以及临床应用范围。
（四）存在的问题
值得注意的是，临床实验室采用梅毒血清学方法检测标本时，由于方法学本身的局限性、患者的特殊情
况、实验条件和试剂或仪器的状况等因素的影响，在结果判读时，可能会出现假阴性或假阳性的情况¨’１…。
１．前带现象：是指临床上符合梅毒体征，但未经稀释血清的ＴＲＵＳＴ或ＲＰＲ实验呈阴性或弱阳性，若将
血清稀释后重复实验，便可出现阳性结果。原因是血清中抗心磷脂抗体过多，抑制了沉淀反应的出现。为避
免此类情况，不能只做原倍血清的检测，可以同时作倍比稀释血清的滴度检测。１…。
２．病程的影响：初期或晚期梅毒患者血清ＴＲＵＳＴ或ＲＰＲ可呈假阴性。原因是感染初期，非特异性心磷
脂抗体迟于特异性抗体出现在血清中，而晚期梅毒非特异性抗体可消失。因此，ＲＰＲ实验不适合一期、三期和治疗后梅毒的诊断¨“。
３．温度的变化：ＲＰＲ是絮状沉淀反应，温度可以改变絮状物形成的速度，可能导致ＲＰＲ假阴性。ｅｌ—
Ｚａａｔａｒｉ和Ｍａｒｔｅｎｓ１１３］报道，１２１０份初筛标本中有１４份假阴性，排除前带现象，可能是由于冷冻离心的原因。
４．特殊人群导致非梅毒螺旋体抗原试验假阳性：多见于系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）、风湿热和系统性硬化等自身免疫性疾病患者，也可见于水痘、麻风和病毒性肝炎等病毒感染性疾病。此外，一些老人和炎症患者亦会出现假阳性的结果，可能和他们特殊的生理免疫状态有关¨４Ｉ。
５．新生儿携带被动抗体导致ＲＰＲ／ＴＰＰＡ检测阳性¨引：由于母体血梅毒螺旋体抗体ＩｇＧ可经胎盘传给胎儿，使患儿血清呈被动阳性。因此，新生儿ＲＰＲ或ＴＰＰＡ阳性时应慎重诊断先天性梅毒，有报道，梅毒孕妇孕期干预后新生儿仍表现ＲＰＲ／ＴＰＰＡ阳性，被误诊为先天梅毒¨…。
表１梅毒检测的实验室方法的比较和临床应用
注：ＲＰＲ示快速血浆反应素环状卡片试验；ＶＤＲＬ示性病研究实验室试验；ＴＰＰＡ示梅毒螺旋体颗粒凝集试验；ＴＰＨＡ示梅毒螺旋体血球凝
集试验；ＴＰ—ＥＬＩＳＡ示梅毒酶联免疫吸附试验；ＴＰ．ＲＴ示梅毒免疫层析法一梅毒快速检测；丌Ａ－ＡＢＳ示荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验；ＣＬＩＡ示化
学发光免疫测定试验；ＴＰ—ＷＢ示梅毒螺旋体蛋白印迹试验
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因此，无论用何种方法检测梅毒，其结果必须与临床实际情况相结合，综合分析各种情况，科学做出诊
断，及时予以治疗。
二、梅毒实验室方法的临床应用及问题
纵观梅毒实验室检测的诸多方法以及目前国内部分临床实验室开展梅毒检测的实际情况，我们可以看到，梅毒的病原体检查和核酸检测对人员、设备、环境和标本的要求较高，临床应用有较大局限性。梅毒的血清免疫学检查方法由于其特异性好，操作简便快捷，可以实现自动化检测，适宜临床大样本高通量筛查，已被
普遍应用于梅毒的临床检测。
采用科学的梅毒血清学筛查诊断流程，不仅能够有效地提高筛查诊断效率，而且对于避免医疗纠纷，减少患者心理压力及家庭矛盾具有重要的意义。目前传统的梅毒检测流程多采用美国ＣＤＣ筛查方案，即血清
标本采用非梅毒螺旋体抗原血清学试验进行初筛，例如ＲＰＲ，若结果阳性再行梅毒螺旋体抗原血清学试验进行验证。该检测流程的目的是发现梅毒螺旋体的现症感染，该筛查方案成本低，与临床符合性好。但是这种检测流程也存在着很大的局限性，如初筛实验特异性不高，不能反映既往感染，需要手工操作和人工主观判读，不适于大批样本的检测。目前我国仅对首次就诊的孕产妇制订了梅毒筛查方案¨７‘，即：首先采用非梅
毒螺旋体抗原血清学试验或梅毒螺旋体抗原血清学试验之一进行初筛，当筛查结果为阳性时，需用另一类试
验进行复检。对一般人群尚无明确的筛查诊断流程。
最近几年，由于临床对梅毒筛查需求的增加以及检测自动化仪器的发展，国内外很多临床实验室采用一
种逆向检测流程，即先行梅毒螺旋体抗原血清学试验初筛，如ＣＬＩＡ或ＥＬＩＳＡ，初筛阳性再行非梅毒螺旋体抗
原血清学试验如ＲＰＲ进行复检。这样的检测流程适应了临床高通量自动化检测的需求，但是当初筛结果为假阳性或与复检结果不符时，往往会给医生和患者造成困扰。例如，ＥＬＩＳＡ（或ＣＬＩＡ）阳性而ＲＰＲ阴性，虽然这种结果可以发生于已治愈的梅毒患者，但是，ＥＬＩＳＡ（或ＣＬＩＡ）假阳性以及ＲＰＲ对早期或潜伏梅毒患者的检测灵敏度不高也有可能导致上述结果。为此，美国ＣＤＣ建议在逆向检测流程中，当初筛阳性而ＲＰＲ阴性时，标本可以采用ＴＰＰＡ进行验证，以排除初筛实验假阳性的可能【ｌ
８Ｉ。
本期发表的陈兰兰等１１９］研究工作《自动化梅毒螺旋体抗体初筛实验的特异性及流程改进探讨》一文，通过对４６９０份血清标本采用化学发光微粒子免疫分析法、ＴＰＰＡ、ＲＰＲ以及ＦＴＡ—ＡＢＳ进行梅毒血清学初筛、复检、确认试验，结果表明，当以化学发光微粒子免疫分析法作为初筛平台时，至少有２７．０８％的假阳性率。因
此，作者提出了对ＴＰ．ＣＭＩＡ作为初筛试验梅毒血清学筛查流程进行改进，即ＴＰ．ＣＭＩＡ筛查阳性的标本，即刻
进行ＴＰＰＡ复检，对于ＴＰＰＡ复查阳性的标本再补做ＲＰＲ检测。同时建议，如果实验室梅毒血清学初筛标本
数量较少，可直接使用ＴＰＰＡ初筛，阳性标本再补做ＲＰＲ检测。无论传统检测流程、逆向检测流程（见图１）
还是陈兰兰等建议的检测流程，各有优缺点，各实验室应根据检测目的、样本量、人员以及仪器设备等实际情况选择制定符合实际的检测流程，将假阴性率和假阳性率降至最低。
总之，在梅毒的检测方法和临床应用中尽管还存在着一些问题，但通过实验室和临床的共同努力正在日趋完善。梅毒的诊治防工作是一项系统的社会工程，而梅毒的实验室检测方法的进步及诊断流程不断优化
必将为梅毒的防治工作提供强有力的医学技术保证。
逆向检测流程
梅毒螺旋体试验（以ＥＬＬＳ＾为倒）
传统检测流程
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阴性
阴性Ｉ阳性
ＥＬＬＳ＾非梅毒螺旋体试验阴性（以ＲＰＲ为例）
ＥＬＩＳＡＢＨ性ＲＰＲ陲］性
擎壁＿性体定子试验
ＴＰＰＡ
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ｌｌＲＰＲ阴性非梅毒螺梅毒螺旋体试验旋体定量（以ＥＬＬＳ＾为例）
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（收稿日期：２０１３－０４—１６）
（本文编辑：武昱）
．学界与业内新动态．
２０１３全国血液体液学检验室间质量评价
总结暨学术会议在昆明召开
由卫生部临床检验中心主办的“２０１３全国血液体液学检验室间质量评价总结暨学术会议”于８月２０至２２日在云南省昆明市顺利召开。会议对２０１１至２０１２年血液体液学检验专业的全围室问质量评价］二作进行总结，分析存在的问题，同时开展临床实验室质量改进的相关培训和学术交流，以提高血液体液学检验实验室的检测能力。
卫生部临床检验中心副主任彭明婷研究员负责本次会议的策划与组织，主要就当前血液体液学检验存在问题的解决方案、技术要求的研讨以及血液体液学重要检验项目的开展和新方法的应用等设定相关专题，邀请国内外知名专家作专题学术报告。
中华医学会检验分会临床血液体液学组执行组长魏军教授做了“分子诊断对临床血液和体液学检查带来的机遇和挑战”的报告；中华医学会检验分会副主任委员申子瑜研究员解读了“医疗卫生体制改革与临床检验收费政策”；彭明婷研究员对已发布的“血细胞分析参考区间”和“临床血液学检验常规项目分析质量要求”等多项卫生行业标准、“卫生部临床检验中心血液体液学检验质量改进工作进展”以及“Ｄ一二聚体检测现状调查与质量控制”进行了讲解；北京协和医院血液科主任赵永强教授、上海交通大学附属瑞金医院王学锋教授、安徽省立医院吴竞生教授和加拿大麦克马斯特大学Ａｎｔｈｏｎｙ
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胞分析的发展趋势”和“流式细胞分析检测项目的规范化”；上海市医学会检验分会临检组组长李智教授、北京协和医院检验科崔巍副主任和新加坡樟宜医院Ａｗ
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别作了“体液检验的标准化”、“血细胞分析流程的再认识”和“血小板计数和血小板输注”的报告。卫生部临床检验中心彭明婷研究员、谷小林副主任技师和李臣宾助理研究员分别就２０１１至２０１２年全血细胞计数、凝血试验、形态学检验、尿液化学分析、网织红细胞计数、流式细胞分析、血液流变学检测和血沉测定的全国质评数据和存在的问题进行了分析，并提出了改进建议。
学术报告分别由魏军教授、王学锋教授、王建中教授、吴竞生教授、上海市医学会检验分会副主任委员李莉教授、昆明医科大学附属第一医院陈端教授、云南省临床检验中心牛华主任和昆明医科大学附属第一医院段勇主任担任主持。
来自全国各省医疗机构临床实验室的专业技术人员、专家、企业代表和会务人员共计５１０人参加了会议。与会代表
一致认为，专家讲授内容与临床实验室需解决的问题密切相
关，卫生行业标准的发布与实施，技术要求的讨论对实验室的质量改进有较大帮助；临床诊断重要检验项目和新方法的讨论与应用有助于血液体液学检验学科的发展和人才培养。室间质量评价是临床实验室质量改进的重要环节，质评新项目的开展和正确度验证计划的实施为临床实验室质量改进提供了更有效的服务；质评数据分析与质量改进方法的探讨为临床实验室技术能力的提高发挥着越来越重要的作用。
Ｃｈａｎ教授分别讲授了“易栓症诊断专
家共识（２０ｔ２）解读”、“凝血及纤溶相关标志物检测”、“肝素抗凝治疗与监测、ＨＩＴ的诊断与治疗”和“血友病关怀和罕见出血性疾病新进展”；北京大学第一医院王建中教授和成都军区总医院吴丽娟教授分别报告了“临床血液学一流式细
（周文宾李臣宾）