※基础研究食品科学
2011, Vol. 32, No. 01
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不同滴灌制度对梨枣抗氧化活性的影响
于金刚1，王 敏1,*，李援农2，吴春森1，高清菡1
(1.西北农林科技大学食品科学与工程学院，陕西 杨凌 712100；2.西北农林科技大学水利与建筑工程学院，陕西 杨凌 712100)
摘 要：目的：探讨不同滴灌制度对梨枣抗氧化成分及活性的影响，为节水高产优质梨枣生产提供科学依据。方法：以陕北7～8年生矮化密植枣树所得枣果为材料，以无灌溉处理枣果为对照，比较3种滴灌制度(不同灌水量和灌水次数)对枣果总酚、黄酮和VC含量及酚类物质组成及抗氧化能力(抗亚油酸过氧化能力、还原力、DPPH自由基清除率和ABTS+・清除率)的影响。结果：在研究设计的滴灌制度下，灌水次数和灌水量对梨枣总酚含量无显著性影响，但对梨枣黄酮和VC含量有显著性影响；梨枣主要的多酚物质：儿茶素、表儿茶素和芦丁含量均受到滴灌制度的显著影响；梨枣的抗过氧化能力(4种模型)在各处理之间均存在着显著性差异(P＜0.05)；抗氧化能力与黄酮含量有显著相关性，但二者并没有随着灌水次数和灌水量的增加而线性增加。结论：适时适量的灌溉制度，是节水高产优质梨枣生产的重要保证。关键词：梨枣；滴灌制度；抗氧化能力；酚类
Effect of Different Drip Irrigation Regimes on Antioxidants in Pear-jujube (Zizyphus jujuba Mill. cv. Lizao)
YU Jin-gang1，WANG Min1,*，LI Yuan-nong2，WU Chun-sen1，GAO Qing-han1
(1. College of Food Science and Engineering, Northwest A&F University, Yangling 712100, China；
2. College of Water Conservancy and Architectural Engineering, Northwest A&F University, Yangling 712100, China)Abstract ：Objective: To provide a scientific basis for pear-jujube production with both high fruit yield and quality under water-saving irrigation. Method: The fruits of seven to eight year old dwarfing close planting pear-jujube trees receiving three dripirrigation regimes (assigned into the experimental groups), which were different in irrigation amount and frequency, or receivingno irrigation treatment (assigned into the control group) were measured for the content of total phenolics, total flavonoids andvitamin C, phenolic composition, and the antioxidant properties including the abilities to inhibit lipid peroxidation and scavengeDPPH and ABTS free radicals and reducing power. Results: Under the drip irrigation regimes designed in our study, irrigationamount and frequency had no significant effect on total phenolic content. But the contents of total flavonoids, vitamin C, and thethree main compounds of flavonoids in pear-jujube fruits, catechin, epicatechin and rutin, were all significantly affected bydifferent drip irrigation regimes. The four models of antioxidant capacity all showed significant discrepancies (P
中图分类号：TS201.2 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2011)01-0039-06
枣(Zizyphus Mill)是我国特有药食兼用的果品资源，起源于黄河两岸，在我国已有两千多年的栽培历史，目前我国枣产量占世界产量的99%，传统红枣以干枣形式
收稿日期： 2010-04-22
基金项目：“十一五”国家科技支撑计划项目(2007BAD88B05)
消费。红枣具有健脾养胃、补中益气、滋肺强肾、缓解药毒、抗衰老的保健功效[1]。现代研究证明机体的衰老与活性氧，如超氧阴离子自由基(O2)和羟自由基(・OH)
作者简介：于金刚(1986—)，男，硕士研究生，研究方向为食品营养与安全。E-mail：[email protected]*通信作者：王敏(1967—)，女, 教授，博士，研究方向为食品化学与分析及西部特色药食兼用资源加工利用。 E-mail：[email protected]
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产生的氧化胁迫有关，而枣尤其是新鲜枣果体内含有的多酚、维生素等抗氧化物质能有效的保护机体组织免受这些自由基引起的氧化损伤。因而鲜枣作为一种新型水果备受市场欢迎。
梨枣(Zizyphus jujuba Mill.cv.Lizao)是我国鲜食枣生产中一个重要的主栽品种，目前以矮化密植方式在我国北方干旱半干旱地区——黄土高原一带大量推广，这些地区由于历史上过度的滥砍滥发，造成了严重的水土流失，生态环境遭到巨大的破坏，随着国家退耕还林政策的实行，梨枣由于其个大味美、收获早、产量高等特性作为生态恢复林和经济林被广泛地种植于这些地区，但水资源短缺是限制当地梨枣优质高产的一个重要问题。干旱半干旱地区水果尤其是梨枣的产量与品质主要受到灌溉的影响[2-3]。而滴灌作为一种现代化的生态节水灌溉方式，不仅能节约大量的水资源，还能有效地提高作物的产量和品质[4-5]，因此，采用现代灌水技术，合理利用当地仅有的水资源，获得高产优质梨枣，即确立适宜当地的节水高效优质梨枣滴灌制度是这一地区发展鲜食红枣的技术关键，这对于黄土高原的生态建设和促进当地的经济发展有重要的意义。
以往的研究表明不同灌溉制度对蔬菜如黄瓜、土豆、西红柿和洋葱的食用品质有重要影响[5-10]，也有研究者报道了不同滴灌制度对梨枣食用品质的影响[11]。但是对于不同滴灌制度对梨枣的重要功能性品质如抗氧化能力的影响却鲜见报道。为此，本研究以陕北7～8年生矮化密植枣树所得枣果为材料，以无灌溉处理枣果为对照，比较3种滴灌制度(不同灌水量和灌水次数)对枣果总酚、黄酮和VC含量及酚类物质组成及抗氧化能力(抗亚油酸过氧化能力、还原力、DPPH自由基清除率和ABTS+・清除率)的影响，并分析梨枣黄酮和抗氧化活性的关系，试图揭示一定灌溉制度条件下梨枣抗氧化物质与抗氧化能力之间的变化规律，以期为旱区节水高产优质鲜食梨枣生产提供科学依据。1材料与方法
1.1
材料与试剂
2009年9月中下旬采摘种植于陕西榆林现代节水灌
溉试验站内7～8年生矮化密植枣树处于白熟期的梨枣。梨枣生长中不同滴灌制度方案见表1，其他农艺措施按枣园正常管理方式进行。采摘后梨枣经预冷并运至0～3℃冷库中保鲜。
表1 不同滴灌制度方案
Table 1 Schemes of different drip irrigation regimes
处理灌溉萌芽展开花坐果实膨果实灌水量/次数叶期果期
大期
成熟期
(m3/ hm2)
对照00T14√√√√90T24√√√√135T3
5
√
√
√√
√
180
注：√.灌溉一次。
二苯基苦肼基(DPPH)、2,2-联氮-双(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)、水溶性VE、乙二胺四乙酸(EDTA)、β-胡萝卜素 美国Sigma公司；原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、芦丁和抗坏血酸标准样品纯度均为色谱纯 金测分析技术天津有限公司；吐温- 40 德国默克公司；2,4-二硝基苯肼、硫脲均为分析纯。1.2
仪器与设备
LC-2010AHT液相色谱仪 日本岛津公司；KQ-700DE型数控超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司；调速多用振荡器 常州国华电器有限公司；JD400-3电子分析天平、ESJ120-4电子天平、JD200-3电子天平 沈阳龙腾电子有限公司； ESB-300均质机、QL-901漩涡仪海门市其林贝尔仪器制造有限公司；RE-52AA旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪器厂； 721型可见分光光度计 上海光谱仪器有限公司。1.3方法
1.3.1
抗氧化活性物质的提取
取20g新鲜梨枣粉碎后加入60mL 80%的甲醇溶液，6000r/min均质5min，超声波提取30min后4000r/min离心10min，重复3次，合并上清液。在45℃旋转蒸发，最后用甲醇定容于25mL容量瓶。所有提取液均保存在－40℃下，以备后续测定使用。1.3.2
总酚含量的测定
总酚含量的测定按Wu等[12]方法，对照原文献处理并稍作改进。取125μL稀释50倍的提取液，加入500μL蒸馏水，再加入125μL Folin-Ciocalteu试剂，充分混匀后加入1.25mL质量分数7%碳酸钠溶液，漩涡混匀后避光放置90min，于波长760nm处测定混合液的吸光度。样品总酚含量以每100g鲜样品中没食子酸的当量(mg/100g)表示。1.3.3
黄酮含量的测定
黄酮含量的测定采用比色法[13]，对照原文献处理并稍作改进。取稀释两倍的100μL提取液加入0.2mL 5% NaNO2溶液，漩涡混匀后室温下放置6min，加入0.2mL 10%的AlCl3，振荡后静止6min，然后加入2mL 1mol/L NaOH 溶液，最后加水定容至5mL，放置15min后于510nm波长处测定混合液吸光度。以芦丁为对照品制作标准曲线，样品黄酮含量用每100g鲜样品中芦丁标准品当量(mg/100g)表示。
※基础研究
食品科学
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1.3.4
总VC含量的测定
2,4-二硝基苯肼比色法测定梨枣总VC含量。称取5g鲜枣，粉碎后放入烧杯加入50mL 2%的草酸溶液，均质打浆，用1%草酸定容于100mL容量瓶，过滤，取25mL滤液加入2g装有活性炭的烧杯中，振荡1min过滤，10mL滤液中加入10mL 2%硫脲。每个样品各取4mL分别放入3个试管，其中一个做空白，另两个加入1mL2,4-二硝基苯肼，在37.5℃保温3h。再加5mL 体积分数85%硫酸溶液，在波长500nm处测吸光度。1.3.5抗氧化活性的测定1.3.5.1
清除DPPH自由基实验
参照Mohd等[14]的方法，以Trolox为标准品，有所改进后进行实验。取1mL稀释1500倍的提取液，加入1mL 131.87μmol/L 80%甲醇DPPH溶液，迅速混匀后避光放置30min，于波长517nm处测定混合溶液的吸光度，以相同体积80%甲醇代替试样，测定其吸光度作为对照。清除DPPH自由基能力以每100g鲜样品中Trolox标准品当量(mmol/100g)表示。
1.3.5.2清除ABTS+・实验
参照Zhou等[15]的方法，以Trolox为标准品，处理步骤有所改进后进行实验。取200μL稀释300倍的提取液，加入3mL经PBS缓冲液调节过的ABTS溶液，漩涡混匀后，立即于波长734nm处测定混合液的吸光度。以Trolox(水溶性VE)作为标准品，结果以每100g鲜样品中含有Trolox标准品当量(mmol/100g)表示。
1.3.5.3β-胡萝卜素-亚油酸抗氧化体系
参照Zhou等[15-16]的方法测定抑制β-胡萝卜素的氧化能力，并稍作修改。称取β-胡萝卜素2.0mg、45mg亚油酸及350mg Tween-40，用氯仿将其定容到10mL。取2mL配好的溶液至圆底烧瓶中，45℃旋转蒸干，然后用双氧水将其定容到100mL的容量瓶中。在试管中逐一加入100μL提取液，加入4mL的反应介质液，然后将试管放入50℃水浴锅反应60min，60min后在波长470nm处测定吸光度。不加β-胡萝卜素的溶液作为空白，以80%甲醇代替提取液作为对照。测定重复3次，抗氧化效果采用抗氧化能力系数(antioxidant activitycoefficient，AAC)表示。
AAC =———————× As(60)－Ac(60)
AA 1000
c(0)－c(60)
式中：As(60)为样品在t=60min时的吸光度；Ac(60) 为对照在t = 60min时的吸光度；Ac(0)为对照在t=0min时的吸光度。1.3.5.4
还原力的测定
取100μL稀释100倍的提取液，加入2.0mL pH6.6
的磷酸缓冲液和2.0mL1g/100mL K3Fe(CN)6溶液，反应液在50℃反应20min，然后加入2.0mL 10g/100mL 三氯乙酸溶液。取1.0mL此混合液加入1.0mL蒸馏水和0.2mL0.1g/100mL的FeCl3溶液。混合液在暗处反应30min后于波长700nm处测定吸光度。结果以每100g鲜样品中VC标准品当量表示(mg/100g)。1.3.6
酚类物质的分析
20g梨枣加入60mL 80%的乙酸乙酯，6000r/min均
质5min，超声波提取30min后4000r/min离心10min，重复3次，最后合并上清液。将上清液于30℃旋转蒸发，最后用乙酸乙酯定容于5mL容量瓶。所有样品均需进行3个平行样测定。
液相色谱条件：色谱柱：Waters Symmetry ODSC18(4.6mm×150mm，5μm)；紫外检测波长280nm，柱温30℃，进样量20μL，流速0.8mL/min；流动相A为甲醇，流动相B为超纯水(用磷酸调pH2.6)。梯度洗脱程序：0min 15% A，15～25min 25%A，65min 75%A，70min 15%A梯度均为线性变化。1.3.7
数据统计与分析
数据统计分析采用DPS数据处理系统，所有样品进
行3次重复，结果以平均值±标准差(±s)表示。2结果与分析2.1
总酚与黄酮含量
)
700A
g0650a
a
a
a
01600/ g550m(500/量450含400酚350总300250200
对照T1T2T3
滴灌处理
)
350B ga
0300a
a
01/gm250(/200b
量含150酮100黄500对照T1T2T3
滴灌处理
有相同字母表示差异不显著；无相同字母表示差异显著(P＜0.05)。下同。
图1 不同滴灌制度对梨枣总酚和黄酮含量的影响
Fig.1 Effect of different drip irrigation regimes on the contents of total
phenolics and flavonoids in pear-jujube
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食品科学※基础研究
由图1可知，不同滴灌制度对梨枣总酚含量没有显著性影响(P＞0.05)，但对梨枣中黄酮含量却有显著性影响(P＜0.05)。其中，T2处理的黄酮含量最低为(169.28±13.71)mg/100g。对照、T1和T3处理的梨枣黄酮含量之间无显著性差异，分别比T2处理高70.6%，52.2%和52.8%。可以看出，T2滴灌制度不利于梨枣黄酮类物质的积累，且梨枣黄酮含量的增加并不随灌溉次数与灌水量的增加而线性增加。2.2
抗氧化活性的比较
/
力12A
能a
a
除)
10ab
g清008基1/l由o6b
自mm4H(PP2D0
对照
T1
T2
T3
滴灌处理
900800Ba
a
a
700600b
C
AA[**************]0
对照T1T2T3
滴灌处理
/
7C
力6a
a
a
能)
g除005b
清1/ 4・lo+m3STm(2BA10
对照T1T2T3
滴灌处理
2500)
gD0012000a
ab
/ gm1500b
ab
(/力1000原还5000
对照
T1
T2
T3
滴灌处理
图2 不同滴灌制度下梨枣抗氧化活性β
Fig.2 Effect of different drip irrigation regimes on DPPH radicalscavenging activity, the inhibitory effect on β-carotene/linoleic acidsystem, ABTS radical scavenging activity and reducing power in pear-jujube
在4种测定梨枣抗氧化活性的模型中，各处理梨枣均表现出较强的抗氧化活性。但随着灌水量和灌水次数的不断增加，梨枣的抗氧化活性并未线性增加，其中T2处理的抗氧化活性在各处理中均为最低。在DPPH自由基清除能力中对照和T3处理之间无显著性差异，但清除能力分别比T2高51.8%和44.6%。对照、T1和T3处理的β-胡萝卜素-亚油酸抗氧化活性和ABTS自由基清除力均显著高于T2处理(P＜0.05)，并且分别相应高出了20.9%、18.1%、15.8%和43.5%、39.1%、39.7%。在还原力测定中，T1、T2和T3处理间无显著性差异，但相对于对照处理，T2的还原力显著地降低了51.2%。因此，T2处理降低了梨枣的抗氧化活性。2.3
抗氧化物质的组成分析
由高效液相色谱分析(图3)可知，梨枣中酚类物质组成复杂，已检测出的物质有：原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素和芦丁，其中，儿茶素和表儿茶素的含量占检测到的酚类物质含量的60%以上。其中各处理之间原儿茶酸的含量变化范围为(13.149±2.718)～(14.946±2.177)mg/100g(表 2)，且原儿茶酸含量没有受到灌溉制度的影响 (P＞0.05)。但滴灌制度对儿茶素、表儿茶素、芦丁和总VC的含量则有不同程度的影响。VC含量的范围为(458.8±191.10)～(814.8±115.90)mg/100g，不同处理之间存在着显著性差异，其中对照处理的总VC含量最高。由表2可知T1处理有利于儿茶素、表儿茶素、芦丁的积累。
1.25A)
8
01.0001010.755
×(V0.502
4m0.256
3
7
0.00
10
20
3040
50
时间/min
3.0B6
)
02.5012.0×(1.5Vm1.02
3
7
0.50.0
[1**********]
时间/min
1.没食子酸；2.原儿茶酸；3.儿茶素；4.绿原酸；5.咖啡酸；6.表儿茶素；7.芦丁；8.肉桂酸；A.标准样品；B.样品(T1)。
图3 HPLC分析梨枣酚类物质
Fig.3 HPLC profiles showing the phenolic composition in pear-jujube
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食品科学
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表2 不同滴灌制度对酚类物质和总VC含量的影响
Table 2 Effect of different drip irrigation regimes on the contents of
phenolics and total VC in pear-jujube
mg/100g处 理
原儿茶酸
儿茶素表儿茶素芦丁总VC
对 照14.071±2.724a
10.933±2.492
b
23.682±2.739
b
6.579±1.802
b
814.8±115.90a
T114.729±3.559a25.179±0.144a31.778±0.300a13.318±8.885ab458.8±191.10bT213.149±2.718a13.158±1.813b20.469±5.525b11.101±2.614ab539.0±152.89abT314.946±2.177a15.611±4.104b26.711±4.905ab
18.127±3.329a594.1±106.38ab
注：同一列中，有相同字母表示差异不显著；无相同字母表示差异显
著(P＜0.05)。下同。
2.4梨枣总酚、黄酮及酚类物质含量与抗氧化活性的
相关分析
表3 总酚、黄酮及酚类物质含量与抗氧化活性的相关分析Table 3 Correlation analysis between four antioxidant properties and
the contents of total phenolics, total flavonoids or four phenolic
compounds in pear-jujube
活性DPPH自由基β-胡萝卜素-亚油ABTS自由基还原成分清除能力酸体系抗氧化能力
清除能力力总酚0.014－0.387－0.278－0.567黄酮0.955*0.991**0.982**0.860原儿茶酸0.6890.7630.8420.338儿茶素－0.1200.2370.2480.025表儿茶素－0.598－0.510－0.422－0.805芦丁
－0.014
－0.063
0.083
－0.558
注：*.相关性在0.05水平显著；**.相关性在0.01水平显著。
由表3可知，梨枣总酚和4种酚类物质含量与抗氧化活性相关性不大，而黄酮含量与DPPH自由基清除能力，β-胡萝卜素-亚油酸体系抗氧化能力，ABTS自由基清除能力和还原力的相关性较高，R值分别为0.955，0.991，0.982和0.860。说明在梨枣中，黄酮类物质是枣果抗氧化能力的主要成分。3
讨论与结论
水果中的酚类化合物与颜色，感官和营养功能有关，这些酚类化合物可以通过单电子转移清除自由基，如超氧阴离子自由基[17-18]，同时还能够与过氧化自由基结合成稳定的化合物，阻止氧化过程中链锁反应的传播。另外，酚类物质还可以通过对金属离子的络合作用清除自由基。越来越多的人开始关注酚类物质与抗氧化活性之间的关系，一些作者也证实总酚含量与抗氧化活性有相关性[19]。
黄酮类化合物特殊的结构赋予它一系列独特的化学性质，如能与多种金属离子发生络合或静电作用，具有还原性和捕获自由基的特性，能与蛋白质结合，具有两亲结构和诸多衍生化反应活性等。黄酮类物质所具有的优秀的抗氧化活性正是这些基本化学性质的综合体现。生物体内自由基处于生物生成体系与生物防护体系的平衡之中。该两大体系均可由酶调控[20]。而体内许
多氧化酶与自由基生成有关，黄酮类物质可与这些酶结合，影响其构型构象，从而抑制酶的活性，减少自由基的生成，并且黄酮类物质对酶的抑制作用有选择性[21]。作为抗氧化剂，黄酮通过酚羟基与自由基反应生成较稳定的半醌式自由基，终止自由基链式反应，从而起到抗氧化的作用。
不同的水果中起主要抗氧化活性的物质是不同的，本研究测定了不同滴灌制度下梨枣总酚、黄酮和所检测出的4种酚类物质的含量及与抗氧化活性的相关性。结果表明梨枣的总酚含量没有显著性差异并且总酚和4种酚类物质与抗氧化活性之间相关性不大，而梨枣中黄酮含量与抗氧活性有较高的相关性，Li等[17]和Onder等[22]也得出类似的结果。这可能一方面是由于起抗氧化作用的物质不仅仅是酚类物质，还有其他一些抗氧化物质如VC和色素，以及它们的协同作用；其次可能是由于梨枣果肉内一些含量少但是对抗氧化活性有重要影响的酚类物质未被检出；另一方面，采用Folin- Ciocalteu比色法测定的总酚含量是一个相对值，不同的酚类具有不同的结构，从而具有不同的抗氧化作用[23]。
而实验中黄酮含量并没有随着灌水量和灌水次数的变化而线性变化，不同处理梨枣的黄酮含量存在显著性差异，且在T2处理下出现了最低值，推测这可能是由查尔酮合成酶(CHS)和莽草酸共同作用引起的。植物次生代谢产物产生于乙酸、莽草酸及甲羟戊酸等少数几个前体，这些前体均源自初生代谢并经酶催化形成几大类基本骨架，再由各种类型的酶促反应进行修饰，产生各种各样的次生代谢产物，而莽草酸正是黄酮合成的前体，CHS在黄酮的酶促反应中起到关键作用。黄酮类成分的生物合成起始于苯丙烷代谢途径，先以丙二酰辅酶A和4-香豆酰-辅酶A为底物经CHS催化形成查尔酮，然后再通过查尔酮异构酶(CHI)、查尔酮还原酶(CHR)、异黄酮合成酶(IFS)、黄烷酮醇还原酶(DFR)等多个酶催化的酶促反应合成黄酮、黄烷酮、黄酮醇、异黄酮、二氢异黄酮、花青素等不同类型的黄酮类化合物。而CHS作为黄酮上游合成的关键酶，在许多条件包括干旱胁迫下诱导产生，被公认为是新的胁迫诱导酶，它的活性和含量在干旱胁迫下会上升[24-26]，因此在干旱条件下，黄酮类化合物的合成受到促进，含量升高。这就解释了在T2的基础上随着水分缺失程度的加深(T1，CK)黄酮含量升高的现象。反之随着灌水的增多，干旱胁迫消失，黄酮含量上升。枣树是一种耐旱植物，但当过量灌溉发生时，充足的水分会一定程度地隔绝枣树根部与氧的结合，形成氧协迫。有研究表明在充足水分条件下，植物根部处于缺氧的环境中，其有氧呼吸受到限制，三羧酸循环受阻，相应地糖酵解与戊糖磷酸途径必将得到加强，糖酵解产生的磷酸烯醇式丙酮酸
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食品科学※基础研究
(PEP)，与戊糖磷酸途径产生的赤藓糖-4-磷酸合成了莽草酸，莽草酸含量的增加促进了黄酮类化合物的合成[27]，同时，由于过量水导致的缺氧胁迫也可能会促进CHS产生，从而导致实验T3处理中黄酮含量的升高。
对新鲜梨枣果肉酚类物质的分析结果表明：梨枣果肉含有原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素和芦丁，并且儿茶素、表儿茶素和芦丁的含量显著受到不同滴灌制度的影响。其中儿茶素和表儿茶素具有防治心血管疾病、预防癌症等多种功能。实验得出儿茶素和表儿茶素的含量占检测到的酚类物质含量的60%以上，这与焦中高等[28]的报道一致。
实验中T1处理的儿茶素和表儿茶素含量显著高于对照处理，对照的总VC含量却高于T1处理，而对照和T1处理的抗氧化活性不存在显著性差异，这说明梨枣的抗氧化活性可能是由儿茶素和原儿茶素等物质和VC共同作用引起的。T3处理的儿茶素和表儿茶素及VC含量与T2处理间无显著性差异，但T3的抗氧化活性却显著地高于T2处理(还原力测定结果除外)，可能在梨枣体内儿茶素和表儿茶素物质与VC不是单独作用，而是存在着一定的协同作用，另外梨枣体内花青素，VE等其他抗氧化物质也会对抗氧化活性产生影响[18,21]
。梨枣体内酚类物质与VC对抗氧化活性的影响是相当复杂的，其机
理还需要进一步研究。
旱区种植梨枣的抗氧化物质含量与抗氧化活性受到灌水次数和灌水量的显著影响，但并未随着灌水量和灌水次数的增加而线性增加。因而适时适量的灌溉制度是节水高产优质梨枣生产的重要保证。
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※基础研究食品科学
2011, Vol. 32, No. 01
39
不同滴灌制度对梨枣抗氧化活性的影响
于金刚1，王 敏1,*，李援农2，吴春森1，高清菡1
(1.西北农林科技大学食品科学与工程学院，陕西 杨凌 712100；2.西北农林科技大学水利与建筑工程学院，陕西 杨凌 712100)
摘 要：目的：探讨不同滴灌制度对梨枣抗氧化成分及活性的影响，为节水高产优质梨枣生产提供科学依据。方法：以陕北7～8年生矮化密植枣树所得枣果为材料，以无灌溉处理枣果为对照，比较3种滴灌制度(不同灌水量和灌水次数)对枣果总酚、黄酮和VC含量及酚类物质组成及抗氧化能力(抗亚油酸过氧化能力、还原力、DPPH自由基清除率和ABTS+・清除率)的影响。结果：在研究设计的滴灌制度下，灌水次数和灌水量对梨枣总酚含量无显著性影响，但对梨枣黄酮和VC含量有显著性影响；梨枣主要的多酚物质：儿茶素、表儿茶素和芦丁含量均受到滴灌制度的显著影响；梨枣的抗过氧化能力(4种模型)在各处理之间均存在着显著性差异(P＜0.05)；抗氧化能力与黄酮含量有显著相关性，但二者并没有随着灌水次数和灌水量的增加而线性增加。结论：适时适量的灌溉制度，是节水高产优质梨枣生产的重要保证。关键词：梨枣；滴灌制度；抗氧化能力；酚类
Effect of Different Drip Irrigation Regimes on Antioxidants in Pear-jujube (Zizyphus jujuba Mill. cv. Lizao)
YU Jin-gang1，WANG Min1,*，LI Yuan-nong2，WU Chun-sen1，GAO Qing-han1
(1. College of Food Science and Engineering, Northwest A&F University, Yangling 712100, China；
2. College of Water Conservancy and Architectural Engineering, Northwest A&F University, Yangling 712100, China)Abstract ：Objective: To provide a scientific basis for pear-jujube production with both high fruit yield and quality under water-saving irrigation. Method: The fruits of seven to eight year old dwarfing close planting pear-jujube trees receiving three dripirrigation regimes (assigned into the experimental groups), which were different in irrigation amount and frequency, or receivingno irrigation treatment (assigned into the control group) were measured for the content of total phenolics, total flavonoids andvitamin C, phenolic composition, and the antioxidant properties including the abilities to inhibit lipid peroxidation and scavengeDPPH and ABTS free radicals and reducing power. Results: Under the drip irrigation regimes designed in our study, irrigationamount and frequency had no significant effect on total phenolic content. But the contents of total flavonoids, vitamin C, and thethree main compounds of flavonoids in pear-jujube fruits, catechin, epicatechin and rutin, were all significantly affected bydifferent drip irrigation regimes. The four models of antioxidant capacity all showed significant discrepancies (P
中图分类号：TS201.2 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2011)01-0039-06
枣(Zizyphus Mill)是我国特有药食兼用的果品资源，起源于黄河两岸，在我国已有两千多年的栽培历史，目前我国枣产量占世界产量的99%，传统红枣以干枣形式
收稿日期： 2010-04-22
基金项目：“十一五”国家科技支撑计划项目(2007BAD88B05)
消费。红枣具有健脾养胃、补中益气、滋肺强肾、缓解药毒、抗衰老的保健功效[1]。现代研究证明机体的衰老与活性氧，如超氧阴离子自由基(O2)和羟自由基(・OH)
作者简介：于金刚(1986—)，男，硕士研究生，研究方向为食品营养与安全。E-mail：[email protected]*通信作者：王敏(1967—)，女, 教授，博士，研究方向为食品化学与分析及西部特色药食兼用资源加工利用。 E-mail：[email protected]
40 2011, Vol. 32, No. 01
食品科学
※基础研究
产生的氧化胁迫有关，而枣尤其是新鲜枣果体内含有的多酚、维生素等抗氧化物质能有效的保护机体组织免受这些自由基引起的氧化损伤。因而鲜枣作为一种新型水果备受市场欢迎。
梨枣(Zizyphus jujuba Mill.cv.Lizao)是我国鲜食枣生产中一个重要的主栽品种，目前以矮化密植方式在我国北方干旱半干旱地区——黄土高原一带大量推广，这些地区由于历史上过度的滥砍滥发，造成了严重的水土流失，生态环境遭到巨大的破坏，随着国家退耕还林政策的实行，梨枣由于其个大味美、收获早、产量高等特性作为生态恢复林和经济林被广泛地种植于这些地区，但水资源短缺是限制当地梨枣优质高产的一个重要问题。干旱半干旱地区水果尤其是梨枣的产量与品质主要受到灌溉的影响[2-3]。而滴灌作为一种现代化的生态节水灌溉方式，不仅能节约大量的水资源，还能有效地提高作物的产量和品质[4-5]，因此，采用现代灌水技术，合理利用当地仅有的水资源，获得高产优质梨枣，即确立适宜当地的节水高效优质梨枣滴灌制度是这一地区发展鲜食红枣的技术关键，这对于黄土高原的生态建设和促进当地的经济发展有重要的意义。
以往的研究表明不同灌溉制度对蔬菜如黄瓜、土豆、西红柿和洋葱的食用品质有重要影响[5-10]，也有研究者报道了不同滴灌制度对梨枣食用品质的影响[11]。但是对于不同滴灌制度对梨枣的重要功能性品质如抗氧化能力的影响却鲜见报道。为此，本研究以陕北7～8年生矮化密植枣树所得枣果为材料，以无灌溉处理枣果为对照，比较3种滴灌制度(不同灌水量和灌水次数)对枣果总酚、黄酮和VC含量及酚类物质组成及抗氧化能力(抗亚油酸过氧化能力、还原力、DPPH自由基清除率和ABTS+・清除率)的影响，并分析梨枣黄酮和抗氧化活性的关系，试图揭示一定灌溉制度条件下梨枣抗氧化物质与抗氧化能力之间的变化规律，以期为旱区节水高产优质鲜食梨枣生产提供科学依据。1材料与方法
1.1
材料与试剂
2009年9月中下旬采摘种植于陕西榆林现代节水灌
溉试验站内7～8年生矮化密植枣树处于白熟期的梨枣。梨枣生长中不同滴灌制度方案见表1，其他农艺措施按枣园正常管理方式进行。采摘后梨枣经预冷并运至0～3℃冷库中保鲜。
表1 不同滴灌制度方案
Table 1 Schemes of different drip irrigation regimes
处理灌溉萌芽展开花坐果实膨果实灌水量/次数叶期果期
大期
成熟期
(m3/ hm2)
对照00T14√√√√90T24√√√√135T3
5
√
√
√√
√
180
注：√.灌溉一次。
二苯基苦肼基(DPPH)、2,2-联氮-双(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)、水溶性VE、乙二胺四乙酸(EDTA)、β-胡萝卜素 美国Sigma公司；原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、芦丁和抗坏血酸标准样品纯度均为色谱纯 金测分析技术天津有限公司；吐温- 40 德国默克公司；2,4-二硝基苯肼、硫脲均为分析纯。1.2
仪器与设备
LC-2010AHT液相色谱仪 日本岛津公司；KQ-700DE型数控超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司；调速多用振荡器 常州国华电器有限公司；JD400-3电子分析天平、ESJ120-4电子天平、JD200-3电子天平 沈阳龙腾电子有限公司； ESB-300均质机、QL-901漩涡仪海门市其林贝尔仪器制造有限公司；RE-52AA旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪器厂； 721型可见分光光度计 上海光谱仪器有限公司。1.3方法
1.3.1
抗氧化活性物质的提取
取20g新鲜梨枣粉碎后加入60mL 80%的甲醇溶液，6000r/min均质5min，超声波提取30min后4000r/min离心10min，重复3次，合并上清液。在45℃旋转蒸发，最后用甲醇定容于25mL容量瓶。所有提取液均保存在－40℃下，以备后续测定使用。1.3.2
总酚含量的测定
总酚含量的测定按Wu等[12]方法，对照原文献处理并稍作改进。取125μL稀释50倍的提取液，加入500μL蒸馏水，再加入125μL Folin-Ciocalteu试剂，充分混匀后加入1.25mL质量分数7%碳酸钠溶液，漩涡混匀后避光放置90min，于波长760nm处测定混合液的吸光度。样品总酚含量以每100g鲜样品中没食子酸的当量(mg/100g)表示。1.3.3
黄酮含量的测定
黄酮含量的测定采用比色法[13]，对照原文献处理并稍作改进。取稀释两倍的100μL提取液加入0.2mL 5% NaNO2溶液，漩涡混匀后室温下放置6min，加入0.2mL 10%的AlCl3，振荡后静止6min，然后加入2mL 1mol/L NaOH 溶液，最后加水定容至5mL，放置15min后于510nm波长处测定混合液吸光度。以芦丁为对照品制作标准曲线，样品黄酮含量用每100g鲜样品中芦丁标准品当量(mg/100g)表示。
※基础研究
食品科学
2011, Vol. 32, No. 01
41
1.3.4
总VC含量的测定
2,4-二硝基苯肼比色法测定梨枣总VC含量。称取5g鲜枣，粉碎后放入烧杯加入50mL 2%的草酸溶液，均质打浆，用1%草酸定容于100mL容量瓶，过滤，取25mL滤液加入2g装有活性炭的烧杯中，振荡1min过滤，10mL滤液中加入10mL 2%硫脲。每个样品各取4mL分别放入3个试管，其中一个做空白，另两个加入1mL2,4-二硝基苯肼，在37.5℃保温3h。再加5mL 体积分数85%硫酸溶液，在波长500nm处测吸光度。1.3.5抗氧化活性的测定1.3.5.1
清除DPPH自由基实验
参照Mohd等[14]的方法，以Trolox为标准品，有所改进后进行实验。取1mL稀释1500倍的提取液，加入1mL 131.87μmol/L 80%甲醇DPPH溶液，迅速混匀后避光放置30min，于波长517nm处测定混合溶液的吸光度，以相同体积80%甲醇代替试样，测定其吸光度作为对照。清除DPPH自由基能力以每100g鲜样品中Trolox标准品当量(mmol/100g)表示。
1.3.5.2清除ABTS+・实验
参照Zhou等[15]的方法，以Trolox为标准品，处理步骤有所改进后进行实验。取200μL稀释300倍的提取液，加入3mL经PBS缓冲液调节过的ABTS溶液，漩涡混匀后，立即于波长734nm处测定混合液的吸光度。以Trolox(水溶性VE)作为标准品，结果以每100g鲜样品中含有Trolox标准品当量(mmol/100g)表示。
1.3.5.3β-胡萝卜素-亚油酸抗氧化体系
参照Zhou等[15-16]的方法测定抑制β-胡萝卜素的氧化能力，并稍作修改。称取β-胡萝卜素2.0mg、45mg亚油酸及350mg Tween-40，用氯仿将其定容到10mL。取2mL配好的溶液至圆底烧瓶中，45℃旋转蒸干，然后用双氧水将其定容到100mL的容量瓶中。在试管中逐一加入100μL提取液，加入4mL的反应介质液，然后将试管放入50℃水浴锅反应60min，60min后在波长470nm处测定吸光度。不加β-胡萝卜素的溶液作为空白，以80%甲醇代替提取液作为对照。测定重复3次，抗氧化效果采用抗氧化能力系数(antioxidant activitycoefficient，AAC)表示。
AAC =———————× As(60)－Ac(60)
AA 1000
c(0)－c(60)
式中：As(60)为样品在t=60min时的吸光度；Ac(60) 为对照在t = 60min时的吸光度；Ac(0)为对照在t=0min时的吸光度。1.3.5.4
还原力的测定
取100μL稀释100倍的提取液，加入2.0mL pH6.6
的磷酸缓冲液和2.0mL1g/100mL K3Fe(CN)6溶液，反应液在50℃反应20min，然后加入2.0mL 10g/100mL 三氯乙酸溶液。取1.0mL此混合液加入1.0mL蒸馏水和0.2mL0.1g/100mL的FeCl3溶液。混合液在暗处反应30min后于波长700nm处测定吸光度。结果以每100g鲜样品中VC标准品当量表示(mg/100g)。1.3.6
酚类物质的分析
20g梨枣加入60mL 80%的乙酸乙酯，6000r/min均
质5min，超声波提取30min后4000r/min离心10min，重复3次，最后合并上清液。将上清液于30℃旋转蒸发，最后用乙酸乙酯定容于5mL容量瓶。所有样品均需进行3个平行样测定。
液相色谱条件：色谱柱：Waters Symmetry ODSC18(4.6mm×150mm，5μm)；紫外检测波长280nm，柱温30℃，进样量20μL，流速0.8mL/min；流动相A为甲醇，流动相B为超纯水(用磷酸调pH2.6)。梯度洗脱程序：0min 15% A，15～25min 25%A，65min 75%A，70min 15%A梯度均为线性变化。1.3.7
数据统计与分析
数据统计分析采用DPS数据处理系统，所有样品进
行3次重复，结果以平均值±标准差(±s)表示。2结果与分析2.1
总酚与黄酮含量
)
700A
g0650a
a
a
a
01600/ g550m(500/量450含400酚350总300250200
对照T1T2T3
滴灌处理
)
350B ga
0300a
a
01/gm250(/200b
量含150酮100黄500对照T1T2T3
滴灌处理
有相同字母表示差异不显著；无相同字母表示差异显著(P＜0.05)。下同。
图1 不同滴灌制度对梨枣总酚和黄酮含量的影响
Fig.1 Effect of different drip irrigation regimes on the contents of total
phenolics and flavonoids in pear-jujube
42 2011, Vol. 32, No. 01
食品科学※基础研究
由图1可知，不同滴灌制度对梨枣总酚含量没有显著性影响(P＞0.05)，但对梨枣中黄酮含量却有显著性影响(P＜0.05)。其中，T2处理的黄酮含量最低为(169.28±13.71)mg/100g。对照、T1和T3处理的梨枣黄酮含量之间无显著性差异，分别比T2处理高70.6%，52.2%和52.8%。可以看出，T2滴灌制度不利于梨枣黄酮类物质的积累，且梨枣黄酮含量的增加并不随灌溉次数与灌水量的增加而线性增加。2.2
抗氧化活性的比较
/
力12A
能a
a
除)
10ab
g清008基1/l由o6b
自mm4H(PP2D0
对照
T1
T2
T3
滴灌处理
900800Ba
a
a
700600b
C
AA[**************]0
对照T1T2T3
滴灌处理
/
7C
力6a
a
a
能)
g除005b
清1/ 4・lo+m3STm(2BA10
对照T1T2T3
滴灌处理
2500)
gD0012000a
ab
/ gm1500b
ab
(/力1000原还5000
对照
T1
T2
T3
滴灌处理
图2 不同滴灌制度下梨枣抗氧化活性β
Fig.2 Effect of different drip irrigation regimes on DPPH radicalscavenging activity, the inhibitory effect on β-carotene/linoleic acidsystem, ABTS radical scavenging activity and reducing power in pear-jujube
在4种测定梨枣抗氧化活性的模型中，各处理梨枣均表现出较强的抗氧化活性。但随着灌水量和灌水次数的不断增加，梨枣的抗氧化活性并未线性增加，其中T2处理的抗氧化活性在各处理中均为最低。在DPPH自由基清除能力中对照和T3处理之间无显著性差异，但清除能力分别比T2高51.8%和44.6%。对照、T1和T3处理的β-胡萝卜素-亚油酸抗氧化活性和ABTS自由基清除力均显著高于T2处理(P＜0.05)，并且分别相应高出了20.9%、18.1%、15.8%和43.5%、39.1%、39.7%。在还原力测定中，T1、T2和T3处理间无显著性差异，但相对于对照处理，T2的还原力显著地降低了51.2%。因此，T2处理降低了梨枣的抗氧化活性。2.3
抗氧化物质的组成分析
由高效液相色谱分析(图3)可知，梨枣中酚类物质组成复杂，已检测出的物质有：原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素和芦丁，其中，儿茶素和表儿茶素的含量占检测到的酚类物质含量的60%以上。其中各处理之间原儿茶酸的含量变化范围为(13.149±2.718)～(14.946±2.177)mg/100g(表 2)，且原儿茶酸含量没有受到灌溉制度的影响 (P＞0.05)。但滴灌制度对儿茶素、表儿茶素、芦丁和总VC的含量则有不同程度的影响。VC含量的范围为(458.8±191.10)～(814.8±115.90)mg/100g，不同处理之间存在着显著性差异，其中对照处理的总VC含量最高。由表2可知T1处理有利于儿茶素、表儿茶素、芦丁的积累。
1.25A)
8
01.0001010.755
×(V0.502
4m0.256
3
7
0.00
10
20
3040
50
时间/min
3.0B6
)
02.5012.0×(1.5Vm1.02
3
7
0.50.0
[1**********]
时间/min
1.没食子酸；2.原儿茶酸；3.儿茶素；4.绿原酸；5.咖啡酸；6.表儿茶素；7.芦丁；8.肉桂酸；A.标准样品；B.样品(T1)。
图3 HPLC分析梨枣酚类物质
Fig.3 HPLC profiles showing the phenolic composition in pear-jujube
※基础研究
食品科学
2011, Vol. 32, No. 01
43
表2 不同滴灌制度对酚类物质和总VC含量的影响
Table 2 Effect of different drip irrigation regimes on the contents of
phenolics and total VC in pear-jujube
mg/100g处 理
原儿茶酸
儿茶素表儿茶素芦丁总VC
对 照14.071±2.724a
10.933±2.492
b
23.682±2.739
b
6.579±1.802
b
814.8±115.90a
T114.729±3.559a25.179±0.144a31.778±0.300a13.318±8.885ab458.8±191.10bT213.149±2.718a13.158±1.813b20.469±5.525b11.101±2.614ab539.0±152.89abT314.946±2.177a15.611±4.104b26.711±4.905ab
18.127±3.329a594.1±106.38ab
注：同一列中，有相同字母表示差异不显著；无相同字母表示差异显
著(P＜0.05)。下同。
2.4梨枣总酚、黄酮及酚类物质含量与抗氧化活性的
相关分析
表3 总酚、黄酮及酚类物质含量与抗氧化活性的相关分析Table 3 Correlation analysis between four antioxidant properties and
the contents of total phenolics, total flavonoids or four phenolic
compounds in pear-jujube
活性DPPH自由基β-胡萝卜素-亚油ABTS自由基还原成分清除能力酸体系抗氧化能力
清除能力力总酚0.014－0.387－0.278－0.567黄酮0.955*0.991**0.982**0.860原儿茶酸0.6890.7630.8420.338儿茶素－0.1200.2370.2480.025表儿茶素－0.598－0.510－0.422－0.805芦丁
－0.014
－0.063
0.083
－0.558
注：*.相关性在0.05水平显著；**.相关性在0.01水平显著。
由表3可知，梨枣总酚和4种酚类物质含量与抗氧化活性相关性不大，而黄酮含量与DPPH自由基清除能力，β-胡萝卜素-亚油酸体系抗氧化能力，ABTS自由基清除能力和还原力的相关性较高，R值分别为0.955，0.991，0.982和0.860。说明在梨枣中，黄酮类物质是枣果抗氧化能力的主要成分。3
讨论与结论
水果中的酚类化合物与颜色，感官和营养功能有关，这些酚类化合物可以通过单电子转移清除自由基，如超氧阴离子自由基[17-18]，同时还能够与过氧化自由基结合成稳定的化合物，阻止氧化过程中链锁反应的传播。另外，酚类物质还可以通过对金属离子的络合作用清除自由基。越来越多的人开始关注酚类物质与抗氧化活性之间的关系，一些作者也证实总酚含量与抗氧化活性有相关性[19]。
黄酮类化合物特殊的结构赋予它一系列独特的化学性质，如能与多种金属离子发生络合或静电作用，具有还原性和捕获自由基的特性，能与蛋白质结合，具有两亲结构和诸多衍生化反应活性等。黄酮类物质所具有的优秀的抗氧化活性正是这些基本化学性质的综合体现。生物体内自由基处于生物生成体系与生物防护体系的平衡之中。该两大体系均可由酶调控[20]。而体内许
多氧化酶与自由基生成有关，黄酮类物质可与这些酶结合，影响其构型构象，从而抑制酶的活性，减少自由基的生成，并且黄酮类物质对酶的抑制作用有选择性[21]。作为抗氧化剂，黄酮通过酚羟基与自由基反应生成较稳定的半醌式自由基，终止自由基链式反应，从而起到抗氧化的作用。
不同的水果中起主要抗氧化活性的物质是不同的，本研究测定了不同滴灌制度下梨枣总酚、黄酮和所检测出的4种酚类物质的含量及与抗氧化活性的相关性。结果表明梨枣的总酚含量没有显著性差异并且总酚和4种酚类物质与抗氧化活性之间相关性不大，而梨枣中黄酮含量与抗氧活性有较高的相关性，Li等[17]和Onder等[22]也得出类似的结果。这可能一方面是由于起抗氧化作用的物质不仅仅是酚类物质，还有其他一些抗氧化物质如VC和色素，以及它们的协同作用；其次可能是由于梨枣果肉内一些含量少但是对抗氧化活性有重要影响的酚类物质未被检出；另一方面，采用Folin- Ciocalteu比色法测定的总酚含量是一个相对值，不同的酚类具有不同的结构，从而具有不同的抗氧化作用[23]。
而实验中黄酮含量并没有随着灌水量和灌水次数的变化而线性变化，不同处理梨枣的黄酮含量存在显著性差异，且在T2处理下出现了最低值，推测这可能是由查尔酮合成酶(CHS)和莽草酸共同作用引起的。植物次生代谢产物产生于乙酸、莽草酸及甲羟戊酸等少数几个前体，这些前体均源自初生代谢并经酶催化形成几大类基本骨架，再由各种类型的酶促反应进行修饰，产生各种各样的次生代谢产物，而莽草酸正是黄酮合成的前体，CHS在黄酮的酶促反应中起到关键作用。黄酮类成分的生物合成起始于苯丙烷代谢途径，先以丙二酰辅酶A和4-香豆酰-辅酶A为底物经CHS催化形成查尔酮，然后再通过查尔酮异构酶(CHI)、查尔酮还原酶(CHR)、异黄酮合成酶(IFS)、黄烷酮醇还原酶(DFR)等多个酶催化的酶促反应合成黄酮、黄烷酮、黄酮醇、异黄酮、二氢异黄酮、花青素等不同类型的黄酮类化合物。而CHS作为黄酮上游合成的关键酶，在许多条件包括干旱胁迫下诱导产生，被公认为是新的胁迫诱导酶，它的活性和含量在干旱胁迫下会上升[24-26]，因此在干旱条件下，黄酮类化合物的合成受到促进，含量升高。这就解释了在T2的基础上随着水分缺失程度的加深(T1，CK)黄酮含量升高的现象。反之随着灌水的增多，干旱胁迫消失，黄酮含量上升。枣树是一种耐旱植物，但当过量灌溉发生时，充足的水分会一定程度地隔绝枣树根部与氧的结合，形成氧协迫。有研究表明在充足水分条件下，植物根部处于缺氧的环境中，其有氧呼吸受到限制，三羧酸循环受阻，相应地糖酵解与戊糖磷酸途径必将得到加强，糖酵解产生的磷酸烯醇式丙酮酸
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食品科学※基础研究
(PEP)，与戊糖磷酸途径产生的赤藓糖-4-磷酸合成了莽草酸，莽草酸含量的增加促进了黄酮类化合物的合成[27]，同时，由于过量水导致的缺氧胁迫也可能会促进CHS产生，从而导致实验T3处理中黄酮含量的升高。
对新鲜梨枣果肉酚类物质的分析结果表明：梨枣果肉含有原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素和芦丁，并且儿茶素、表儿茶素和芦丁的含量显著受到不同滴灌制度的影响。其中儿茶素和表儿茶素具有防治心血管疾病、预防癌症等多种功能。实验得出儿茶素和表儿茶素的含量占检测到的酚类物质含量的60%以上，这与焦中高等[28]的报道一致。
实验中T1处理的儿茶素和表儿茶素含量显著高于对照处理，对照的总VC含量却高于T1处理，而对照和T1处理的抗氧化活性不存在显著性差异，这说明梨枣的抗氧化活性可能是由儿茶素和原儿茶素等物质和VC共同作用引起的。T3处理的儿茶素和表儿茶素及VC含量与T2处理间无显著性差异，但T3的抗氧化活性却显著地高于T2处理(还原力测定结果除外)，可能在梨枣体内儿茶素和表儿茶素物质与VC不是单独作用，而是存在着一定的协同作用，另外梨枣体内花青素，VE等其他抗氧化物质也会对抗氧化活性产生影响[18,21]
。梨枣体内酚类物质与VC对抗氧化活性的影响是相当复杂的，其机
理还需要进一步研究。
旱区种植梨枣的抗氧化物质含量与抗氧化活性受到灌水次数和灌水量的显著影响，但并未随着灌水量和灌水次数的增加而线性增加。因而适时适量的灌溉制度是节水高产优质梨枣生产的重要保证。
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