人类白细胞抗原B*1502测定试剂盒（基因法）说明书
货号：SC-B1502 规格：50人份/盒
项目意义：
调查研究表明，卡马西平，苯妥英等药物用于HLA—B*1502等位基因阳性亚裔患者治疗出现史蒂文斯一约翰逊综合征(sJs)和中毒性表皮坏死松解症(TEN)的严重皮肤反应的初步数据。HLA—B*1502是一种人类白血球抗原(HLA)等位基因，几乎只存在于亚洲人种之中，包括中国汉族人、菲律宾人、马来西亚人、南亚印度人和泰国人。
在中国、泰国、马来西亚、印度尼西亚、菲律宾和台湾地区，估计有10％～15％甚至更多的患者携带HLA—B*1502等位基因。包括印度人在内的南亚人携带该基因的比率中等，平均为2％ ～4％，但在一些人群中比率较高。日本人和韩国人携带此基因的比率较低，不到l％。
目前卡马西平，苯妥英等抗癫痫的药品说明书建议，可能携带HLA—B*1502等位基因的患者在接受卡马西平，苯妥英等抗癫痫卡马西平治疗之前应进行HLA—B*1502等位基因筛查，筛查结果阳性的患者不宜使用卡马西平，苯妥英等抗癫痫，除非其效益明显大于风险。
目前HLA-B27检测手段主要有血清学方法如微量淋巴细胞毒试验( CDC )、流式细胞术( FCM)以及引物特异性聚合酶链反应( SSP PCR) 。SSP-PCR是目前被广泛采用的检测
HLA-B1502的方法。该方法实验过程简单，只需一次PCR反应就可得到确定的结果。若检测样本DNA中带有B*1502基因，则利用B*1502的序列特异性引物，就可以扩增出目的条带。
SSP-PCR的检测方法过程简单，所需仪器只是实验室常用设备，项目容易开展。该检测方法的灵敏度高、特异度好、漏诊率低，并且结果判读简单明了。
试剂盒简介：
本方案结合HLA-B*1502碱基序列设计特异性的引物，使 PCR反应结果更稳定可靠，具有以下特点：
1． 三孔反应管同时检测内参条带和B*1502基因，无需另做内参检测。
2． 只需一次PCR反应，根据阳性带的出与不出就可得到确定的结果，判断简单。 3． 最少仅需 5ng基因组 DNA（约相当于750个细胞）即可得到理想的检测结果。 使用说明：
1. PCR准备：
本试剂盒每三管为一个独立的检测反应，按照以下步骤配制一人份PCR Mix：
混匀，将混合液加入反应孔中，向每孔内加10ul石蜡油（防止蒸干），然后立即进
行扩增。
北京思尔成生物技术有限公司
2.
扩增
按照以下程序进行扩增：
3. 电泳：
1. 用0.5X的TBE制备2％的电泳胶。
2. 0.5X TBE 作电泳液，用加样枪加6ul于电泳胶孔内。加DL1000 Marker。 3. 150伏特电泳10分钟。照相。
结果分析：
1)均应有 1014bp的内参基因扩增条带，该条带存在说明 DNA模板和 PCR反应正常。 2)三孔同时出现阳性条带（P1引物可出425bp带，P2引物可出550bp带，P3引物可出125bp带）出现说明样本含有B1502基因序列。
3)无阳性条带，或三孔出两孔阳性带，或三孔出一孔阳性带说明样本阴性。 示例：
M S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8
由上而下依次为 1000、700、500、400、300、200、100bp的 DNA分子量标记。 S1、S2、S3：B1502阴性标本。 S4、S5、S6、S7：B1502阳性标本。 S8 ： H2O
注意事项：
1. DNA模板量：
本试剂盒每反应所需最佳模板量为5ng基因组DNA，过多的DNA模板使用会导致扩增条带太强，影响电泳的美观性。
由于不同实验室提取的DNA质量有所差异，质量差的DNA会对PCR的扩增效率有所影响，可尝试将DNA量增加至50ng以保证检测结果。
2. 运输和保存：
本试剂盒可室温运输和短期保存，长期保存请保存于-20℃或更低温度。有任何问题，请拨打北京思尔成生物技术有限公司电话：400-650-1950
北京思尔成生物技术有限公司
人类白细胞抗原B*1502测定试剂盒（基因法）说明书
货号：SC-B1502 规格：50人份/盒
项目意义：
调查研究表明，卡马西平，苯妥英等药物用于HLA—B*1502等位基因阳性亚裔患者治疗出现史蒂文斯一约翰逊综合征(sJs)和中毒性表皮坏死松解症(TEN)的严重皮肤反应的初步数据。HLA—B*1502是一种人类白血球抗原(HLA)等位基因，几乎只存在于亚洲人种之中，包括中国汉族人、菲律宾人、马来西亚人、南亚印度人和泰国人。
在中国、泰国、马来西亚、印度尼西亚、菲律宾和台湾地区，估计有10％～15％甚至更多的患者携带HLA—B*1502等位基因。包括印度人在内的南亚人携带该基因的比率中等，平均为2％ ～4％，但在一些人群中比率较高。日本人和韩国人携带此基因的比率较低，不到l％。
目前卡马西平，苯妥英等抗癫痫的药品说明书建议，可能携带HLA—B*1502等位基因的患者在接受卡马西平，苯妥英等抗癫痫卡马西平治疗之前应进行HLA—B*1502等位基因筛查，筛查结果阳性的患者不宜使用卡马西平，苯妥英等抗癫痫，除非其效益明显大于风险。
目前HLA-B27检测手段主要有血清学方法如微量淋巴细胞毒试验( CDC )、流式细胞术( FCM)以及引物特异性聚合酶链反应( SSP PCR) 。SSP-PCR是目前被广泛采用的检测
HLA-B1502的方法。该方法实验过程简单，只需一次PCR反应就可得到确定的结果。若检测样本DNA中带有B*1502基因，则利用B*1502的序列特异性引物，就可以扩增出目的条带。
SSP-PCR的检测方法过程简单，所需仪器只是实验室常用设备，项目容易开展。该检测方法的灵敏度高、特异度好、漏诊率低，并且结果判读简单明了。
试剂盒简介：
本方案结合HLA-B*1502碱基序列设计特异性的引物，使 PCR反应结果更稳定可靠，具有以下特点：
1． 三孔反应管同时检测内参条带和B*1502基因，无需另做内参检测。
2． 只需一次PCR反应，根据阳性带的出与不出就可得到确定的结果，判断简单。 3． 最少仅需 5ng基因组 DNA（约相当于750个细胞）即可得到理想的检测结果。 使用说明：
1. PCR准备：
本试剂盒每三管为一个独立的检测反应，按照以下步骤配制一人份PCR Mix：
混匀，将混合液加入反应孔中，向每孔内加10ul石蜡油（防止蒸干），然后立即进
行扩增。
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2.
扩增
按照以下程序进行扩增：
3. 电泳：
1. 用0.5X的TBE制备2％的电泳胶。
2. 0.5X TBE 作电泳液，用加样枪加6ul于电泳胶孔内。加DL1000 Marker。 3. 150伏特电泳10分钟。照相。
结果分析：
1)均应有 1014bp的内参基因扩增条带，该条带存在说明 DNA模板和 PCR反应正常。 2)三孔同时出现阳性条带（P1引物可出425bp带，P2引物可出550bp带，P3引物可出125bp带）出现说明样本含有B1502基因序列。
3)无阳性条带，或三孔出两孔阳性带，或三孔出一孔阳性带说明样本阴性。 示例：
M S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8
由上而下依次为 1000、700、500、400、300、200、100bp的 DNA分子量标记。 S1、S2、S3：B1502阴性标本。 S4、S5、S6、S7：B1502阳性标本。 S8 ： H2O
注意事项：
1. DNA模板量：
本试剂盒每反应所需最佳模板量为5ng基因组DNA，过多的DNA模板使用会导致扩增条带太强，影响电泳的美观性。
由于不同实验室提取的DNA质量有所差异，质量差的DNA会对PCR的扩增效率有所影响，可尝试将DNA量增加至50ng以保证检测结果。
2. 运输和保存：
本试剂盒可室温运输和短期保存，长期保存请保存于-20℃或更低温度。有任何问题，请拨打北京思尔成生物技术有限公司电话：400-650-1950
北京思尔成生物技术有限公司