支持细胞骨架与血睾屏障的研究进展

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国际生殖健康／计划生育杂志２００８年３月第２７卷第２期

［７］

ＪＩｎｔＲｅｐｒｏｄＨｅａｌｔｈ6ＦａｍＰｌａｎ，Ｍａｒ．２００８，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．２

的自我更新和分化是被严格调控的，与精子发生再启动的完整过程相协调的［２０］。２００３年ＭｃＬｅａｎ等［４］利用ＳＳＣ移植实验分析ＳＳＣ发育和分化的特点及相应的形态学特征。

此外，通过ＳＳＣ移植还可确定雄性不育是由生殖细胞缺陷引起或由体细胞缺陷引起；也可用于有价值的动物保护和避孕研究。

随着ＳＳＣ研究的不断深入，ＳＳＣ移植将会有更大的应用前景，但是目前仍有许多问题尚未解决。虽然在治疗不育症上有很大的发展潜力，但仍存在伦理、排斥反应和遗传等问题。虽然可以给青年肿瘤患者在放化疗后恢复生育力带来希望，但这又可能导致肿瘤复发［２１］。目前取得的成果只是给进一步深入研究指明了方向，带来了希望，这个领域中仍有许多的问题亟待解决，需要有更多研究投入，相信随着ＳＳＣ研究的不断深入，ＳＳＣ移植将会有更加宽广的应用前景。

参

考

文

献

［１］ＯｌｉｖｅＶ，ＣｕｚｉｎＦ．Ｔｈｅｓｐｅｒｍａｔｏｇｏｎｉａｌｓｔｅｍｃｅｌｌ：ｆｒｏｍｂａｓｉｃｋｎｏｗｌｅｄｇｅｔｏｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ［Ｊ］．ＩｎｔＪＢｉｏｃｈｅｍＣｅｌｌＢｉｏｌ，２００５，３７（２）：［２］［３］

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ＮａｇａｎｏＭＣ．Ｈｏｍｉｎｇｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙａｎｄｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆｍａｌｅｇｅｒｍｌｉｎｅｓｔｅｍｃｅｌｌｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｉｎｍｉｃｅ［Ｊ］．ＢｉｏｌＲｅｐｒｏｄ，２００３，６９（２）：７０１－７０７．

ＳｃｈｌａｔｔＳ，ＨｏｎａｒａｍｏｏｚＡ，ＥｈｍｃｋｅＪ，ｅｔａｌ．Ｌｉｍｉｔｅｄｓｕｒｖｉｖａｌｏｆａｄｕｌｔｈｕｍａｎｔｅｓｔｉｃｕｌａｒｔｉｓｓｕｅａｓｅｃｔｏｐｉｃｘｅｎｏｇｒａｆｔ［Ｊ］．ＨｕｍＲｅｐｒｏｄ，２００６，２１（２）：３８４－３８９．

支持细胞骨架与血睾屏障的研究进展

重庆医科大学电子显微镜室生殖医学超微结构实验室（４０００１６）

摘

要

石之虎综述廖晓岗审校

血睾屏障（ＢＴＢ）对精子的发生、穿越及排放有特殊的调控机制。支持细胞骨架成分与ＢＴＢ有极其密切

的关系。支持细胞骨架成分如微丝、微管、中间丝等及其所表达的肌动蛋白、微管蛋白、波形蛋白、Ｃｌａｕｄｉｎｓ、４．１蛋白家族等多种蛋白，可通过支持、黏附、信号转导和基因位点表达等对ＢＴＢ的结构和功能起维持和促进作用。着重对支持细胞骨架成分所表达的各种蛋白与ＢＴＢ的结构和功能的关系做进展性综述。

关键词

血睾屏障

支持细胞

细胞骨架

４．１蛋白

血睾屏障（ｂｌｏｏｄ－ｔｅｓｔｉｓｂａｒｒｉｅｒ，ＢＴＢ）是机体最有效的保护屏障之一，其功能主要是阻止某些大分子物质经血液或淋巴途径进入曲细精管管腔，调节生

收稿日期：２００７－０７－０３

修回日期：２００７－１１－３０

物活性物质在生精上皮内的浓度，同时具有免疫屏障作用。支持细胞（ｓｅｒｔｏｌｉｃｅｌｌ）作为生精上皮中唯一与生精细胞相接触的细胞，参与形成ＢＴＢ，创造稳定的生精内环境。广义的ＢＴＢ由紧密连接（ｔｉｇｈｔ

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黏附连接（ａｄｈｅｒｅｎｓｊｕｎｃｔｉｏｎ）、缝隙连接ｊｕｎｃｔｉｏｎ）、

（ｇａｐｊｕｎｃｔｉｏｎ）等连接复合体共同组成。这些连接复合体通过特殊的“开”、“关”装置调节前细线期和细线期精母细胞顺利穿过ＢＴＢ。狭义的ＢＴＢ，即支持细胞间的紧密连接。硝酸镧注入动物血管后，镧可通过毛细血管内皮细胞、曲细精管的界膜进入生精上皮的精原细胞间隙中，但被支持细胞间的连接复合体阻挡，后者具有紧密连接的典型结构。支持细胞内多种细胞骨架成分与ＢＴＢ重要生理功能的实现密切相关。近年，随着细胞和分子生物学研究技术的快速发展以及电子显微镜的广泛应用，对细胞骨架的作用有了更深层次的认识。细胞骨架在维持细胞形状、促进细胞的运动和连接以及信号转导方面都有积极的作用。充分了解支持细胞内多种细胞骨架成分与ＢＴＢ结构、功能的关系，以及某些干扰物对其产生的影响，对于探讨男性不育机制、保护男性生殖健康有重要的现实意义。

肌动蛋白微丝

微丝（ｍｉｃｒｏｆｉｌａｍｅｎｔ）是普遍存在于细胞质内的一种细丝状结构，与细胞的运动和连接有关。微丝分为细微丝和粗微丝。细微丝主要由肌动蛋白（ａｃｔｉｎ）组成，故也称肌动蛋白微丝（ａｃｔｉｎ－ｆｉｌａｍｅｎｔ）。粗微丝主要由肌球蛋白（ｍｙｏｓｉｎ）组成。现已证实，睾丸支持细胞内肌动蛋白微丝呈束状沿细胞膜下分布，肌动蛋白微丝、紧密连接和生精细胞三者呈几何图形样有规律地排列在一起。该特征对支持细胞整体形态及ＢＴＢ的维持有重要意义。支持细胞胞质中存在着连接特化区（ｅｃｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｃｉａｌｉｚａｔｉｏｎｓ），此特化区是支持细胞中肌动蛋白微丝与内质网的复合物。该复合物对肌动蛋白微丝的黏附功能有重要作用。采用冷冻蚀刻技术可以观察到紧密连接与肌动蛋白微丝并联，并且非常紧密，其间隙约１２ｎｍ。冷冻蚀刻和肌动蛋白磷脂酶胶体金（ＰＬＡ２－ＣＧ）标记技术实验发现，大鼠睾丸组织的紧密连接处有狭窄条状金颗粒ＰＬＡ２－ＣＧ标记复合物，提示肌动蛋白微丝的空间分布可能与紧密连接的三维结构相关联。而紧密连接自身所表达的一些蛋白如ＺＯ－１，

如Ｃｌａｕｄｉｎｓ－１，－３，－４，－５，－７，－１０和－１６在不同组织来源的癌中具有不同的表达［５］。Ｃｌａｕｄｉｎｓ可通过自身的浓缩、重组，使紧密连接的网状结构得到完善和巩固。冷冻蚀刻电镜观察发现，Ｃｌａｕｄｉｎｓ过表达可增强紧密连接的深度、数量和复杂性。Ｃｌａｕｄｉｎｓ不仅可调控紧密连接的渗透性，还可能通过更直接的调控途径来发挥作用，如信号转导途径、磷酸化作用等［３］。此外，肌动蛋白微丝自身表达的相关蛋白也参与了紧密连接结构的形成。如纽蛋白（Ｖｉｎｃｕｌｉｎ）、Ｅｓｐｉｎ和

Ｆｉｍｂｒｉｎ等都与紧密连接有特殊的化学或信号方面

的联系。Ｖｉｎｃｕｌｉｎ在紧密连接中具有信号分子的功能，主要通过黏着斑激酶（ｐＦＡＫ）／磷脂酰肌醇－３－激酶（ＰＩ３Ｋ）／Ｐ１３０Ｃａｓ信号途径调节紧密连接相关蛋白的基因位点的表达［６］。

实验提示，甘油可以促使紧密连接断裂、ＢＴＢ打开，导致其渗透性增高，作者认为甘油破坏ＢＴＢ的过程中，肌动蛋白微丝起到桥梁的作用。己烯雌酚（ＤＥＳ）作用于小鼠支持细胞后，延长了ＢＴＢ的形成时间，并导致生精细胞分化停止，而此时肌动蛋白微丝也失去了组装功能。体内实验发现，镉（ｃａｄｍｉｕｍ，

Ｃｄ）对紧密连接结构破坏的同时，Ｏｃｃｌｕｄｉｎ和ＺＯ－１

在ＢＴＢ中位点也发生了丢失，认为转化生长因子－Ｂ２，－Ｂ３（ＴＧＦ－Ｂ２和ＴＧＦ－Ｂ３）／细胞分裂活化蛋白（Ｐ３８ＭＡＰ）激酶信号调节途径在Ｃｄ引起紧密连接

相关蛋白位点的丢失起着关键性作用［７］。实验报道，大鼠睾丸切除术后１４ｄ，附睾紧密连接中Ｃｌａｕｄｉｎｓ－１缺乏可能与雄激素缺乏有关［８］。另外，支持细胞自身分泌的肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）家族可以调节Ｏｃｃｌｕｄｉｎ的表达以及ＪＡＭ－Ａ（紧密连接蛋白家族的一种）的分布。ＴＮＦ对紧密连接的破坏是可逆的，可能是通过整合素连接激酶（ＩＬＫ）／糖原合酶激酶－Ｂ３（ＧＳＫ－Ｂ３）／

Ｐ１３０Ｃａｓ／ｃ－Ｊｕｎ氨基末端激酶（ＪＮＫ）信号途径来干扰紧密连接蛋白的表达，破坏ＢＴＢ。

微

管

微管（ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ）为１３条原丝环列组合成的圆筒状结构，由微管蛋白（ｔｕｂｕｌｉｎ）和少量的微管结合蛋白（ＭＡＰｓ）组成，主要参与物质运输，维持细胞形状，促进细胞运动。微管在支持细胞的胞质中含量很丰富，可以改变紧密连接复合体在形成过程中的极性，起到定位作用。Ｍｙｅｒｓ等［９］采用免疫组化法和电镜技术等证实，性腺机能减退大鼠的睾丸支持细胞中，微管和紧密连接蛋白表达减少，紧密连接结构不完整以及连接特化区缺失，说明微管与紧密连接蛋白共同参与了紧密连接的某些功能。支持细胞分

Ｏｃｃｌｕｄｉｎ和Ｃｌａｕｄｉｎｓ等均与肌动蛋白微丝有密切联

系。ＺＯ－１和肌动蛋白微丝共同参与紧密连接网状结构的形成［１］。实验证实，Ｏｃｃｌｕｄｉｎ缺乏的小鼠，上皮紧密连接的功能和结构出现缺损［２］。Ｃｌａｕｄｉｎｓ则是一

类具有封闭性、可调控性、孔隙样的跨膜蛋白［３］，分子质量在２０～２７ｋｕ之间［４］，为细胞间重要的黏附分子。例Ｃｌａｕｄｉｎｓ在全身组织中有各自的特异性表达。

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国际生殖健康／计划生育杂志２００８年３月第２７卷第２期ＪＩｎｔＲｅｐｒｏｄＨｅａｌｔｈ6ＦａｍＰｌａｎ，Ｍａｒ．２００８，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．２

泌的某些营养物质和蛋白因子需要透过紧密连接来维持生精细胞的生长，而此作用的发挥可能与微管相关蛋白有关。此外，微管与紧密连接在信号转导方面亦有密切的联系。微管可以调控ＴＧＦ基因位点表达。而ＴＧＦ又可导致紧密连接的破坏和渗透性增高，其作用机制可能是通过信号转导方式使紧密连接中的连接蛋白如ＺＯ－１、Ｏｃｃｌｕｄｉｎ等发生位点的重排或减少，ＴＧＦ在紧密连接中的动力学效应是被

中，采用逆转录酶－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）分析支持细胞基因表达时发现，波形蛋白、Ｏｃｃｌｕｄｉｎ和

Ｃｌａｕｄｉｎ－１表达减少，细胞骨架破坏以及紧密连接复

合体缺损，ＢＴＢ的功能遭到破坏。上述改变表明，波形蛋白有可能直接或间接参与调节ＢＴＢ的功能。波形蛋白还可能通过参与信号转导途径来调节紧密连接的生理功能，如经一氧化氮合酶（ＮＯＳ）处理的大鼠，ＮＯＳ与紧密连接蛋白和波形蛋白广泛结合，且与波形蛋白一起通过一氧化氮（ＮＯ）／鸟苷酸环化酶（ｃＧＭＰ）／蛋白激酶Ｇ信号途径对ＢＴＢ进行调节［１３］。另外，波形蛋白还与Ｐ１３０Ｃａｓ家族成员中ＣＡＳＬ／

Ｐ３８ＭＡＰ激酶途径所调节的［１０］。

成年大鼠睾丸内注射１０％的甘油，经２４ｈ，７ｄ，１５ｄ和２１ｄ取材，用免疫组化法和激光共聚焦显微镜等技术观察发现，微管、微丝和Ｏｃｃｌｕｄｉｎ都出现

破坏，ＢＴＢ渗透性增高。而Ｃｄ导致微管结构紊乱和丝状物断裂可能与Ｃａ２＋有某些相关性。如①Ｃｄ可以加速磷酸肌醇３（ＩＰ３）的肌醇磷脂水解。②抑制钙离子三磷酸腺苷酶（Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ）活性。③抑制Ｎａ＋／并Ｃａ２＋交换。④激活微管的钙调蛋白与Ｃａ２＋的竞争。且Ｃｄ还可以通过三磷酸腺苷酶（Ｖ－ＡＴＰａｓｅ）的酸化作用起到同样的效果。

中间丝

中间丝（ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｆｉｌａｍｅｎｔ，ＩＦｓ）由细胞内高度不溶解的直径为１０ｎｍ左右的丝网状结构所构成，其在细胞的完整性、可移动性及分化中扮演重要角色。同时ＩＦｓ还具静力锚定作用，即使在浓度相当低时（如０．１％浓度）也具有高黏稠度。ＩＦｓ蛋白组成主要有５大类：①角蛋白（ｋｅｒａｔｉｎ），主要存在于上皮细胞。②神经丝蛋白（ｎｅｕｒｏｆｉｌａｍｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎ），主要存在于神经元。③结蛋白（ｄｅｓｍｉｎ），主要存在于肌细胞中。

ＨＥＦ１有密切的信号转导调控机制，波形蛋白与紧

密连接相互作用时，ＣＡＳＬ／ＨＥＦ１可能起着信号分子的作用。

一些环境毒物对波形蛋白也可以造成损伤，影响支持细胞骨架的正常形成，导致支持细胞形态改变及生精细胞的凋亡。如采用支持细胞体外原代培养、免疫组化法以及ｍＲＮＡ原位杂交技术分析双酚

Ａ对支持细胞波形蛋白及其基因转录的影响时，发

现双酚Ａ抑制波形蛋白基因转录并干扰波形蛋白合成。还有实验表明，局部高温可导致支持细胞波形蛋白表达的增多及分布变化，并且波形蛋白的改变与生精细胞凋亡有着密切关系。有研究隐睾症中发现，支持细胞内的波形蛋白分布发生改变，生精细胞凋亡增加。提示波形蛋白对精子的发生起着重要作用［１４］。Ｌｅｅ等［１５］发现Ｃｄ导致生精细胞凋亡，并认为可能与Ｃｄ引起波形蛋白丢失有关。而波形蛋白异常改变导致的生精细胞凋亡是否与支持细胞紧密连接破坏有直接关系，还有待进一步探讨。

④胶质纤维酸性蛋白（ｇｌｉａｌｆｉｂｒｉｌｌａｒｙａｃｉｄｉｃｐｒｏｔｅｒｉｎ），主要存在于星形胶质细胞。⑤波形蛋白（ｖｉｍｅｎｔｉｎ），

主要存在于间质细胞和中胚层起源的细胞。

波形蛋白是ＩＦｓ的主要成分，通常密集环绕于核周，并与核膜下的核纤层相连，形成所谓“中间丝－核纤层－核质骨架结构体系”，因而具有保持细胞位置稳定的作用，即“锚定作用”。动物实验发现波形蛋白与维持支持细胞与生精细胞的黏附、传递细胞间的信号以及细胞凋亡等有关。Ｎｉｅｍｉｎｅｎ等［１１］研究认为，波形蛋白对细胞间的连接、跨膜转运及ＢＴＢ的渗透功能有重要作用。如果波形蛋白丢失，将导致细胞黏附分子如ＩＣＡＭ－１位点分布紊乱及基因表达的缺失。采用电镜、激光共聚焦显微镜和免疫组化法观察老年马的睾丸时发现，曲细精管萎缩，基底膜纤维化，胞质内肌动蛋白微丝、波形蛋白表达减少。Ｗａｎｇ等［１２］在雄性激素受体敲除的大鼠模型

４．１蛋白家族

４．１蛋白指的是红细胞膜蛋白上第４．１条显色

带，其家族成员主要有４．１Ｒ，４．１Ｇ（广泛表达），４．１Ｎ（神经特异表达）和４．１Ｂ（主要在脑中表达）。４．１蛋

白在维持细胞的正常形态和结构特性方面有重要作用。其可以影响离子通道的决定位置，并且通过细胞黏附分子来调整细胞与细胞的联合，同时也是细胞生长的调节器以及肿瘤抑制因子［１６］。４．１Ｒ是第１个被分离鉴定的４．１蛋白家族成员，呈多肽链结构片段，其构像似一个四叶苜蓿形的立体道路的交叉点。

４．１Ｒ与紧密连接的关系近几年有一些研究进展，如４．１Ｒ蛋白与肌动蛋白共同作用而具有细胞间黏附功能。４．１Ｒ蛋白与紧密连接蛋白ＺＯ－２在ＢＴＢ中有特殊的关系，４．１Ｒ与ＺＯ－２共同作用可以填补

细胞异常表达所空缺的结合位点。Ｈｕａｎｇ等［１７］和

国际生殖健康／计划生育杂志２００８年３月第２７卷第２期ＪＩｎｔＲｅｐｒｏｄＨｅａｌｔｈ6ＦａｍＰｌａｎ，Ｍａｒ．２００８，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．２

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Ｋｒａｕｓｓ等［１８］的实验证实，４．１Ｒ在微管和细胞骨架的

整合以及有丝分裂中是必需的。以上表明，４．１Ｒ蛋白在紧密连接中具有直接或间接的功能。４．１Ｇ是继

ＭｏｒｉｎＰＪ．Ｃｌａｕｄｉｎｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒ：ｐｒｏｍｉｓｉｎｇｎｅｗｔａｒｇｅｔｓｆｏｒｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ，２００５，６５（２１）：９６０３－９６０６．

４．１Ｒ之后发现的第２个４．１蛋白家族成员。４．１Ｇ基

因位于人的６号染色体上，有１００５个核苷酸组成

的开放阅读框架，编码１１３ｋｕ的蛋白质。成年大鼠睾丸中，４．１Ｇ定位于曲细精管的基底部和近腔小室，与生精细胞和支持细胞相邻。免疫染色观察

［６］ＳｉｕＭＫ，ＭｒｕｋＤＤ，ＬｅｅＷＭ，ｅｔａｌ．Ａｄｈｅｒｉｎｇｊｕｎｃｔｉｏｎｄｙｎａｍｉｃｓｉｎｔｈｅｔｅｓｔｉｓａｒｅｒｅｇｕｌａｔｅｄｂｙａｎｉｎｔｅｒｐｌａｙｏｆｂｅｔａ１－ｉｎｔｅｇｒｉｎａｎｄｆｏｃａｌａｄｈｅｓｉｏｎｃｏｍｐｌｅｘ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓ［Ｊ］．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，２００３，１４４（５）：２１４１－２１６３．

［７］［８］

ＷｏｎｇＣＨ，ＭｒｕｋＤＤ，ＬｕｉＷＹ，ｅｔａｌ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｂｌｏｏｄ－ｔｅｓｔｉｓｂａｒ－ｒｉｅｒｄｙｎａｍｉｃｓ：ａｎｉｎｖｉｖｏｓｔｕｄｙ［Ｊ］．ＪＣｅｌｌＳｃｉ，２００４，１１７（５）：７７８３－７７９８．ＣｙｒＤＧ，ＧｒｅｇｏｒｙＭ，ＤｕｂéＥ，ｅｔａｌ．Ｏｒｃｈｅｓｔｒａｔｉｏｎｏｆｏｃｃｌｕｄｉｎｓ，ｃｌａｕｄｉｎｓ，ｃａｔｅｎｉｎｓａｎｄｃａｄｈｅｒｉｎｓａｓｐｌａｙｅｒｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅｏｆｔｈｅｂｌｏｏｄ－ｅｐｉｄｉｄｙｍａｌｂａｒｒｉｅｒｉｎａｎｉｍａｌｓａｎｄｈｕｍａｎｓ［Ｊ］．ＡｓｉａｎＪＡｎｄｒｏｌ，２００７，９（４）：４６３－４７５．

４．１Ｇ与钙粘蛋白有相同的定位。说明４．１Ｇ与黏附

分子在细胞之间的黏附功能上可能有某种联系。

Ｔｅｒａｄａ等［１９］在Ｃｄ诱导的大鼠模型中发现，曲细精

管的紧密连接被破坏，４．１Ｇ蛋白在曲细精管中的免

疫染色减少。该结果提示，４．１Ｇ在支持细胞之间的紧密连接中有着基本的连接功能。而４．１Ｂ是红细胞蛋白４．１Ｒ的同系物，４．１Ｂ定位于人的ｌ８号和小鼠的ｌ７号染色体。４．１Ｂ的结构包括３个已知功能区域和３个特殊结构域。最近研究发现，４．１Ｂ也可以在睾丸中表达。４．１Ｂ定位在输精管的基底室，特别是在精原细胞和支持细胞中也发现其定位区域。但是在精子发生过程中，４．１Ｂ的定位与表达是不同的。

［９］ＭｙｅｒｓＭ，ＥｂｌｉｎｇＦＪ，ＮｗａｇｗｕＭ，ｅｔａｌ．ＡｔｙｐｉｃａｌｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＳｅｒｔｏｌｉｃｅｌｌｓａｎｄｉｍｐａｉｒｍｅｎｔｏｆｓｐｅｒｍａｔｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｔｈｅｈｙｐｏｇｏｎａｄａｌ（ｈｐｇ）ｍｏｕｓｅ［Ｊ］．ＪＡｎａｔ，２００５，２０７（６）：７９７－８１１．

［１０］ＬｕｉＷＹ，ＬｅｅＷＭ，ＣｈｅｎｇＣＹ．Ｓｅｒｔｏｌｉ－ｇｅｒｍｃｅｌｌａｄｈｅｒｅｎｓｊｕｎｃｔｉｏｎ

ｄｙｎａｍｉｃｓｉｎｔｈｅｔｅｓｔｉｓａｒｅｒｅｇｕｌａｔｅｄｂｙＲｈｏＢＧＴＰａｓｅｖｉａｔｈｅＲＯＣＫ／ＬＩＭＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．ＢｉｏｌＲｅｐｒｏｄ，２００３，６８（６）：２１８９－２２０６．

［１１］ＮｉｅｍｉｎｅｎＭ，ＨｅｎｔｔｉｎｅｎＴ，ＭｅｒｉｎｅｎＭ，ｅｔａｌ．Ｖｉｍｅｎｔｉｎｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎ

ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅａｄｈｅｓｉｏｎａｎｄｔｒａｎｓｃｅｌｌｕｌａｒｍｉｇｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＮａｔＣｅｌｌＢｉｏｌ，２００６，８（２）：１５６－１５６２．

［１２］ＷａｎｇＲＳ，ＹｅｈＳ，ＣｈｅｎＬＭ，ｅｔａｌ．Ａｎｄｒｏｇｅｎｒｅｃｅｐｔｏｒｉｎｓｅｒｔｏｌｉｃｅｌｌ

Ｔｅｒａｄａ等

［２０］

用电镜观察证实，４．１Ｂ蛋白免疫产物主

ｉｓｅｓｓｅｎｔｉａｌｆｏｒｇｅｒｍｃｅｌｌｎｕｒｓｅｒｙａｎｄｊｕｎｃｔｉｏｎａｌｃｏｍｐｌｅｘｆｏｒｍａｔｉｏｎｉｎｍｏｕｓｅｔｅｓｔｅｓ［Ｊ］．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，２００６，１４７（１２）：５６２４－５６３３．［１３］ＬｅｅＮＰ，ＣｈｅｎｇＣＹ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｓｅｒｔｏｌｉｃｅｌｌｔｉｇｈｔｊｕｎｃｔｉｏｎｄｙｎａｍｉｃｓ

要分布在支持细胞膜上，提示４．１Ｂ蛋白在支持细胞与生精细胞（特别是精原细胞）之间有着基本的连接功能。然而，有关４．１蛋白表达异常对精子发生、排放的影响如何，迄今尚未见有报道。

综上所述，支持细胞和ＢＴＢ结构与功能的维持对生精细胞的发育至关重要。支持细胞骨架成分发生异常改变或受损必然导致ＢＴＢ破坏，最终引起精子形成内环境的改变和生精细胞的损害。对于多种细胞骨架成分在维持正常ＢＴＢ中的作用，尚有许多机制需要阐明，特别是涉及支持细胞骨架成分以及与ＢＴＢ相关蛋白的基因表达位点和信号转导方面的分子生物学研究已成为近年的热门探讨课题。

参

［１］

ｉｎｔｈｅｒａｔｔｅｓｔｉｓｖｉａｔｈｅｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ／ｓｏｌｕｂｌｅｇｕａｎｙｌａｔｅｃｙｃｌａｓｅ／３＇，５＇－ｃｙｃｌｉｃｇｕａｎｏｓｉｎｅｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ／ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＧｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ：ａｎｉｎｖｉｔｒｏｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，２００３，１４４（７）：３１１４－３１２９．

［１４］ＫｏｐｅｃｋｙＭ，ＳｅｍｅｃｋｙＶ，ＮａｃｈｔｉｇａｌＰ，ｅｔａｌ．Ｖｉｍｅｎｔｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ

ｄｕｒｉｎｇａｌｔｅｒｅｄｓｐｅｒｍａｔｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｒａｔｓ［Ｊ］．ＡｃｔａＨｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａ，２００５，１０７（４）：２７９－２８９．

［１５］ＬｅｅＪＳ，ＺｈａｎｇＭＨ，ＹｕｎＥＫ，ｅｔａｌ．Ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ２７ｉｎｔｅｒａｃｔｓ

ｗｉｔｈｖｉｍｅｎｔｉｎａｎｄｐｒｅｖｅｎｔｓｉｎｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｖｉｍｅｎｔｉｎｓｕｂｕｎｉｔｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｃａｄｍｉｕｍ［Ｊ］．ＥｘｐＭｏｌＭｅｄ，２００５，３７（５）：４２７－４３５．［１６］Ｔａｙｌｏｒ－ＨａｒｒｉｓＰＭ，ＫｅａｔｉｎｇＬＡ，ＭａｇｇｓＡＭ，ｅｔａｌ．Ｃａｒｄｉａｃｍｕｓｃｌｅ

ｃｅｌｌｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔａｌｐｒｏｔｅｉｎ４．１：ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓａｎｄｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｔｉｏｎ－ｒｅｌｅｖａｎｃｅｔｏｍｅｍｂｒａｎｅｉｎｔｅｇｒｉｔｙ，ｍｉｃｒｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ａｎｄｐｏｓｓｉｂｌｅｒｏｌｅｉｎｈｅａｒｔｆａｉｌｕｒｅ［Ｊ］．ＭａｍｍＧｅｎｏｍｅ，２００５，１６（３）：１３７－１５１．［１７］ＨｕａｎｇＳＣ，ＬｉｕＥＳ，Ｃｈａｎ，ＳＨ，ｅｔａｌ．Ｍｉｔｏｔｉｃｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎ

考文献

ＴｏｙａｍａＹ，ＭａｅｋａｗａＭ，ＹｕａｓａＳ，ｅｔａｌ．ＥｃｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｃｉａｌｉｚａｔｉｏｎｓｉｎｔｈｅＳｅｒｔｏｌｉｃｅｌｌ：ｎｅｗｖｉｓｔａｓｂａｓｅｄｏｎｇｅｎｅｔｉｃｄｅｆｅｃｔｓａｎｄｔｅｓｔｉｃｕｌａｒｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ［Ｊ］．ＡｎａｔＳｃｉＩｎｔ，２００３，７８（１）：１－１６．

４．１Ｒｉｎｖｏｌｖｅｓｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｂｙｃｄｃ２ｋｉｎａｓｅ［Ｊ］．ＭｏｌＢｉｏｌＣｅｌｌ，２００５，１６（１）：１１７－１２７．

［１８］ＫｒａｕｓｓＳＷ，ＬｅｅＧ，ＣｈａｓｉｓＪＡ，ｅｔａｌ．Ｔｗｏｐｒｏｔｅｉｎ４．１ｄｏｍａｉｎｓ

［２］ＳｃｈｕｌｚｋｅＪＤ，ＧｉｔｔｅｒＡＨ，ＭａｎｋｅｒｔｚＪ，ｅｔａｌ．Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｔｒａｎｓｐｏｒｔａｎｄｂａｒｒｉｅｒｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｏｃｃｌｕｄｉｎｄｅｆｉｃｉｅｎｔｍｉｃｅ［Ｊ］．ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａ，２００５，１６６９（１）：３４－４２．

ｅｓｓｅｎｔｉａｌｆｏｒｍｉｔｏｔｉｃｓｐｉｎｄｌｅａｎｄａｓｔｅｒｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅｄｙｎａｍｉｃｓａｎｄｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎｉｎｖｉｔｒｏ［Ｊ］．ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ，２００４，２７９（２６）：２７５９１－２７５９８．［１９］ＴｅｒａｄａＮ，ＯｈｎｏＮ，ＹａｍａｋａｗａＨ，ｅｔａｌ．Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓｔｕｄｙ

［３］［４］

ＶａｎＩｔａｌｌｉｅＣＭ，ＡｎｄｅｒｓｏｎＪＭ．Ｃｌａｕｄｉｎｓａｎｄｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｐａｒａｃｅｌｌｕｌａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔ［Ｊ］．ＡｎｎｕＲｅｖＰｈｙｓｉｏｌ，２００６，６８（１）：４０３－４２９．

ＯｌｉｖｅｉｒａＳＳ，Ｍｏｒｇａｄｏ－ＤíａｚＪＡ．Ｃｌａｕｄｉｎｓ：ｍｕｌｔｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｐｌａｙｅｒｓｉｎｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｔｉｇｈｔｊｕｎｃｔｉｏｎｓａｎｄｔｈｅｉｒｒｏｌｅｉｎｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．ＣｅｌｌＭｏｌＬｉｆｅＳｃｉ，２００７，６４（１）：１７－２８．

ｏｆａｍｅｍｂｒａｎｅｓｋｅｌｅｔａｌｍｏｌｅｃｕｌｅ，ｐｒｏｔｅｉｎ４．１Ｇ，ｉｎｍｏｕｓｅｓｅｍｉｎｉｆｅｒ－ｏｕｓｔｕｂｕｌｅｓ［Ｊ］．ＨｉｓｔｏｃｈｅｍＣｅｌｌＢｉｏｌ，２００５，１２４（３－４）：３０３－３１１．［２０］ＴｅｒａｄａＮ，ＯｈｎｏＮ，ＹａｍａｋａｗａＨ，ｅｔａｌ．Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓｔｕｄｙ

ｏｆｐｒｏｔｅｉｎ４．１ＢｉｎｔｈｅｎｏｒｍａｌａｎｄＷ／Ｗ（ｖ）ｍｏｕｓｅｓｅｍｉｎｉｆｅｒｏｕｓｅｐ－ｉｔｈｅｌｉｕｍ［Ｊ］．ＪＨｉｓｔｏｃｈｅｍＣｙｔｏｃｈｅｍ，２００４，５２（６）：７６９－７７７．

・・１２４

国际生殖健康／计划生育杂志２００８年３月第２７卷第２期

［７］

ＪＩｎｔＲｅｐｒｏｄＨｅａｌｔｈ6ＦａｍＰｌａｎ，Ｍａｒ．２００８，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．２

的自我更新和分化是被严格调控的，与精子发生再启动的完整过程相协调的［２０］。２００３年ＭｃＬｅａｎ等［４］利用ＳＳＣ移植实验分析ＳＳＣ发育和分化的特点及相应的形态学特征。

此外，通过ＳＳＣ移植还可确定雄性不育是由生殖细胞缺陷引起或由体细胞缺陷引起；也可用于有价值的动物保护和避孕研究。

随着ＳＳＣ研究的不断深入，ＳＳＣ移植将会有更大的应用前景，但是目前仍有许多问题尚未解决。虽然在治疗不育症上有很大的发展潜力，但仍存在伦理、排斥反应和遗传等问题。虽然可以给青年肿瘤患者在放化疗后恢复生育力带来希望，但这又可能导致肿瘤复发［２１］。目前取得的成果只是给进一步深入研究指明了方向，带来了希望，这个领域中仍有许多的问题亟待解决，需要有更多研究投入，相信随着ＳＳＣ研究的不断深入，ＳＳＣ移植将会有更加宽广的应用前景。

参

考

文

献

［１］ＯｌｉｖｅＶ，ＣｕｚｉｎＦ．Ｔｈｅｓｐｅｒｍａｔｏｇｏｎｉａｌｓｔｅｍｃｅｌｌ：ｆｒｏｍｂａｓｉｃｋｎｏｗｌｅｄｇｅｔｏｔｒａｎｓｇｅｎｉｃｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ［Ｊ］．ＩｎｔＪＢｉｏｃｈｅｍＣｅｌｌＢｉｏｌ，２００５，３７（２）：［２］［３］

［８］

［９］

［１０］

［１１］

［１２］［１３］［１４］

［１５］［１６］

［１７］

［４］

［５］

［６］

２４６－２５０．

ＤｅＲｏｏｉｊＤＧ．Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｓｐｅｒｍａｔｏｇｏｎｉａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，２００１，１２１（３）：３４７－３５４．

Ｋａｎａｔｓｕ－ＳｈｉｎｏｈａｒａＭ，ＯｇｏｎｕｋｉＮ，ＩｎｏｕｅＫ，ｅｔａｌ．Ａｌｌｏｇｅｎｅｉｃｏｆｆｓｐｒｉｎｇｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｍａｌｅｇｅｒｍｌｉｎｅｓｔｅｍｃｅｌｌｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｉｎｔｏｉｎｆｅｒｔｉｌｅｍｏｕｓｅｔｅｓｔｉｓ［Ｊ］．ＢｉｏｌＲｅｐｒｏｄ，２００３，６８（１）：１６７－１７３．

ＭｃＬｅａｎＤＪ，ＦｒｉｅｌＰＪ，ＪｏｈｎｓｔｏｎＤＳ，ｅｔａｌ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｓｐｅｒ－ｍａｔｏｇｏｎｉａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｍａｔｕｒａｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｉｎｎｅｏｎａｔａｌｍｉｃｅ［Ｊ］．ＢｉｏｌＲｅｐｒｏｄ，２００３，６９（６）：２０８５－２０９１．

ＫａｎａｔｓｕＳＭ，ＯｇｏｎｕｋｉＮ，ＩｎｏｕｅＫ，ｅｔａｌ．Ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｇｅｒｍｌｉｎｅｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｏｆｍｏｕｓｅｍａｌｅｇｅｒｍｌｉｎｅｓｔｅｍｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＢｉｏｌＲｅｐｒｏｄ，２００３，６９（２）：６１２－６１６．

ＫａｔｈｙＳ，ＪｏｈｎｓｏｎＥＷ，ＤｉｒａｍｉＧ，ｅｔａｌ．Ｉｍｍｕｎｏｍａｇｎｅｔｉｃｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｌｏｎｇ－ｔｅｒｍｃｕｌｔｕｒｅｏｆｍｏｕｓｅｔｙｐｅａｓｐｅｒｍａｔｏｇｏｎｉａ［Ｊ］．ＪＡｎｄｒｏｌ，２００１，２２（４）：６９６－７０４．

［１８］

［１９］

［２０］

［２１］

ＩｚａｄｙａｒＦ，ＳｐｉｅｒｅｎｂｅｒｇＧＴ，ＣｒｅｅｍｅｒｓＬＢ，ｅｔａｌ．ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｙｐｅＡｓｐｅｒｍａｔｏｇｏｎｉａｆｒｏｍｔｈｅｂｏｖｉｎｅｔｅｓｔｉｓ［Ｊ］．Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，２００２，１２４（１）：８５－９４．

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ＣｒｅｅｍｅｒｓＬＢ，ＭｅｎｇＸ，ＯｕｄｅｎＫ，ｅｔａｌ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｏｆｇｅｒｍｃｅｌｌｓｆｒｏｍｇｌｉａｌｃｅｌｌｌｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ－ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇｍｉｃｅｔｏｈｏｓｔｔｅｓｔｅｓｄｅｐｌｅｔｅｄｏｆｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓｓｐｅｒｍａｔｏｇｅｎｅｓｉｓｂｙｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎｌ［Ｊ］．ＢｉｏｌＲｅｐｒｏｄ，２００２，６６（６）：１５７９－１５８４．ＨｏｎａｒａｍｏｏｚＡ，ＢｅｈｂｏｏｄｉＥ，ＨａｕｓｌｅｒＣＬ，ｅｔａｌ．Ｄｅｐｌｅｔｉｏｎｏｆｅｎｄｏｇｅ－ｎｏｕｓｇｅｒｍｃｅｌｌｓｉｎｍａｌｅｐｉｇｓａｎｄｇｏａｔｓｉｎｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｆｏｒｇｅｒｍｃｅｌｌｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪＡｎｄｒｏｌ，２００５，２６（６）：６９８－７０５．

ＳｃｈｌａｔｔＳ，ＦｏｐｐｉａｎｉＬ，ＲｏｌｆＣ，ｅｔａｌ．ＧｅｒｍｃｅｌｌｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｉｎｔｏＸ－ｉｒｒａｄｉａｔｅｄｍｏｎｋｅｙｔｅｓｔｅｓ［Ｊ］．ＨｕｍＲｅｐｒｏｄ，２００２，１７（１）：５５－６２．ＨｏｎａｒａｍｏｏｚＡ，ＭｅｇｅｅＳＯ，ＤｏｂｒｉｎｓｋｉＩ．Ｇｅｒｍｃｅｌｌｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｉｎｐｉｇｓ［Ｊ］．ＢｉｏｌＲｅｐｒｏｄ，２００２，６６（１）：２１－２８．

ＢｒｉｎｓｔｅｒＲＬ，ＺｉｍｍｅｒｍａｎｎＪＷ．Ｓｐｅｒｍａｔｏｇｅｎｅｓｉｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇｍａｌｅｇｅｒｍ－ｃｅｌｌｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ，１９９４，９１（２４）：１１２９８－１１３０２．

ＪｏｅｒｇＨ，ＪａｎｅｔｔＦ，ＳｃｈｌａｔｔＳ，ｅｔａｌ．Ｇｅｒｍｃｅｌｌｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｉｎａｎａｚｏｏｓｐｅｒｍｉｃｋｌｉｎｅｆｅｌｔｅｒｂｕｌｌ［Ｊ］．ＢｉｏｌＲｅｐｒｏｄ，２００３，６９（６）：１９４０－１９４４．ＦｕｊｉｔａＫ，ＯｈｔａＨ，ＴｓｕｊｉｍｕｒａＡ，ｅｔａｌ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｏｆｓｐｅｒｍａｔｏｇｏ－ｎｉａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｌｅｕｋｅｍｉｃｍｉｃｅｒｅｓｔｏｒｅｓｆｅｒｔｉｌｉｔｙｗｉｔｈｏｕｔｉｎｄｕｃｉｎｇｌｅｕｋｅｍｉａ［Ｊ］．ＪＣｌｉｎＩｎｖｅｓｔ，２００５，１１５（７）：１８５５－１８６１．ＪａｈｎｕｋａｉｎｅｎＫ，ＥｈｍｃｋｅＪ，ＨｅｒｇｅｎｒｏｔｈｅｒＳＤ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｃｏｌｄｓｔｏｒａｇｅａｎｄｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆｉｍｍａｔｕｒｅｎｏｎ－ｈｕｍａｎｐｒｉｍａｔｅｔｅｓｔｉｃｕｌａｒｔｉｓｓｕｅｏｎｓｐｅｒｍａｔｏｇｏｎｉａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｐｏｔｅｎｔｉａｌｉｎｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ［Ｊ］．ＨｕｍＲｅｐｒｏｄ，２００７，２２（４）：１０６０－１０６７．

ｖａｎｄｅｎＢｅｒｇＨ，ＲｅｐｐｉｎｇＳ，ｖａｎｄｅｒＶｅｅｎＦ．Ｐａｒｅｎｔａｌｄｅｓｉｒｅａｎｄａｃｃｅｐｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｓｐｅｒｍａｔｏｇｏｎｉａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｉｎｂｏｙｓｗｉｔｈｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．ＨｕｍＲｅｐｒｏｄ，２００７，２２（２）：５９４－５９７．

Ｋａｎａｔｓｕ－ＳｈｉｎｏｈａｒａＳ，ＴｏｙｏｋｕｎｉＳ，ＭｏｒｉｍｏｔｏＴ，ｅｔａｌ．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆｓｅｌｆ－ｒｅｎｅｗａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｍａｌｅｇｅｒｍｌｉｎｅｓｔｅｍｃｅｌｌｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇｃｙｔｏｔｏｘｉｃｄａｍａｇｅａｎｄｓｅｒｉａｌｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＢｉｏｌＲｅｐｒｏｄ，２００３，６８（５）：１８０１－１８０７．

ＮａｇａｎｏＭＣ．Ｈｏｍｉｎｇｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙａｎｄｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆｍａｌｅｇｅｒｍｌｉｎｅｓｔｅｍｃｅｌｌｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｉｎｍｉｃｅ［Ｊ］．ＢｉｏｌＲｅｐｒｏｄ，２００３，６９（２）：７０１－７０７．

ＳｃｈｌａｔｔＳ，ＨｏｎａｒａｍｏｏｚＡ，ＥｈｍｃｋｅＪ，ｅｔａｌ．Ｌｉｍｉｔｅｄｓｕｒｖｉｖａｌｏｆａｄｕｌｔｈｕｍａｎｔｅｓｔｉｃｕｌａｒｔｉｓｓｕｅａｓｅｃｔｏｐｉｃｘｅｎｏｇｒａｆｔ［Ｊ］．ＨｕｍＲｅｐｒｏｄ，２００６，２１（２）：３８４－３８９．

支持细胞骨架与血睾屏障的研究进展

重庆医科大学电子显微镜室生殖医学超微结构实验室（４０００１６）

摘

要

石之虎综述廖晓岗审校

血睾屏障（ＢＴＢ）对精子的发生、穿越及排放有特殊的调控机制。支持细胞骨架成分与ＢＴＢ有极其密切

的关系。支持细胞骨架成分如微丝、微管、中间丝等及其所表达的肌动蛋白、微管蛋白、波形蛋白、Ｃｌａｕｄｉｎｓ、４．１蛋白家族等多种蛋白，可通过支持、黏附、信号转导和基因位点表达等对ＢＴＢ的结构和功能起维持和促进作用。着重对支持细胞骨架成分所表达的各种蛋白与ＢＴＢ的结构和功能的关系做进展性综述。

关键词

血睾屏障

支持细胞

细胞骨架

４．１蛋白

血睾屏障（ｂｌｏｏｄ－ｔｅｓｔｉｓｂａｒｒｉｅｒ，ＢＴＢ）是机体最有效的保护屏障之一，其功能主要是阻止某些大分子物质经血液或淋巴途径进入曲细精管管腔，调节生

收稿日期：２００７－０７－０３

修回日期：２００７－１１－３０

物活性物质在生精上皮内的浓度，同时具有免疫屏障作用。支持细胞（ｓｅｒｔｏｌｉｃｅｌｌ）作为生精上皮中唯一与生精细胞相接触的细胞，参与形成ＢＴＢ，创造稳定的生精内环境。广义的ＢＴＢ由紧密连接（ｔｉｇｈｔ

国际生殖健康／计划生育杂志２００８年３月第２７卷第２期ＪＩｎｔＲｅｐｒｏｄＨｅａｌｔｈ6ＦａｍＰｌａｎ，Ｍａｒ．２００８，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．２

・・１２５

黏附连接（ａｄｈｅｒｅｎｓｊｕｎｃｔｉｏｎ）、缝隙连接ｊｕｎｃｔｉｏｎ）、

（ｇａｐｊｕｎｃｔｉｏｎ）等连接复合体共同组成。这些连接复合体通过特殊的“开”、“关”装置调节前细线期和细线期精母细胞顺利穿过ＢＴＢ。狭义的ＢＴＢ，即支持细胞间的紧密连接。硝酸镧注入动物血管后，镧可通过毛细血管内皮细胞、曲细精管的界膜进入生精上皮的精原细胞间隙中，但被支持细胞间的连接复合体阻挡，后者具有紧密连接的典型结构。支持细胞内多种细胞骨架成分与ＢＴＢ重要生理功能的实现密切相关。近年，随着细胞和分子生物学研究技术的快速发展以及电子显微镜的广泛应用，对细胞骨架的作用有了更深层次的认识。细胞骨架在维持细胞形状、促进细胞的运动和连接以及信号转导方面都有积极的作用。充分了解支持细胞内多种细胞骨架成分与ＢＴＢ结构、功能的关系，以及某些干扰物对其产生的影响，对于探讨男性不育机制、保护男性生殖健康有重要的现实意义。

肌动蛋白微丝

微丝（ｍｉｃｒｏｆｉｌａｍｅｎｔ）是普遍存在于细胞质内的一种细丝状结构，与细胞的运动和连接有关。微丝分为细微丝和粗微丝。细微丝主要由肌动蛋白（ａｃｔｉｎ）组成，故也称肌动蛋白微丝（ａｃｔｉｎ－ｆｉｌａｍｅｎｔ）。粗微丝主要由肌球蛋白（ｍｙｏｓｉｎ）组成。现已证实，睾丸支持细胞内肌动蛋白微丝呈束状沿细胞膜下分布，肌动蛋白微丝、紧密连接和生精细胞三者呈几何图形样有规律地排列在一起。该特征对支持细胞整体形态及ＢＴＢ的维持有重要意义。支持细胞胞质中存在着连接特化区（ｅｃｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｃｉａｌｉｚａｔｉｏｎｓ），此特化区是支持细胞中肌动蛋白微丝与内质网的复合物。该复合物对肌动蛋白微丝的黏附功能有重要作用。采用冷冻蚀刻技术可以观察到紧密连接与肌动蛋白微丝并联，并且非常紧密，其间隙约１２ｎｍ。冷冻蚀刻和肌动蛋白磷脂酶胶体金（ＰＬＡ２－ＣＧ）标记技术实验发现，大鼠睾丸组织的紧密连接处有狭窄条状金颗粒ＰＬＡ２－ＣＧ标记复合物，提示肌动蛋白微丝的空间分布可能与紧密连接的三维结构相关联。而紧密连接自身所表达的一些蛋白如ＺＯ－１，

如Ｃｌａｕｄｉｎｓ－１，－３，－４，－５，－７，－１０和－１６在不同组织来源的癌中具有不同的表达［５］。Ｃｌａｕｄｉｎｓ可通过自身的浓缩、重组，使紧密连接的网状结构得到完善和巩固。冷冻蚀刻电镜观察发现，Ｃｌａｕｄｉｎｓ过表达可增强紧密连接的深度、数量和复杂性。Ｃｌａｕｄｉｎｓ不仅可调控紧密连接的渗透性，还可能通过更直接的调控途径来发挥作用，如信号转导途径、磷酸化作用等［３］。此外，肌动蛋白微丝自身表达的相关蛋白也参与了紧密连接结构的形成。如纽蛋白（Ｖｉｎｃｕｌｉｎ）、Ｅｓｐｉｎ和

Ｆｉｍｂｒｉｎ等都与紧密连接有特殊的化学或信号方面

的联系。Ｖｉｎｃｕｌｉｎ在紧密连接中具有信号分子的功能，主要通过黏着斑激酶（ｐＦＡＫ）／磷脂酰肌醇－３－激酶（ＰＩ３Ｋ）／Ｐ１３０Ｃａｓ信号途径调节紧密连接相关蛋白的基因位点的表达［６］。

实验提示，甘油可以促使紧密连接断裂、ＢＴＢ打开，导致其渗透性增高，作者认为甘油破坏ＢＴＢ的过程中，肌动蛋白微丝起到桥梁的作用。己烯雌酚（ＤＥＳ）作用于小鼠支持细胞后，延长了ＢＴＢ的形成时间，并导致生精细胞分化停止，而此时肌动蛋白微丝也失去了组装功能。体内实验发现，镉（ｃａｄｍｉｕｍ，

Ｃｄ）对紧密连接结构破坏的同时，Ｏｃｃｌｕｄｉｎ和ＺＯ－１

在ＢＴＢ中位点也发生了丢失，认为转化生长因子－Ｂ２，－Ｂ３（ＴＧＦ－Ｂ２和ＴＧＦ－Ｂ３）／细胞分裂活化蛋白（Ｐ３８ＭＡＰ）激酶信号调节途径在Ｃｄ引起紧密连接

相关蛋白位点的丢失起着关键性作用［７］。实验报道，大鼠睾丸切除术后１４ｄ，附睾紧密连接中Ｃｌａｕｄｉｎｓ－１缺乏可能与雄激素缺乏有关［８］。另外，支持细胞自身分泌的肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）家族可以调节Ｏｃｃｌｕｄｉｎ的表达以及ＪＡＭ－Ａ（紧密连接蛋白家族的一种）的分布。ＴＮＦ对紧密连接的破坏是可逆的，可能是通过整合素连接激酶（ＩＬＫ）／糖原合酶激酶－Ｂ３（ＧＳＫ－Ｂ３）／

Ｐ１３０Ｃａｓ／ｃ－Ｊｕｎ氨基末端激酶（ＪＮＫ）信号途径来干扰紧密连接蛋白的表达，破坏ＢＴＢ。

微

管

微管（ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ）为１３条原丝环列组合成的圆筒状结构，由微管蛋白（ｔｕｂｕｌｉｎ）和少量的微管结合蛋白（ＭＡＰｓ）组成，主要参与物质运输，维持细胞形状，促进细胞运动。微管在支持细胞的胞质中含量很丰富，可以改变紧密连接复合体在形成过程中的极性，起到定位作用。Ｍｙｅｒｓ等［９］采用免疫组化法和电镜技术等证实，性腺机能减退大鼠的睾丸支持细胞中，微管和紧密连接蛋白表达减少，紧密连接结构不完整以及连接特化区缺失，说明微管与紧密连接蛋白共同参与了紧密连接的某些功能。支持细胞分

Ｏｃｃｌｕｄｉｎ和Ｃｌａｕｄｉｎｓ等均与肌动蛋白微丝有密切联

系。ＺＯ－１和肌动蛋白微丝共同参与紧密连接网状结构的形成［１］。实验证实，Ｏｃｃｌｕｄｉｎ缺乏的小鼠，上皮紧密连接的功能和结构出现缺损［２］。Ｃｌａｕｄｉｎｓ则是一

类具有封闭性、可调控性、孔隙样的跨膜蛋白［３］，分子质量在２０～２７ｋｕ之间［４］，为细胞间重要的黏附分子。例Ｃｌａｕｄｉｎｓ在全身组织中有各自的特异性表达。

・・１２６

国际生殖健康／计划生育杂志２００８年３月第２７卷第２期ＪＩｎｔＲｅｐｒｏｄＨｅａｌｔｈ6ＦａｍＰｌａｎ，Ｍａｒ．２００８，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．２

泌的某些营养物质和蛋白因子需要透过紧密连接来维持生精细胞的生长，而此作用的发挥可能与微管相关蛋白有关。此外，微管与紧密连接在信号转导方面亦有密切的联系。微管可以调控ＴＧＦ基因位点表达。而ＴＧＦ又可导致紧密连接的破坏和渗透性增高，其作用机制可能是通过信号转导方式使紧密连接中的连接蛋白如ＺＯ－１、Ｏｃｃｌｕｄｉｎ等发生位点的重排或减少，ＴＧＦ在紧密连接中的动力学效应是被

中，采用逆转录酶－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）分析支持细胞基因表达时发现，波形蛋白、Ｏｃｃｌｕｄｉｎ和

Ｃｌａｕｄｉｎ－１表达减少，细胞骨架破坏以及紧密连接复

合体缺损，ＢＴＢ的功能遭到破坏。上述改变表明，波形蛋白有可能直接或间接参与调节ＢＴＢ的功能。波形蛋白还可能通过参与信号转导途径来调节紧密连接的生理功能，如经一氧化氮合酶（ＮＯＳ）处理的大鼠，ＮＯＳ与紧密连接蛋白和波形蛋白广泛结合，且与波形蛋白一起通过一氧化氮（ＮＯ）／鸟苷酸环化酶（ｃＧＭＰ）／蛋白激酶Ｇ信号途径对ＢＴＢ进行调节［１３］。另外，波形蛋白还与Ｐ１３０Ｃａｓ家族成员中ＣＡＳＬ／

Ｐ３８ＭＡＰ激酶途径所调节的［１０］。

成年大鼠睾丸内注射１０％的甘油，经２４ｈ，７ｄ，１５ｄ和２１ｄ取材，用免疫组化法和激光共聚焦显微镜等技术观察发现，微管、微丝和Ｏｃｃｌｕｄｉｎ都出现

破坏，ＢＴＢ渗透性增高。而Ｃｄ导致微管结构紊乱和丝状物断裂可能与Ｃａ２＋有某些相关性。如①Ｃｄ可以加速磷酸肌醇３（ＩＰ３）的肌醇磷脂水解。②抑制钙离子三磷酸腺苷酶（Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ）活性。③抑制Ｎａ＋／并Ｃａ２＋交换。④激活微管的钙调蛋白与Ｃａ２＋的竞争。且Ｃｄ还可以通过三磷酸腺苷酶（Ｖ－ＡＴＰａｓｅ）的酸化作用起到同样的效果。

中间丝

中间丝（ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｆｉｌａｍｅｎｔ，ＩＦｓ）由细胞内高度不溶解的直径为１０ｎｍ左右的丝网状结构所构成，其在细胞的完整性、可移动性及分化中扮演重要角色。同时ＩＦｓ还具静力锚定作用，即使在浓度相当低时（如０．１％浓度）也具有高黏稠度。ＩＦｓ蛋白组成主要有５大类：①角蛋白（ｋｅｒａｔｉｎ），主要存在于上皮细胞。②神经丝蛋白（ｎｅｕｒｏｆｉｌａｍｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎ），主要存在于神经元。③结蛋白（ｄｅｓｍｉｎ），主要存在于肌细胞中。

ＨＥＦ１有密切的信号转导调控机制，波形蛋白与紧

密连接相互作用时，ＣＡＳＬ／ＨＥＦ１可能起着信号分子的作用。

一些环境毒物对波形蛋白也可以造成损伤，影响支持细胞骨架的正常形成，导致支持细胞形态改变及生精细胞的凋亡。如采用支持细胞体外原代培养、免疫组化法以及ｍＲＮＡ原位杂交技术分析双酚

Ａ对支持细胞波形蛋白及其基因转录的影响时，发

现双酚Ａ抑制波形蛋白基因转录并干扰波形蛋白合成。还有实验表明，局部高温可导致支持细胞波形蛋白表达的增多及分布变化，并且波形蛋白的改变与生精细胞凋亡有着密切关系。有研究隐睾症中发现，支持细胞内的波形蛋白分布发生改变，生精细胞凋亡增加。提示波形蛋白对精子的发生起着重要作用［１４］。Ｌｅｅ等［１５］发现Ｃｄ导致生精细胞凋亡，并认为可能与Ｃｄ引起波形蛋白丢失有关。而波形蛋白异常改变导致的生精细胞凋亡是否与支持细胞紧密连接破坏有直接关系，还有待进一步探讨。

④胶质纤维酸性蛋白（ｇｌｉａｌｆｉｂｒｉｌｌａｒｙａｃｉｄｉｃｐｒｏｔｅｒｉｎ），主要存在于星形胶质细胞。⑤波形蛋白（ｖｉｍｅｎｔｉｎ），

主要存在于间质细胞和中胚层起源的细胞。

波形蛋白是ＩＦｓ的主要成分，通常密集环绕于核周，并与核膜下的核纤层相连，形成所谓“中间丝－核纤层－核质骨架结构体系”，因而具有保持细胞位置稳定的作用，即“锚定作用”。动物实验发现波形蛋白与维持支持细胞与生精细胞的黏附、传递细胞间的信号以及细胞凋亡等有关。Ｎｉｅｍｉｎｅｎ等［１１］研究认为，波形蛋白对细胞间的连接、跨膜转运及ＢＴＢ的渗透功能有重要作用。如果波形蛋白丢失，将导致细胞黏附分子如ＩＣＡＭ－１位点分布紊乱及基因表达的缺失。采用电镜、激光共聚焦显微镜和免疫组化法观察老年马的睾丸时发现，曲细精管萎缩，基底膜纤维化，胞质内肌动蛋白微丝、波形蛋白表达减少。Ｗａｎｇ等［１２］在雄性激素受体敲除的大鼠模型

４．１蛋白家族

４．１蛋白指的是红细胞膜蛋白上第４．１条显色

带，其家族成员主要有４．１Ｒ，４．１Ｇ（广泛表达），４．１Ｎ（神经特异表达）和４．１Ｂ（主要在脑中表达）。４．１蛋

白在维持细胞的正常形态和结构特性方面有重要作用。其可以影响离子通道的决定位置，并且通过细胞黏附分子来调整细胞与细胞的联合，同时也是细胞生长的调节器以及肿瘤抑制因子［１６］。４．１Ｒ是第１个被分离鉴定的４．１蛋白家族成员，呈多肽链结构片段，其构像似一个四叶苜蓿形的立体道路的交叉点。

４．１Ｒ与紧密连接的关系近几年有一些研究进展，如４．１Ｒ蛋白与肌动蛋白共同作用而具有细胞间黏附功能。４．１Ｒ蛋白与紧密连接蛋白ＺＯ－２在ＢＴＢ中有特殊的关系，４．１Ｒ与ＺＯ－２共同作用可以填补

细胞异常表达所空缺的结合位点。Ｈｕａｎｇ等［１７］和

国际生殖健康／计划生育杂志２００８年３月第２７卷第２期ＪＩｎｔＲｅｐｒｏｄＨｅａｌｔｈ6ＦａｍＰｌａｎ，Ｍａｒ．２００８，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．２

［５］

・・１２７

Ｋｒａｕｓｓ等［１８］的实验证实，４．１Ｒ在微管和细胞骨架的

整合以及有丝分裂中是必需的。以上表明，４．１Ｒ蛋白在紧密连接中具有直接或间接的功能。４．１Ｇ是继

ＭｏｒｉｎＰＪ．Ｃｌａｕｄｉｎｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒ：ｐｒｏｍｉｓｉｎｇｎｅｗｔａｒｇｅｔｓｆｏｒｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ，２００５，６５（２１）：９６０３－９６０６．

４．１Ｒ之后发现的第２个４．１蛋白家族成员。４．１Ｇ基

因位于人的６号染色体上，有１００５个核苷酸组成

的开放阅读框架，编码１１３ｋｕ的蛋白质。成年大鼠睾丸中，４．１Ｇ定位于曲细精管的基底部和近腔小室，与生精细胞和支持细胞相邻。免疫染色观察

［６］ＳｉｕＭＫ，ＭｒｕｋＤＤ，ＬｅｅＷＭ，ｅｔａｌ．Ａｄｈｅｒｉｎｇｊｕｎｃｔｉｏｎｄｙｎａｍｉｃｓｉｎｔｈｅｔｅｓｔｉｓａｒｅｒｅｇｕｌａｔｅｄｂｙａｎｉｎｔｅｒｐｌａｙｏｆｂｅｔａ１－ｉｎｔｅｇｒｉｎａｎｄｆｏｃａｌａｄｈｅｓｉｏｎｃｏｍｐｌｅｘ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓ［Ｊ］．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，２００３，１４４（５）：２１４１－２１６３．

［７］［８］

ＷｏｎｇＣＨ，ＭｒｕｋＤＤ，ＬｕｉＷＹ，ｅｔａｌ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｂｌｏｏｄ－ｔｅｓｔｉｓｂａｒ－ｒｉｅｒｄｙｎａｍｉｃｓ：ａｎｉｎｖｉｖｏｓｔｕｄｙ［Ｊ］．ＪＣｅｌｌＳｃｉ，２００４，１１７（５）：７７８３－７７９８．ＣｙｒＤＧ，ＧｒｅｇｏｒｙＭ，ＤｕｂéＥ，ｅｔａｌ．Ｏｒｃｈｅｓｔｒａｔｉｏｎｏｆｏｃｃｌｕｄｉｎｓ，ｃｌａｕｄｉｎｓ，ｃａｔｅｎｉｎｓａｎｄｃａｄｈｅｒｉｎｓａｓｐｌａｙｅｒｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅｏｆｔｈｅｂｌｏｏｄ－ｅｐｉｄｉｄｙｍａｌｂａｒｒｉｅｒｉｎａｎｉｍａｌｓａｎｄｈｕｍａｎｓ［Ｊ］．ＡｓｉａｎＪＡｎｄｒｏｌ，２００７，９（４）：４６３－４７５．

４．１Ｇ与钙粘蛋白有相同的定位。说明４．１Ｇ与黏附

分子在细胞之间的黏附功能上可能有某种联系。

Ｔｅｒａｄａ等［１９］在Ｃｄ诱导的大鼠模型中发现，曲细精

管的紧密连接被破坏，４．１Ｇ蛋白在曲细精管中的免

疫染色减少。该结果提示，４．１Ｇ在支持细胞之间的紧密连接中有着基本的连接功能。而４．１Ｂ是红细胞蛋白４．１Ｒ的同系物，４．１Ｂ定位于人的ｌ８号和小鼠的ｌ７号染色体。４．１Ｂ的结构包括３个已知功能区域和３个特殊结构域。最近研究发现，４．１Ｂ也可以在睾丸中表达。４．１Ｂ定位在输精管的基底室，特别是在精原细胞和支持细胞中也发现其定位区域。但是在精子发生过程中，４．１Ｂ的定位与表达是不同的。

［９］ＭｙｅｒｓＭ，ＥｂｌｉｎｇＦＪ，ＮｗａｇｗｕＭ，ｅｔａｌ．ＡｔｙｐｉｃａｌｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＳｅｒｔｏｌｉｃｅｌｌｓａｎｄｉｍｐａｉｒｍｅｎｔｏｆｓｐｅｒｍａｔｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｔｈｅｈｙｐｏｇｏｎａｄａｌ（ｈｐｇ）ｍｏｕｓｅ［Ｊ］．ＪＡｎａｔ，２００５，２０７（６）：７９７－８１１．

［１０］ＬｕｉＷＹ，ＬｅｅＷＭ，ＣｈｅｎｇＣＹ．Ｓｅｒｔｏｌｉ－ｇｅｒｍｃｅｌｌａｄｈｅｒｅｎｓｊｕｎｃｔｉｏｎ

ｄｙｎａｍｉｃｓｉｎｔｈｅｔｅｓｔｉｓａｒｅｒｅｇｕｌａｔｅｄｂｙＲｈｏＢＧＴＰａｓｅｖｉａｔｈｅＲＯＣＫ／ＬＩＭＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．ＢｉｏｌＲｅｐｒｏｄ，２００３，６８（６）：２１８９－２２０６．

［１１］ＮｉｅｍｉｎｅｎＭ，ＨｅｎｔｔｉｎｅｎＴ，ＭｅｒｉｎｅｎＭ，ｅｔａｌ．Ｖｉｍｅｎｔｉｎｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎ

ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅａｄｈｅｓｉｏｎａｎｄｔｒａｎｓｃｅｌｌｕｌａｒｍｉｇｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＮａｔＣｅｌｌＢｉｏｌ，２００６，８（２）：１５６－１５６２．

［１２］ＷａｎｇＲＳ，ＹｅｈＳ，ＣｈｅｎＬＭ，ｅｔａｌ．Ａｎｄｒｏｇｅｎｒｅｃｅｐｔｏｒｉｎｓｅｒｔｏｌｉｃｅｌｌ

Ｔｅｒａｄａ等

［２０］

用电镜观察证实，４．１Ｂ蛋白免疫产物主

ｉｓｅｓｓｅｎｔｉａｌｆｏｒｇｅｒｍｃｅｌｌｎｕｒｓｅｒｙａｎｄｊｕｎｃｔｉｏｎａｌｃｏｍｐｌｅｘｆｏｒｍａｔｉｏｎｉｎｍｏｕｓｅｔｅｓｔｅｓ［Ｊ］．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，２００６，１４７（１２）：５６２４－５６３３．［１３］ＬｅｅＮＰ，ＣｈｅｎｇＣＹ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｓｅｒｔｏｌｉｃｅｌｌｔｉｇｈｔｊｕｎｃｔｉｏｎｄｙｎａｍｉｃｓ

要分布在支持细胞膜上，提示４．１Ｂ蛋白在支持细胞与生精细胞（特别是精原细胞）之间有着基本的连接功能。然而，有关４．１蛋白表达异常对精子发生、排放的影响如何，迄今尚未见有报道。

综上所述，支持细胞和ＢＴＢ结构与功能的维持对生精细胞的发育至关重要。支持细胞骨架成分发生异常改变或受损必然导致ＢＴＢ破坏，最终引起精子形成内环境的改变和生精细胞的损害。对于多种细胞骨架成分在维持正常ＢＴＢ中的作用，尚有许多机制需要阐明，特别是涉及支持细胞骨架成分以及与ＢＴＢ相关蛋白的基因表达位点和信号转导方面的分子生物学研究已成为近年的热门探讨课题。

参

［１］

ｉｎｔｈｅｒａｔｔｅｓｔｉｓｖｉａｔｈｅｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ／ｓｏｌｕｂｌｅｇｕａｎｙｌａｔｅｃｙｃｌａｓｅ／３＇，５＇－ｃｙｃｌｉｃｇｕａｎｏｓｉｎｅｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ／ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＧｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ：ａｎｉｎｖｉｔｒｏｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，２００３，１４４（７）：３１１４－３１２９．

［１４］ＫｏｐｅｃｋｙＭ，ＳｅｍｅｃｋｙＶ，ＮａｃｈｔｉｇａｌＰ，ｅｔａｌ．Ｖｉｍｅｎｔｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ

ｄｕｒｉｎｇａｌｔｅｒｅｄｓｐｅｒｍａｔｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｒａｔｓ［Ｊ］．ＡｃｔａＨｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａ，２００５，１０７（４）：２７９－２８９．

［１５］ＬｅｅＪＳ，ＺｈａｎｇＭＨ，ＹｕｎＥＫ，ｅｔａｌ．Ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ２７ｉｎｔｅｒａｃｔｓ

ｗｉｔｈｖｉｍｅｎｔｉｎａｎｄｐｒｅｖｅｎｔｓｉｎｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｖｉｍｅｎｔｉｎｓｕｂｕｎｉｔｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｃａｄｍｉｕｍ［Ｊ］．ＥｘｐＭｏｌＭｅｄ，２００５，３７（５）：４２７－４３５．［１６］Ｔａｙｌｏｒ－ＨａｒｒｉｓＰＭ，ＫｅａｔｉｎｇＬＡ，ＭａｇｇｓＡＭ，ｅｔａｌ．Ｃａｒｄｉａｃｍｕｓｃｌｅ

ｃｅｌｌｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔａｌｐｒｏｔｅｉｎ４．１：ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓａｎｄｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｏｃａｔｉｏｎ－ｒｅｌｅｖａｎｃｅｔｏｍｅｍｂｒａｎｅｉｎｔｅｇｒｉｔｙ，ｍｉｃｒｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ａｎｄｐｏｓｓｉｂｌｅｒｏｌｅｉｎｈｅａｒｔｆａｉｌｕｒｅ［Ｊ］．ＭａｍｍＧｅｎｏｍｅ，２００５，１６（３）：１３７－１５１．［１７］ＨｕａｎｇＳＣ，ＬｉｕＥＳ，Ｃｈａｎ，ＳＨ，ｅｔａｌ．Ｍｉｔｏｔｉｃｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎ

考文献

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［１８］ＫｒａｕｓｓＳＷ，ＬｅｅＧ，ＣｈａｓｉｓＪＡ，ｅｔａｌ．Ｔｗｏｐｒｏｔｅｉｎ４．１ｄｏｍａｉｎｓ

［２］ＳｃｈｕｌｚｋｅＪＤ，ＧｉｔｔｅｒＡＨ，ＭａｎｋｅｒｔｚＪ，ｅｔａｌ．Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｔｒａｎｓｐｏｒｔａｎｄｂａｒｒｉｅｒｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｏｃｃｌｕｄｉｎｄｅｆｉｃｉｅｎｔｍｉｃｅ［Ｊ］．ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａ，２００５，１６６９（１）：３４－４２．

ｅｓｓｅｎｔｉａｌｆｏｒｍｉｔｏｔｉｃｓｐｉｎｄｌｅａｎｄａｓｔｅｒｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅｄｙｎａｍｉｃｓａｎｄｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎｉｎｖｉｔｒｏ［Ｊ］．ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ，２００４，２７９（２６）：２７５９１－２７５９８．［１９］ＴｅｒａｄａＮ，ＯｈｎｏＮ，ＹａｍａｋａｗａＨ，ｅｔａｌ．Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓｔｕｄｙ

［３］［４］

ＶａｎＩｔａｌｌｉｅＣＭ，ＡｎｄｅｒｓｏｎＪＭ．Ｃｌａｕｄｉｎｓａｎｄｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｐａｒａｃｅｌｌｕｌａｒｔｒａｎｓｐｏｒｔ［Ｊ］．ＡｎｎｕＲｅｖＰｈｙｓｉｏｌ，２００６，６８（１）：４０３－４２９．

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ｏｆａｍｅｍｂｒａｎｅｓｋｅｌｅｔａｌｍｏｌｅｃｕｌｅ，ｐｒｏｔｅｉｎ４．１Ｇ，ｉｎｍｏｕｓｅｓｅｍｉｎｉｆｅｒ－ｏｕｓｔｕｂｕｌｅｓ［Ｊ］．ＨｉｓｔｏｃｈｅｍＣｅｌｌＢｉｏｌ，２００５，１２４（３－４）：３０３－３１１．［２０］ＴｅｒａｄａＮ，ＯｈｎｏＮ，ＹａｍａｋａｗａＨ，ｅｔａｌ．Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓｔｕｄｙ

ｏｆｐｒｏｔｅｉｎ４．１ＢｉｎｔｈｅｎｏｒｍａｌａｎｄＷ／Ｗ（ｖ）ｍｏｕｓｅｓｅｍｉｎｉｆｅｒｏｕｓｅｐ－ｉｔｈｅｌｉｕｍ［Ｊ］．ＪＨｉｓｔｏｃｈｅｍＣｙｔｏｃｈｅｍ，２００４，５２（６）：７６９－７７７．