【名词解释】
1.抗原抗体反应:抗原抗体反应是指抗原与相应抗体在体内和体外发生的特异性结合反应
2.亲和性;抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间的结合强度,
3.亲和力;一个完整的抗体结合部位与若干个抗原表位之间结合的强度
4.带现象;由于抗原或抗体过量,形成免疫复合物少,沉淀物少,上清液中可测出游离的抗原或抗体
6.抗血清:将免疫原按照一定的免疫程序免疫动物,一定时间后,采集动物血液,分离得到含有抗体的血清。
7凝集反应;细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原,或可溶性抗原(或抗体)与载体颗粒结合成致敏颗粒后,它们与相应抗体(或抗原)发生特异性反应,在适当电解质存在下,形成肉眼可见的凝集现象
8.直接凝集反应:颗粒性抗原直接与抗体结合,在电解质的作用下,出现肉眼可见的凝集现象(这个名解删除)
9.间接凝集反应:将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面(加到了反应面积),然后与相应的抗体或抗原反应,在电解质的作用下,出现肉眼可见的凝集现象这个名解删除)
10.沉淀反应:可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现的沉淀现象,其特性与经典的抗原抗体反应相同。
11.比放射活性:单位质量标记物中所含的放射性强度(每分子被标记物平均所结合放射性原子的数目)单位: Ci/g
12.发射光谱:指固定激发波长,在不同波长下记录的样品发射荧光的强度。
13.激发光谱:指固定检测波长,用不同波长的激发光激发样品,记录相应的荧光发射强度。
14.荧光效率:荧光物质将光能转变成荧光的百分率,一定范围内与激发光强度呈正相关。
15.荧光寿命:荧光物质被激发后所产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间。
16.荧光猝灭:荧光物质在某些理化因素作用下,发射荧光减弱甚至消退,称为荧光淬灭。
17.包被;将抗原或抗体结合于固相载体的过程
18.封闭:抗原或抗体包被后,为防止固相载体没有完全包被,可能在后续实验中非特异性吸附蛋白,因此用1%~5%的牛血清白蛋白重新包被,覆盖所有蛋白结合位点,消除非特异性吸附
19.固相膜免疫分析技术:以微孔膜作为固相载体,利用液体可以流过微孔膜也可以通过毛细管作用在膜上向前移行的特性,以酶标记或各种有色粒子(胶体金,胶体硒等)标记抗体或抗原作为标记物,通过抗原抗体反应或抗体检测的快速检验方法
20.免疫金;指胶体金与抗原或抗体等大分子物质的结合,习惯称金探针
21.免疫组织化学技术:又称免疫细胞化学技术,是指用标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项免疫检测方法。
22.抗原修复:免疫组化在制片的过程中由于广泛的蛋白交联而使其组织的某些抗原决定簇发生遮蔽、致使免疫细胞化学的信号减弱或消失等不良效应。所以,
使遮蔽的组织抗原决定簇重新暴露的方法,即抗原修复。
23.CH50;补体总活性测定方法是以红细胞的溶解为指示,以50%溶血为判断终点
24.不完全抗体。
1.超敏反应(hypersensitivity)又称变态反应,是指机体再次接受相同抗原刺激后,发生的以组织细胞损伤或生理功能紊乱为主的特异性免疫应答
2.变应原(allergen):引起超敏反应的抗原称之为变应原。
3.自身免疫耐受(autoimmune-tolerance):正常情况下,机体免疫系统能识别“自我”,对自身组织成分不发生免疫应答反应,或仅产生微弱的免疫应答,此为自身免疫耐受。
4.自身免疫(autoimmunity):是指机体免疫系统针对自身成分发生免疫应答反应,出现自身抗体或致敏淋巴细胞的现象。
5.自身免疫病(autoimmune disease,AID):因自身免疫反应导致组织器官损伤或功能障碍所致疾病。
6.混合性结缔组织病(MCTD:自身免疫病通常由Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ超敏反应所引发,常有两种或两种以上的自身免疫病混合出现的临床表现
7.自身抗体(autoantibody)(掌握),是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白,是自身免疫和自身免疫病重要特征之一,某些自身免疫病伴有特征性的自身抗体(谱)。
8.抗核抗体(ANA)(掌握):是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称。ANA 的性质主要是IgG,也有IgM、IgA 和IgD。
9.免疫增殖性疾病(immunoproliferative disease)是指由于淋巴细胞异常增殖所引起的疾病,多属于血液疾病范畴
10.多发性骨髓瘤(multiple myeloma)是浆细胞异常增生的恶性肿瘤,也称浆细胞瘤(plasnocytoma),因其引起骨破坏而得名。患者常伴有贫血、肾功损害和免疫功能障碍
11.巨球蛋白血症(macroglobulinemia)是以分泌IgM的浆细胞恶性增殖为病理基础的疾病。好发于老年男性。
12.M蛋白(掌握):。当某一类Ig显著增加,含量≥30g/L,理化性质一致时,称为单克隆蛋白,即M蛋白。M蛋白见于免疫增殖病,如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、重链病、轻链病和恶性淋巴瘤等
13.免疫缺陷病(ID).由遗传因素或其他原因造成的免疫系统发育或免疫应答障碍而导致的一种或多种免疫功能不全称为免疫缺陷(immunodeficiency),由此所致的各种临床综合征称为免疫缺陷病
14.肿瘤抗原(tumor antigen):是指在肿瘤发生、发展过程中新出现的或过度表达的抗原物质。
15.肿瘤特异性抗原(TSA)。 为肿瘤细胞所特有,只表达于肿瘤细胞,而不存在于任何处于不同发育阶段的正常细胞
16.肿瘤相关抗原(TAA。指非肿瘤细胞所特有的抗原成分,也少量存在于正常细胞,但在肿瘤发生的机体可异常表达,可分为胚胎性抗原和分化抗原两种类型。
17.质量保证(QA)。质量保证是临床实验室为了证明给患者做提供实验数据的有效性,而采取的一系列措施,涵盖实验室进行检测前后的所用活动。
18.准确度(accuracy)待测物的测定值与其真值的一致性程度
19.精密度(precision) 在一定条件下进行多次测定,所得结果之间的符合程度
20.标准品(standard)。指性质纯的处于一定基质中已知含量或成分且特性明确的物质,通常用于比较检测未知的物质或成分
21.正确诊断指数(Youden’s index)又称约登指数,指将灵敏度和特异度结合的评价某种免疫学实验的综合指标。其值是灵敏度与特异度之和减去1,大小范围从0到1 。
22.选择性蛋白尿指数(掌握),SPI= (尿Ig/血清Ig)/(尿TRF/血清TRF)
23.冷球蛋白:在低温下发生沉淀,加温后又复溶的免疫球蛋白。 0~4℃沉淀,37 ℃恢复溶解
24.SD抗原。由血清学分型法检测的抗原称为SD抗原,包括,HLA-A,HLA-C,HLA-DR,HLA-DQ
25.LD抗原.由细胞学分型法检测的抗原称为LD 抗原包括HLA-D,HLA-DP
26.混合淋巴细胞反应:又称混合淋巴细胞培养,是指两个无关个体、功能正常的淋巴细胞在体外混合培养时,由于HLA II类抗原中D和DP抗原不同,可相互猜忌对方的T细胞发生增值。
【大题以及知识点】
一、.抗原抗体结合力有哪些(掌握)
静电引力,范德华力(最弱),氢键(特异性),疏水作用力(最强)
二、抗原抗体反应的特点(掌握)
特异性,比例性,可逆性,阶段性
注意:抗体过量称为前带,抗原过量称为后带
三、抗原抗体反应体系中为何要确定抗原、抗体的最适比例。(掌握)
抗原抗体分子比例适合的范围称为抗原抗体等价带,在此范围内,抗原抗体结合充分,沉淀物形成快而多。在等价带前后,由于抗体和抗原过量,形成沉淀物少,上清液中可测出游离的抗体或抗原,这种现象称为带现象,由于带现象的干扰,可导致假阴性结果,因此需要确定合适比例
四、什么是免疫佐剂,免疫佐剂的种类(熟悉)
预先或与抗原同时注入体内,可增加机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答的类型的物质,简称佐剂。分为福氏完全佐剂,福氏不完全佐剂,两者的区别在于前者含有卡介苗。
五、什么是直接Coombs实验,直接和间接coombs实验有何区别?(掌握) 抗球蛋白试验是抗球蛋白参与的间接血凝试验,用于检测抗红细胞不完全抗体。直接coombs试验用于检测吸附于红细胞表面的不完全抗体,间接coombs试验用于检测血清中游离的不完全抗体。
六、免疫浊度法的原理?和影响因素?(掌握)
原理:可溶性抗原与相应的抗体特异性结合,两者在合适比例和增浊剂作用下,可以快速形成一一定大小的免疫复合物,使其反应液出现浊度。它的最大优点就是稳定性好,敏感度高,精确度高。简便快速,易于自动化,无放射性核素污染。
因素:抗原抗体的比例、抗体的质量、抗原抗体反应的环境、增浊剂。
七、碘125的优势有哪些?(掌握)
1.化学性质活泼,标记方法简单,核素丰度高
2.产生的γ射线,便于测量且测量的效率高
3.半衰期60天,易于废料处理。
九、常用荧光物质种类和用途 (掌握)
1.异硫氰酸荧光素(FITC)最大吸收波长490—495nm,最大发射波长520-530nm 呈现黄绿色荧光,常用于双标记免疫荧光染色
2.四乙基罗丹明(RB200),棕红色常用与双重标记或对比染色
3.藻红蛋白(PE)最大吸收波长565nm,常用于双标记免疫荧光染色
4.镧系螯合物如铕Eu3+,常用于时间分辨荧光免疫侧定
5.酶作用后产生的荧光物质,常用于荧光酶免疫分析
十、时间分辨荧光免疫测定的原理(掌握)
通常各组织、蛋白或者其他化合物,在激发光的照射下都能发出一定波长的自发荧光,但他们的荧光寿命通常较短,最长不超过20秒钟。而镧系元素螯合物的荧光寿命较长,因此在检测时可在短寿命本底自发荧光完全衰变后,再测定
镧系元素螯合物的特异性荧光信号,可有效的降低本底荧光的干扰,故称为。。
十二、荧光偏振免疫测定原理(掌握)
在反应液中,荧光素标记的小分子抗原转动速度快,失去方向性;但与抗体结合后,荧光素标记抗原分子增大,转动速度变慢,受偏振光激发后发射出的偏振荧光明显增强。当待检抗原过多时,由于竞争性结合,形成小分子抗原抗体复合物少,游离的小分子抗原就多,受偏振光激发后,发射的偏振荧光就越弱,即待检抗原含量与偏振荧光强度呈反比。
十三、酶免疫技术中,常用的固相载体有哪些(掌握)
1.塑料制品:聚苯乙烯,聚氯乙烯
2.微粒。
3.膜载体;NC,PVDF
十四、ELISA的原理和方法类型?(必须掌握)
原理:把抗原或者抗体结合到某种固相载体表面,将抗原或抗体与酶连接成酶标抗原或抗体,将受检样品和酶标抗原或抗体按照不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体反应,洗涤复合物与其他物质分开,加入底物,底物被固相载体上的酶催化成有色物,通过定性或定量测有色物即可。
方法类型:1检测抗原的方法:双抗体夹心法、双位点一步法、竞争法
2.检测抗体的方法:间接法、双抗原夹心法、竞争法、捕获法。
十五、均相酶免疫测定的原理和方法类型?(掌握)
原理:利用酶标记物与相应的抗原或抗体结合后,标记酶的活性会发生改变的原理,可以在不将结合和游离酶标记物分离的情况下,通过测定标记酶活性的改变,从而测定抗原或抗体的含量。
方法类型:酶放大免疫分析技术(EMIT)
克隆酶供体免疫分析(CEDIA)
十六、化学发光免疫分析根据标记物的不同分类?(掌握)
1.直接化学发光免疫分析,用化学发光剂(如吖啶脂)直接标记抗原或抗体
2.化学发光酶免疫分析,用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶来标记抗原或抗体
3.电化学发光免疫分析,以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗原或抗体
4,鲁米诺氧途径免疫分析,利用均相化学发光检测技术,参与免疫反应的一个抗体上包被了感光珠,另一个抗体上包被了发光珠。
十七、生物素亲和素放大作用的原理?(掌握)
由于一个个亲和素分子能同时结合4个生物素,且一个生物大分子可标记多个生物素而产生级联放大效应,提升检测敏感度
十八、DICA和DIGFA的原理(掌握)
1.DICA 即斑点金免疫层析试验,是将胶体金标记技术和蛋白质层析技术相结合的以硝酸纤维素膜为载体的快速的固相膜免疫分析技术,标本溶液受载体膜毛细管作用移动过程中,被固定于载体膜上某一区域的抗体或抗原结合固相化,通过胶体金呈色条来判试验结果
2.DIGFA 即斑点金免疫渗滤试验,是在以硝酸纤维素膜为载体并包被了抗原或抗体的渗滤装置中,依次滴加标本、免疫金以及洗涤液,将微孔滤膜贴置于吸水材料上,溶液流经渗滤装置时与膜上的抗原或抗体快速结合并起到浓缩作用,达到快速将检测的目的。
十九、细胞分离的方法?(掌握)
1.外周血单个核细胞的分离:Ficoll分层液法,Percoll分层液法
2.淋巴细胞分离:贴壁粘附法。吸附柱过滤法,percoll分离液法
3.T细胞和B细胞分离:E花环沉降法。尼龙毛柱分离法
4.T细胞亚群分离:磁性微球分离法,荧光激活细胞分离仪分离法。
二十、T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞的主要分化抗原(掌握) T细胞:辅助性T细胞:CD3+ CD4+ CD8-
细胞毒性T细胞:CD3+ CD4- CD8+
B细胞:B1细胞:CD19+ CD5+ B2细胞:CD19+ CD5- NK细胞:CD3- CD56+ CD16+
单核细胞:CD14
二十二、T细胞功能检测(掌握)
1.T细胞增值试验:形态学检查法,3H-TdR渗入法,MTT比色法
2.T细胞分泌功能测定:CK
3.T细胞介导的细胞毒试验:形态学检查法,51Cr释放法,细胞增殖评价法(包括3H-TdR渗入法,MTT比色法)
二十三、CH50的测定原理以及判定结果?(掌握)
原理;在特定的反应系统中,溶血的程度和补体的活性呈正相关,以溶血百分率为纵坐标,相应血清含量为横坐标,可见在轻微溶血和接近完全溶血时,对补
体含量变化敏感度下降,形成特殊的S型曲线,在30%-70%之间斜度最陡,几乎成一条直线,补体量的细微变化也会引起溶血程度的明显改变,故取50%溶血作为判定终点,这一方法称为补体50%溶血实验,即CH50.引起50%溶血所需要的最小补体量为一个CH50单位(U).
判定结果:CH50=(1/终点管稀释血清的用量)*血清稀释度
小点;(掌握)
1.单项扩散试验的应用:可定量定性,但必须先做标准曲线
双向扩散试验的应用:判断抗原抗体的存在以及估计相对含量;分析抗原或者抗体相对分子量;分析抗原的性质(相切表示两抗原部分相同,相吻合表示完全相同,相交表示完全不同);用于抗体效价滴定(以出现沉淀线最高的抗体稀释度作为抗体效价);鉴定抗原或抗体纯度
2.化学发光剂的分类:
直接化学发光剂:1.吖啶脂,碱性条件下被H2O2氧化 2.三联吡啶钌,是电化学发光剂
间接化学发光剂:1.鲁米诺及其衍生物 2.AMPPD
3.标本固定的目的;
使细胞内蛋白质凝固,细胞内分解酶反应终止以防止细胞自溶,保持细胞形态和结构
保存组织细胞抗原性,防止标本脱落,除去妨碍标本结合的类脂,便于保存 抑制组织中的细菌,防止组织腐败和在后续组织制备中的细胞结构和成分的改变
4.抗原修复的方法有:1.酶消化法 2.盐酸水解法3.微波法 4.高压锅法 5.煮沸法
5.PAP复合物是:2个酶抗体和3个过氧化物酶分子组成
6.SPA结合Fc段,不影响抗体活性,具有双价结合能力
7.中性粒细胞趋化功能检测方法:滤膜渗透法,琼脂糖平板法
8.免疫固定电泳临床上最常用于M蛋白的鉴定
9.常见的酶:(1)辣根过氧化物酶(HRP):
邻苯二胺(OPD),橙黄色,致癌性
四甲基联苯胺(TMB),蓝色,优于OPD
(2)碱性磷酸酶(ALP):P-npp,
(3)β-半乳糖甘酶;4-MUG
10.Ficoll分层液法属于单次差速密度梯度离心法,Percoll分层液法属于连续差速密度梯度离心法
1.I型超敏反应(熟悉):IgE参与,肥大细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞参与
2.常见Ⅰ型超敏反应性疾病(熟悉)
药物过敏性休克 血清过敏性休克 呼吸道过敏反应 消化道过敏反应 皮肤过敏反应
3.I型超敏反应免疫学检测(掌握)
(一) 1.血清总IgE的测定:方法有;免疫比浊法、化学发光免疫测定、酶联免疫吸附实验。意义;血清IgE水平升高见于寄生虫感染、过敏性哮喘,特发性皮炎等
2.特异性IgE的测定:酶联免疫吸附试验、免疫印迹技术(常用)、放射性变应原吸附实验
(二)激发试验: 是模拟自然发病条件,用少量超敏原引起一次较轻的超敏反应发作,达到确定超敏原的一种体内试验。
皮肤试验:皮内试验:迟发型,48~72h内观察红肿硬结
速发型,0.01-0.02ml,15~30min,内观察风团 点刺试验:看红晕
斑贴试验(Ⅳ型超敏反应)
4.Ⅱ型超敏反应(熟悉):IgM和IgG参与,补体、吞噬细胞、NK细胞参与 组织损伤或器官功能改变的机制:细胞溶解、吞噬作用、ADCC作用、刺激或抑制靶细胞
5.常见Ⅱ型超敏反应性疾病(熟悉) :
输血反应
新生儿溶血症
自身免疫性溶血性贫血
甲状腺功能亢进(刺激性抗体)
重症肌无力(阻断或抑制性抗体)
药物过敏性血细胞减少症
肺出血肾炎综合征
6.Ⅲ型超敏反应(熟悉):IgG参与,中性粒细胞、碱性粒细胞、肥大细胞、血小板 参与
7.常见Ⅲ型超敏反应性疾病(熟悉):Arthus反应、类Arthus反应,血清病、链球菌感染后肾小球肾炎、类风湿关节炎、系统性红斑狼疮
8.Ⅲ型超敏反应免疫学检测(免疫复合物的检测)(掌握)
物理法-PEG法
ELISA
补体法-C1q结合试验
抗球蛋白法-mRF固相抑制试验
细胞法- Raji细胞试验
9.常见Ⅳ型超敏反应性疾病(熟悉):感染性超敏反应 、接触性皮炎 、移植排斥反应
10.Ⅳ型超敏反应免疫学检测(熟悉);斑贴试验 、结核菌素试验
11.自身免疫病的分类(掌握)
按器官特异性分为两类; 器官特异性自身免疫病(例如慢性甲状腺炎、ITP、Graves病
非器官特异性自身免疫病(如RA,SLE
12.常见的自身免疫性疾病(掌握)
一)由II型超敏反应引起的自身免疫病
自身免疫性溶血性贫血(AIHI ),体内出现抗红细胞自身抗体
免疫性血小板减少性紫癜(ITP),抗血小板抗体
重症肌无力(MG),抗乙酰胆碱受体的自身抗体
甲亢,抗促甲状腺激素受体的自身抗体
肺出血肾炎综合征,抗肾小球基底膜Ⅳ型胶原抗体,由于肺泡基底膜与肾小球基底膜有共同抗原,所以抗体可同时作用于肺组织
二)免疫复合物引起的自身免疫性疾病
系统性红斑狼疮(SLE),抗核抗体及其他自身抗体
类风湿性关节炎(RA),抗变性IgG抗体
三)T细胞对自身抗原应答引起的自身免疫性疾病
型糖尿病(DM1),针对胰岛β细胞的CD8+ CTL
多发性硬化症(MS),髓鞘碱性蛋白(MBP)
13.自身抗体的特性(熟悉)
自身免疫病的重要标志
高滴度存在于自身免疫病患者体内
与疾病的活动性相关
参与免疫病理性损伤
14.抗核抗体检测的意义(掌握):均质型,斑点型,核膜型,核仁型
16.(掌握)浆细胞功能异常导致免疫球蛋白异常增殖性疾病分为良性增殖病和恶性增殖病两大类疾病。
17.M蛋白检测方法(掌握方法):蛋白区带电泳电泳、免疫电泳、免疫比浊法、免疫固定电泳、
M蛋白检测的意义:(掌握) 异常单克隆免疫球蛋白临床上多见于多发性骨髓瘤、高丙种球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链病、轻链病等。
18.免疫缺陷病的特点免(熟悉);反复感染 易发肿瘤 高度伴发自身免疫病的倾向,以类风湿关节炎和恶性贫血等多见。遗传倾向 临床表现和病理损伤复杂多样
19.掌握)体液免疫缺陷病:以化脓性球菌感染为主,细胞免疫缺陷病:以细胞内寄生病原体感染为主
20.HIV感染的免疫学特征(掌握)
CD4﹢T细胞数量显著减少。
Th1细胞与Th2细胞平衡失调。
抗原呈递细胞功能降低。
B细胞功能异常,表现为多克隆激活、高Ig血症和产生多种自身抗体。
21.AIDS的典型临床表现(掌握);机会性感染, 恶性肿瘤, 神经系统损害
22.HIV抗体检测(掌握):HIV感染后2~3月可出现抗体,初筛试验:ELISA法 确认试验:免疫印迹法。CD4+T细胞计数是反映HIV感染患者免疫系统损害状态的最明确指标。
23.常见肿瘤抗原及其意义(掌握)
24.肿瘤标志物及其特点(熟悉):与肿瘤相伴产生;抗原或激素或酶蛋白;存在于血液、体液及组织中
可定量或定性检测到;可以作为辨认和追踪肿瘤存在和发展的标志
24.(掌握)免疫检验质量控制包括对定量实验、半定量实验和定性实验三个方面的监控
25.Rayleigh原理(熟悉):即散射光的强度与复合物的量呈正比,与散射光的夹角呈正比,与波长呈反比。
26熟悉 ,IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白,主要由黏膜下淋巴组织中的浆细胞分泌,为亲细胞抗体,引起I型超敏反应;与机体抗寄生虫免疫有关
27.IgE 检测意义(掌握)
增高:Ⅰ变态反应性疾病
非变态反应性疾病:IgE骨髓瘤、寄生虫感染肝炎、SLE、RA 降低:原发无丙种球蛋白血症
以下为病例题知识点:
1.关于器官移植病例题
一例链球群感染后肾炎、肾衰竭后肾脏移植
男,14岁。首诊前3个月,感冒发烧病史。首次就诊原因:头痛,乏力,眼睑浮肿。实验室检查:蛋白尿,尿红细胞阳性。抗炎症治疗1周,稍好,恢复上学,正常饮食。2月后,恶心、乏力,眼睑浮肿加重,24小时尿量减少,蛋白管型。住院治疗2个月,肾脏衰竭加重,每周透析3到4次。活检见肾小球内CIC沉淀,抗人IgA、IgG阳性。
建议:申请肾移植手术。亲属自愿做HLA配型,同时申请自无关人群寻找供体肾。半年后分配到合适供体肾(无关人群);检查身体,符合手术要求,进行肾脏移植手术。术后临床观察并服用移植排斥抑制药物,补充EPO。定期到医院检测血药浓度,检测免疫功能。移植后8年后生存状态良好,但长期服用抗移植排斥药物。
(1)肾脏移植前选择供者的检查项目:
传染性疾病病原学检查
ABO血型配型
HLA配型符合要求
供受双方淋巴细胞混合培养阴性
(2)移植前免疫学检测
ABO血型抗原一致
HLA配型 主要做HLA-DR、A、B
混合淋巴细胞反应:阴性
受者血清细胞毒性实验:阴性 受者血清+供者细胞
(2)肾源选择的原则(HLA配型与预后关系):
以ABO血型完全相同者为好,选择最佳HLA配型的供者器官,供者无传染性疾病
(3)移植后的临床观测:T细胞总数、CD4/CD8比值、IL-2及其受体的检测,判断排斥反应的发生和评估免疫抑制剂治疗效果
2.关于类风湿因子(RF)病例题
(1) RF为抗变性的IgG的自身抗体,主要为IgM型,也有IgG,IgA型
(2)检测方法:胶乳颗粒凝集实验 、速率散射比浊法 、 ELISA
(3)临床应用:
“RF在RA、SLE等多种自身免疫性疾病患者中均可被检出。(RF阳性提示自身免疫病发生。);
RF滴度与RA患者临床表现呈正相关;
IgG-RF与RA患者的滑膜炎、血管炎和关节症状密切相关,常伴随IgM-RF同时出现,在正常人及非RA患者中很难检(IgG和IgM型RF同时出现,提示可能为RA发病);
IgA-RF与RA患者关节症状的严重程度及骨质破坏有显著相关性。
3.关于速发型超敏的病例题
(1)I型超敏反应免疫学检测方法:
体外检测①血清总IgE的测定:方法有;免疫比浊法、化学发光免疫测定、酶联免疫吸附实验。意义;血清IgE水平升高见于寄生虫感染、过敏性哮喘,特发性皮炎等
②特异性IgE的测定:酶联免疫吸附试验、免疫印迹技术(常用)、放射性变应原吸附实验
体内试验①皮肤试验:包括皮内试验和点刺试验
②支气管激发试验。
③食物激发试验
4.关于SLE的病例题
(1) SLE的致病机制:患者体内的自身抗体与相应抗原结合形成的免疫复合物可沉积在心血管结缔组织,肾小球基底膜,浆膜等,复合物在局部激活补体,吸引中性粒细胞浸润,造成局部组织的慢性炎症损伤。
(2) SLE患者可表现为:发热,皮疹,关节痛,肾损害,贫血等, 体内产生抗核抗体和其他自身抗体
(3)SLE免疫学检测方法:
抗核抗体(ANA)检测:采用间接免疫荧光法(最佳筛查试验),
抗双链DNA抗体检测(对诊断的特异性较高):间接免疫荧光法、ELISA
【名词解释】
1.抗原抗体反应:抗原抗体反应是指抗原与相应抗体在体内和体外发生的特异性结合反应
2.亲和性;抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间的结合强度,
3.亲和力;一个完整的抗体结合部位与若干个抗原表位之间结合的强度
4.带现象;由于抗原或抗体过量,形成免疫复合物少,沉淀物少,上清液中可测出游离的抗原或抗体
6.抗血清:将免疫原按照一定的免疫程序免疫动物,一定时间后,采集动物血液,分离得到含有抗体的血清。
7凝集反应;细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原,或可溶性抗原(或抗体)与载体颗粒结合成致敏颗粒后,它们与相应抗体(或抗原)发生特异性反应,在适当电解质存在下,形成肉眼可见的凝集现象
8.直接凝集反应:颗粒性抗原直接与抗体结合,在电解质的作用下,出现肉眼可见的凝集现象(这个名解删除)
9.间接凝集反应:将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面(加到了反应面积),然后与相应的抗体或抗原反应,在电解质的作用下,出现肉眼可见的凝集现象这个名解删除)
10.沉淀反应:可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现的沉淀现象,其特性与经典的抗原抗体反应相同。
11.比放射活性:单位质量标记物中所含的放射性强度(每分子被标记物平均所结合放射性原子的数目)单位: Ci/g
12.发射光谱:指固定激发波长,在不同波长下记录的样品发射荧光的强度。
13.激发光谱:指固定检测波长,用不同波长的激发光激发样品,记录相应的荧光发射强度。
14.荧光效率:荧光物质将光能转变成荧光的百分率,一定范围内与激发光强度呈正相关。
15.荧光寿命:荧光物质被激发后所产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间。
16.荧光猝灭:荧光物质在某些理化因素作用下,发射荧光减弱甚至消退,称为荧光淬灭。
17.包被;将抗原或抗体结合于固相载体的过程
18.封闭:抗原或抗体包被后,为防止固相载体没有完全包被,可能在后续实验中非特异性吸附蛋白,因此用1%~5%的牛血清白蛋白重新包被,覆盖所有蛋白结合位点,消除非特异性吸附
19.固相膜免疫分析技术:以微孔膜作为固相载体,利用液体可以流过微孔膜也可以通过毛细管作用在膜上向前移行的特性,以酶标记或各种有色粒子(胶体金,胶体硒等)标记抗体或抗原作为标记物,通过抗原抗体反应或抗体检测的快速检验方法
20.免疫金;指胶体金与抗原或抗体等大分子物质的结合,习惯称金探针
21.免疫组织化学技术:又称免疫细胞化学技术,是指用标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项免疫检测方法。
22.抗原修复:免疫组化在制片的过程中由于广泛的蛋白交联而使其组织的某些抗原决定簇发生遮蔽、致使免疫细胞化学的信号减弱或消失等不良效应。所以,
使遮蔽的组织抗原决定簇重新暴露的方法,即抗原修复。
23.CH50;补体总活性测定方法是以红细胞的溶解为指示,以50%溶血为判断终点
24.不完全抗体。
1.超敏反应(hypersensitivity)又称变态反应,是指机体再次接受相同抗原刺激后,发生的以组织细胞损伤或生理功能紊乱为主的特异性免疫应答
2.变应原(allergen):引起超敏反应的抗原称之为变应原。
3.自身免疫耐受(autoimmune-tolerance):正常情况下,机体免疫系统能识别“自我”,对自身组织成分不发生免疫应答反应,或仅产生微弱的免疫应答,此为自身免疫耐受。
4.自身免疫(autoimmunity):是指机体免疫系统针对自身成分发生免疫应答反应,出现自身抗体或致敏淋巴细胞的现象。
5.自身免疫病(autoimmune disease,AID):因自身免疫反应导致组织器官损伤或功能障碍所致疾病。
6.混合性结缔组织病(MCTD:自身免疫病通常由Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ超敏反应所引发,常有两种或两种以上的自身免疫病混合出现的临床表现
7.自身抗体(autoantibody)(掌握),是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白,是自身免疫和自身免疫病重要特征之一,某些自身免疫病伴有特征性的自身抗体(谱)。
8.抗核抗体(ANA)(掌握):是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称。ANA 的性质主要是IgG,也有IgM、IgA 和IgD。
9.免疫增殖性疾病(immunoproliferative disease)是指由于淋巴细胞异常增殖所引起的疾病,多属于血液疾病范畴
10.多发性骨髓瘤(multiple myeloma)是浆细胞异常增生的恶性肿瘤,也称浆细胞瘤(plasnocytoma),因其引起骨破坏而得名。患者常伴有贫血、肾功损害和免疫功能障碍
11.巨球蛋白血症(macroglobulinemia)是以分泌IgM的浆细胞恶性增殖为病理基础的疾病。好发于老年男性。
12.M蛋白(掌握):。当某一类Ig显著增加,含量≥30g/L,理化性质一致时,称为单克隆蛋白,即M蛋白。M蛋白见于免疫增殖病,如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、重链病、轻链病和恶性淋巴瘤等
13.免疫缺陷病(ID).由遗传因素或其他原因造成的免疫系统发育或免疫应答障碍而导致的一种或多种免疫功能不全称为免疫缺陷(immunodeficiency),由此所致的各种临床综合征称为免疫缺陷病
14.肿瘤抗原(tumor antigen):是指在肿瘤发生、发展过程中新出现的或过度表达的抗原物质。
15.肿瘤特异性抗原(TSA)。 为肿瘤细胞所特有,只表达于肿瘤细胞,而不存在于任何处于不同发育阶段的正常细胞
16.肿瘤相关抗原(TAA。指非肿瘤细胞所特有的抗原成分,也少量存在于正常细胞,但在肿瘤发生的机体可异常表达,可分为胚胎性抗原和分化抗原两种类型。
17.质量保证(QA)。质量保证是临床实验室为了证明给患者做提供实验数据的有效性,而采取的一系列措施,涵盖实验室进行检测前后的所用活动。
18.准确度(accuracy)待测物的测定值与其真值的一致性程度
19.精密度(precision) 在一定条件下进行多次测定,所得结果之间的符合程度
20.标准品(standard)。指性质纯的处于一定基质中已知含量或成分且特性明确的物质,通常用于比较检测未知的物质或成分
21.正确诊断指数(Youden’s index)又称约登指数,指将灵敏度和特异度结合的评价某种免疫学实验的综合指标。其值是灵敏度与特异度之和减去1,大小范围从0到1 。
22.选择性蛋白尿指数(掌握),SPI= (尿Ig/血清Ig)/(尿TRF/血清TRF)
23.冷球蛋白:在低温下发生沉淀,加温后又复溶的免疫球蛋白。 0~4℃沉淀,37 ℃恢复溶解
24.SD抗原。由血清学分型法检测的抗原称为SD抗原,包括,HLA-A,HLA-C,HLA-DR,HLA-DQ
25.LD抗原.由细胞学分型法检测的抗原称为LD 抗原包括HLA-D,HLA-DP
26.混合淋巴细胞反应:又称混合淋巴细胞培养,是指两个无关个体、功能正常的淋巴细胞在体外混合培养时,由于HLA II类抗原中D和DP抗原不同,可相互猜忌对方的T细胞发生增值。
【大题以及知识点】
一、.抗原抗体结合力有哪些(掌握)
静电引力,范德华力(最弱),氢键(特异性),疏水作用力(最强)
二、抗原抗体反应的特点(掌握)
特异性,比例性,可逆性,阶段性
注意:抗体过量称为前带,抗原过量称为后带
三、抗原抗体反应体系中为何要确定抗原、抗体的最适比例。(掌握)
抗原抗体分子比例适合的范围称为抗原抗体等价带,在此范围内,抗原抗体结合充分,沉淀物形成快而多。在等价带前后,由于抗体和抗原过量,形成沉淀物少,上清液中可测出游离的抗体或抗原,这种现象称为带现象,由于带现象的干扰,可导致假阴性结果,因此需要确定合适比例
四、什么是免疫佐剂,免疫佐剂的种类(熟悉)
预先或与抗原同时注入体内,可增加机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答的类型的物质,简称佐剂。分为福氏完全佐剂,福氏不完全佐剂,两者的区别在于前者含有卡介苗。
五、什么是直接Coombs实验,直接和间接coombs实验有何区别?(掌握) 抗球蛋白试验是抗球蛋白参与的间接血凝试验,用于检测抗红细胞不完全抗体。直接coombs试验用于检测吸附于红细胞表面的不完全抗体,间接coombs试验用于检测血清中游离的不完全抗体。
六、免疫浊度法的原理?和影响因素?(掌握)
原理:可溶性抗原与相应的抗体特异性结合,两者在合适比例和增浊剂作用下,可以快速形成一一定大小的免疫复合物,使其反应液出现浊度。它的最大优点就是稳定性好,敏感度高,精确度高。简便快速,易于自动化,无放射性核素污染。
因素:抗原抗体的比例、抗体的质量、抗原抗体反应的环境、增浊剂。
七、碘125的优势有哪些?(掌握)
1.化学性质活泼,标记方法简单,核素丰度高
2.产生的γ射线,便于测量且测量的效率高
3.半衰期60天,易于废料处理。
九、常用荧光物质种类和用途 (掌握)
1.异硫氰酸荧光素(FITC)最大吸收波长490—495nm,最大发射波长520-530nm 呈现黄绿色荧光,常用于双标记免疫荧光染色
2.四乙基罗丹明(RB200),棕红色常用与双重标记或对比染色
3.藻红蛋白(PE)最大吸收波长565nm,常用于双标记免疫荧光染色
4.镧系螯合物如铕Eu3+,常用于时间分辨荧光免疫侧定
5.酶作用后产生的荧光物质,常用于荧光酶免疫分析
十、时间分辨荧光免疫测定的原理(掌握)
通常各组织、蛋白或者其他化合物,在激发光的照射下都能发出一定波长的自发荧光,但他们的荧光寿命通常较短,最长不超过20秒钟。而镧系元素螯合物的荧光寿命较长,因此在检测时可在短寿命本底自发荧光完全衰变后,再测定
镧系元素螯合物的特异性荧光信号,可有效的降低本底荧光的干扰,故称为。。
十二、荧光偏振免疫测定原理(掌握)
在反应液中,荧光素标记的小分子抗原转动速度快,失去方向性;但与抗体结合后,荧光素标记抗原分子增大,转动速度变慢,受偏振光激发后发射出的偏振荧光明显增强。当待检抗原过多时,由于竞争性结合,形成小分子抗原抗体复合物少,游离的小分子抗原就多,受偏振光激发后,发射的偏振荧光就越弱,即待检抗原含量与偏振荧光强度呈反比。
十三、酶免疫技术中,常用的固相载体有哪些(掌握)
1.塑料制品:聚苯乙烯,聚氯乙烯
2.微粒。
3.膜载体;NC,PVDF
十四、ELISA的原理和方法类型?(必须掌握)
原理:把抗原或者抗体结合到某种固相载体表面,将抗原或抗体与酶连接成酶标抗原或抗体,将受检样品和酶标抗原或抗体按照不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体反应,洗涤复合物与其他物质分开,加入底物,底物被固相载体上的酶催化成有色物,通过定性或定量测有色物即可。
方法类型:1检测抗原的方法:双抗体夹心法、双位点一步法、竞争法
2.检测抗体的方法:间接法、双抗原夹心法、竞争法、捕获法。
十五、均相酶免疫测定的原理和方法类型?(掌握)
原理:利用酶标记物与相应的抗原或抗体结合后,标记酶的活性会发生改变的原理,可以在不将结合和游离酶标记物分离的情况下,通过测定标记酶活性的改变,从而测定抗原或抗体的含量。
方法类型:酶放大免疫分析技术(EMIT)
克隆酶供体免疫分析(CEDIA)
十六、化学发光免疫分析根据标记物的不同分类?(掌握)
1.直接化学发光免疫分析,用化学发光剂(如吖啶脂)直接标记抗原或抗体
2.化学发光酶免疫分析,用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶来标记抗原或抗体
3.电化学发光免疫分析,以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗原或抗体
4,鲁米诺氧途径免疫分析,利用均相化学发光检测技术,参与免疫反应的一个抗体上包被了感光珠,另一个抗体上包被了发光珠。
十七、生物素亲和素放大作用的原理?(掌握)
由于一个个亲和素分子能同时结合4个生物素,且一个生物大分子可标记多个生物素而产生级联放大效应,提升检测敏感度
十八、DICA和DIGFA的原理(掌握)
1.DICA 即斑点金免疫层析试验,是将胶体金标记技术和蛋白质层析技术相结合的以硝酸纤维素膜为载体的快速的固相膜免疫分析技术,标本溶液受载体膜毛细管作用移动过程中,被固定于载体膜上某一区域的抗体或抗原结合固相化,通过胶体金呈色条来判试验结果
2.DIGFA 即斑点金免疫渗滤试验,是在以硝酸纤维素膜为载体并包被了抗原或抗体的渗滤装置中,依次滴加标本、免疫金以及洗涤液,将微孔滤膜贴置于吸水材料上,溶液流经渗滤装置时与膜上的抗原或抗体快速结合并起到浓缩作用,达到快速将检测的目的。
十九、细胞分离的方法?(掌握)
1.外周血单个核细胞的分离:Ficoll分层液法,Percoll分层液法
2.淋巴细胞分离:贴壁粘附法。吸附柱过滤法,percoll分离液法
3.T细胞和B细胞分离:E花环沉降法。尼龙毛柱分离法
4.T细胞亚群分离:磁性微球分离法,荧光激活细胞分离仪分离法。
二十、T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞的主要分化抗原(掌握) T细胞:辅助性T细胞:CD3+ CD4+ CD8-
细胞毒性T细胞:CD3+ CD4- CD8+
B细胞:B1细胞:CD19+ CD5+ B2细胞:CD19+ CD5- NK细胞:CD3- CD56+ CD16+
单核细胞:CD14
二十二、T细胞功能检测(掌握)
1.T细胞增值试验:形态学检查法,3H-TdR渗入法,MTT比色法
2.T细胞分泌功能测定:CK
3.T细胞介导的细胞毒试验:形态学检查法,51Cr释放法,细胞增殖评价法(包括3H-TdR渗入法,MTT比色法)
二十三、CH50的测定原理以及判定结果?(掌握)
原理;在特定的反应系统中,溶血的程度和补体的活性呈正相关,以溶血百分率为纵坐标,相应血清含量为横坐标,可见在轻微溶血和接近完全溶血时,对补
体含量变化敏感度下降,形成特殊的S型曲线,在30%-70%之间斜度最陡,几乎成一条直线,补体量的细微变化也会引起溶血程度的明显改变,故取50%溶血作为判定终点,这一方法称为补体50%溶血实验,即CH50.引起50%溶血所需要的最小补体量为一个CH50单位(U).
判定结果:CH50=(1/终点管稀释血清的用量)*血清稀释度
小点;(掌握)
1.单项扩散试验的应用:可定量定性,但必须先做标准曲线
双向扩散试验的应用:判断抗原抗体的存在以及估计相对含量;分析抗原或者抗体相对分子量;分析抗原的性质(相切表示两抗原部分相同,相吻合表示完全相同,相交表示完全不同);用于抗体效价滴定(以出现沉淀线最高的抗体稀释度作为抗体效价);鉴定抗原或抗体纯度
2.化学发光剂的分类:
直接化学发光剂:1.吖啶脂,碱性条件下被H2O2氧化 2.三联吡啶钌,是电化学发光剂
间接化学发光剂:1.鲁米诺及其衍生物 2.AMPPD
3.标本固定的目的;
使细胞内蛋白质凝固,细胞内分解酶反应终止以防止细胞自溶,保持细胞形态和结构
保存组织细胞抗原性,防止标本脱落,除去妨碍标本结合的类脂,便于保存 抑制组织中的细菌,防止组织腐败和在后续组织制备中的细胞结构和成分的改变
4.抗原修复的方法有:1.酶消化法 2.盐酸水解法3.微波法 4.高压锅法 5.煮沸法
5.PAP复合物是:2个酶抗体和3个过氧化物酶分子组成
6.SPA结合Fc段,不影响抗体活性,具有双价结合能力
7.中性粒细胞趋化功能检测方法:滤膜渗透法,琼脂糖平板法
8.免疫固定电泳临床上最常用于M蛋白的鉴定
9.常见的酶:(1)辣根过氧化物酶(HRP):
邻苯二胺(OPD),橙黄色,致癌性
四甲基联苯胺(TMB),蓝色,优于OPD
(2)碱性磷酸酶(ALP):P-npp,
(3)β-半乳糖甘酶;4-MUG
10.Ficoll分层液法属于单次差速密度梯度离心法,Percoll分层液法属于连续差速密度梯度离心法
1.I型超敏反应(熟悉):IgE参与,肥大细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞参与
2.常见Ⅰ型超敏反应性疾病(熟悉)
药物过敏性休克 血清过敏性休克 呼吸道过敏反应 消化道过敏反应 皮肤过敏反应
3.I型超敏反应免疫学检测(掌握)
(一) 1.血清总IgE的测定:方法有;免疫比浊法、化学发光免疫测定、酶联免疫吸附实验。意义;血清IgE水平升高见于寄生虫感染、过敏性哮喘,特发性皮炎等
2.特异性IgE的测定:酶联免疫吸附试验、免疫印迹技术(常用)、放射性变应原吸附实验
(二)激发试验: 是模拟自然发病条件,用少量超敏原引起一次较轻的超敏反应发作,达到确定超敏原的一种体内试验。
皮肤试验:皮内试验:迟发型,48~72h内观察红肿硬结
速发型,0.01-0.02ml,15~30min,内观察风团 点刺试验:看红晕
斑贴试验(Ⅳ型超敏反应)
4.Ⅱ型超敏反应(熟悉):IgM和IgG参与,补体、吞噬细胞、NK细胞参与 组织损伤或器官功能改变的机制:细胞溶解、吞噬作用、ADCC作用、刺激或抑制靶细胞
5.常见Ⅱ型超敏反应性疾病(熟悉) :
输血反应
新生儿溶血症
自身免疫性溶血性贫血
甲状腺功能亢进(刺激性抗体)
重症肌无力(阻断或抑制性抗体)
药物过敏性血细胞减少症
肺出血肾炎综合征
6.Ⅲ型超敏反应(熟悉):IgG参与,中性粒细胞、碱性粒细胞、肥大细胞、血小板 参与
7.常见Ⅲ型超敏反应性疾病(熟悉):Arthus反应、类Arthus反应,血清病、链球菌感染后肾小球肾炎、类风湿关节炎、系统性红斑狼疮
8.Ⅲ型超敏反应免疫学检测(免疫复合物的检测)(掌握)
物理法-PEG法
ELISA
补体法-C1q结合试验
抗球蛋白法-mRF固相抑制试验
细胞法- Raji细胞试验
9.常见Ⅳ型超敏反应性疾病(熟悉):感染性超敏反应 、接触性皮炎 、移植排斥反应
10.Ⅳ型超敏反应免疫学检测(熟悉);斑贴试验 、结核菌素试验
11.自身免疫病的分类(掌握)
按器官特异性分为两类; 器官特异性自身免疫病(例如慢性甲状腺炎、ITP、Graves病
非器官特异性自身免疫病(如RA,SLE
12.常见的自身免疫性疾病(掌握)
一)由II型超敏反应引起的自身免疫病
自身免疫性溶血性贫血(AIHI ),体内出现抗红细胞自身抗体
免疫性血小板减少性紫癜(ITP),抗血小板抗体
重症肌无力(MG),抗乙酰胆碱受体的自身抗体
甲亢,抗促甲状腺激素受体的自身抗体
肺出血肾炎综合征,抗肾小球基底膜Ⅳ型胶原抗体,由于肺泡基底膜与肾小球基底膜有共同抗原,所以抗体可同时作用于肺组织
二)免疫复合物引起的自身免疫性疾病
系统性红斑狼疮(SLE),抗核抗体及其他自身抗体
类风湿性关节炎(RA),抗变性IgG抗体
三)T细胞对自身抗原应答引起的自身免疫性疾病
型糖尿病(DM1),针对胰岛β细胞的CD8+ CTL
多发性硬化症(MS),髓鞘碱性蛋白(MBP)
13.自身抗体的特性(熟悉)
自身免疫病的重要标志
高滴度存在于自身免疫病患者体内
与疾病的活动性相关
参与免疫病理性损伤
14.抗核抗体检测的意义(掌握):均质型,斑点型,核膜型,核仁型
16.(掌握)浆细胞功能异常导致免疫球蛋白异常增殖性疾病分为良性增殖病和恶性增殖病两大类疾病。
17.M蛋白检测方法(掌握方法):蛋白区带电泳电泳、免疫电泳、免疫比浊法、免疫固定电泳、
M蛋白检测的意义:(掌握) 异常单克隆免疫球蛋白临床上多见于多发性骨髓瘤、高丙种球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链病、轻链病等。
18.免疫缺陷病的特点免(熟悉);反复感染 易发肿瘤 高度伴发自身免疫病的倾向,以类风湿关节炎和恶性贫血等多见。遗传倾向 临床表现和病理损伤复杂多样
19.掌握)体液免疫缺陷病:以化脓性球菌感染为主,细胞免疫缺陷病:以细胞内寄生病原体感染为主
20.HIV感染的免疫学特征(掌握)
CD4﹢T细胞数量显著减少。
Th1细胞与Th2细胞平衡失调。
抗原呈递细胞功能降低。
B细胞功能异常,表现为多克隆激活、高Ig血症和产生多种自身抗体。
21.AIDS的典型临床表现(掌握);机会性感染, 恶性肿瘤, 神经系统损害
22.HIV抗体检测(掌握):HIV感染后2~3月可出现抗体,初筛试验:ELISA法 确认试验:免疫印迹法。CD4+T细胞计数是反映HIV感染患者免疫系统损害状态的最明确指标。
23.常见肿瘤抗原及其意义(掌握)
24.肿瘤标志物及其特点(熟悉):与肿瘤相伴产生;抗原或激素或酶蛋白;存在于血液、体液及组织中
可定量或定性检测到;可以作为辨认和追踪肿瘤存在和发展的标志
24.(掌握)免疫检验质量控制包括对定量实验、半定量实验和定性实验三个方面的监控
25.Rayleigh原理(熟悉):即散射光的强度与复合物的量呈正比,与散射光的夹角呈正比,与波长呈反比。
26熟悉 ,IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白,主要由黏膜下淋巴组织中的浆细胞分泌,为亲细胞抗体,引起I型超敏反应;与机体抗寄生虫免疫有关
27.IgE 检测意义(掌握)
增高:Ⅰ变态反应性疾病
非变态反应性疾病:IgE骨髓瘤、寄生虫感染肝炎、SLE、RA 降低:原发无丙种球蛋白血症
以下为病例题知识点:
1.关于器官移植病例题
一例链球群感染后肾炎、肾衰竭后肾脏移植
男,14岁。首诊前3个月,感冒发烧病史。首次就诊原因:头痛,乏力,眼睑浮肿。实验室检查:蛋白尿,尿红细胞阳性。抗炎症治疗1周,稍好,恢复上学,正常饮食。2月后,恶心、乏力,眼睑浮肿加重,24小时尿量减少,蛋白管型。住院治疗2个月,肾脏衰竭加重,每周透析3到4次。活检见肾小球内CIC沉淀,抗人IgA、IgG阳性。
建议:申请肾移植手术。亲属自愿做HLA配型,同时申请自无关人群寻找供体肾。半年后分配到合适供体肾(无关人群);检查身体,符合手术要求,进行肾脏移植手术。术后临床观察并服用移植排斥抑制药物,补充EPO。定期到医院检测血药浓度,检测免疫功能。移植后8年后生存状态良好,但长期服用抗移植排斥药物。
(1)肾脏移植前选择供者的检查项目:
传染性疾病病原学检查
ABO血型配型
HLA配型符合要求
供受双方淋巴细胞混合培养阴性
(2)移植前免疫学检测
ABO血型抗原一致
HLA配型 主要做HLA-DR、A、B
混合淋巴细胞反应:阴性
受者血清细胞毒性实验:阴性 受者血清+供者细胞
(2)肾源选择的原则(HLA配型与预后关系):
以ABO血型完全相同者为好,选择最佳HLA配型的供者器官,供者无传染性疾病
(3)移植后的临床观测:T细胞总数、CD4/CD8比值、IL-2及其受体的检测,判断排斥反应的发生和评估免疫抑制剂治疗效果
2.关于类风湿因子(RF)病例题
(1) RF为抗变性的IgG的自身抗体,主要为IgM型,也有IgG,IgA型
(2)检测方法:胶乳颗粒凝集实验 、速率散射比浊法 、 ELISA
(3)临床应用:
“RF在RA、SLE等多种自身免疫性疾病患者中均可被检出。(RF阳性提示自身免疫病发生。);
RF滴度与RA患者临床表现呈正相关;
IgG-RF与RA患者的滑膜炎、血管炎和关节症状密切相关,常伴随IgM-RF同时出现,在正常人及非RA患者中很难检(IgG和IgM型RF同时出现,提示可能为RA发病);
IgA-RF与RA患者关节症状的严重程度及骨质破坏有显著相关性。
3.关于速发型超敏的病例题
(1)I型超敏反应免疫学检测方法:
体外检测①血清总IgE的测定:方法有;免疫比浊法、化学发光免疫测定、酶联免疫吸附实验。意义;血清IgE水平升高见于寄生虫感染、过敏性哮喘,特发性皮炎等
②特异性IgE的测定:酶联免疫吸附试验、免疫印迹技术(常用)、放射性变应原吸附实验
体内试验①皮肤试验:包括皮内试验和点刺试验
②支气管激发试验。
③食物激发试验
4.关于SLE的病例题
(1) SLE的致病机制:患者体内的自身抗体与相应抗原结合形成的免疫复合物可沉积在心血管结缔组织,肾小球基底膜,浆膜等,复合物在局部激活补体,吸引中性粒细胞浸润,造成局部组织的慢性炎症损伤。
(2) SLE患者可表现为:发热,皮疹,关节痛,肾损害,贫血等, 体内产生抗核抗体和其他自身抗体
(3)SLE免疫学检测方法:
抗核抗体(ANA)检测:采用间接免疫荧光法(最佳筛查试验),
抗双链DNA抗体检测(对诊断的特异性较高):间接免疫荧光法、ELISA