175
特点，一旦治疗不及时或治疗不当很容易导致患儿死亡。细菌是引发小儿感染性腹泻的主要病原，主要包括沙门菌、志贺氏菌、大肠埃希菌及弧菌等病原菌[4]。近年来，随着抗生素在临床上的逐渐应用，感染性腹泻的发病率及病死率得到了有效的控制，但是许多临床医师在使用抗生素时存在着明显的滥用情况，严重影响了患儿的治疗[5]。本次研究结果显示，本组检出的84株病原菌中沙门氏菌共有56株，占所有检出病原菌的66.7%，其中鼠伤寒沙门菌33株（58.9%）。20株大肠埃希菌对于多种抗菌药物均普遍具有耐药性，其中对于氨苄西林和哌拉西林的耐药率均非常高，共检出6株ESBL 菌株，共占30.0%。沙门菌和志贺氏菌对于第3代头孢菌素和头孢哌酮/舒巴坦为基本敏感。所有菌株对于哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南类药物均比较敏感。由此可见，儿童感染性腹泻分离的病原菌中主要以沙门氏菌为主，大肠埃希菌对于ESBLs 类抗菌药物的耐药则比较
严重，故临床上应根据病原菌的分布及耐药性情况来选择合理的抗菌药物。
参考文献
[1] [2] [3] [4]
林羡华，冉陆，马莉，等. 2010年全国其他感染性腹泻报告病
例信息分析[J]. 中国食品卫生杂志，2011，21(5)：385-389.
于国慧，董方，甄景慧，等. 北京地区儿童感染性腹泻病原学和耐药性分析[J]. 临床儿科杂志，2010，28(6)：535-538.
颜善活，卓永光. 钦州地区儿童细菌感染性腹泻的病原菌及药敏试验分析[J]. 检验医学与临床，2010，7(9)：848-850.
于国慧，董方，刘锡清，等. 2009年北京地区儿童感染性腹泻病原学及耐药性分析[J]. 中国小儿急救医学，2011，18(1)：33-35.
时花，杨晓云，周瑞，等. 儿童感染性腹泻细菌谱及耐药性变迁临床分析[J]. 安徽医学，2013，34(5)：571-573.
[5]
病原微生物检测技术进展
张艳秋
【摘要】 快速鉴定病原微生物的检验技术的更新换代非常迅速，其主
要原因在于微生物的生理特性，它们种类繁多且变异迅速。对病原体进行快速、准确的检测是十分必要的。常规的检测方法操作复杂，耗时长，且对操作人员的要求极高，已经远远不能满足现在对各种病原体的诊断和流行病学研究，微生物检测技术必须得到快速发展，才能适应未来发展的要求。【关键词】微生物；检测技术；进展【中图分类号】R446.5 【文献标识码】B 【文章编号】1674-9308（2015）09-0175-02doi ：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.09.151
由于传统的镜检方法方便快捷，因此对于类似螺旋体感染、淋球菌感染、结核分枝杆菌等具有特殊形态病原微生物感染的初步诊断，实验室里仍然将镜检方法作为重要检测手段。1.2 分离培养
分离培养用于从检验标本或培养物的多种细菌中分离出某一种细菌的检验，但传统的分离培养方法存在着检测周期较长且不能批量处理样本的缺陷。随着检验设备的技术性进步，目前生产出的自动培养和鉴定系统克服了传统方法的缺陷，较先进的全自动微生物分析仪，不但可以批量处理，而且可同时做细菌鉴定和药敏试验缩短了检测周期。2 酶联免疫与免疫磁珠分离技术2.1 酶联免疫
酶联免疫测试技术是通过已知的抗体或抗原检测病原体的抗原或抗体的一种血清学检测技术，此技术可以对病原体进行快速鉴定。酶联免疫技不但可以检测样本中病原体抗原，而且可以检测机体的抗体成分，此技术的应用在很大程度上提升了血清学检测的特异性和敏感性，全自动免疫分析仪就因其具有高灵敏度和耗用时间短的特点而受到重视。2.2 免疫磁珠分离技术
免疫磁珠分离技术（IMBS）是将特定病原体的单抗或多抗或二抗偶联到磁珠微球上并通过抗原抗体反应形成磁珠，通过外部磁场磁力，将目标病原体分离出来的微生物检测技术。作为微生物检测领域中的一种新技术，IMBS在近年来得到了广泛应用，目前已经开发出了针对各种病原体的免疫磁珠。免疫磁珠分离技术(IMBS)特点是不但减少检测耗时，而且可提高检测限。3 基因检测
由于病原微生物的核酸序列具有特异性，因此鉴别病原微生物可能过检测其特有的基因片段序列来实现。3.1 核酸杂交技术
Progress Pathogen Detection Technology
ZHANG Yanqiu, Mulan County Disease Control and prevention Center, Haerbin 151900, China
[Abstract] Rapid identification of pathogenic microorganisms upgrading inspection techniques very quickly, mainly due to microbial physiological characteristics, the variety and variability of their rapidly. Pathogens rapid and accurate detection is essential. Conventional detection methods complex operation, time-consuming, and extremely high demands on the operator, has been far from satisfying a variety of pathogens present diagnostic and epidemiological studies, rapid microbial detection technology must be developed in order to adapt to the future development of Claim.[Key words] Microorganism, Detection technology, Progress
病原学诊断已从病原体水平，深入到分子水平、基因水平，如PCR 技术、基因芯片技术等。这些技术通过自动化完成检测，耗时短，准确性和灵敏度都很高。这样的现代生物科学技术能够对病原微生物做出及时的诊断和鉴定，可大大减少人类对其感染的致病率和死亡率。本文对一些微生物检测技术进行简要介绍。1 病原微生物检测传统方法
病原微生物传统的实验室检查方法是将标本涂片染色后在显微下进行镜检和采用在培养基上接种后进行分离培养。1.1 涂片镜检
151900 哈尔滨市木兰县疾病预防控制中心作者单位：
176 核酸原位杂交和膜上印迹杂交两种技术主要应用在病原微生物检测中。其中核酸原位杂交是直接与细胞或组织切片中的核酸进行杂交，而膜上印迹杂交是标记的核酸探针与从微生物细胞中分离出来的核酸进行杂交，与其他方法比，核酸杂交种技术除了更加简便快速外，在特异性和敏感性上也都较为突出。3.2 基因芯片技术
通过对上述核酸分子杂交技术发展和延伸，在微生物检测领域更应用了基因芯片(DNA chip)技术，该技术是通过微加工技术，将数以万计甚至百万计的基因探针有规律地排列成二维DNA 探针阵列，固定后与标记的样品分子进行核酸杂交，用于基因检测工作。基因芯片技术的特点是除了缩短了确诊所需要的时间外，还能检测出病原体耐药的情况。但基因芯片技术同样还有些问题有待解决，如提高芯片的特异性和检测信号的敏感性，降低芯片的制作成本等，而且多数芯片都需要昂贵的检测仪器，这些问题使得基因芯片到目前主要局限于实验室研究而未能广泛应用于临床病原微生物的检测与鉴定。 3.3 聚合酶链反应技术
作为一种DNA 的体外扩增技术，聚合酶链反应技术是用已知寡核苷酸引物引导未知片段中微量待测基因片段并进行扩增的技术。利用PCR 可以对待测基因进行扩增的特性对病原体感染进行早期诊断，是特别适用的。如果特异性不强，可能会造成假阳性的出现，虽是如此，PCR技术仍然发展迅速，通过对PCR 技术进行改进，使之派生出许多新用途，从而使PCR 技术得到了进一步的完善。其中多重PCR、实时荧光定量PCR 受到广泛关注。3.3.1 多重PCR 技术
多重PCR 技术大量样本的分析与鉴定适合采用此方法。目前采用基因芯片技术与多重PCR 相结合的技术也大量应用于实际工
[2] [3] [1]
[1]
作中。由于通过PCR 对目的基因进行放大结合基因芯片的荧光探针增加检测的灵敏性和特异性，如此达到两种检测技术优势的充分发挥[2]。
3.3.2 实时荧光定量PCR
实时荧光定量PCR 原理是在PCR 反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个进程，其特点是灵敏高、特异性强，同时能够有效地解决PCR 污染问题。荧光基团标记的特异性引物能够反映病原体感染和药物疗效，大多应用于不可人工培养或难以培养的病原体感染的诊断。4 未来展望
从应用角度出发，无论是临床诊疗还是疾病预防，快速准确地对病原体进行检测和鉴定都有着十分重要的意义。当前生物学研究已由宏观领域向微观领域的迅速发展，病原体检测方法也随之延伸到分子水平和基因水平[3]。病原微生物高通量检测技术的快速推进，无疑是适应未平发展需求的结果，由于这些技术具有方便快速、结果精确、无污染及自动化程度高等优点，因此在未来的应用中，高通量诊断技术在病原微生物的诊断分析方面起到的作用将会越来越重要。
参考文献
蔡挺, 李巧云，张顺，等. 基因芯片技术检测常见革兰阴性杆菌
耐药基因的研究[J]. 中华医院感染学杂志，2011，21(21)：4111-4112.
王晓宏，熊正英. 多重PCR-质谱联用技术在病原体检测中的应用及比较[J]. 微生物学免疫学进展，2011，39(4)：81-83.
贺晨，孙鸿燕，邵丽筠，等. 多重PCR 结合基因芯片技术检测11种致病菌方法的建立[J]. 中国实验诊断学，2011，15(4)：587-591.
尿沉渣全自动分析仪与显微镜检测法在尿常规检验中应用的对比分析
祝红娟
【摘要】 目的 对比分析尿沉渣全自动分析仪与显微镜检测法在尿常规检验中应用的意义，探索更高效的检验方案。方法 对我院的5 000份尿液标本进行分析，尿常规检验分别选用尿沉渣全自动分析仪和显微镜检测法、干化学法进行。结果 对比RBC 和WBC 的阳性检出率，干化学法与另外2种检测方法有显著性差异，具统计学意义（P ＜0.05）。结论 我们在进行尿常规的检验时可以将2种方法有机结合，从而提升检验水准。
【关键词】显微镜检测法；尿常规；尿沉渣全自动分析仪；对比分析【中图分类号】R446.12 【文献标识码】B 【文章编号】1674-9308（2015）09-0176-02doi ：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.09.152
Comparative Analysis on the Application of Urine Sediment Analyzer and Automatic Detection in Urine Microscopic Examination
ZHU Hongjuan, Laboratory of Ning'an City People's Hospital, Ning'an 157400 宁安市人民医院检验科作者单位：
157400, China
[Abstract] Objective Comparative analysis of the significance of urinary sediment analyzer with automatic detection in urine microscopy inspection applications. Methods 5 000 cases for clinical urine specimens acquired from our hospital were analyzed, urine test were selected automatic urine sediment analyzer and microscopy, dry chemical method. Results RBC and WBC contrast positive rate, dry chemical method has significant differences with the other two kinds of detection methods, with statistical significance (P
[Key words] Microscopy assays, Urine test, Automatic urine sediment analyzer, Comparative analysis
尿常规在目前临床常规检验中是常见而重要的项目，同时也是住院患者入院时初步检查的必选项目。既往针对尿液常规的检验，采用的传统检测方法就是显微镜检测法[1]。得益于现代医学
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特点，一旦治疗不及时或治疗不当很容易导致患儿死亡。细菌是引发小儿感染性腹泻的主要病原，主要包括沙门菌、志贺氏菌、大肠埃希菌及弧菌等病原菌[4]。近年来，随着抗生素在临床上的逐渐应用，感染性腹泻的发病率及病死率得到了有效的控制，但是许多临床医师在使用抗生素时存在着明显的滥用情况，严重影响了患儿的治疗[5]。本次研究结果显示，本组检出的84株病原菌中沙门氏菌共有56株，占所有检出病原菌的66.7%，其中鼠伤寒沙门菌33株（58.9%）。20株大肠埃希菌对于多种抗菌药物均普遍具有耐药性，其中对于氨苄西林和哌拉西林的耐药率均非常高，共检出6株ESBL 菌株，共占30.0%。沙门菌和志贺氏菌对于第3代头孢菌素和头孢哌酮/舒巴坦为基本敏感。所有菌株对于哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南类药物均比较敏感。由此可见，儿童感染性腹泻分离的病原菌中主要以沙门氏菌为主，大肠埃希菌对于ESBLs 类抗菌药物的耐药则比较
严重，故临床上应根据病原菌的分布及耐药性情况来选择合理的抗菌药物。
参考文献
[1] [2] [3] [4]
林羡华，冉陆，马莉，等. 2010年全国其他感染性腹泻报告病
例信息分析[J]. 中国食品卫生杂志，2011，21(5)：385-389.
于国慧，董方，甄景慧，等. 北京地区儿童感染性腹泻病原学和耐药性分析[J]. 临床儿科杂志，2010，28(6)：535-538.
颜善活，卓永光. 钦州地区儿童细菌感染性腹泻的病原菌及药敏试验分析[J]. 检验医学与临床，2010，7(9)：848-850.
于国慧，董方，刘锡清，等. 2009年北京地区儿童感染性腹泻病原学及耐药性分析[J]. 中国小儿急救医学，2011，18(1)：33-35.
时花，杨晓云，周瑞，等. 儿童感染性腹泻细菌谱及耐药性变迁临床分析[J]. 安徽医学，2013，34(5)：571-573.
[5]
病原微生物检测技术进展
张艳秋
【摘要】 快速鉴定病原微生物的检验技术的更新换代非常迅速，其主
要原因在于微生物的生理特性，它们种类繁多且变异迅速。对病原体进行快速、准确的检测是十分必要的。常规的检测方法操作复杂，耗时长，且对操作人员的要求极高，已经远远不能满足现在对各种病原体的诊断和流行病学研究，微生物检测技术必须得到快速发展，才能适应未来发展的要求。【关键词】微生物；检测技术；进展【中图分类号】R446.5 【文献标识码】B 【文章编号】1674-9308（2015）09-0175-02doi ：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.09.151
由于传统的镜检方法方便快捷，因此对于类似螺旋体感染、淋球菌感染、结核分枝杆菌等具有特殊形态病原微生物感染的初步诊断，实验室里仍然将镜检方法作为重要检测手段。1.2 分离培养
分离培养用于从检验标本或培养物的多种细菌中分离出某一种细菌的检验，但传统的分离培养方法存在着检测周期较长且不能批量处理样本的缺陷。随着检验设备的技术性进步，目前生产出的自动培养和鉴定系统克服了传统方法的缺陷，较先进的全自动微生物分析仪，不但可以批量处理，而且可同时做细菌鉴定和药敏试验缩短了检测周期。2 酶联免疫与免疫磁珠分离技术2.1 酶联免疫
酶联免疫测试技术是通过已知的抗体或抗原检测病原体的抗原或抗体的一种血清学检测技术，此技术可以对病原体进行快速鉴定。酶联免疫技不但可以检测样本中病原体抗原，而且可以检测机体的抗体成分，此技术的应用在很大程度上提升了血清学检测的特异性和敏感性，全自动免疫分析仪就因其具有高灵敏度和耗用时间短的特点而受到重视。2.2 免疫磁珠分离技术
免疫磁珠分离技术（IMBS）是将特定病原体的单抗或多抗或二抗偶联到磁珠微球上并通过抗原抗体反应形成磁珠，通过外部磁场磁力，将目标病原体分离出来的微生物检测技术。作为微生物检测领域中的一种新技术，IMBS在近年来得到了广泛应用，目前已经开发出了针对各种病原体的免疫磁珠。免疫磁珠分离技术(IMBS)特点是不但减少检测耗时，而且可提高检测限。3 基因检测
由于病原微生物的核酸序列具有特异性，因此鉴别病原微生物可能过检测其特有的基因片段序列来实现。3.1 核酸杂交技术
Progress Pathogen Detection Technology
ZHANG Yanqiu, Mulan County Disease Control and prevention Center, Haerbin 151900, China
[Abstract] Rapid identification of pathogenic microorganisms upgrading inspection techniques very quickly, mainly due to microbial physiological characteristics, the variety and variability of their rapidly. Pathogens rapid and accurate detection is essential. Conventional detection methods complex operation, time-consuming, and extremely high demands on the operator, has been far from satisfying a variety of pathogens present diagnostic and epidemiological studies, rapid microbial detection technology must be developed in order to adapt to the future development of Claim.[Key words] Microorganism, Detection technology, Progress
病原学诊断已从病原体水平，深入到分子水平、基因水平，如PCR 技术、基因芯片技术等。这些技术通过自动化完成检测，耗时短，准确性和灵敏度都很高。这样的现代生物科学技术能够对病原微生物做出及时的诊断和鉴定，可大大减少人类对其感染的致病率和死亡率。本文对一些微生物检测技术进行简要介绍。1 病原微生物检测传统方法
病原微生物传统的实验室检查方法是将标本涂片染色后在显微下进行镜检和采用在培养基上接种后进行分离培养。1.1 涂片镜检
151900 哈尔滨市木兰县疾病预防控制中心作者单位：
176 核酸原位杂交和膜上印迹杂交两种技术主要应用在病原微生物检测中。其中核酸原位杂交是直接与细胞或组织切片中的核酸进行杂交，而膜上印迹杂交是标记的核酸探针与从微生物细胞中分离出来的核酸进行杂交，与其他方法比，核酸杂交种技术除了更加简便快速外，在特异性和敏感性上也都较为突出。3.2 基因芯片技术
通过对上述核酸分子杂交技术发展和延伸，在微生物检测领域更应用了基因芯片(DNA chip)技术，该技术是通过微加工技术，将数以万计甚至百万计的基因探针有规律地排列成二维DNA 探针阵列，固定后与标记的样品分子进行核酸杂交，用于基因检测工作。基因芯片技术的特点是除了缩短了确诊所需要的时间外，还能检测出病原体耐药的情况。但基因芯片技术同样还有些问题有待解决，如提高芯片的特异性和检测信号的敏感性，降低芯片的制作成本等，而且多数芯片都需要昂贵的检测仪器，这些问题使得基因芯片到目前主要局限于实验室研究而未能广泛应用于临床病原微生物的检测与鉴定。 3.3 聚合酶链反应技术
作为一种DNA 的体外扩增技术，聚合酶链反应技术是用已知寡核苷酸引物引导未知片段中微量待测基因片段并进行扩增的技术。利用PCR 可以对待测基因进行扩增的特性对病原体感染进行早期诊断，是特别适用的。如果特异性不强，可能会造成假阳性的出现，虽是如此，PCR技术仍然发展迅速，通过对PCR 技术进行改进，使之派生出许多新用途，从而使PCR 技术得到了进一步的完善。其中多重PCR、实时荧光定量PCR 受到广泛关注。3.3.1 多重PCR 技术
多重PCR 技术大量样本的分析与鉴定适合采用此方法。目前采用基因芯片技术与多重PCR 相结合的技术也大量应用于实际工
[2] [3] [1]
[1]
作中。由于通过PCR 对目的基因进行放大结合基因芯片的荧光探针增加检测的灵敏性和特异性，如此达到两种检测技术优势的充分发挥[2]。
3.3.2 实时荧光定量PCR
实时荧光定量PCR 原理是在PCR 反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个进程，其特点是灵敏高、特异性强，同时能够有效地解决PCR 污染问题。荧光基团标记的特异性引物能够反映病原体感染和药物疗效，大多应用于不可人工培养或难以培养的病原体感染的诊断。4 未来展望
从应用角度出发，无论是临床诊疗还是疾病预防，快速准确地对病原体进行检测和鉴定都有着十分重要的意义。当前生物学研究已由宏观领域向微观领域的迅速发展，病原体检测方法也随之延伸到分子水平和基因水平[3]。病原微生物高通量检测技术的快速推进，无疑是适应未平发展需求的结果，由于这些技术具有方便快速、结果精确、无污染及自动化程度高等优点，因此在未来的应用中，高通量诊断技术在病原微生物的诊断分析方面起到的作用将会越来越重要。
参考文献
蔡挺, 李巧云，张顺，等. 基因芯片技术检测常见革兰阴性杆菌
耐药基因的研究[J]. 中华医院感染学杂志，2011，21(21)：4111-4112.
王晓宏，熊正英. 多重PCR-质谱联用技术在病原体检测中的应用及比较[J]. 微生物学免疫学进展，2011，39(4)：81-83.
贺晨，孙鸿燕，邵丽筠，等. 多重PCR 结合基因芯片技术检测11种致病菌方法的建立[J]. 中国实验诊断学，2011，15(4)：587-591.
尿沉渣全自动分析仪与显微镜检测法在尿常规检验中应用的对比分析
祝红娟
【摘要】 目的 对比分析尿沉渣全自动分析仪与显微镜检测法在尿常规检验中应用的意义，探索更高效的检验方案。方法 对我院的5 000份尿液标本进行分析，尿常规检验分别选用尿沉渣全自动分析仪和显微镜检测法、干化学法进行。结果 对比RBC 和WBC 的阳性检出率，干化学法与另外2种检测方法有显著性差异，具统计学意义（P ＜0.05）。结论 我们在进行尿常规的检验时可以将2种方法有机结合，从而提升检验水准。
【关键词】显微镜检测法；尿常规；尿沉渣全自动分析仪；对比分析【中图分类号】R446.12 【文献标识码】B 【文章编号】1674-9308（2015）09-0176-02doi ：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.09.152
Comparative Analysis on the Application of Urine Sediment Analyzer and Automatic Detection in Urine Microscopic Examination
ZHU Hongjuan, Laboratory of Ning'an City People's Hospital, Ning'an 157400 宁安市人民医院检验科作者单位：
157400, China
[Abstract] Objective Comparative analysis of the significance of urinary sediment analyzer with automatic detection in urine microscopy inspection applications. Methods 5 000 cases for clinical urine specimens acquired from our hospital were analyzed, urine test were selected automatic urine sediment analyzer and microscopy, dry chemical method. Results RBC and WBC contrast positive rate, dry chemical method has significant differences with the other two kinds of detection methods, with statistical significance (P
[Key words] Microscopy assays, Urine test, Automatic urine sediment analyzer, Comparative analysis
尿常规在目前临床常规检验中是常见而重要的项目，同时也是住院患者入院时初步检查的必选项目。既往针对尿液常规的检验，采用的传统检测方法就是显微镜检测法[1]。得益于现代医学