微生物相关的免疫抑制剂
钟传青, 曹广祥, 张子成, 周宗仪, 江 曙1
276006;
1
(鲁南制药集团股份有限公司, 临沂
南京中医药大学药学院)
摘要: 主要介绍了几种微生物产生的免疫抑制剂。从发现时间、结构、作用机制等方面将各种免疫抑制剂作了比较, 对其适应症、副作用等进行了阐述。大环内酯类、杂环类、直链类、芳香族类免疫抑制剂各有其特点, 在治疗器官移植、自身免疫系统疾病等方面发挥着不同的作用。关键词: 免疫抑制剂; 器官移植; 作用机制; 副作用
中图分类号:R392 文献标识码:A 文章编号:1002-7777(2007) 06-0436-04Immunosuppressant Produced by Microbes
Zhong Chuanqing, Cao Guangx iang , Zhang Zicheng , Zhou Zongy i and Jiang Shu (Lunan Pharmaceutical Gr oup Co rpo ration, Linyi 276006; 1M edicine Institute, Nanjing University of T raditional Chinese Medicine)
ABSTRAC T Several im muno suppressant produced w ith micro bes are introduced in this article. The immuno suppressant are compar ed in detecting time, structure, effecting mechanism, etc. T heir indication and side effects are ex patiated on. So the char acteristic of the imm unosuppressant are deeply fo rmulated. Macrolide, heterocycle, straig ht chain, ar omatic immunosuppressant play different ro le in organ tr ansplantation and auto immune diseases.
KEY WORDS im munosuppressant; org an tr ansplantation; effecting mechanism; side effect 选择性免疫抑制剂是指对淋巴细胞有专一性抑制, 而对正常的红细胞生成与增殖几乎无影响或毒性极低, 不损害宿主对细菌和真菌感染防御机制的药物。选择性免疫抑制剂常见于微生物产生的代谢产物中, 化学制剂类免疫抑制剂由于它们的毒、副作用比较明显[1, 2], 逐渐被微生物来源的免疫抑制剂所替代。近年来由于生命科学的发展和各种学科的相互交叉、渗透, 与微生物相关的免疫抑制剂种类越来越多。真菌、放线菌、细菌等均能产生不同化学结构的免疫抑制剂, 最早微生物来源的免疫抑制剂是20世纪60年代Lazary 等[3]分离出来的化合物Ov alicin (卵假散囊菌素) , 是由真菌Pseudeur otium ovalis 产生的, 能够较强地抑制淋巴细胞增殖和淋巴瘤细胞的DNA 合成, 但由于其毒副作用较大而未能应用到临床。目前已经用于临床的与微生物相关的免疫抑制剂主要有以下几类:1 大环内酯类
大环内酯类免疫抑制剂主要是通过抑制细胞液
钙神经碱磷酸酯酶而发挥作用。当大环内酯类免疫抑制剂与细胞液蛋白结合后形成免疫素, 而环孢菌素A (CsA) 、他克莫司(FK 506) 等可分别形成不同的亲免疫素, 亲免疫素与钙神经碱结合, 使磷酸酯酶活化受到抑制。钙神经碱是调节细胞液蛋白成分转录的核因子, 所以大环内酯类免疫抑制剂能够抑制基因转录和产生过程中各种介质如IL-2等的活性, 抑制T 细胞生长及活化。而雷帕霉素不与钙神经碱结合而直接与亲免疫素结合, 因此雷帕霉素可以直接抑制细胞素的生成而不抑制早期T 细胞的活性。1 1 环孢菌素
微生物产生的活性物质环孢菌素是世界上第一个真正具有选择性的免疫抑制剂, 是1969年瑞士山道士公司在巴塞尔微生物研究所进行抗真菌药物筛选时, 从美国和挪威土壤中分离到两种不完全真菌即光泽柱孢菌(Cy lindr ocar p on lucidum ) 和多孔木霉(T oly p ocladium inf latum ) , 后者正名为
1
雪白白僵菌(Beauver ia bassiana ) 产生的窄谱有抗真菌活性的抗生素, 1976年首次报道其免疫抑制作用, 1978年进行肾移植试验, 1980年完成全合成, 1983年美国FDA 批准用于器官移植[5]。环孢菌素为多组分的微生物次级代谢产物, 已分离并确定结构的有A ~Z 等25种, A 为主要组分。这一系列化合物都是由11个氨基酸组成的33元环肽, 有6~7个氨基酸的氨基被甲基化[6]。福建微生物研究所也曾在我国土壤中分离出另一环孢菌素产生菌株镰刀菌(Fusar ium solani ) 4-11。
环孢菌素A (CsA) 能够特异性抑制由抗原或有丝分裂原诱导的T 淋巴细胞的产生以及迟发性变态反应等, 是通过抑制某些早期基因的转录而实现的[7]。CsA 能够显著提高肾脏、心脏、肝脏、胰脏和骨髓移植的成功率; 同时CsA 对自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、牛皮癣、哮喘、内源性葡萄膜炎及肾病综合症等的疗效显著。但CsA 副作用较多, 有牙龈增生、神经胃肠系统反应、肾功能障碍、多毛症等, CsA 的最大优点是无骨髓抑制的副作用, 不影响人体免疫系统防御感染的能力[8]。CsA 的使用给器官移植带来了巨大的变化, 同时也开创了微生物产生的免疫抑制剂的新纪元
[9]
[4]
和(Fusar ium ex y sp or um )
-1
(MIC 0 05 g
m L ) 的抗菌活性, 对细菌和酵母无明显抑制作用[12]。
1 3 匹美克莫司(Pimecr olimus)
匹美克莫司是33-表-氯-33-脱氧-子囊素。子囊素最初是在60年代从链霉菌的变种子囊菌(ascomy ceticus ) 的发酵液中分离出来的。匹美克莫司属子囊素(ascomy cin) 衍生物, 子囊衍生物是一组新的具抗炎性的大环内酯类药物。该组化合物成员均有大环结构, 含有23个成员。其中匹美克莫司能抑制T 细胞活化及肥大细胞的作用, 还能抑制T h1/T h2细胞因子、中性粒细胞的产生。1 4 西罗莫司(Siro limus, 又名雷帕霉素, Rapamycin)
西罗莫司是A yerster 实验室于1975年从太平洋Ester 岛(RapaN ui) 的土壤样品中分离的吸水链霉菌(Streptom yces hygr oscopicus ) NRRL5491AT CC29253所产生的代谢产物, 因其分离场所名称为RapaNui 岛, 所以又被称为雷帕霉素(Rapamy cin) 。西罗莫司刚开始被作为低毒性抗真菌药物来开发, 1977年发现西罗莫司具有免疫抑制作用; 1999年FDA 允许将西罗莫司作为一种安全性较高的药物用于防治肾移植后排斥反应。
西罗莫司是一亲脂性的35元环内酯类化合物, 结构中有非常特殊的由 , -二酮己哌啶酸胺分子掩盖的半宿酮, 与23元环的FK 506的大环内酯结构非常相似, 两种结构式中有半边完全相同。西罗莫司的免疫抑制作用与FK 506相似或更强, 毒性却较FK 506低。西罗莫司产生菌产生的许多天然同系物如7-氧-脱甲基西罗莫司也是一种有效的免疫抑制剂, 可用于预防组织移植的排斥反应、风湿性关节炎等。雷帕霉素与环孢菌素联用会产生协同作用, 比单独应用、雷帕霉素加霉酚酸酯、环孢素加霉酚酸酯的联合作用效果更显著[13]。Zhou 等的实验表明, 西罗莫司与LF15-0195在抗移植排斥反应中有协同作用, LF15-0195是一种新型的脱氧精胍素类似物, 其毒性弱于脱氧精胍素而抗排斥反应作用强于脱氧精胍素[14]。2 杂环类
杂环类免疫抑制剂大多属于细胞毒类药物。它们直接或间接地选择性抑制T 、B 淋巴细胞的次黄苷酸脱氢酶(IM PDH ) 和GM P 合成酶来抑制嘌
。
1 2 他克莫司(FK506, Tacr olimus, 商品名:普乐可复)
与CsA 相同, FK 506也属于钙调素抑制剂, 是藤泽药品工业公司探索研究所从日本筑波山土壤中分离到的筑波链霉菌(S tr ep tomy ces tssukubaensis ) No 9993的发酵液中提取到的大环内酯类抗生素。1986年后又由藤泽公司工业化第二研究所进行菌株改良和发酵条件优化, 最终使其生产能力有了很大提高。
FK 506是以内酰胺内酯组成的一个大型疏水性23元含氮大环内酯, 具有高度脂溶性。FK 506在化学结构上分为两个部分:与亲免疫蛋白结合的结合区段和结合后发挥免疫抑制效应的药效区段。FK 506免疫抑制作用的靶细胞主要是T 细胞, 它与T 淋巴细胞内的相应受体FKBP (FK506Binding Protein) 结合形成的复合体是其发挥免疫抑制效应的主要机制[10]。FK 506主要用于防治器官移植出现的排斥反应及异位性皮炎。
FK 506与CsA 、皮质激素(Pred) 、硫唑嘌呤(Aza) 均有协同作用, 并具有抗丝状真菌(A sp er gillus f um igatus ) (M IC 0 025 g mL -1)
[11]
438
呤的合成, 阻止细胞DNA 和RNA 的生物合成, 从而抑制淋巴细胞的增殖和抗体的产生。咪唑立宾和霉酚酸酯分别在体内转化为一磷酸咪唑立宾和霉酚酸再发挥其免疫抑制作用。2 1 咪唑立宾(mizor ibine, MIZ)
咪唑立宾是1971年由日本开发出的免疫抑制剂, 在20世纪70年代后期用于临床。咪唑立宾为土壤真菌(E up enicillium bref eldianum ) 产生的咪唑类核酸物质。咪唑立宾在动物试验及临床试验中均表现出较强的免疫抑制作用, 目前商品有日本旭化成工业株式会社生产的布累迪宁等。咪唑立宾的主要不良反应有胃肠道反应、血液系统障碍和过敏症状、白细胞减少、食欲不振、发热及肝功能异常、骨髓抑制和急性肾功能衰竭等。
2 2 霉酚酸酯(mycophenolate mofetil, M MF)
MM F 是一种新型免疫抑制剂, 在我国免疫抑制剂市场排名第二位。MMF 是MA (mycophenolic acid, 麦考酚酸, 又名霉酚酸) 的2-乙基酯化衍生物, MA 可以在霉菌(Penicillium brevicomp actu ) 菌株的培养液里提取精制得到。
MA 是1896年由Go sio 发现的具有抗真菌活性的抗生素, 1952年阐明其化学结构, 1969年实现化学全合成, 1995年FDA 批准作为免疫抑制剂应用于临床。M M F 在实质性器官移植和全身免疫性疾病(如银屑病、系统红斑狼疮) 方面疗效显著。国内外许多动物实验和临床应用研究证明, MM F 能有效减少急性排斥反应发生率和抗T 细胞抗体的难治性急性排斥反应, 对慢性排斥反应的治疗也有效。与CsA 相比, M MF 很少有或没有肝、肾毒性等不良反应
[15]
中国药事2007年第21卷第6期
人研究发现, DSG 对巨噬细胞具有抑制作用, 能够竞争性抑制细胞周期中自G1期到S 期的进行, 并且能部分抑制混合淋巴细胞反应(MLR) , 能强烈抑制IL-2受体(IL-2R) 表达; DSG 还能够抑制杀伤性T 细胞的产生(即诱导期) 和抗体的产生[18]。DSG 的体外免疫抑制作用不仅可以预防排斥反应的发生, 而且可以抑制正在进行的排斥反应
[19]
。T akahashi 等将DSG 用于ABO 血型不匹
配的病人和已存在供体抗体的病人的肾移植, 以预防急性排斥反应的发生[20]。DSG 的免疫抑制作用很强, 而毒性较低, 特别是对肝、肾以及神经几乎没有毒副作用。4 芳香族类
康乐霉素C 是中国协和医科大学医药生物技术研究所的王南金从我国广东省康乐地区的土壤中分离出的一种稀有放线菌-地中海诺卡氏菌发酵液中分离到的新型芳香族类化合物, 是一种具有新型结构的低分子量化合物, 其结构中具有苯骈[ ]蒽环结构, 利于化学结构改造。该品对皮肤和心脏移植的抗排斥作用及其对细胞免疫抑制作用与CsA 相当, 对体液免疫抑制作用明显优于CsA 。康乐霉素C 主要应用于临床器官移植、骨髓移植手术中以消除排斥反应, 也广泛用于糖尿病、风湿性关节炎、红斑狼疮等一些自身免疫性疾病。微生物来源的免疫抑制剂在近10年以来发展很快, 除了上述微生物相关的免疫抑制剂外, 还有许多高活性免疫抑制剂与微生物有关, 如基因工程药物中的干扰素、用大肠杆菌进行生产的PEG 化T NF 抗体片断CDP-870等。我国有丰富的微生物资源, 再加上免疫学、生物制药学、医学及相关边缘交叉学科的发展, 通过与国际先进技术、研发思路的交流, 相信在不久的将来我国研究工作者能够通过自己的努力开发出更多低毒、高效的选择性免疫抑制剂。
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[3]
Lazary S,
Stah elin H Immun osuppressive and specific
[21]
, 并且M M F 能够与CsA 合
用以降低剂量和毒性, 还能作为移植术后的患者接受CsA 治疗产生的严重肾毒性、溶血性尿毒综合征等症状时的替代疗法[16]。
3 直链类3 1 脱氧精胍素(Deox yspergualin, DSG)
精胍素是1981年由T akenclin 从Bacillus lacterosp or us 发酵液中分离出来的一种活性物质, 具有较强的抗肿瘤活性及免疫抑制作用。1982年经研究发现对精胍素脱羟基化后得到在体内外都有强生物活性的脱氧精胍素, 发现脱氧精胍素的抗肿瘤活性比精胍素更强、更广。1985年在大鼠皮肤移植模型中发现脱氧精胍素具有很好的免疫抑制作用。1987年U meda 成功完成脱氧精胍素的全合成。1994年由N ippo n Kayaku 公司开发上市。有
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immunos uppressive agant, w ith
kidney
deoxys pergualin,
from
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王南金, 白硕可 新免疫抑制剂康乐霉素C 的开发研究[J] 中国药科大学学报, 2001, 32(4) :315
(上接第419页)
4 8 精密度试验
取本品, 按含量测定方法项下配制样品溶液, 并重复进样6次, 计算6次峰面积的平均值为9833546, RSD 为0 34%(n=6) 。结果表明, 本方法的进样精密度良好。4 9 样品测定
取诺氟沙星对照品约40m g, 精密称定, 置100mL 量瓶中, 加0 1m ol L 盐酸溶液2mL 使溶解, 加水稀释至刻度, 摇匀, 精密量取5mL, 置25mL 量瓶中, 加水稀释至刻度, 取10 L 注入液相色谱仪, 记录色谱图; 精密量取本品适量, 加水稀释制成每1mL 中含诺氟沙星80 g 的溶液, 同法测定, 按外标法以峰面积计算, 即得。依法检查本品3批, 结果见表5。
表5 含量测定结果
批号含量(%)
[1**********] 81
[1**********] 56
[1**********] 66
[4][1][2][3]
-1
5 讨论
试验结果表明:在本文所设计的实验条件下, 有关物质检查的专属性较好。在含量测定条件下,
该方法的线性范围、回收率、精密度、重复性及稳定性的考察结果都较满意。综上所述, 采用H PLC 法对谷氨酸诺氟沙星注射液的有关物质和含量进行测定具有专属性强, 结果准确及操作简便等优点。
参考文献:
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微生物相关的免疫抑制剂
钟传青, 曹广祥, 张子成, 周宗仪, 江 曙1
276006;
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(鲁南制药集团股份有限公司, 临沂
南京中医药大学药学院)
摘要: 主要介绍了几种微生物产生的免疫抑制剂。从发现时间、结构、作用机制等方面将各种免疫抑制剂作了比较, 对其适应症、副作用等进行了阐述。大环内酯类、杂环类、直链类、芳香族类免疫抑制剂各有其特点, 在治疗器官移植、自身免疫系统疾病等方面发挥着不同的作用。关键词: 免疫抑制剂; 器官移植; 作用机制; 副作用
中图分类号:R392 文献标识码:A 文章编号:1002-7777(2007) 06-0436-04Immunosuppressant Produced by Microbes
Zhong Chuanqing, Cao Guangx iang , Zhang Zicheng , Zhou Zongy i and Jiang Shu (Lunan Pharmaceutical Gr oup Co rpo ration, Linyi 276006; 1M edicine Institute, Nanjing University of T raditional Chinese Medicine)
ABSTRAC T Several im muno suppressant produced w ith micro bes are introduced in this article. The immuno suppressant are compar ed in detecting time, structure, effecting mechanism, etc. T heir indication and side effects are ex patiated on. So the char acteristic of the imm unosuppressant are deeply fo rmulated. Macrolide, heterocycle, straig ht chain, ar omatic immunosuppressant play different ro le in organ tr ansplantation and auto immune diseases.
KEY WORDS im munosuppressant; org an tr ansplantation; effecting mechanism; side effect 选择性免疫抑制剂是指对淋巴细胞有专一性抑制, 而对正常的红细胞生成与增殖几乎无影响或毒性极低, 不损害宿主对细菌和真菌感染防御机制的药物。选择性免疫抑制剂常见于微生物产生的代谢产物中, 化学制剂类免疫抑制剂由于它们的毒、副作用比较明显[1, 2], 逐渐被微生物来源的免疫抑制剂所替代。近年来由于生命科学的发展和各种学科的相互交叉、渗透, 与微生物相关的免疫抑制剂种类越来越多。真菌、放线菌、细菌等均能产生不同化学结构的免疫抑制剂, 最早微生物来源的免疫抑制剂是20世纪60年代Lazary 等[3]分离出来的化合物Ov alicin (卵假散囊菌素) , 是由真菌Pseudeur otium ovalis 产生的, 能够较强地抑制淋巴细胞增殖和淋巴瘤细胞的DNA 合成, 但由于其毒副作用较大而未能应用到临床。目前已经用于临床的与微生物相关的免疫抑制剂主要有以下几类:1 大环内酯类
大环内酯类免疫抑制剂主要是通过抑制细胞液
钙神经碱磷酸酯酶而发挥作用。当大环内酯类免疫抑制剂与细胞液蛋白结合后形成免疫素, 而环孢菌素A (CsA) 、他克莫司(FK 506) 等可分别形成不同的亲免疫素, 亲免疫素与钙神经碱结合, 使磷酸酯酶活化受到抑制。钙神经碱是调节细胞液蛋白成分转录的核因子, 所以大环内酯类免疫抑制剂能够抑制基因转录和产生过程中各种介质如IL-2等的活性, 抑制T 细胞生长及活化。而雷帕霉素不与钙神经碱结合而直接与亲免疫素结合, 因此雷帕霉素可以直接抑制细胞素的生成而不抑制早期T 细胞的活性。1 1 环孢菌素
微生物产生的活性物质环孢菌素是世界上第一个真正具有选择性的免疫抑制剂, 是1969年瑞士山道士公司在巴塞尔微生物研究所进行抗真菌药物筛选时, 从美国和挪威土壤中分离到两种不完全真菌即光泽柱孢菌(Cy lindr ocar p on lucidum ) 和多孔木霉(T oly p ocladium inf latum ) , 后者正名为
1
雪白白僵菌(Beauver ia bassiana ) 产生的窄谱有抗真菌活性的抗生素, 1976年首次报道其免疫抑制作用, 1978年进行肾移植试验, 1980年完成全合成, 1983年美国FDA 批准用于器官移植[5]。环孢菌素为多组分的微生物次级代谢产物, 已分离并确定结构的有A ~Z 等25种, A 为主要组分。这一系列化合物都是由11个氨基酸组成的33元环肽, 有6~7个氨基酸的氨基被甲基化[6]。福建微生物研究所也曾在我国土壤中分离出另一环孢菌素产生菌株镰刀菌(Fusar ium solani ) 4-11。
环孢菌素A (CsA) 能够特异性抑制由抗原或有丝分裂原诱导的T 淋巴细胞的产生以及迟发性变态反应等, 是通过抑制某些早期基因的转录而实现的[7]。CsA 能够显著提高肾脏、心脏、肝脏、胰脏和骨髓移植的成功率; 同时CsA 对自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、牛皮癣、哮喘、内源性葡萄膜炎及肾病综合症等的疗效显著。但CsA 副作用较多, 有牙龈增生、神经胃肠系统反应、肾功能障碍、多毛症等, CsA 的最大优点是无骨髓抑制的副作用, 不影响人体免疫系统防御感染的能力[8]。CsA 的使用给器官移植带来了巨大的变化, 同时也开创了微生物产生的免疫抑制剂的新纪元
[9]
[4]
和(Fusar ium ex y sp or um )
-1
(MIC 0 05 g
m L ) 的抗菌活性, 对细菌和酵母无明显抑制作用[12]。
1 3 匹美克莫司(Pimecr olimus)
匹美克莫司是33-表-氯-33-脱氧-子囊素。子囊素最初是在60年代从链霉菌的变种子囊菌(ascomy ceticus ) 的发酵液中分离出来的。匹美克莫司属子囊素(ascomy cin) 衍生物, 子囊衍生物是一组新的具抗炎性的大环内酯类药物。该组化合物成员均有大环结构, 含有23个成员。其中匹美克莫司能抑制T 细胞活化及肥大细胞的作用, 还能抑制T h1/T h2细胞因子、中性粒细胞的产生。1 4 西罗莫司(Siro limus, 又名雷帕霉素, Rapamycin)
西罗莫司是A yerster 实验室于1975年从太平洋Ester 岛(RapaN ui) 的土壤样品中分离的吸水链霉菌(Streptom yces hygr oscopicus ) NRRL5491AT CC29253所产生的代谢产物, 因其分离场所名称为RapaNui 岛, 所以又被称为雷帕霉素(Rapamy cin) 。西罗莫司刚开始被作为低毒性抗真菌药物来开发, 1977年发现西罗莫司具有免疫抑制作用; 1999年FDA 允许将西罗莫司作为一种安全性较高的药物用于防治肾移植后排斥反应。
西罗莫司是一亲脂性的35元环内酯类化合物, 结构中有非常特殊的由 , -二酮己哌啶酸胺分子掩盖的半宿酮, 与23元环的FK 506的大环内酯结构非常相似, 两种结构式中有半边完全相同。西罗莫司的免疫抑制作用与FK 506相似或更强, 毒性却较FK 506低。西罗莫司产生菌产生的许多天然同系物如7-氧-脱甲基西罗莫司也是一种有效的免疫抑制剂, 可用于预防组织移植的排斥反应、风湿性关节炎等。雷帕霉素与环孢菌素联用会产生协同作用, 比单独应用、雷帕霉素加霉酚酸酯、环孢素加霉酚酸酯的联合作用效果更显著[13]。Zhou 等的实验表明, 西罗莫司与LF15-0195在抗移植排斥反应中有协同作用, LF15-0195是一种新型的脱氧精胍素类似物, 其毒性弱于脱氧精胍素而抗排斥反应作用强于脱氧精胍素[14]。2 杂环类
杂环类免疫抑制剂大多属于细胞毒类药物。它们直接或间接地选择性抑制T 、B 淋巴细胞的次黄苷酸脱氢酶(IM PDH ) 和GM P 合成酶来抑制嘌
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1 2 他克莫司(FK506, Tacr olimus, 商品名:普乐可复)
与CsA 相同, FK 506也属于钙调素抑制剂, 是藤泽药品工业公司探索研究所从日本筑波山土壤中分离到的筑波链霉菌(S tr ep tomy ces tssukubaensis ) No 9993的发酵液中提取到的大环内酯类抗生素。1986年后又由藤泽公司工业化第二研究所进行菌株改良和发酵条件优化, 最终使其生产能力有了很大提高。
FK 506是以内酰胺内酯组成的一个大型疏水性23元含氮大环内酯, 具有高度脂溶性。FK 506在化学结构上分为两个部分:与亲免疫蛋白结合的结合区段和结合后发挥免疫抑制效应的药效区段。FK 506免疫抑制作用的靶细胞主要是T 细胞, 它与T 淋巴细胞内的相应受体FKBP (FK506Binding Protein) 结合形成的复合体是其发挥免疫抑制效应的主要机制[10]。FK 506主要用于防治器官移植出现的排斥反应及异位性皮炎。
FK 506与CsA 、皮质激素(Pred) 、硫唑嘌呤(Aza) 均有协同作用, 并具有抗丝状真菌(A sp er gillus f um igatus ) (M IC 0 025 g mL -1)
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呤的合成, 阻止细胞DNA 和RNA 的生物合成, 从而抑制淋巴细胞的增殖和抗体的产生。咪唑立宾和霉酚酸酯分别在体内转化为一磷酸咪唑立宾和霉酚酸再发挥其免疫抑制作用。2 1 咪唑立宾(mizor ibine, MIZ)
咪唑立宾是1971年由日本开发出的免疫抑制剂, 在20世纪70年代后期用于临床。咪唑立宾为土壤真菌(E up enicillium bref eldianum ) 产生的咪唑类核酸物质。咪唑立宾在动物试验及临床试验中均表现出较强的免疫抑制作用, 目前商品有日本旭化成工业株式会社生产的布累迪宁等。咪唑立宾的主要不良反应有胃肠道反应、血液系统障碍和过敏症状、白细胞减少、食欲不振、发热及肝功能异常、骨髓抑制和急性肾功能衰竭等。
2 2 霉酚酸酯(mycophenolate mofetil, M MF)
MM F 是一种新型免疫抑制剂, 在我国免疫抑制剂市场排名第二位。MMF 是MA (mycophenolic acid, 麦考酚酸, 又名霉酚酸) 的2-乙基酯化衍生物, MA 可以在霉菌(Penicillium brevicomp actu ) 菌株的培养液里提取精制得到。
MA 是1896年由Go sio 发现的具有抗真菌活性的抗生素, 1952年阐明其化学结构, 1969年实现化学全合成, 1995年FDA 批准作为免疫抑制剂应用于临床。M M F 在实质性器官移植和全身免疫性疾病(如银屑病、系统红斑狼疮) 方面疗效显著。国内外许多动物实验和临床应用研究证明, MM F 能有效减少急性排斥反应发生率和抗T 细胞抗体的难治性急性排斥反应, 对慢性排斥反应的治疗也有效。与CsA 相比, M MF 很少有或没有肝、肾毒性等不良反应
[15]
中国药事2007年第21卷第6期
人研究发现, DSG 对巨噬细胞具有抑制作用, 能够竞争性抑制细胞周期中自G1期到S 期的进行, 并且能部分抑制混合淋巴细胞反应(MLR) , 能强烈抑制IL-2受体(IL-2R) 表达; DSG 还能够抑制杀伤性T 细胞的产生(即诱导期) 和抗体的产生[18]。DSG 的体外免疫抑制作用不仅可以预防排斥反应的发生, 而且可以抑制正在进行的排斥反应
[19]
。T akahashi 等将DSG 用于ABO 血型不匹
配的病人和已存在供体抗体的病人的肾移植, 以预防急性排斥反应的发生[20]。DSG 的免疫抑制作用很强, 而毒性较低, 特别是对肝、肾以及神经几乎没有毒副作用。4 芳香族类
康乐霉素C 是中国协和医科大学医药生物技术研究所的王南金从我国广东省康乐地区的土壤中分离出的一种稀有放线菌-地中海诺卡氏菌发酵液中分离到的新型芳香族类化合物, 是一种具有新型结构的低分子量化合物, 其结构中具有苯骈[ ]蒽环结构, 利于化学结构改造。该品对皮肤和心脏移植的抗排斥作用及其对细胞免疫抑制作用与CsA 相当, 对体液免疫抑制作用明显优于CsA 。康乐霉素C 主要应用于临床器官移植、骨髓移植手术中以消除排斥反应, 也广泛用于糖尿病、风湿性关节炎、红斑狼疮等一些自身免疫性疾病。微生物来源的免疫抑制剂在近10年以来发展很快, 除了上述微生物相关的免疫抑制剂外, 还有许多高活性免疫抑制剂与微生物有关, 如基因工程药物中的干扰素、用大肠杆菌进行生产的PEG 化T NF 抗体片断CDP-870等。我国有丰富的微生物资源, 再加上免疫学、生物制药学、医学及相关边缘交叉学科的发展, 通过与国际先进技术、研发思路的交流, 相信在不久的将来我国研究工作者能够通过自己的努力开发出更多低毒、高效的选择性免疫抑制剂。
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用以降低剂量和毒性, 还能作为移植术后的患者接受CsA 治疗产生的严重肾毒性、溶血性尿毒综合征等症状时的替代疗法[16]。
3 直链类3 1 脱氧精胍素(Deox yspergualin, DSG)
精胍素是1981年由T akenclin 从Bacillus lacterosp or us 发酵液中分离出来的一种活性物质, 具有较强的抗肿瘤活性及免疫抑制作用。1982年经研究发现对精胍素脱羟基化后得到在体内外都有强生物活性的脱氧精胍素, 发现脱氧精胍素的抗肿瘤活性比精胍素更强、更广。1985年在大鼠皮肤移植模型中发现脱氧精胍素具有很好的免疫抑制作用。1987年U meda 成功完成脱氧精胍素的全合成。1994年由N ippo n Kayaku 公司开发上市。有
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(上接第419页)
4 8 精密度试验
取本品, 按含量测定方法项下配制样品溶液, 并重复进样6次, 计算6次峰面积的平均值为9833546, RSD 为0 34%(n=6) 。结果表明, 本方法的进样精密度良好。4 9 样品测定
取诺氟沙星对照品约40m g, 精密称定, 置100mL 量瓶中, 加0 1m ol L 盐酸溶液2mL 使溶解, 加水稀释至刻度, 摇匀, 精密量取5mL, 置25mL 量瓶中, 加水稀释至刻度, 取10 L 注入液相色谱仪, 记录色谱图; 精密量取本品适量, 加水稀释制成每1mL 中含诺氟沙星80 g 的溶液, 同法测定, 按外标法以峰面积计算, 即得。依法检查本品3批, 结果见表5。
表5 含量测定结果
批号含量(%)
[1**********] 81
[1**********] 56
[1**********] 66
[4][1][2][3]
-1
5 讨论
试验结果表明:在本文所设计的实验条件下, 有关物质检查的专属性较好。在含量测定条件下,
该方法的线性范围、回收率、精密度、重复性及稳定性的考察结果都较满意。综上所述, 采用H PLC 法对谷氨酸诺氟沙星注射液的有关物质和含量进行测定具有专属性强, 结果准确及操作简便等优点。
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