米氏方程概述
v=Vmax×[S]/（Km+[S])，
这个方程称为Michaelis-Menten 方程，是在假定存在一个稳态反应条件下推导出来的，其中 Km 值称为米氏常数，Vmax 是酶被底物饱和时的反应速度，[S]为底物浓度。由此可见Km 值的物理意义为反应速度（v ）达到1/2Vmax时的底物浓度（即Km=[S]），单位一般为mol/L，只由酶的性质决定，而与酶的浓度无关。可用Km 的值鉴别不同的酶。
当底物浓度非常大时，反应速度接近于一个恒定值。在曲线的这个区域，酶几乎被底物饱和，反应相对于底物S 是个零级反应。就是说再增加底物对反应速度没有什么影响。反应速度逐渐趋近的恒定值称为最大反应速度Vmax 。对于给定酶量的Vmax 可以定义为处于饱和底物浓度的起始反应速度n 。对于反应曲线的这个假一级反应区的速度方程可写成一种等价形式：
n （饱和时）=Vmax=k[E][S]0=k[E]total=k cat[ES]
速度常数k 等于催化常数k cat，k cat是ES 转化为游离的E 和产物的速度常数。饱和时，所有的E 都是以ES 存在。方程（3.2）中还有另一个简单的关系式：Vmax=k cat [E]total。从中得出：k cat=Vmax / [E]total。k cat的单位是s －1。催化常数可以衡量一个酶促反应的快慢。
米氏常数Km 是酶促反应速度n 为最大酶促反应速度值一半时的底物浓度。这可通过用[S]取代米氏方程中的Km 证明，通过计算可得n=Vmax /2。
（1）Km 和Vmax 的意义
① 当ν=Vmax/2时，Km=[S]。因此，Km 等于酶促反应速度达最大值一半时的底物浓度。
② 当k-1>>k+2时，Km=k-1/k+1=Ks。因此，Km 可以反映酶与底物亲和力的大小，即Km 值越小，则酶与底物的亲和力越大；反之，则越小。 ③ Km 可用于判断反应级数：
当[S]
当[S]>100Km时，ν=Vmax，反应为零级反应，即反应速度与底物浓度无关；
当0.01Km
④ Km 是酶的特征性常数：在一定条件下，某种酶的Km 值是恒定的，因而可以通过测定不同酶（特别是一组同工酶）的Km 值，来判断是否为不同的酶。
⑤ Km 可用来判断酶的最适底物：当酶有几种不同的底物存在时，Km 值最小者，为该酶的最适底物。
⑥ Km 可用来确定酶活性测定时所需的底物浓度：
当[S]=10Km时，ν=91%Vmax，为最合适的测定酶活性所需的底物浓度。 ⑦ Vmax 可用于酶的转换数的计算：当酶的总浓度和最大速度已知时，可计算出酶的转换数，即单位时间内每个酶分子催化底物转变为产物的分子数。
Km 和Vmax 的测定：主要采用Lineweaver-Burk Hanes 作图法。
（2） 双倒数作图
酶促反应中的Km 和Vmax 值有几种测量方法。
固定反应中的酶浓度，然后分析几种不同底物浓度下的起始速度，就可获得Km 和Vmax 值。但直接从起始速度对底物浓度的图中确定Km 或Vmax 值是很困难的，因为曲线接近Vmax 时是个渐进过程。
所以通常都是利用米氏方程的转换形式求出Km 和Vmax 值。
常用的米氏方程转换形式是Lineweaver-Burk 方程，也称为双倒数方程。 使1/ v 对1/[S]作图，可以获得一条直线。从直线与x 轴的截距可以得到1/Km的绝对值；而1/Vmax是直线与y 轴的截距。双倒数作图直观、容易理解，为酶抑制研究提供了易于识别的图形。
（3） 抑制作用的影响 竞争性抑制
Km 值增大，Vmax 值不变 非竞争性抑制
Km 值不变，Vmax 值变小 反竞争性抑制
Km 值变小，Vmax 值变小，但Vmax/Km值不变
米氏方程概述
v=Vmax×[S]/（Km+[S])，
这个方程称为Michaelis-Menten 方程，是在假定存在一个稳态反应条件下推导出来的，其中 Km 值称为米氏常数，Vmax 是酶被底物饱和时的反应速度，[S]为底物浓度。由此可见Km 值的物理意义为反应速度（v ）达到1/2Vmax时的底物浓度（即Km=[S]），单位一般为mol/L，只由酶的性质决定，而与酶的浓度无关。可用Km 的值鉴别不同的酶。
当底物浓度非常大时，反应速度接近于一个恒定值。在曲线的这个区域，酶几乎被底物饱和，反应相对于底物S 是个零级反应。就是说再增加底物对反应速度没有什么影响。反应速度逐渐趋近的恒定值称为最大反应速度Vmax 。对于给定酶量的Vmax 可以定义为处于饱和底物浓度的起始反应速度n 。对于反应曲线的这个假一级反应区的速度方程可写成一种等价形式：
n （饱和时）=Vmax=k[E][S]0=k[E]total=k cat[ES]
速度常数k 等于催化常数k cat，k cat是ES 转化为游离的E 和产物的速度常数。饱和时，所有的E 都是以ES 存在。方程（3.2）中还有另一个简单的关系式：Vmax=k cat [E]total。从中得出：k cat=Vmax / [E]total。k cat的单位是s －1。催化常数可以衡量一个酶促反应的快慢。
米氏常数Km 是酶促反应速度n 为最大酶促反应速度值一半时的底物浓度。这可通过用[S]取代米氏方程中的Km 证明，通过计算可得n=Vmax /2。
（1）Km 和Vmax 的意义
① 当ν=Vmax/2时，Km=[S]。因此，Km 等于酶促反应速度达最大值一半时的底物浓度。
② 当k-1>>k+2时，Km=k-1/k+1=Ks。因此，Km 可以反映酶与底物亲和力的大小，即Km 值越小，则酶与底物的亲和力越大；反之，则越小。 ③ Km 可用于判断反应级数：
当[S]
当[S]>100Km时，ν=Vmax，反应为零级反应，即反应速度与底物浓度无关；
当0.01Km
④ Km 是酶的特征性常数：在一定条件下，某种酶的Km 值是恒定的，因而可以通过测定不同酶（特别是一组同工酶）的Km 值，来判断是否为不同的酶。
⑤ Km 可用来判断酶的最适底物：当酶有几种不同的底物存在时，Km 值最小者，为该酶的最适底物。
⑥ Km 可用来确定酶活性测定时所需的底物浓度：
当[S]=10Km时，ν=91%Vmax，为最合适的测定酶活性所需的底物浓度。 ⑦ Vmax 可用于酶的转换数的计算：当酶的总浓度和最大速度已知时，可计算出酶的转换数，即单位时间内每个酶分子催化底物转变为产物的分子数。
Km 和Vmax 的测定：主要采用Lineweaver-Burk Hanes 作图法。
（2） 双倒数作图
酶促反应中的Km 和Vmax 值有几种测量方法。
固定反应中的酶浓度，然后分析几种不同底物浓度下的起始速度，就可获得Km 和Vmax 值。但直接从起始速度对底物浓度的图中确定Km 或Vmax 值是很困难的，因为曲线接近Vmax 时是个渐进过程。
所以通常都是利用米氏方程的转换形式求出Km 和Vmax 值。
常用的米氏方程转换形式是Lineweaver-Burk 方程，也称为双倒数方程。 使1/ v 对1/[S]作图，可以获得一条直线。从直线与x 轴的截距可以得到1/Km的绝对值；而1/Vmax是直线与y 轴的截距。双倒数作图直观、容易理解，为酶抑制研究提供了易于识别的图形。
（3） 抑制作用的影响 竞争性抑制
Km 值增大，Vmax 值不变 非竞争性抑制
Km 值不变，Vmax 值变小 反竞争性抑制
Km 值变小，Vmax 值变小，但Vmax/Km值不变