DOI:10.13618/j.issn.1001-5728.2013.04.020
CHIN J FORENSIC MED 2013284·技术交流·
GPC-GC /MS 法分析血中20种安眠镇静药物
张炳谦，王国强，孙桂进，徐建军
（连云港市公安局刑警支队，江苏连云港222000）
【摘要】目的
GC /MS同时分析血中巴比妥类、研究建立液液提取－在线GPC-吩噻嗪类、苯并二氮杂卓类、三环类
血样加入内标SKF 525A ，加β-葡萄糖酸苷酶水解后用乙腈沉淀蛋白浸取药物，加
选择总离子
和其他安眠精神类药物的方法。方法
GC-MS 分析。结果无水硫酸镁脱水，提取液浓缩至干后用GPC 流动相定容，在线GPC 净化，大体积进样，内工作曲线的线性关系良好。结论
【中图分类号】DF795. 1
监测模式，血中20种安眠镇静药物提取率在80. 2% 99. 3%之间，检出限小于21. 6ng /mL；在0. 1 10μg /mL浓度范围
方法可用于安眠镇静类药物误服中毒者和刑事案件中毒者血样的分析。【文献标识码】B
【文章编号】1001－5728（2013）04－0327－04
【关键词】法医毒物分析；安眠镇静药；血；在线凝胶渗透色谱净化；气质联用法
GPC-GC /MSanalyed 20kinds of hypnotic sedative drug ingredients in blood （Zhang Bingqian ，Wang Guoqiang ，Sun Guijin ，Xu Jianjun /Criminal police detachment of Lianyungang City Public Security Bureau ，Jiangsu Lianyungang ，222000，China ）
【Abstract 】Objective To establish the method for the barbiturates ，phenothiazines ，benzodiazepines ，tricyclics and other sleep psychotropic drugs in blood by using liquid-liquid extraction-online GPC-GC /MS．Methods The blood samples added internal standard SKF 525A ，hydrolied with the biological enzyme ，precipitated the protein with acetonitrile to leach drug ，then added anhydrous magnesium sulfate ，mixed fully and high-speed centrifugation ，dispensed the supernatant to evprate at temperature of 60ħ with nitrogen ，constanted volume with cyclohexaneacetone ，then filtered with 0. 4μm filter to analyes by online GPC-GC /MS．Results The extraction rate of all types of representative hypnotic sedative drugs in the blood was between 80. 2% 99. 3%，and the detection limit is less than 21. 6ng /mL；Between the concentration range of 0. 1 10μg /mL，it has good linear relationship of working curve．Conclusion The method can be used for the analysis of blood samples of hypnotic sedative drugs mistakenly taking and the poisoner in criminal cases．
【Key words 】forensic toxicological analysis ；hypnotic sedative drugs ；blood ；online GPC ；GC-MS
在法医毒物分析中，安眠镇静类药物检验是一项
重要的内容，文献报道的方法主要为调节酸碱性后用有机溶剂或固相萃取方法提取，以气相色谱、气质联
［1-6］
用、液相色谱和液质联用法进行分析，操作过程繁琐。本文建立了液液提取－在线凝胶渗透色谱（GPC ）净化－气质联用分析血中20种各类安眠镇静药物成分的分析方法，此方法特异性好、灵敏度高、通用性强。
安眠精神类药物标准品（购于国家标准物质研究中
心）；空白血（购自于连云港市中心血站）。1. 2
血样处理方法
取血液样品1mL ，加入10mL 的试管中，加入内标SKF 525A 和烯丙基异丙基巴比妥各1μg ，加100μL β-葡萄糖酸苷酶反应2h ，加2mL 乙腈，混匀，加2g 无水硫酸8000r /min离心，镁，充分混匀，分取上层清液于10mL
60ħ 下N 2吹至干，1mL 环己烷－丙酮提取剂试管中，
（体积比7ʒ3 ）定容，0. 45μm 滤膜过滤超声提取5min ，
供在线凝胶渗透色谱－气相色谱/质谱分析1. 31. 3. 1
凝胶净化、气相色谱和质谱条件
凝胶渗透色谱条件
GPC 凝胶渗透色谱柱CLNpakEV200（2. 0ˑ
1
1. 1
材料与方法
主要仪器和试剂
GCMS-QP2010PLUS 气相色谱和质谱联用仪（日
20A （日本岛津公司）；在线凝胶渗透色谱分析仪LC-本岛津公司）；超声波清洗仪等。
巴比妥类、吩噻嗪类、苯骈二氮杂艹三环类等卓类、
【作者简介】张炳谦，男，高级工程师，学士，主要从事法医毒物mail ：bingqian1970@163. com 分析方面研究。E-
150mm ）；柱温箱温度：40ħ ；紫外检测器检测波长：
210nm ；流动相：丙酮/环己烷（体积比7ʒ 3）；流速：0. 1mL /min；进样体积：10μL ；采集样品时间4. 07 6. 07min 。
·327·
CHIN J FORENSIC MED 20132841. 3. 2
气相色谱条件
35MS （0. 25mmID ˑ 30m ˑ 0. 25μm ）色谱柱：DB-
弹性石英毛细柱；载气为高纯氦气（纯度≥
99. 999%）；PTV 进样口，进样口程序升温：120ħ （5min ）→100ħ /min→250ħ （31. 7min ）恒压模式，分
分流比10ʒ1 ，进样量200μL ；柱箱温度程序：流进样，
82ħ （5min ）→8ħ /min→310ħ （11. 75min ）。1. 3. 3
质谱条件
EI 电子轰击源，70eV ；离子源温度200ħ ；接口
扫描时间：9. 6 40. 0min 质量范围：m /z温度：250ħ ，
45 450，溶剂延迟9. 5min ；模式为全扫描采集模式。1. 4
定性分析和定量分析方法
采用全离子扫描检测模式。检测分析物和内标
的定量离子，根据色谱峰面积用内标工作曲线法进行定量分析。检测分析物的定量离子和辅助定性离
根据离子丰度比结合保留时间进行定性分析。子，
2
2. 1
结果与讨论
色谱分离
通过对提取溶剂进行考查，发现采用乙腈沉淀蛋白提取对药物和内标都有较好的提取效果。各待测物在拟定的色谱条件下分离完全，空白血液对检测无干扰。各待测物及内标的总离子流图见图1。2. 2
进样组分GPC 采集程序的确定
血液提取物中分子量较大的脂肪、蛋白质、色素等干扰物质与待测的安眠镇静类药物在凝胶色谱柱上的保留时间不同，是凝胶净化的理论基础，实验发现：提取液中杂质类物质主要在2. 41 3. 90min 流出，混合待测物质标准品主要在3. 48 5. 50min 流出，图2为空白血液样品和待测物210nm 的紫外吸收色谱图
。
表1
·328·
3. 74 5. 74min ，本文考察了3. 07 5. 07min ，
4. 07 6. 07min 三个采集时间的GPC 净化回收率及杂质去除效果。取20种待测物混合标样，在相同的进样量和色谱条件下，通过比较GPC 净化前后各待测物的峰面积计算回收率，不同采集时间段待测标样的回收率见表1。
20种安眠镇静类药物GPC 净化回收率
CHIN J FORENSIC MED 2013284不同采集时间段空白血样提取物中杂质的去除效果见图
3
实验结果发现：4. 07 6. 07min 之间的收集组分既能保证各待测样品有较高的GPC 净化回收率，同时血样提取液杂质净化效果较好。2. 3
检出限、标准曲线、回收率和精密度
取空白血样1mL 添加分析物各1μg ，按照实验拟定的方法进行分析，选择离子法定量，根据信噪比s /n=3：1确定方法的检出限，20种安眠镇静药物检出限
分别加入0. 1 均小于21. 6ng /mL。取空白血样，
10μg 各分析物，再加入1μg 内标，制备各分析物的工
作曲线，计算相关系数，在上述范围浓度范围内，线性关系良好，相关系数均大于0. 99。取空白血样5份，添加分析物及内标后平行进样分析，测定回收率和精密度，提取率在80. 2% 99. 3%之间，相对偏差均小于10%（n =5）。结果见表2。
图3空白血提取液GPC 净化后不同采集时间的总离子流图
表2
20种安眠镇静类的检出限、工作曲线、回收率和精密度
相关系数
R 0. 99650. 99000. 99120. 99790. 99610. 99540. 99870. 99100. 99550. 99910. 99120. 99130. 99670. 99700. 99260. 99250. 99660. 99490. 99450. 9966
工作曲线Y =Ax +b Y =1. 896x +0. 215Y =1. 821x +0. 012Y =1. 989x +0. 091Y =2. 887x +0. 031Y =2. 995x +0. 020Y =1. 555x +0. 089Y =1. 589x +0. 028Y =2. 125x +0. 003Y =1. 233x +0. 015Y =2. 055x +0. 889Y =2. 995x +0. 020Y =2. 004x +0. 211Y =0. 998x +0. 009Y =1. 787x +0. 111Y =2. 022x +0. 962Y =2. 545x +0. 889Y =0. 998x +0. 009Y =2. 887x +0. 031Y =0. 998x +0. 009Y =1. 589x +0. 028
检测限ng /mL6. 775. 07. 433. 754. 238. 864. 612. 043. 154. 132. 701. 633. 5220. 710. 312. 511. 212. 721. 68. 0
方法回收率
%65. 367. 561. 660. 370. 275. 482. 380. 681. 686. 790. 694. 379. 384. 390. 685. 189. 390. 089. 389. 3
相对偏差
%8. 37. 55. 66. 05. 69. 32. 37. 65. 64. 65. 63. 36. 37. 38. 65. 15. 36. 06. 32. 3
检测物巴比妥异戊巴比妥戊巴比妥速可眠眠尔通苯巴比妥阿米替林多虑平异丙嗪泰尔登氯丙嗪安定三氟拉嗪硝基安定氯氮平利眠宁氯硝安定舒乐安定阿普唑仑三唑仑
保留时间min 15. 294518. 004018. 500019. 087519. 816522. 164523. 579523. 961024. 859026. 942526. 999027. 133028. 026032. 113032. 244533. 426033. 563534. 648034. 985537. 3725
定量定性离子
amu [***********][***********][***********][***********][***********][***********][***********][***********][***********]8
·329·
CHIN J FORENSIC MED 20132842. 4
实际中毒样品分析
［3］陈建虎．固相萃取/离子阱气相色谱质谱联用对血液中多
J ］．分析测试学报，2010，29（6）：种安眠药物的同时测定［84-87．
［4］郭海荣，裴茂清．生物检材中巴比妥类药物固相萃取及分
J ］．刑事技术，2008，（6）：16-18．析方法［
［5］陈建虎．GC-MS /MS测定血液中巴比妥类安眠药物［J ］．
2010，（5）：32-34．刑事技术，
［6］刘洪涛，马安德．血中22种常见毒/药物的液相色谱－串
［1］刘畅，夏晶，胡青，等．LC /MS法对中成药中非法添加9种
J ］．解放军药学学镇静催眠类化学药品检测方法的研究［2009，25（3）：254-256．报，
［2］卓先义，MS /MS同时分析血液中五种巴比妥类向平．LC-J ］．中国司法鉴定，2007（2）：17-19．药物［
J ］．南方医科大学学报，2009，29（8）：联质谱法快速鉴定［1665-1667．
（收稿日期：2012-09-13）
取麻醉强奸受害者血液1mL ，用本实验方法测
定，在血样中检出三唑仑，含量为1. 1μg /mL，说明本方法在刑事案件分析中是切实可行的，能满足基层办案检测的要求。
参
考
文
献
·技术交流·
3种特殊染色在急性心肌梗死死后诊断中的应用比较
毕海涛，杨
莹，刘
霞，黄建业，王松军，李英敏，丛
斌
（河北医科大学法医学系河北省法医学重点实验室，河北石家庄050017）
【摘要】目的
对比观察苏木素－碱性复红－苦味酸染色（HBFP 染色）、变色酸2R-亮绿染色和Heidenhain 染色在
以大鼠急性心肌梗死模型、法医检案急性心肌梗死心脏标本作为研究对
①3种特染方法在大鼠心肌缺血
急性心肌梗死死后诊断中的应用价值。方法
采用HBFP 染色、变色酸2R-亮绿染色和Heidenhain 染色进行对比观察。结果象，
15min 时均可观察到阳性染色，且阳性染色面积随缺血时间的延长而扩大；②大鼠急性心肌缺血4h 心脏标本在－20ħ 、4ħ 及室温条件下保存至14d ，3种特染方法仍可见阳性着色，但变色酸2R-亮绿染色和HBFP 染色随保存时间的延长而Heidenhain 染色效果最为稳定；③急性心肌梗死检案标本中，3种特染方法均出现着色能力下降，阳性区域变小的趋势，可显示缺血心肌纤维，发病1h 内死亡者Heidenhain 染色优于另外两种染色。结论3种特染均可客观的显示出急性心肌梗死早期病理改变，其中Heidenhain 染色更具稳定性和可操作性。
【关键词】法医病理学；急性心肌梗死；苏木素－碱性复红－苦味酸染色；变色酸2R-亮绿染色；Heidenhain 染色；死后诊断
【中图分类号】DF795. 1
【文献标识码】B
【文章编号】1001－5728（2013）04－0330－03
Application and comparison of three special stains in the postmortem diagnosis of acute myocardial infarction （Bi Haitao ，Yang Ying ，Liu Xia ，Huang Jianye ，Wang Songjun ，Li Yingmin ，Cong Bin /Department of Forensic Medicine ，Hebei Medical University ，Key Laboratory of Forensic Medicine ，Shijiazhuang 050017，China ）
【Abstract 】Objective To observe comparatively the applications of HBFP stain ，chrometrope 2R-Brilliant green stain and Heidenhain stain for the postmortem diagnosis of acute myocardial infarction．Methods Experimental myocardial infarction in the rat and human postmortem myocardium specimens were studied with the HBFP stain ，chrometrope 2R-brilliant green stain and Heidenhain stain separately．Results ①Positive staining can be seen 15minutes after myocardial ischemia of the rats through all three staining
methods ，and the positive stained areas of the heart expanded as the ischemia continued ；②After the hearts ，
which suffered acute myocardial ischemia for 4hours ，
【作者简介】毕海涛，男，讲师，博士研究生，主要从事法医病理E-mail ：bihaitao@126. com 学研究，
【通信作者】丛斌，男，教授，博士，主要从事法医病理学和法医E-mail ：hbydcongbin@126. com 物证学研究，·330·
were preserved for 14days at －20ħ ，4ħ and room temperature separately ，there was still positive staining in ischemic tissues with the three special
DOI:10.13618/j.issn.1001-5728.2013.04.020
CHIN J FORENSIC MED 2013284·技术交流·
GPC-GC /MS 法分析血中20种安眠镇静药物
张炳谦，王国强，孙桂进，徐建军
（连云港市公安局刑警支队，江苏连云港222000）
【摘要】目的
GC /MS同时分析血中巴比妥类、研究建立液液提取－在线GPC-吩噻嗪类、苯并二氮杂卓类、三环类
血样加入内标SKF 525A ，加β-葡萄糖酸苷酶水解后用乙腈沉淀蛋白浸取药物，加
选择总离子
和其他安眠精神类药物的方法。方法
GC-MS 分析。结果无水硫酸镁脱水，提取液浓缩至干后用GPC 流动相定容，在线GPC 净化，大体积进样，内工作曲线的线性关系良好。结论
【中图分类号】DF795. 1
监测模式，血中20种安眠镇静药物提取率在80. 2% 99. 3%之间，检出限小于21. 6ng /mL；在0. 1 10μg /mL浓度范围
方法可用于安眠镇静类药物误服中毒者和刑事案件中毒者血样的分析。【文献标识码】B
【文章编号】1001－5728（2013）04－0327－04
【关键词】法医毒物分析；安眠镇静药；血；在线凝胶渗透色谱净化；气质联用法
GPC-GC /MSanalyed 20kinds of hypnotic sedative drug ingredients in blood （Zhang Bingqian ，Wang Guoqiang ，Sun Guijin ，Xu Jianjun /Criminal police detachment of Lianyungang City Public Security Bureau ，Jiangsu Lianyungang ，222000，China ）
【Abstract 】Objective To establish the method for the barbiturates ，phenothiazines ，benzodiazepines ，tricyclics and other sleep psychotropic drugs in blood by using liquid-liquid extraction-online GPC-GC /MS．Methods The blood samples added internal standard SKF 525A ，hydrolied with the biological enzyme ，precipitated the protein with acetonitrile to leach drug ，then added anhydrous magnesium sulfate ，mixed fully and high-speed centrifugation ，dispensed the supernatant to evprate at temperature of 60ħ with nitrogen ，constanted volume with cyclohexaneacetone ，then filtered with 0. 4μm filter to analyes by online GPC-GC /MS．Results The extraction rate of all types of representative hypnotic sedative drugs in the blood was between 80. 2% 99. 3%，and the detection limit is less than 21. 6ng /mL；Between the concentration range of 0. 1 10μg /mL，it has good linear relationship of working curve．Conclusion The method can be used for the analysis of blood samples of hypnotic sedative drugs mistakenly taking and the poisoner in criminal cases．
【Key words 】forensic toxicological analysis ；hypnotic sedative drugs ；blood ；online GPC ；GC-MS
在法医毒物分析中，安眠镇静类药物检验是一项
重要的内容，文献报道的方法主要为调节酸碱性后用有机溶剂或固相萃取方法提取，以气相色谱、气质联
［1-6］
用、液相色谱和液质联用法进行分析，操作过程繁琐。本文建立了液液提取－在线凝胶渗透色谱（GPC ）净化－气质联用分析血中20种各类安眠镇静药物成分的分析方法，此方法特异性好、灵敏度高、通用性强。
安眠精神类药物标准品（购于国家标准物质研究中
心）；空白血（购自于连云港市中心血站）。1. 2
血样处理方法
取血液样品1mL ，加入10mL 的试管中，加入内标SKF 525A 和烯丙基异丙基巴比妥各1μg ，加100μL β-葡萄糖酸苷酶反应2h ，加2mL 乙腈，混匀，加2g 无水硫酸8000r /min离心，镁，充分混匀，分取上层清液于10mL
60ħ 下N 2吹至干，1mL 环己烷－丙酮提取剂试管中，
（体积比7ʒ3 ）定容，0. 45μm 滤膜过滤超声提取5min ，
供在线凝胶渗透色谱－气相色谱/质谱分析1. 31. 3. 1
凝胶净化、气相色谱和质谱条件
凝胶渗透色谱条件
GPC 凝胶渗透色谱柱CLNpakEV200（2. 0ˑ
1
1. 1
材料与方法
主要仪器和试剂
GCMS-QP2010PLUS 气相色谱和质谱联用仪（日
20A （日本岛津公司）；在线凝胶渗透色谱分析仪LC-本岛津公司）；超声波清洗仪等。
巴比妥类、吩噻嗪类、苯骈二氮杂艹三环类等卓类、
【作者简介】张炳谦，男，高级工程师，学士，主要从事法医毒物mail ：bingqian1970@163. com 分析方面研究。E-
150mm ）；柱温箱温度：40ħ ；紫外检测器检测波长：
210nm ；流动相：丙酮/环己烷（体积比7ʒ 3）；流速：0. 1mL /min；进样体积：10μL ；采集样品时间4. 07 6. 07min 。
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CHIN J FORENSIC MED 20132841. 3. 2
气相色谱条件
35MS （0. 25mmID ˑ 30m ˑ 0. 25μm ）色谱柱：DB-
弹性石英毛细柱；载气为高纯氦气（纯度≥
99. 999%）；PTV 进样口，进样口程序升温：120ħ （5min ）→100ħ /min→250ħ （31. 7min ）恒压模式，分
分流比10ʒ1 ，进样量200μL ；柱箱温度程序：流进样，
82ħ （5min ）→8ħ /min→310ħ （11. 75min ）。1. 3. 3
质谱条件
EI 电子轰击源，70eV ；离子源温度200ħ ；接口
扫描时间：9. 6 40. 0min 质量范围：m /z温度：250ħ ，
45 450，溶剂延迟9. 5min ；模式为全扫描采集模式。1. 4
定性分析和定量分析方法
采用全离子扫描检测模式。检测分析物和内标
的定量离子，根据色谱峰面积用内标工作曲线法进行定量分析。检测分析物的定量离子和辅助定性离
根据离子丰度比结合保留时间进行定性分析。子，
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2. 1
结果与讨论
色谱分离
通过对提取溶剂进行考查，发现采用乙腈沉淀蛋白提取对药物和内标都有较好的提取效果。各待测物在拟定的色谱条件下分离完全，空白血液对检测无干扰。各待测物及内标的总离子流图见图1。2. 2
进样组分GPC 采集程序的确定
血液提取物中分子量较大的脂肪、蛋白质、色素等干扰物质与待测的安眠镇静类药物在凝胶色谱柱上的保留时间不同，是凝胶净化的理论基础，实验发现：提取液中杂质类物质主要在2. 41 3. 90min 流出，混合待测物质标准品主要在3. 48 5. 50min 流出，图2为空白血液样品和待测物210nm 的紫外吸收色谱图
。
表1
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3. 74 5. 74min ，本文考察了3. 07 5. 07min ，
4. 07 6. 07min 三个采集时间的GPC 净化回收率及杂质去除效果。取20种待测物混合标样，在相同的进样量和色谱条件下，通过比较GPC 净化前后各待测物的峰面积计算回收率，不同采集时间段待测标样的回收率见表1。
20种安眠镇静类药物GPC 净化回收率
CHIN J FORENSIC MED 2013284不同采集时间段空白血样提取物中杂质的去除效果见图
3
实验结果发现：4. 07 6. 07min 之间的收集组分既能保证各待测样品有较高的GPC 净化回收率，同时血样提取液杂质净化效果较好。2. 3
检出限、标准曲线、回收率和精密度
取空白血样1mL 添加分析物各1μg ，按照实验拟定的方法进行分析，选择离子法定量，根据信噪比s /n=3：1确定方法的检出限，20种安眠镇静药物检出限
分别加入0. 1 均小于21. 6ng /mL。取空白血样，
10μg 各分析物，再加入1μg 内标，制备各分析物的工
作曲线，计算相关系数，在上述范围浓度范围内，线性关系良好，相关系数均大于0. 99。取空白血样5份，添加分析物及内标后平行进样分析，测定回收率和精密度，提取率在80. 2% 99. 3%之间，相对偏差均小于10%（n =5）。结果见表2。
图3空白血提取液GPC 净化后不同采集时间的总离子流图
表2
20种安眠镇静类的检出限、工作曲线、回收率和精密度
相关系数
R 0. 99650. 99000. 99120. 99790. 99610. 99540. 99870. 99100. 99550. 99910. 99120. 99130. 99670. 99700. 99260. 99250. 99660. 99490. 99450. 9966
工作曲线Y =Ax +b Y =1. 896x +0. 215Y =1. 821x +0. 012Y =1. 989x +0. 091Y =2. 887x +0. 031Y =2. 995x +0. 020Y =1. 555x +0. 089Y =1. 589x +0. 028Y =2. 125x +0. 003Y =1. 233x +0. 015Y =2. 055x +0. 889Y =2. 995x +0. 020Y =2. 004x +0. 211Y =0. 998x +0. 009Y =1. 787x +0. 111Y =2. 022x +0. 962Y =2. 545x +0. 889Y =0. 998x +0. 009Y =2. 887x +0. 031Y =0. 998x +0. 009Y =1. 589x +0. 028
检测限ng /mL6. 775. 07. 433. 754. 238. 864. 612. 043. 154. 132. 701. 633. 5220. 710. 312. 511. 212. 721. 68. 0
方法回收率
%65. 367. 561. 660. 370. 275. 482. 380. 681. 686. 790. 694. 379. 384. 390. 685. 189. 390. 089. 389. 3
相对偏差
%8. 37. 55. 66. 05. 69. 32. 37. 65. 64. 65. 63. 36. 37. 38. 65. 15. 36. 06. 32. 3
检测物巴比妥异戊巴比妥戊巴比妥速可眠眠尔通苯巴比妥阿米替林多虑平异丙嗪泰尔登氯丙嗪安定三氟拉嗪硝基安定氯氮平利眠宁氯硝安定舒乐安定阿普唑仑三唑仑
保留时间min 15. 294518. 004018. 500019. 087519. 816522. 164523. 579523. 961024. 859026. 942526. 999027. 133028. 026032. 113032. 244533. 426033. 563534. 648034. 985537. 3725
定量定性离子
amu [***********][***********][***********][***********][***********][***********][***********][***********][***********]8
·329·
CHIN J FORENSIC MED 20132842. 4
实际中毒样品分析
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（收稿日期：2012-09-13）
取麻醉强奸受害者血液1mL ，用本实验方法测
定，在血样中检出三唑仑，含量为1. 1μg /mL，说明本方法在刑事案件分析中是切实可行的，能满足基层办案检测的要求。
参
考
文
献
·技术交流·
3种特殊染色在急性心肌梗死死后诊断中的应用比较
毕海涛，杨
莹，刘
霞，黄建业，王松军，李英敏，丛
斌
（河北医科大学法医学系河北省法医学重点实验室，河北石家庄050017）
【摘要】目的
对比观察苏木素－碱性复红－苦味酸染色（HBFP 染色）、变色酸2R-亮绿染色和Heidenhain 染色在
以大鼠急性心肌梗死模型、法医检案急性心肌梗死心脏标本作为研究对
①3种特染方法在大鼠心肌缺血
急性心肌梗死死后诊断中的应用价值。方法
采用HBFP 染色、变色酸2R-亮绿染色和Heidenhain 染色进行对比观察。结果象，
15min 时均可观察到阳性染色，且阳性染色面积随缺血时间的延长而扩大；②大鼠急性心肌缺血4h 心脏标本在－20ħ 、4ħ 及室温条件下保存至14d ，3种特染方法仍可见阳性着色，但变色酸2R-亮绿染色和HBFP 染色随保存时间的延长而Heidenhain 染色效果最为稳定；③急性心肌梗死检案标本中，3种特染方法均出现着色能力下降，阳性区域变小的趋势，可显示缺血心肌纤维，发病1h 内死亡者Heidenhain 染色优于另外两种染色。结论3种特染均可客观的显示出急性心肌梗死早期病理改变，其中Heidenhain 染色更具稳定性和可操作性。
【关键词】法医病理学；急性心肌梗死；苏木素－碱性复红－苦味酸染色；变色酸2R-亮绿染色；Heidenhain 染色；死后诊断
【中图分类号】DF795. 1
【文献标识码】B
【文章编号】1001－5728（2013）04－0330－03
Application and comparison of three special stains in the postmortem diagnosis of acute myocardial infarction （Bi Haitao ，Yang Ying ，Liu Xia ，Huang Jianye ，Wang Songjun ，Li Yingmin ，Cong Bin /Department of Forensic Medicine ，Hebei Medical University ，Key Laboratory of Forensic Medicine ，Shijiazhuang 050017，China ）
【Abstract 】Objective To observe comparatively the applications of HBFP stain ，chrometrope 2R-Brilliant green stain and Heidenhain stain for the postmortem diagnosis of acute myocardial infarction．Methods Experimental myocardial infarction in the rat and human postmortem myocardium specimens were studied with the HBFP stain ，chrometrope 2R-brilliant green stain and Heidenhain stain separately．Results ①Positive staining can be seen 15minutes after myocardial ischemia of the rats through all three staining
methods ，and the positive stained areas of the heart expanded as the ischemia continued ；②After the hearts ，
which suffered acute myocardial ischemia for 4hours ，
【作者简介】毕海涛，男，讲师，博士研究生，主要从事法医病理E-mail ：bihaitao@126. com 学研究，
【通信作者】丛斌，男，教授，博士，主要从事法医病理学和法医E-mail ：hbydcongbin@126. com 物证学研究，·330·
were preserved for 14days at －20ħ ，4ħ and room temperature separately ，there was still positive staining in ischemic tissues with the three special