广东药学院学报
Journal of Guangdong Phar m aceutical College Oct . 2009, 25(5)
493
吡硫醇聚乙二醇前药的合成与表征
张围宇, 王红, 蔡波涛, 胡春玲
(湖北中医学院药学院, 湖北武汉430065)
摘要:目的合成吡硫醇聚乙二醇前体药物, 对目标化合物进行初步体外释放及刺激性试验研究。方法以单甲氧基聚乙二醇4000为原料, 与丁二酸酐反应后再与N 2羟基丁二酰亚胺缩合得到活泼酯, 最后与吡硫醇反应得到目标化合物; 用薄层色谱、紫外、红外、核磁共振氢谱对其结构进行表征。结果与结论合成产物的结构表征结果表明单甲氧基聚乙二醇4000成功地连接到了吡硫醇上; 初步的体外降解及刺激性试验表明该前药具有一定缓释作用, 。关键词:吡硫醇; 单甲氧基聚乙二醇; 前药; 结构表征
中图分类号:R 914 文献标识码:A 文章编号:1006-8783(-03
Syn thesis and i n ol 2ZHANG W I Bo 2HU Chun 2ling (School of Phar m acy, Hubei U niversity of
Chinese M W 430065, China )
Abstract:Objecti ve To synthesize and characterize pyritinol 2PEG p r odrug, and assess its in vitro release and irritati on . M ethods mPEG4K was first reacted with succinic anhydride, and then treated with N 2hydr oxyl succinic anhydride, finally, reacted with pyritinol t o give the target pyritinol 2PEG which is the p r odrug of pyritinol . Results The che m ical structure of pyritinol 2PEG was characterized by T LC, UV, FTI R and H 2NMR. Conclusi on The structural characterizati on of the target compound showed that mPEG4K was bonded t o pyritinol . This p r odrug has sl ow 2release p r ofile during in vitr o release test, and significantly l ow vascular irritati on .
Key words:pyritinol; methoxy polyethyleneglycol; p r odrug; synthesis
1
高分子量的聚乙二醇及其单甲氧基聚乙二醇等由于其良好的水溶性、生物相容性和无免疫原性, 以及无毒等优点, 在前体药物的制备中有越来越多的应用
[1-2]
枝状及注射部位乃至整个上肢皮肤水肿、发硬、痒痛等不良反应。作者通过采用单甲氧基聚乙二醇的活化酯与吡硫醇合成前体药物
[3-6]
, 以期改善吡硫醇
。吡硫醇临床上主要用于脑震荡综合症、
药物半衰期短以及刺激性大的问题。1 实验部分1. 1 仪器与试剂
RE 252AA 旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂) ; 78HW 21型恒温磁力搅拌器(杭州仪表电机有限公
脑外伤后遗症、脑炎及脑炎后遗症等的头胀痛、头晕、失眠、记忆力减退、注意力不集中、情绪变化等症状的改善, 亦用于脑动脉硬化、老年痴呆等。临床主要用其盐酸盐, 因其半衰期短, 口服给药需每天3次, 很不方便; 静脉滴注时, 药物对血管黏膜有刺激作用, 易发生注射部位血管肿胀、疼痛、呈青紫色、树
收稿日期:2009-07-01; 修回日期:2009-10-11基金项目:湖北省自然科学基金资助课题(2007ABA213) 作者简介:张围宇(1981-) , 男, 在读硕士研究生, E mail:
zhang weiyusuper@163. co m; 通讯作者:王红(1958-) ,
司) ; SKFG 201电热恒温鼓风干燥器(湖北省黄石市
医疗器械厂) ; SHB 2Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司) ; UV 21700紫外可见分光光度计(日本岛津) ; DFY 2低温恒温反应浴(郑州长城仪器有限公司) ; WRS 2I B 数字熔点仪(上海精密科学仪器公司) ; Perkin 2El m er Spectru m 2000FTI R 光谱仪(美国PE 公司) ; AS600(600MHz ) 高分辨率核磁共
女, 教授, 硕士生导师, 主要从事新药研究与开发,
E mail:wanghonghb502@yahoo . com. cn 。
494广东药学院学报
85%, mp 56. 3～58. 2℃。
第25卷
振仪; ZF 26型三用紫外线分析仪(上海嘉鹏科技有
限公司) 。
药用单甲氧聚乙二醇4000(mPEG4K ) (南京威尔化工有限公司) ; 吡硫醇(质量分数:98. 5%, 水分:0. 17%, 批号:080519, 上海新云化工有限公司提供) ; 丁二酸酐、二环己基碳酰亚胺(DCC ) 、N 2羟基琥珀酰亚胺(NHS ) 、对二甲氨基吡啶(DMAP ) 、薄层层析硅胶GF 254均为化学纯, N , N 2二甲基甲酰胺(DMF ) 、三氯甲烷、二氯甲烷、乙醚、甲醇、吡啶、丙酮均为分析纯。1. 2 方法
1. 2. 1 单甲氧基聚乙二醇4000琥珀酸单酯(mPEG4K 2A ) 的合成 参照文献[7-8]进行合成
1. 2. 2 吡硫醇聚乙二醇前药的合成 参照文
献
进行合成试验研究。称取干燥的mPEG4K 2
A 4. 0g (0. 1mmoL ) , 用50mL DMF 溶解, 0～5℃搅拌20m in, 依次加入NHS 0. 23g (0. 2mmoL ) 和DCC 0. 62g (0. 3mmoL ) , 0～5℃搅拌10m in, 依次
[9-10]
加入吡硫醇0. 48g (0. 13mmoL ) 和DMAP 0. 16g (0. 13mmoL ) 。0～5℃反应2h, 30～35℃下反应20h, 停止反应, 反应液过滤, 滤液在快速搅拌下加
入冷乙醚180mL, 搅拌5m in 后置冰箱中静置30m in 。过滤得浅米黄色固体, 30mL 水溶解,
过滤, () , 用1mol/LHCl (×(×2) 。加。过滤干燥剂, 滤, 滤液浓缩, 快速搅, 过滤得浅米黄色粉末, 40℃真空干燥24h (干燥剂为P 2O 5) , 得浅米黄色粉末(吡硫醇的载药量4. 89%) , mp 56. 5～59. 2℃。
试验研究。称取干燥的单甲氧基聚乙二醇(mPEG4000) 40g (10mmoL ) , 烷中, 20. 6啶, , 入饱和3使溶解, 过滤, 用80mL 2次, 水相冷却至0℃后用2mol/L 的HCl 酸化至pH 2左右, 用二氯甲烷100mL 分3
次萃取, 合并二氯甲烷层, 无水Na 2S O 4干燥过夜。滤去干燥剂, 浓缩至粘稠, 快速搅拌下加入冷无水乙醚300mL, 放入冰箱静置, 待产品完全析出后过滤, 抽干, P 2O 5干燥, 称重, 得mPEG4K 2S 35g, 产率为
2 结果与讨论2. 1 合成
吡硫醇聚乙二醇前药的合成路线如下
。
2. 2 表征
2. 2. 1 熔点测定 用毛细管法对目标化合物与吡
硫醇进行熔点测定, 得目标化合物的熔点为56. 5～59. 2℃, 明显低于吡硫醇的215. 9～217. 7℃, 推断目标化合物是不同于吡硫醇的其他物质。2. 2. 2 薄层色谱鉴别 称取吡硫醇、吡硫醇聚乙二
醇前药, 用DMF 溶解, 分别点样于同一硅胶板上, 以
丙酮2石油醚2甲醇(体积比1∶1∶1) 为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 置紫外灯(254nm ) 下检视, 吡硫醇斑点与目标化合物斑点清晰, 且两试样R f 值相差较大, 说明目标化合物是不同于吡硫醇的其他物质。2. 2. 3 紫外色谱鉴别 分别称取吡硫醇及目标化
第5期
-1
张围宇, 等. 吡硫醇聚乙二醇前药的合成与表征495
合物少量, 溶于0. 1mol ・L HCl 中, 经适当稀释得一定浓度的溶液, 分别在200～400nm 波长范围内进行紫外扫描。结果:吡硫醇的0. 1mol ・L HCl 溶液在295. 20n m 有最大吸收, 目标化合物的0. 1
-1
mol ・L HCl 溶液在297. 40n m 有最大吸收。结果表明:目标化合物具有吡硫醇分子的基本结构; 最大吸收波长发生红移, mPEG 已经连接在吡硫醇上。2. 2. 4 红外光谱表征 将目标化合物和各步反应
-1
3 结论
本研究合成了吡硫醇聚乙二醇前药, 经熔点测
定、薄层色谱、紫外图谱、红外光谱、核磁共振氢谱表征, 表明mPEG4K 成功地连接到了吡硫醇上。通过初步的体外降解及刺激性试验, 该前药具有一定缓释作用, 且能显著减小在注射过程中对注射部位及血管的刺激作用。
参考文献:
Effective drug delivery by pegylated drug conjugates [J ].A dvan D rug D eliv Rev , 2003, 55(2) :-250.
[2]RB. w [J ].J
(:[R, P ALCZ UK N C . Effect of
polyethylene glycol on i m munogenicity circulating life of bovine liver catalase [J ].J B iol Che m , 1977, 252(11) :3582-3586.
[4]ABUCHOW SKIA, VAN ES T, P ALCZ UK N C . A lterati on
of i m munol ogical p r op rties of bovine seru m albu m in by covalent attach ment of polyethylene glycol [J ].J B iol Che m , 1977, 252(11) :3578-3581.
[5]公伟, 薛春佳, 冯军, 等. 单甲氧基聚乙二醇修饰L 2门冬
酰胺酶的研究[J ].中国医药工业杂志, 2005, 38(5) :336-339.
[6]LEE H, P ARK TG . Preparati on and characterizati on of
mono 2PEGylated i p ider mal gr owth fact or:evaluti on of in vitro bi ol ogic activity[J ].Phar m R es, 2002, 19(6) :845-851.
[7]熊成东, 王亚辉, 袁明龙, 等. 聚乙二醇衍生物的合成研
究进展[J ].高分子通报, 2003, 26(1) :39-43. [8]Y UKI O N, K AZ UNOR I K,MAS AO K, et al . Poly (ehylene
glycol ) and cycl odextrin as novel building units f or molecular asse mbly and polyr otaxanes [J ].Polym Prepr , 1997, 38(2) :529-533.
[9]叶海, 张灿, 沈文斌, 等. 灯盏乙素聚乙二醇前药的合成
与表征[J ].中国天然药物, 2006, 4(4) :283-286. [10]GRE NWALD RB, PE NDR I A, CONOVER C, et al . D rug
deliver syste m s:2, Ca mp t othecin 202O 2poly (ethlene glycol ) ester trans port f or m s [J ].J M ed Che m , 1996, 39(20) :1938-1940.
[11]常军, 郑玉斌, 段久芳, 等. 含52氟尿嘧啶的聚乙二醇酯
的制备与表征[J ].现代化工, 2006, 26(3) :40-42. [12]孟繁娜, 唐星, 符纯美. 盐酸吡硫醇无痛型注射液的制
备[J ].沈阳药科大学学报, 2006, 23(12) :754-756. [13]LOVE LL M W. Less 2painful emulsi on for mulati ons f or
intravenous ad m inistrati on of clarithr omycin [J ].Int J Phar m , 1994, 109:45-57.
[14]C ANNON J B. Reducti on of pain on intravenous infusi on
with bile salt for mulati ons for a macr olide antibi otic [J ].Int J Phar m , 1995, 114:65-74.
[1]GREE NWALD RB, CHOE YH, MCG U I RE J, et al .
产物用压片法进行红外扫描, 各图谱进行对比, 得到
-1
目标化合物中可能的基团:3525. 40c m (酚羟基
-1
伸缩振动) ; 1735. 68c m (酯羰基上羰基伸缩振
-1-1-1
动) ; 1455. 32c m , 1349. 52c m , 1297. 18c m ,
-1
949. 67c m (均为聚乙二醇骨架伸缩振动) ; 1108125-1-1
c m (醚健不对称伸缩振动) ; 2869. 55c m (环上碳氢伸缩振动) 。表明mPEG 醇上。
2. 2. 5 由于, 所以在图谱上很难看到吡硫醇的氢信号, 无法准确积分氢的个数。各氢的化学位移(δ) 如下:2. 6～2. 8(—O —CO —CH 2—CH 2—CO —O —) , 3. 3～3. 4(—OCH 3) , 3. 4～3. 8(—OCH 2—) , 4. 2～4. 3(—CH 2—O —CO —) 。
2. 3 初步体外释放及刺激性试验
2. 3. 1 体外释放试验 参照文献[11-12]采用透
析袋与紫外分光光度法, 分别在0. 1mol ・L 的
-1-1
HCl 、0. 1mol ・L 的Na OH 、及0. 1mol ・L 的pH7. 2的磷酸盐缓冲液3种不同的环境中对吡硫醇
-1
聚乙二醇前药做了体外释放研究。结果:吡硫醇与单甲氧基聚乙二醇4000琥珀酸单酯的物理混合物在酸性、中性、碱性条件下, 24h 释放率均达90%以上; 吡硫醇聚乙二醇前药24h 后的降解情况分别为酸性条件下释放36%、碱性条件下53%、中性条件下26%; 前药在不同条件下的释放速率大小为:碱性>酸性>中性。
[13-14]
2. 3. 2 刺激性试验 参照文献, 通过小鼠抓挠试验、大鼠舔足试验、大鼠尾静脉刺激性试验对吡硫醇聚乙二醇前药做初步刺激性考察。小鼠抓挠试验结果:供试组与阳性对照组、阴性对照组比较差异均有显著性(P
广东药学院学报
Journal of Guangdong Phar m aceutical College Oct . 2009, 25(5)
493
吡硫醇聚乙二醇前药的合成与表征
张围宇, 王红, 蔡波涛, 胡春玲
(湖北中医学院药学院, 湖北武汉430065)
摘要:目的合成吡硫醇聚乙二醇前体药物, 对目标化合物进行初步体外释放及刺激性试验研究。方法以单甲氧基聚乙二醇4000为原料, 与丁二酸酐反应后再与N 2羟基丁二酰亚胺缩合得到活泼酯, 最后与吡硫醇反应得到目标化合物; 用薄层色谱、紫外、红外、核磁共振氢谱对其结构进行表征。结果与结论合成产物的结构表征结果表明单甲氧基聚乙二醇4000成功地连接到了吡硫醇上; 初步的体外降解及刺激性试验表明该前药具有一定缓释作用, 。关键词:吡硫醇; 单甲氧基聚乙二醇; 前药; 结构表征
中图分类号:R 914 文献标识码:A 文章编号:1006-8783(-03
Syn thesis and i n ol 2ZHANG W I Bo 2HU Chun 2ling (School of Phar m acy, Hubei U niversity of
Chinese M W 430065, China )
Abstract:Objecti ve To synthesize and characterize pyritinol 2PEG p r odrug, and assess its in vitro release and irritati on . M ethods mPEG4K was first reacted with succinic anhydride, and then treated with N 2hydr oxyl succinic anhydride, finally, reacted with pyritinol t o give the target pyritinol 2PEG which is the p r odrug of pyritinol . Results The che m ical structure of pyritinol 2PEG was characterized by T LC, UV, FTI R and H 2NMR. Conclusi on The structural characterizati on of the target compound showed that mPEG4K was bonded t o pyritinol . This p r odrug has sl ow 2release p r ofile during in vitr o release test, and significantly l ow vascular irritati on .
Key words:pyritinol; methoxy polyethyleneglycol; p r odrug; synthesis
1
高分子量的聚乙二醇及其单甲氧基聚乙二醇等由于其良好的水溶性、生物相容性和无免疫原性, 以及无毒等优点, 在前体药物的制备中有越来越多的应用
[1-2]
枝状及注射部位乃至整个上肢皮肤水肿、发硬、痒痛等不良反应。作者通过采用单甲氧基聚乙二醇的活化酯与吡硫醇合成前体药物
[3-6]
, 以期改善吡硫醇
。吡硫醇临床上主要用于脑震荡综合症、
药物半衰期短以及刺激性大的问题。1 实验部分1. 1 仪器与试剂
RE 252AA 旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂) ; 78HW 21型恒温磁力搅拌器(杭州仪表电机有限公
脑外伤后遗症、脑炎及脑炎后遗症等的头胀痛、头晕、失眠、记忆力减退、注意力不集中、情绪变化等症状的改善, 亦用于脑动脉硬化、老年痴呆等。临床主要用其盐酸盐, 因其半衰期短, 口服给药需每天3次, 很不方便; 静脉滴注时, 药物对血管黏膜有刺激作用, 易发生注射部位血管肿胀、疼痛、呈青紫色、树
收稿日期:2009-07-01; 修回日期:2009-10-11基金项目:湖北省自然科学基金资助课题(2007ABA213) 作者简介:张围宇(1981-) , 男, 在读硕士研究生, E mail:
zhang weiyusuper@163. co m; 通讯作者:王红(1958-) ,
司) ; SKFG 201电热恒温鼓风干燥器(湖北省黄石市
医疗器械厂) ; SHB 2Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司) ; UV 21700紫外可见分光光度计(日本岛津) ; DFY 2低温恒温反应浴(郑州长城仪器有限公司) ; WRS 2I B 数字熔点仪(上海精密科学仪器公司) ; Perkin 2El m er Spectru m 2000FTI R 光谱仪(美国PE 公司) ; AS600(600MHz ) 高分辨率核磁共
女, 教授, 硕士生导师, 主要从事新药研究与开发,
E mail:wanghonghb502@yahoo . com. cn 。
494广东药学院学报
85%, mp 56. 3～58. 2℃。
第25卷
振仪; ZF 26型三用紫外线分析仪(上海嘉鹏科技有
限公司) 。
药用单甲氧聚乙二醇4000(mPEG4K ) (南京威尔化工有限公司) ; 吡硫醇(质量分数:98. 5%, 水分:0. 17%, 批号:080519, 上海新云化工有限公司提供) ; 丁二酸酐、二环己基碳酰亚胺(DCC ) 、N 2羟基琥珀酰亚胺(NHS ) 、对二甲氨基吡啶(DMAP ) 、薄层层析硅胶GF 254均为化学纯, N , N 2二甲基甲酰胺(DMF ) 、三氯甲烷、二氯甲烷、乙醚、甲醇、吡啶、丙酮均为分析纯。1. 2 方法
1. 2. 1 单甲氧基聚乙二醇4000琥珀酸单酯(mPEG4K 2A ) 的合成 参照文献[7-8]进行合成
1. 2. 2 吡硫醇聚乙二醇前药的合成 参照文
献
进行合成试验研究。称取干燥的mPEG4K 2
A 4. 0g (0. 1mmoL ) , 用50mL DMF 溶解, 0～5℃搅拌20m in, 依次加入NHS 0. 23g (0. 2mmoL ) 和DCC 0. 62g (0. 3mmoL ) , 0～5℃搅拌10m in, 依次
[9-10]
加入吡硫醇0. 48g (0. 13mmoL ) 和DMAP 0. 16g (0. 13mmoL ) 。0～5℃反应2h, 30～35℃下反应20h, 停止反应, 反应液过滤, 滤液在快速搅拌下加
入冷乙醚180mL, 搅拌5m in 后置冰箱中静置30m in 。过滤得浅米黄色固体, 30mL 水溶解,
过滤, () , 用1mol/LHCl (×(×2) 。加。过滤干燥剂, 滤, 滤液浓缩, 快速搅, 过滤得浅米黄色粉末, 40℃真空干燥24h (干燥剂为P 2O 5) , 得浅米黄色粉末(吡硫醇的载药量4. 89%) , mp 56. 5～59. 2℃。
试验研究。称取干燥的单甲氧基聚乙二醇(mPEG4000) 40g (10mmoL ) , 烷中, 20. 6啶, , 入饱和3使溶解, 过滤, 用80mL 2次, 水相冷却至0℃后用2mol/L 的HCl 酸化至pH 2左右, 用二氯甲烷100mL 分3
次萃取, 合并二氯甲烷层, 无水Na 2S O 4干燥过夜。滤去干燥剂, 浓缩至粘稠, 快速搅拌下加入冷无水乙醚300mL, 放入冰箱静置, 待产品完全析出后过滤, 抽干, P 2O 5干燥, 称重, 得mPEG4K 2S 35g, 产率为
2 结果与讨论2. 1 合成
吡硫醇聚乙二醇前药的合成路线如下
。
2. 2 表征
2. 2. 1 熔点测定 用毛细管法对目标化合物与吡
硫醇进行熔点测定, 得目标化合物的熔点为56. 5～59. 2℃, 明显低于吡硫醇的215. 9～217. 7℃, 推断目标化合物是不同于吡硫醇的其他物质。2. 2. 2 薄层色谱鉴别 称取吡硫醇、吡硫醇聚乙二
醇前药, 用DMF 溶解, 分别点样于同一硅胶板上, 以
丙酮2石油醚2甲醇(体积比1∶1∶1) 为展开剂, 展开, 取出, 晾干, 置紫外灯(254nm ) 下检视, 吡硫醇斑点与目标化合物斑点清晰, 且两试样R f 值相差较大, 说明目标化合物是不同于吡硫醇的其他物质。2. 2. 3 紫外色谱鉴别 分别称取吡硫醇及目标化
第5期
-1
张围宇, 等. 吡硫醇聚乙二醇前药的合成与表征495
合物少量, 溶于0. 1mol ・L HCl 中, 经适当稀释得一定浓度的溶液, 分别在200～400nm 波长范围内进行紫外扫描。结果:吡硫醇的0. 1mol ・L HCl 溶液在295. 20n m 有最大吸收, 目标化合物的0. 1
-1
mol ・L HCl 溶液在297. 40n m 有最大吸收。结果表明:目标化合物具有吡硫醇分子的基本结构; 最大吸收波长发生红移, mPEG 已经连接在吡硫醇上。2. 2. 4 红外光谱表征 将目标化合物和各步反应
-1
3 结论
本研究合成了吡硫醇聚乙二醇前药, 经熔点测
定、薄层色谱、紫外图谱、红外光谱、核磁共振氢谱表征, 表明mPEG4K 成功地连接到了吡硫醇上。通过初步的体外降解及刺激性试验, 该前药具有一定缓释作用, 且能显著减小在注射过程中对注射部位及血管的刺激作用。
参考文献:
Effective drug delivery by pegylated drug conjugates [J ].A dvan D rug D eliv Rev , 2003, 55(2) :-250.
[2]RB. w [J ].J
(:[R, P ALCZ UK N C . Effect of
polyethylene glycol on i m munogenicity circulating life of bovine liver catalase [J ].J B iol Che m , 1977, 252(11) :3582-3586.
[4]ABUCHOW SKIA, VAN ES T, P ALCZ UK N C . A lterati on
of i m munol ogical p r op rties of bovine seru m albu m in by covalent attach ment of polyethylene glycol [J ].J B iol Che m , 1977, 252(11) :3578-3581.
[5]公伟, 薛春佳, 冯军, 等. 单甲氧基聚乙二醇修饰L 2门冬
酰胺酶的研究[J ].中国医药工业杂志, 2005, 38(5) :336-339.
[6]LEE H, P ARK TG . Preparati on and characterizati on of
mono 2PEGylated i p ider mal gr owth fact or:evaluti on of in vitro bi ol ogic activity[J ].Phar m R es, 2002, 19(6) :845-851.
[7]熊成东, 王亚辉, 袁明龙, 等. 聚乙二醇衍生物的合成研
究进展[J ].高分子通报, 2003, 26(1) :39-43. [8]Y UKI O N, K AZ UNOR I K,MAS AO K, et al . Poly (ehylene
glycol ) and cycl odextrin as novel building units f or molecular asse mbly and polyr otaxanes [J ].Polym Prepr , 1997, 38(2) :529-533.
[9]叶海, 张灿, 沈文斌, 等. 灯盏乙素聚乙二醇前药的合成
与表征[J ].中国天然药物, 2006, 4(4) :283-286. [10]GRE NWALD RB, PE NDR I A, CONOVER C, et al . D rug
deliver syste m s:2, Ca mp t othecin 202O 2poly (ethlene glycol ) ester trans port f or m s [J ].J M ed Che m , 1996, 39(20) :1938-1940.
[11]常军, 郑玉斌, 段久芳, 等. 含52氟尿嘧啶的聚乙二醇酯
的制备与表征[J ].现代化工, 2006, 26(3) :40-42. [12]孟繁娜, 唐星, 符纯美. 盐酸吡硫醇无痛型注射液的制
备[J ].沈阳药科大学学报, 2006, 23(12) :754-756. [13]LOVE LL M W. Less 2painful emulsi on for mulati ons f or
intravenous ad m inistrati on of clarithr omycin [J ].Int J Phar m , 1994, 109:45-57.
[14]C ANNON J B. Reducti on of pain on intravenous infusi on
with bile salt for mulati ons for a macr olide antibi otic [J ].Int J Phar m , 1995, 114:65-74.
[1]GREE NWALD RB, CHOE YH, MCG U I RE J, et al .
产物用压片法进行红外扫描, 各图谱进行对比, 得到
-1
目标化合物中可能的基团:3525. 40c m (酚羟基
-1
伸缩振动) ; 1735. 68c m (酯羰基上羰基伸缩振
-1-1-1
动) ; 1455. 32c m , 1349. 52c m , 1297. 18c m ,
-1
949. 67c m (均为聚乙二醇骨架伸缩振动) ; 1108125-1-1
c m (醚健不对称伸缩振动) ; 2869. 55c m (环上碳氢伸缩振动) 。表明mPEG 醇上。
2. 2. 5 由于, 所以在图谱上很难看到吡硫醇的氢信号, 无法准确积分氢的个数。各氢的化学位移(δ) 如下:2. 6～2. 8(—O —CO —CH 2—CH 2—CO —O —) , 3. 3～3. 4(—OCH 3) , 3. 4～3. 8(—OCH 2—) , 4. 2～4. 3(—CH 2—O —CO —) 。
2. 3 初步体外释放及刺激性试验
2. 3. 1 体外释放试验 参照文献[11-12]采用透
析袋与紫外分光光度法, 分别在0. 1mol ・L 的
-1-1
HCl 、0. 1mol ・L 的Na OH 、及0. 1mol ・L 的pH7. 2的磷酸盐缓冲液3种不同的环境中对吡硫醇
-1
聚乙二醇前药做了体外释放研究。结果:吡硫醇与单甲氧基聚乙二醇4000琥珀酸单酯的物理混合物在酸性、中性、碱性条件下, 24h 释放率均达90%以上; 吡硫醇聚乙二醇前药24h 后的降解情况分别为酸性条件下释放36%、碱性条件下53%、中性条件下26%; 前药在不同条件下的释放速率大小为:碱性>酸性>中性。
[13-14]
2. 3. 2 刺激性试验 参照文献, 通过小鼠抓挠试验、大鼠舔足试验、大鼠尾静脉刺激性试验对吡硫醇聚乙二醇前药做初步刺激性考察。小鼠抓挠试验结果:供试组与阳性对照组、阴性对照组比较差异均有显著性(P