石蜡包埋的步骤

包埋时间

50%酒精:1个小时

70%酒精:1个小时

80%酒精:1个小时

90%酒精:1个小时

95%酒精:1个小时

无水酒精1:1个小时

无水酒精2:1个小时

无水酒精:二甲苯1:1 1个小时

二甲苯透明:时间不定

二甲苯:石蜡1:1 20- 1个小时不等

石蜡1:1个半小时

石蜡2:1个半小时

包埋的时间不确定,由组织块的大小来决定,像一般的比较小的而且比较容易脱水的如消化道的胃、小肠等脱水半个小时至四十分就行,蝌蚪整体的话因为有皮肤包着所以时间要长一些至少一个小时这样算下来包完一套需要至少12个小时,包埋的关键不是脱水,而是在那两步1:1上,只要这两个过度做好了其余的就很顺畅了,只要1:1时间够了透明时间就可以适当的短一些,一般不要超过1分钟,30秒左右就可以。

想做好石蜡切片从取材到染色每一步都很重要,可以说是环环相扣,哪一步没做好都会影响最终的结果。

现在从取材说起,取材时要迅速,以免组织自溶,固定要充分,固定液我们一般用的有两种,一是10%中性福尔马林溶液,第二是Bouin氏液,这个根据组织来决定用哪个,要是整体固定蝌蚪的话可以用浓度稍高一些的福尔马林,一般可以用12—15%的福尔马林。取下的材料需固定一段时间,至少要过夜,若是固定时间比较长的话需要用流水冲洗一个晚上第二天再脱水包埋,时间短的话,第二天可以直接用水泡一个半小时即可进行包埋,当然这其中要换几次水。

包埋完切片,捞出的片子至少烘干一个晚上的时间。

二甲苯2:30分钟

二甲苯1:30分钟

酒精:二甲苯1:1:10分钟

无水酒精2:5分钟

无水酒精1:5分钟

95%;5分钟

90%:5分钟

80%:5分钟

70%:5分钟

50%:5分钟

流水冲洗

苏木精时间不定,视当时染液的情况而定。一般5-10分钟,甚至更长。

流水冲洗

50%:5分钟

70%:5分钟

80%:5分钟

90%:5分钟

伊红30秒,吸水纸上吸一下染液

95%:蘸三下

无水酒精1:5分钟

无水酒精2:5分钟

酒精:二甲苯1:1 10分钟

二甲苯1:30分钟

二甲苯2:30分钟

染色整个过程大约需要四个小时,每一步都要用吸水纸蘸几下;整个实验下来至少需要两天半时间。

具体问题不明白的话再问我吧,也可以上网去查一下别人怎么做的。

包埋时间

50%酒精:1个小时

70%酒精:1个小时

80%酒精:1个小时

90%酒精:1个小时

95%酒精:1个小时

无水酒精1:1个小时

无水酒精2:1个小时

无水酒精:二甲苯1:1 1个小时

二甲苯透明:时间不定

二甲苯:石蜡1:1 20- 1个小时不等

石蜡1:1个半小时

石蜡2:1个半小时

包埋的时间不确定,由组织块的大小来决定,像一般的比较小的而且比较容易脱水的如消化道的胃、小肠等脱水半个小时至四十分就行,蝌蚪整体的话因为有皮肤包着所以时间要长一些至少一个小时这样算下来包完一套需要至少12个小时,包埋的关键不是脱水,而是在那两步1:1上,只要这两个过度做好了其余的就很顺畅了,只要1:1时间够了透明时间就可以适当的短一些,一般不要超过1分钟,30秒左右就可以。

想做好石蜡切片从取材到染色每一步都很重要,可以说是环环相扣,哪一步没做好都会影响最终的结果。

现在从取材说起,取材时要迅速,以免组织自溶,固定要充分,固定液我们一般用的有两种,一是10%中性福尔马林溶液,第二是Bouin氏液,这个根据组织来决定用哪个,要是整体固定蝌蚪的话可以用浓度稍高一些的福尔马林,一般可以用12—15%的福尔马林。取下的材料需固定一段时间,至少要过夜,若是固定时间比较长的话需要用流水冲洗一个晚上第二天再脱水包埋,时间短的话,第二天可以直接用水泡一个半小时即可进行包埋,当然这其中要换几次水。

包埋完切片,捞出的片子至少烘干一个晚上的时间。

二甲苯2:30分钟

二甲苯1:30分钟

酒精:二甲苯1:1:10分钟

无水酒精2:5分钟

无水酒精1:5分钟

95%;5分钟

90%:5分钟

80%:5分钟

70%:5分钟

50%:5分钟

流水冲洗

苏木精时间不定,视当时染液的情况而定。一般5-10分钟,甚至更长。

流水冲洗

50%:5分钟

70%:5分钟

80%:5分钟

90%:5分钟

伊红30秒,吸水纸上吸一下染液

95%:蘸三下

无水酒精1:5分钟

无水酒精2:5分钟

酒精:二甲苯1:1 10分钟

二甲苯1:30分钟

二甲苯2:30分钟

染色整个过程大约需要四个小时,每一步都要用吸水纸蘸几下;整个实验下来至少需要两天半时间。

具体问题不明白的话再问我吧,也可以上网去查一下别人怎么做的。


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