动物医学进展,2006,27(增):16218ProgressinVeterinaryMedicine
猪胸膜肺炎放线杆菌溶血外毒素研究进展
石 琴,贺 英,赵 萍,储岳峰,高鹏程,逯忠新
(中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州730046)
中图分类号:S852.619.S858.28文献标识码:A文章编号:100725038(2006)S20016203
摘 要:从分子质量、基因结构及致病机理等方面概述了猪传染性胸膜肺炎放线杆菌溶血
外毒素ApxⅠ,ApxⅡ,ApxⅢ和ApxⅣ的基本特点和研究进展。比较并归纳了这4种溶血外毒素的异同点及在15种血清型中存在的特点。
关键词:胸膜肺炎放线杆菌;溶血外毒素
猪胸膜肺炎放线杆菌
(Actinobacillus
pleuropneumoniae,APP)是引起猪传染性胸膜肺炎
性作用。ApxⅣ只在体内表达,在大肠埃希菌内的表达产物具有微弱的溶血活性,细胞毒性还不清楚,因为缺少了ApxⅠ,ApxⅡ,ApxⅢ但仍能产生ApxⅣ的菌株不能引起病变或发病[2]。
如果要产生和分泌具有生物活性的Apx毒素,需要相邻的按一定顺序排列的4个基因,即C,A,B和D。A基因编码结构毒素蛋白,C基因编码激活蛋白,B和D基因编码毒素分泌所必需的、与蛋白质连在一起的膜。
(Porcineinfectiouspleuropneumonia)的致病菌,原
1xⅠ105ku,具有很强的溶
称胸膜肺炎嗜血杆菌(Haemophilpleuropneumoiae,Hp),,血清型1,5,9,10,11和14均能表达并分泌它。ApxⅠ的分泌和细胞活性都需要Ca2+的参与[3]。
在胸膜肺炎放线杆菌中产生、激活并分泌有活性的ApxⅠ受一个操纵子的调控,该操纵子包括4个基因,即ApxⅠCABD。ApxⅠA基因编码毒素蛋白的前体,ApxⅠC基因编码毒素翻译后的激活物,ApxⅠBD基因的产物负责毒素的分泌。这是一个典型的RTX毒素的操纵子。
在血清型1,5a,5b,9,10和11中,存在完整的ApxⅠ的操纵子,它们产生具有强溶血和强细胞毒
属,因其表型和DNA式种密切相关,,命。传染性胸膜肺炎是猪的呼吸道传染病,各种年龄的猪均易感,常与巴氏杆菌等混合感染。
胸膜肺炎放线杆菌的毒力因子有很多,其中主要包括外毒素、脂多糖、荚膜多糖、外膜蛋白、转铁结合蛋白、黏附素等,这些毒力因子都能引起胸膜肺炎的发生,最主要的就是溶血外毒素[1],现介绍如下。
目前为止已经发现胸膜肺炎放线杆菌可以产生4种RTX毒素(Repeatsinthestructural,RTX),称
为Apx(ActinobacilluspleuropneumoniaeRTX2toxin,Apx),即ApxⅠ,ApxⅡ,ApxⅢ和ApxⅣ。ApxⅠ,ApxⅡ,ApxⅢ对于疾病临床症状的出现以
性的ApxⅠ。临床上产生的具有严重肺损伤和高死亡率的APP的暴发,一般都是由血清型1,5a,5b,9,10和11引起的。
及典型的肺部病变是必需的。这3种毒素在体内和体外都能表达,对肺泡巨噬细胞、多形核白细胞、肺上皮细胞和内皮细胞都有不同程度的细胞毒性。ApxⅠ和ApxⅡ具有溶血活性和细胞毒性作用,ApxⅠ溶血活性强于ApxⅡ,而ApxⅢ只有细胞素
在血清型2,4,6,7,8和12中虽然不能产生ApxⅠ,但它们却存在一个截短的ApxⅠ的操纵子,
其中缺失了部分的C基因和大部分的A基因,但保留了原有的启动子,300bp～500bp的A基因和完整的BD基因,其表达产物具有分泌功能,所有血清
收稿日期:2006208229
基金项目:国家科技成果重点推广计划项目(2005EC000330)作者简介:石 琴(1981-),女,新疆喀什人,硕士研究生,主要从事细菌分子生物学研究。
石 琴等:猪胸膜肺炎放线杆菌溶血外毒素研究进展17
型ApxⅡ的分泌都依赖于该表达产物的反式互补作用。在血清型3中,截短的ApxⅠ操纵子完全缺失,以至于其产生的ApxⅡ由于失去了ApxIBD的反式互补作用而不能有效分泌。
4 ApxⅣ
ApxⅣ是1999年才被首次报道的一种毒素,分
子质量为202ku。1997年,Anderson等在APP血清型1型菌株CM5的LacZ基因的下游发现了类似于脑膜炎奈瑟球菌FrpA和FrpC基因的序列,表明APP中存在第4种Apx毒素的可能性。之后,AlainScaller等研究人员分别从APP血清型1型和3型中克隆了整个毒素基因并进行了测序和表达,
2 ApxⅡ
ApxⅡ分子质量为105ku,最初被认为是一种
具有弱溶血活性的毒素,后来人们发现它对肺泡巨噬细胞和中性粒细胞也具有细胞毒性作用,因此它)。也被称作clyⅡ(cytolysinⅡ
ApxⅡ的产生、激活和分泌受两个操纵子的调
并对表达的产物进行了功能分析,将该毒素命名为ApxⅣ。
ApxⅣ的结构同样具有RTX毒素的特征,N末
控,即ApxⅡCA操纵子和ApxⅠBD操纵子。Frey等根据己发表的5型APP的AppCA基因(ApxⅡCA)的序列设计引物,结果在除10型外所有的血清
端疏水,C末端含有24个富含甘氨酸的九肽重复,可结合Ca2+。其C末端含有两个具有DNA聚合酶特征的序列,功能目前还不为人们所了解。APP所有血清型都分泌ApxⅣ,该毒素毒力很弱,只有当APP在动物体内时ApxⅣ,在任何
型中,都扩增到了3.4kb的ApxⅡCA基因片段,这说明在除10型外所有的血清型中,都存在ApxⅡCA基因。而且,ApxⅡCA基因PCR产物的限制性
分析表明,在所有的血清型中,该基因都非常保守,几乎没有变异。ApxⅠBD实际上就是上面所提到的截短的ApxⅠ的操纵子。ApxⅡ的分泌需要ApⅠBD表达产物的反式互补作用,4,7,8和12中,中迄今发现的惟一x的种间特异性很,有良好的作为诊断试剂抗原的前景[8]。
ApxⅣ在大肠埃希菌中的表达产物具有弱的溶
清型1,5a,5b,9和ApxⅠ。在血清型3,
血活性和CAMP效应。凡是被APP感染的猪,不论是何种血清型,动物的血清都可以与表达的ApxⅣ反应。目前,ApxⅣ对动物的致病作用还需要进一步的研究。
Apx毒素是APP主要的毒力因子。不同血清
虽然存在着ApxⅡCA基因并有ApxⅡ的表达,但由于ApxIBD的完全缺失,所以释放出来的ApxⅡ的量非常少[326]。
3 ApxⅢ
ApxⅢ毒素是一种表观分子质量为120ku的蛋)或ptx白,最开始的时侯称为clyⅢ(cytolysineⅢ(pleulotoxin)。ApxⅢ没有溶血活性,但其对肺泡巨
型的毒力与其分泌毒素的种类有关,ApxⅠ的毒力最强,能分泌ApxⅠ毒素的血清型1,5a,5b,9,10和11在临床上表现出的致病力也最强。ApxⅡ的毒力
噬细胞和中性粒细胞有很强的细胞毒性作用。通过在大肠埃希菌中克隆和表达ApxⅢ的结构蛋白基因ApxⅢ后,发现它存在于血清型2,3,4,6,8,15参考
较弱,相应地,仅分泌ApxⅡ毒素的血清型6,7和12的毒力也较弱。至于血清型3型,因其只能分泌ApxⅢ,以至于在一些国家,3型APP在临床上根本
菌株中。在所有血清型中均可找到它的一个完整的操纵子,该操纵子包括激活基因ApxⅢC,结构基因ApxⅢA和两个分泌基因ApxⅢB和ApxⅢD,以前
不会引起疾病的流行。另一方面,Apx毒素也具有很好的免疫原性,能诱导机体产生很好的保护力。不溶血的突变株不能对动物产生保护力。不产毒素的菌株只能对其相应血清型的感染产生保护,而不能对其他血清型的感染产生保护[6]。关于APP的RTX毒素的相关资料见表1。
它们分别被命名为clyⅢC,clyⅢA,clyⅢB和clyⅢD[7]。
18动物医学进展 2006年 第27卷 增刊(总第157期)表1 APP外毒素的基因结构、生物活性和分子质量
Table1 Molecularweight,bio2activityandgenestructrueofAPPexotoxin
毒素
ToxinApxⅠApxⅡApxⅢApxⅣ
产生该毒素的血清型
Serologicaltype1,5a,5b,9,10,11,141,2,4,5a,5b,6,7,8,9,
11,12,13,15
2,3,4,6,8,15
操纵子Operon
激活基因
ActivegeneapxⅠCapxⅡCpxⅢCORF1
活性
Active
/ku
细胞毒性
Celltoxicity
MW105～110103～105120200
结构基因
Structuralgene
apxⅠAapxⅡAapxⅢAapxIVA
分泌基因
SecretegeneapxⅠBD
溶血活性
Hemolysis
强 Strong弱 Weak无 NO
弱 Weak
强 Strong中 Moderate强 Strong
ND
无 NO
ApxⅢBD
所有15个血清型All无 NO
由于Apx在胸膜肺炎放线杆菌致病过程中起
十分重要的作用,其不仅是重要的毒力因子,还是主要的免疫原。当前对猪传染性胸膜肺炎的预防和控制一直都是使用灭活疫苗,而APP血清型众多,所以灭活免疫效果非常有限,根据Apx的特点,许多研究工作者尝试着将毒素的结构基因如ApxⅡA基因进行原核表达,并把表达产物添加到灭活疫苗中,以增加灭活疫苗的免疫效果,华中农业大学刘建杰等人用基因工程的方法,实现了APP3种毒素ApxⅠ、ApxⅡ、pxⅢ在原核表达系统大肠杆菌内的高效表达。利用表达毒素和7小鼠,攻毒对于同型和异型菌的分别91.7%和83.3%,发表)。,,和7,之后进行攻毒,探讨此种亚单位菌苗对猪的保护效力。随着研究的深入,会有更多更好的基因工程疫苗和亚单位疫苗被研制出来[9]。
了解APP的RTX毒素的特征和作用机制,对诊断、治疗、预防和控制细菌性传染病是非常重要的。分子遗传学和蛋白质工程等方法大大更新了毒素研究的内容。基因克隆、序列分析、定点突变等技术的广泛应用使研究人员能够构建大量的杂合毒素并得到原始毒素和重组毒素。基于已经获得的知识,人们已经能够推测毒素的初级结构,对其细胞、亚细胞及分子水平的作用机制有了更好的了解,进
一步明确了毒素结构与功能的关系及其所在疾病中的真实作用或作为毒力因子的作用方式,因此,对APP的RTX毒素的研究具有重要的意义。
参考文献:
[1] 徐晓娟,何启盖,陈焕春.胸膜肺炎放线杆菌毒素的分子生物学
[J].中国预防兽医学报,2004,26(3):2342237.
[2] 刘建杰.[A].2[3].ApfA基因的表
[].,2004:427.
],,李 冲,等.新型基因工程亚单位菌苗对猪传
染性胸膜肺炎的保护效力研究[J].中国农业科学,2005,38
(3):5962600.
[5] 王春来,刘思国,邵美丽,等.重组ApxⅡA对胸膜肺炎放线杆
菌灭活疫苗免疫效果的影响[J].中国兽医科学,2006,36(06):
4342438.
[6] 贝为成,严 琳,何启盖,等.猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素
apxⅡA基因的真核表达及其核酸疫苗[J]农业生物技术学报,2005,13(5):6162619.
[7] 黄红亮,李 冲,周 锐,抗胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ
的单克隆抗体的制备[J].农业生物技术学报,2005,13(5):6592
663.
[8] SchallerA,KuhnR,KuhnertP.CharacterizationofapxⅣA,a
newRTXdeterminantofActinbacilluspleuropmeumoniae[J].Microbiology,1999,145:210522116.
[9] 徐晓娟,何启盖,吴 斌,等.猪传染性胸膜肺炎的诊断和疫苗
研究进展[J].养殖与饲料,2005,2:35237.
AdvancesinActinobacilluspleuropneumoniae2RTX2toxins
SHIQin,HEYing,ZHAOPing,CHUYue2feng,GAOPeng2cheng,LUZhong2xin
(LanzhouVeterinaryResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Lanzhou,Gansu,730046,China)
Abstract:ThecharacteristicsandresearchadvancesofActinobacilluspleuropneumoniaeApxⅠ,ApxⅡ,ApxⅢandApxⅣSuchasthemolecularweight,genestructrueandnosogenesiswerepresented.Thesimi2laritiesanddifferencesof4kindsofexotoxinewerecomparedamong15serologicaltypes.Keywords:Actinobacilluspleuropneumoniae;RTX2toxins;ApxⅠ;ApxⅡ;ApxⅢ;ApxⅣ
动物医学进展,2006,27(增):16218ProgressinVeterinaryMedicine
猪胸膜肺炎放线杆菌溶血外毒素研究进展
石 琴,贺 英,赵 萍,储岳峰,高鹏程,逯忠新
(中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州730046)
中图分类号:S852.619.S858.28文献标识码:A文章编号:100725038(2006)S20016203
摘 要:从分子质量、基因结构及致病机理等方面概述了猪传染性胸膜肺炎放线杆菌溶血
外毒素ApxⅠ,ApxⅡ,ApxⅢ和ApxⅣ的基本特点和研究进展。比较并归纳了这4种溶血外毒素的异同点及在15种血清型中存在的特点。
关键词:胸膜肺炎放线杆菌;溶血外毒素
猪胸膜肺炎放线杆菌
(Actinobacillus
pleuropneumoniae,APP)是引起猪传染性胸膜肺炎
性作用。ApxⅣ只在体内表达,在大肠埃希菌内的表达产物具有微弱的溶血活性,细胞毒性还不清楚,因为缺少了ApxⅠ,ApxⅡ,ApxⅢ但仍能产生ApxⅣ的菌株不能引起病变或发病[2]。
如果要产生和分泌具有生物活性的Apx毒素,需要相邻的按一定顺序排列的4个基因,即C,A,B和D。A基因编码结构毒素蛋白,C基因编码激活蛋白,B和D基因编码毒素分泌所必需的、与蛋白质连在一起的膜。
(Porcineinfectiouspleuropneumonia)的致病菌,原
1xⅠ105ku,具有很强的溶
称胸膜肺炎嗜血杆菌(Haemophilpleuropneumoiae,Hp),,血清型1,5,9,10,11和14均能表达并分泌它。ApxⅠ的分泌和细胞活性都需要Ca2+的参与[3]。
在胸膜肺炎放线杆菌中产生、激活并分泌有活性的ApxⅠ受一个操纵子的调控,该操纵子包括4个基因,即ApxⅠCABD。ApxⅠA基因编码毒素蛋白的前体,ApxⅠC基因编码毒素翻译后的激活物,ApxⅠBD基因的产物负责毒素的分泌。这是一个典型的RTX毒素的操纵子。
在血清型1,5a,5b,9,10和11中,存在完整的ApxⅠ的操纵子,它们产生具有强溶血和强细胞毒
属,因其表型和DNA式种密切相关,,命。传染性胸膜肺炎是猪的呼吸道传染病,各种年龄的猪均易感,常与巴氏杆菌等混合感染。
胸膜肺炎放线杆菌的毒力因子有很多,其中主要包括外毒素、脂多糖、荚膜多糖、外膜蛋白、转铁结合蛋白、黏附素等,这些毒力因子都能引起胸膜肺炎的发生,最主要的就是溶血外毒素[1],现介绍如下。
目前为止已经发现胸膜肺炎放线杆菌可以产生4种RTX毒素(Repeatsinthestructural,RTX),称
为Apx(ActinobacilluspleuropneumoniaeRTX2toxin,Apx),即ApxⅠ,ApxⅡ,ApxⅢ和ApxⅣ。ApxⅠ,ApxⅡ,ApxⅢ对于疾病临床症状的出现以
性的ApxⅠ。临床上产生的具有严重肺损伤和高死亡率的APP的暴发,一般都是由血清型1,5a,5b,9,10和11引起的。
及典型的肺部病变是必需的。这3种毒素在体内和体外都能表达,对肺泡巨噬细胞、多形核白细胞、肺上皮细胞和内皮细胞都有不同程度的细胞毒性。ApxⅠ和ApxⅡ具有溶血活性和细胞毒性作用,ApxⅠ溶血活性强于ApxⅡ,而ApxⅢ只有细胞素
在血清型2,4,6,7,8和12中虽然不能产生ApxⅠ,但它们却存在一个截短的ApxⅠ的操纵子,
其中缺失了部分的C基因和大部分的A基因,但保留了原有的启动子,300bp～500bp的A基因和完整的BD基因,其表达产物具有分泌功能,所有血清
收稿日期:2006208229
基金项目:国家科技成果重点推广计划项目(2005EC000330)作者简介:石 琴(1981-),女,新疆喀什人,硕士研究生,主要从事细菌分子生物学研究。
石 琴等:猪胸膜肺炎放线杆菌溶血外毒素研究进展17
型ApxⅡ的分泌都依赖于该表达产物的反式互补作用。在血清型3中,截短的ApxⅠ操纵子完全缺失,以至于其产生的ApxⅡ由于失去了ApxIBD的反式互补作用而不能有效分泌。
4 ApxⅣ
ApxⅣ是1999年才被首次报道的一种毒素,分
子质量为202ku。1997年,Anderson等在APP血清型1型菌株CM5的LacZ基因的下游发现了类似于脑膜炎奈瑟球菌FrpA和FrpC基因的序列,表明APP中存在第4种Apx毒素的可能性。之后,AlainScaller等研究人员分别从APP血清型1型和3型中克隆了整个毒素基因并进行了测序和表达,
2 ApxⅡ
ApxⅡ分子质量为105ku,最初被认为是一种
具有弱溶血活性的毒素,后来人们发现它对肺泡巨噬细胞和中性粒细胞也具有细胞毒性作用,因此它)。也被称作clyⅡ(cytolysinⅡ
ApxⅡ的产生、激活和分泌受两个操纵子的调
并对表达的产物进行了功能分析,将该毒素命名为ApxⅣ。
ApxⅣ的结构同样具有RTX毒素的特征,N末
控,即ApxⅡCA操纵子和ApxⅠBD操纵子。Frey等根据己发表的5型APP的AppCA基因(ApxⅡCA)的序列设计引物,结果在除10型外所有的血清
端疏水,C末端含有24个富含甘氨酸的九肽重复,可结合Ca2+。其C末端含有两个具有DNA聚合酶特征的序列,功能目前还不为人们所了解。APP所有血清型都分泌ApxⅣ,该毒素毒力很弱,只有当APP在动物体内时ApxⅣ,在任何
型中,都扩增到了3.4kb的ApxⅡCA基因片段,这说明在除10型外所有的血清型中,都存在ApxⅡCA基因。而且,ApxⅡCA基因PCR产物的限制性
分析表明,在所有的血清型中,该基因都非常保守,几乎没有变异。ApxⅠBD实际上就是上面所提到的截短的ApxⅠ的操纵子。ApxⅡ的分泌需要ApⅠBD表达产物的反式互补作用,4,7,8和12中,中迄今发现的惟一x的种间特异性很,有良好的作为诊断试剂抗原的前景[8]。
ApxⅣ在大肠埃希菌中的表达产物具有弱的溶
清型1,5a,5b,9和ApxⅠ。在血清型3,
血活性和CAMP效应。凡是被APP感染的猪,不论是何种血清型,动物的血清都可以与表达的ApxⅣ反应。目前,ApxⅣ对动物的致病作用还需要进一步的研究。
Apx毒素是APP主要的毒力因子。不同血清
虽然存在着ApxⅡCA基因并有ApxⅡ的表达,但由于ApxIBD的完全缺失,所以释放出来的ApxⅡ的量非常少[326]。
3 ApxⅢ
ApxⅢ毒素是一种表观分子质量为120ku的蛋)或ptx白,最开始的时侯称为clyⅢ(cytolysineⅢ(pleulotoxin)。ApxⅢ没有溶血活性,但其对肺泡巨
型的毒力与其分泌毒素的种类有关,ApxⅠ的毒力最强,能分泌ApxⅠ毒素的血清型1,5a,5b,9,10和11在临床上表现出的致病力也最强。ApxⅡ的毒力
噬细胞和中性粒细胞有很强的细胞毒性作用。通过在大肠埃希菌中克隆和表达ApxⅢ的结构蛋白基因ApxⅢ后,发现它存在于血清型2,3,4,6,8,15参考
较弱,相应地,仅分泌ApxⅡ毒素的血清型6,7和12的毒力也较弱。至于血清型3型,因其只能分泌ApxⅢ,以至于在一些国家,3型APP在临床上根本
菌株中。在所有血清型中均可找到它的一个完整的操纵子,该操纵子包括激活基因ApxⅢC,结构基因ApxⅢA和两个分泌基因ApxⅢB和ApxⅢD,以前
不会引起疾病的流行。另一方面,Apx毒素也具有很好的免疫原性,能诱导机体产生很好的保护力。不溶血的突变株不能对动物产生保护力。不产毒素的菌株只能对其相应血清型的感染产生保护,而不能对其他血清型的感染产生保护[6]。关于APP的RTX毒素的相关资料见表1。
它们分别被命名为clyⅢC,clyⅢA,clyⅢB和clyⅢD[7]。
18动物医学进展 2006年 第27卷 增刊(总第157期)表1 APP外毒素的基因结构、生物活性和分子质量
Table1 Molecularweight,bio2activityandgenestructrueofAPPexotoxin
毒素
ToxinApxⅠApxⅡApxⅢApxⅣ
产生该毒素的血清型
Serologicaltype1,5a,5b,9,10,11,141,2,4,5a,5b,6,7,8,9,
11,12,13,15
2,3,4,6,8,15
操纵子Operon
激活基因
ActivegeneapxⅠCapxⅡCpxⅢCORF1
活性
Active
/ku
细胞毒性
Celltoxicity
MW105～110103～105120200
结构基因
Structuralgene
apxⅠAapxⅡAapxⅢAapxIVA
分泌基因
SecretegeneapxⅠBD
溶血活性
Hemolysis
强 Strong弱 Weak无 NO
弱 Weak
强 Strong中 Moderate强 Strong
ND
无 NO
ApxⅢBD
所有15个血清型All无 NO
由于Apx在胸膜肺炎放线杆菌致病过程中起
十分重要的作用,其不仅是重要的毒力因子,还是主要的免疫原。当前对猪传染性胸膜肺炎的预防和控制一直都是使用灭活疫苗,而APP血清型众多,所以灭活免疫效果非常有限,根据Apx的特点,许多研究工作者尝试着将毒素的结构基因如ApxⅡA基因进行原核表达,并把表达产物添加到灭活疫苗中,以增加灭活疫苗的免疫效果,华中农业大学刘建杰等人用基因工程的方法,实现了APP3种毒素ApxⅠ、ApxⅡ、pxⅢ在原核表达系统大肠杆菌内的高效表达。利用表达毒素和7小鼠,攻毒对于同型和异型菌的分别91.7%和83.3%,发表)。,,和7,之后进行攻毒,探讨此种亚单位菌苗对猪的保护效力。随着研究的深入,会有更多更好的基因工程疫苗和亚单位疫苗被研制出来[9]。
了解APP的RTX毒素的特征和作用机制,对诊断、治疗、预防和控制细菌性传染病是非常重要的。分子遗传学和蛋白质工程等方法大大更新了毒素研究的内容。基因克隆、序列分析、定点突变等技术的广泛应用使研究人员能够构建大量的杂合毒素并得到原始毒素和重组毒素。基于已经获得的知识,人们已经能够推测毒素的初级结构,对其细胞、亚细胞及分子水平的作用机制有了更好的了解,进
一步明确了毒素结构与功能的关系及其所在疾病中的真实作用或作为毒力因子的作用方式,因此,对APP的RTX毒素的研究具有重要的意义。
参考文献:
[1] 徐晓娟,何启盖,陈焕春.胸膜肺炎放线杆菌毒素的分子生物学
[J].中国预防兽医学报,2004,26(3):2342237.
[2] 刘建杰.[A].2[3].ApfA基因的表
[].,2004:427.
],,李 冲,等.新型基因工程亚单位菌苗对猪传
染性胸膜肺炎的保护效力研究[J].中国农业科学,2005,38
(3):5962600.
[5] 王春来,刘思国,邵美丽,等.重组ApxⅡA对胸膜肺炎放线杆
菌灭活疫苗免疫效果的影响[J].中国兽医科学,2006,36(06):
4342438.
[6] 贝为成,严 琳,何启盖,等.猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素
apxⅡA基因的真核表达及其核酸疫苗[J]农业生物技术学报,2005,13(5):6162619.
[7] 黄红亮,李 冲,周 锐,抗胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ
的单克隆抗体的制备[J].农业生物技术学报,2005,13(5):6592
663.
[8] SchallerA,KuhnR,KuhnertP.CharacterizationofapxⅣA,a
newRTXdeterminantofActinbacilluspleuropmeumoniae[J].Microbiology,1999,145:210522116.
[9] 徐晓娟,何启盖,吴 斌,等.猪传染性胸膜肺炎的诊断和疫苗
研究进展[J].养殖与饲料,2005,2:35237.
AdvancesinActinobacilluspleuropneumoniae2RTX2toxins
SHIQin,HEYing,ZHAOPing,CHUYue2feng,GAOPeng2cheng,LUZhong2xin
(LanzhouVeterinaryResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Lanzhou,Gansu,730046,China)
Abstract:ThecharacteristicsandresearchadvancesofActinobacilluspleuropneumoniaeApxⅠ,ApxⅡ,ApxⅢandApxⅣSuchasthemolecularweight,genestructrueandnosogenesiswerepresented.Thesimi2laritiesanddifferencesof4kindsofexotoxinewerecomparedamong15serologicaltypes.Keywords:Actinobacilluspleuropneumoniae;RTX2toxins;ApxⅠ;ApxⅡ;ApxⅢ;ApxⅣ