实验名称(Title of Experimetn)氨基酸薄层层析实验地点 (Lab No.) 指导老师(Instructor)实验日期(Date of Experiment)合作者(Partner)总分(Total Score)XX教师签名(Signature)李某某批改日期(Date)【实验报告第一部分（预习报告内容） ：①实验原理、②实验材料（包括实验样品、主 要试剂、主要仪器与器材） 、③实验步骤（包括实验流程、操作步骤和注意事项） ；评分 （满分 30 分） ：XX】一、预习报告 实验原理：层析（chromatography） ：利用混合物各组分物理化学性质的差异，将多组分混合物 进行分离及测定的方法。 固定相（stationary phase） 层析体质的一个基质。 能与待分离的化合物进行可逆的吸附、溶解、交换等作用。流动相（mobile phase） 在层析过程中推动固定相上贷分离的物质朝着一个方 向运动的液体或气体。 迁移率（rate of flow，Rf） 一定条件下， 在特定时间内某一组份在固定相移动的距 离与流动相本身移动的距离之比值，Rf 值≤1。 层析原理：层析体系由一个固定相和一个流动相组成。流动相对固定相做相对运动， 从而推动待分离的混合物样品通过固定相向前移动。样品中各组份物理化学性质不 同，与两相发生相互作用的能力不同，被流动相推动前进时受到的阻力和移动速度不同，一定时间后，不同组份就可以在固定相上分离。根据固定相基质的形式，层析可分为纸层析、薄层层析和柱层析。薄层层析是在玻 璃或塑料等光滑表面铺一层很薄的基质进行层析。薄层层析（thin layer chromatography，TLC） ：是将吸附剂均匀地在玻璃板上铺 成薄层（固定相） ，再把样品点在薄层板一端，再把板的这端浸入适当的溶剂（流动相） 在薄层板上扩展。 并在此过程中通过吸附——解吸附——再吸附——再解吸附的反复进 行，而将样品各组份分离出来。本次实验： 具体原理：当流动相在固定相上流动时，由于吸附剂对不同氨基酸的吸附力不 一样，不同氨基酸在展开溶剂中的溶解度不一样，点在薄板上的混合氨基酸样 品随着展开剂的移动速率也不同，因而可以彼此分开。 吸附剂（固定相） ：硅胶（C.P.） 。为使制成的薄层板不易松散，加入 5%羟甲基纤维素钠（CMCNa）作黏合剂。 展开剂：正丁醇、冰醋酸和蒸馏水的混合液（80:10:10,V/V/V） 。 展层-显色剂：按照 10:1 比例（V/V）混匀的展开剂和 0.1%茚三酮溶液。 活化（activation） ：在一定温度下，对吸附剂硅胶加热去除水分。可使硅胶的 活性提高，吸附能力加强。 氨基酸与茚三酮的显色反应： 茚三酮水化后生成的水合茚三酮在加热时被还原， 此产物与氨基酸加热分解产生的氨结合，以及另一分子水合茚三酮缩合生成紫 红色化合物而使氨基酸斑点显色。 Rf 值：Rf 斑点中心到样品原点的 距离 对应溶剂前沿到样品原 点的距离由于物质在一定溶剂中的分配系数是一定的，故移动速率（Rf 值）也是恒定的，因此可以根据 Rf 值来鉴定被分离的物质。 实验材料： 样品：1、0.01mol/L 丙氨酸; 2、 0.01mol/L 精氨酸; 3、0.01mol/L 甘氨酸; 4、混合氨基酸溶液。 试剂：1、硅胶（C.P.） 2、0.5%羟甲基纤维素钠（CMCNa） 3、层展-显色剂：按照 10:1 比例（V/V）混匀的展开剂（正丁醇、冰醋酸和蒸馏水 的混合液（80:10:10,V/V/V） ）和 0.1%茚三酮溶液。 仪器及器材：1、层析版（6cm×15cm） 2、小烧杯 3、量筒（10ml） 4、刻度尺 5、铅笔 6、毛细玻璃管 7、层析缸 8、烘箱 9、天平 10、药匙实验步骤： 实验流程： 步骤操作步骤： 操作 ①调浆：称取硅胶 3g，加入 0.5%羟甲基纤维素钠 8ml，调成均匀的糊状 ②涂布：取洁净的干燥玻璃板涂层并涂抹震荡均匀 ③干燥：将玻璃板水平放置，室温下放置 0.5h，自然晾干至表面没有明显水渍 ④活化：70°C 烘干 60min（1） 制板（2） 点样①标记：用铅笔距底边 2cm 水平线上均匀确定 4 个点并做好标记。每个样品间相距 1cm ②点样：用毛细玻璃管分别吸取 0.01mol/L 丙氨酸、精氨酸、甘氨酸、混合氨基酸溶液，轻轻接触薄层表面点样。加样原点扩散直径不超过 2mm（3） 层析 将薄层板点样端浸入展层-显色剂，展层-显色剂液面应低于点样线。盖好层析缸盖， 上行展层。当层展剂前沿到达薄板二分之一时，停止展层，取出薄板，用铅笔描出溶 剂的前沿界线。 （4） 显色 90℃下烘干 30min，即可显出各层斑点注意事项：1、玻璃板要清洁平整无油污；2、去掉玻璃板侧缘的硅胶粉，否则层析时会有较强的边缘效应； 3、点样时轻触疾起，避免重复点样和斑点过大产生交叉和拖尾；4、毛细玻璃管用完放回原来的烧 杯里；5、避免用手接触层析板，避免用手握层析板的下半部分；6、层析板放入层析缸时底端应放 置水平，以防倾斜放置使展层方向与薄板下缘不垂直，不好处理数据；7、样点不能浸入到溶液中； 8、层析缸盖应作密封处理防止挥发。【实验报告第二部分（实验记录） ：①主要实验条件（如材料的来源、质量；试剂的规 格、用量、浓度；实验时间、操作要点中的技巧、失误等，以便总结实验时进行核对和 作为查找成败原因的参考依据） ；②实验中观察到的现象（如加入试剂后溶液颜色的变 化） ；③原始实验数据。评分（满分 20 分） ：XX】二、实验记录（一共做了两组实验，以作对照） 主要实验条件： 材料：1、硅胶（C.P.） 2、玻璃板。要求干净干燥。 试剂：1、0.5%的羧甲基纤维素钠 8ml 2、0.01mol/L 丙氨酸、精氨酸、甘氨酸、混合氨基酸溶液。各取毛细管 2cm 高左右， 扩散不超 2mm 3、展层-显色液，层析缸内深度 1-2cm 操作要点：1、制板时，尽量快地将混合匀浆倒在玻璃板上，易于铺匀。 2、层析板晾干时尽量保持水平，避免强风猛吹，否则制作的板厚薄不均。 3、活化时烘干以背面无水渍为准。 4、点样时要轻触疾起。 5、点样完毕将层析板放入层析缸时，要保持层析板下缘水平。 6、展层-显色剂液面应低于点样线，展层剂前沿大概跑到 1/2 处时取出7、避免手触碰层析板和点样端边缘。 实验现象： 第一组：1、制板后，约 60min 晾干。 2、点样时，第三个点点得较轻，其他点扩散后大小适中，不超 2mm。 3、因层析缸不平整，浸入展层-显色液时层析板有些倾斜。 4、在层析约 45min 后溶剂前沿到达层析板的 1/2 处左右， 取出并烘干。 溶剂前沿是 一条凹陷明显的曲线。 5、在利用烤箱烘干后， 层析板上出现 5 个倾斜的蓝紫色斑点， 第一和第三个点相对 模糊。第一个点有拖尾现象，第三个点明显较其他点小，显色不明显。 6、板的周缘边出现有明显蓝紫色丝带。 如图：第二组：1、制板后，约 30min 晾干。 2、点样时，点扩散后大小适中，不超 2mm。 3、层展-显色剂前沿在前 20min 水平几乎无凹陷， 之后开始出现细小凹陷。 至 25min 时前沿到达层析板的 1/2 处左右， 取出并烘干。 溶剂前沿是一条有轻微凹陷的曲线。 4、在利用烤箱烘干后，层析板上出现 5 个明显的蓝紫色斑点。第三个颜色较浅。 5、板的周缘边出现些许蓝紫色丝带。 如图：原始实验数据：每个数据测量三次，取平均数。第一组：表1样品第一组原始数据记录表色斑中心至样品原点中心距离（cm） 溶剂前缘至原点中心距离（cm） 测量 1 测量 2 1.19 2.45 2.51 1.16 2.51 测量 3 1.20 2.45 2.48 1.18 2.51 平均数 1.20 2.45 2.48 1.18 2.51 测量 1 4.50 4.90 5.00 5.14 5.14 测量 2 4.50 5.00 5.08 5.16 5.16 测量 3 4.50 4.95 5.04 5.15 5.15 平均数 4.50 4.95 5.04 5.15 5.15精氨酸 丙氨酸 甘氨酸 混合 1 混合 21.21 2.45 2.45 1.20 2.50说明：1、由于薄层板点样端浸入展层-显色剂时，板与液面有倾斜，故选取经过点 样起点和止点的连线作为样品原点中心距离，再延长和前沿线的交点作为前缘至原 点中心距离，得出的实验数据，以减少实验误差。 2、溶液前缘到样品原点的距离是指对应的溶液前缘到样品原点的距离。第二组表2样品第二组原始数据记录表色斑中心至样品原点中心距离（cm） 溶剂前缘至原点中心距离（cm） 测量 1 测量 2 0.98 1.72 1.32 0.98 1.97 测量 3 0.99 1.74 1.29 0.99 1.99 平均数 0.98 1.74 1.32 0.98 1.98 测量 1 3.96 3.74 3.79 4.05 4.05 测量 2 4.00 3.75 3.85 4.11 4.11 测量 3 3.98 3.73 3.82 4.08 4.08 平均数 3.98 3.74 3.82 4.08 4.08精氨酸 丙氨酸 甘氨酸 混合 1 混合 20.97 1.76 1.35 0.98 1.99【实验报告第三部分（结果与讨论） ：①结果（定量实验包括计算） ：应把所得的实验结 果（如观察现象）和数据进行整理、归纳、分析、对比，尽量用图表的形式概括实验的 结果；②讨论：不应是实验结果的重述，而是以结果为基础的逻辑推论。③结论：简单 扼要，说明本次实验所获得的结果。 （包括思考题） 。评分（满分 45 分） ：XX】三、结果与讨论 结果：根据 Rf 斑点中心到样品原点的 距离 计算。 对应溶剂前沿到样品原 点的距离第一组： 样品 精氨酸 丙氨酸 甘氨酸 混合点 1 混合点 2 Rf 值 0.267 0.495 0.492 0.229 0.487 推断 精氨酸 -只能在误差允许范围内，认为混合氨基酸中含有精氨酸。现有数据不能确定混合点 2 的氨基酸种类，本组实验认定为失败。 第二组： 样品 精氨酸 丙氨酸 甘氨酸 混合点 1 Rf 值 0.246 0.465 0.346 0.241 推断 精氨酸混合点 20.485丙氨酸在误差允许的范围内，确定混合点 1 是精氨酸，混合点 2 是丙氨酸。混合氨基酸由 精氨酸与丙氨酸组成。 讨论：对比两组实验，可以发现，操作是否达到要求严重影响实验结果，甚至决定实验成 败。 项目 层析板晾干 第一组 第二组 分析 根据溶剂前缘曲直程度 可以看出第一组的板明 显厚薄不均，较第二组 差别很大。 晾干时间 边缘效应 烘烤时间 约 60min 十分明显，影响很大 长 约 30min 大有改善，不明显 短 不倾斜 第一组倾斜，导致展层显色剂展层方向与层析 板方向有偏差，数据无 法使用。 显色效果 模糊，颜色不明显 清晰，颜色明显 点样时第二次较第一次 有经验，点样较成功。 综上讨论：1、实验时一定要严格按照实验要求操作。 2、多做才能熟能生巧。 3、做实验时要有耐心，欲速则不达。 欲速则不达，应严格按 照实验要求操作。空调猛吹，晾干时板不 自然晾干 水平层 析 板 在 层 倾斜 析缸中位置4、实验时要根据实际情况随机应变，不能墨守成规。 （第二组时，层展-显色剂前沿在前 20min 水平几乎无凹陷，之后开始出现细小凹陷。此 时前沿已接近层析板二分之一处，应及时取出，避免因厚薄不均引起更 大的数据误差） 结论： 实验结论 实验条件严格达到要求的情况下，测得混合的氨基酸溶液中，存在有精氨酸和 丙氨酸两种氨基酸。 思考题1、硅胶的吸附力与含水量的问题。 答：硅胶的活性可分为 5 个等级，活性等级越大，硅胶的吸附性能越小。该活性与 水的含量有关。在一定的温度下，加热以除去水分可以提高活性和吸附，这就是所谓的活化。然而，温度应在一定的限度，因为高温可以改变吸附剂的内部结构和不可逆地降低的吸附。 （硅胶活性级别与含水量关系：Ⅰ:0%;Ⅱ:5%;Ⅲ:15%;Ⅳ:25%; Ⅴ:38）即，吸附力越大，含水量越少。2、吸附实验中吸附剂的选择根据。 1) 吸附剂应该具有最大的表面积和吸附力。 2) 吸附剂对不同的物质有不同的吸附作用。 3) 吸附剂不能与溶剂和样品发生化学反应。 4) 吸附剂应均匀，且不能在操作中被损坏。3、氨基酸纸层析，两者有何区别。 1) 吸附剂：薄层层析使用硅胶,纸层析使用纸张。2) 分辨率：薄层层析具有的分辨率比纸层析高。 3) 速度：薄层层析比纸层析更加的快。
实验名称(Title of Experimetn)氨基酸薄层层析实验地点 (Lab No.) 指导老师(Instructor)实验日期(Date of Experiment)合作者(Partner)总分(Total Score)XX教师签名(Signature)李某某批改日期(Date)【实验报告第一部分（预习报告内容） ：①实验原理、②实验材料（包括实验样品、主 要试剂、主要仪器与器材） 、③实验步骤（包括实验流程、操作步骤和注意事项） ；评分 （满分 30 分） ：XX】一、预习报告 实验原理：层析（chromatography） ：利用混合物各组分物理化学性质的差异，将多组分混合物 进行分离及测定的方法。 固定相（stationary phase） 层析体质的一个基质。 能与待分离的化合物进行可逆的吸附、溶解、交换等作用。流动相（mobile phase） 在层析过程中推动固定相上贷分离的物质朝着一个方 向运动的液体或气体。 迁移率（rate of flow，Rf） 一定条件下， 在特定时间内某一组份在固定相移动的距 离与流动相本身移动的距离之比值，Rf 值≤1。 层析原理：层析体系由一个固定相和一个流动相组成。流动相对固定相做相对运动， 从而推动待分离的混合物样品通过固定相向前移动。样品中各组份物理化学性质不 同，与两相发生相互作用的能力不同，被流动相推动前进时受到的阻力和移动速度不同，一定时间后，不同组份就可以在固定相上分离。根据固定相基质的形式，层析可分为纸层析、薄层层析和柱层析。薄层层析是在玻 璃或塑料等光滑表面铺一层很薄的基质进行层析。薄层层析（thin layer chromatography，TLC） ：是将吸附剂均匀地在玻璃板上铺 成薄层（固定相） ，再把样品点在薄层板一端，再把板的这端浸入适当的溶剂（流动相） 在薄层板上扩展。 并在此过程中通过吸附——解吸附——再吸附——再解吸附的反复进 行，而将样品各组份分离出来。本次实验： 具体原理：当流动相在固定相上流动时，由于吸附剂对不同氨基酸的吸附力不 一样，不同氨基酸在展开溶剂中的溶解度不一样，点在薄板上的混合氨基酸样 品随着展开剂的移动速率也不同，因而可以彼此分开。 吸附剂（固定相） ：硅胶（C.P.） 。为使制成的薄层板不易松散，加入 5%羟甲基纤维素钠（CMCNa）作黏合剂。 展开剂：正丁醇、冰醋酸和蒸馏水的混合液（80:10:10,V/V/V） 。 展层-显色剂：按照 10:1 比例（V/V）混匀的展开剂和 0.1%茚三酮溶液。 活化（activation） ：在一定温度下，对吸附剂硅胶加热去除水分。可使硅胶的 活性提高，吸附能力加强。 氨基酸与茚三酮的显色反应： 茚三酮水化后生成的水合茚三酮在加热时被还原， 此产物与氨基酸加热分解产生的氨结合，以及另一分子水合茚三酮缩合生成紫 红色化合物而使氨基酸斑点显色。 Rf 值：Rf 斑点中心到样品原点的 距离 对应溶剂前沿到样品原 点的距离由于物质在一定溶剂中的分配系数是一定的，故移动速率（Rf 值）也是恒定的，因此可以根据 Rf 值来鉴定被分离的物质。 实验材料： 样品：1、0.01mol/L 丙氨酸; 2、 0.01mol/L 精氨酸; 3、0.01mol/L 甘氨酸; 4、混合氨基酸溶液。 试剂：1、硅胶（C.P.） 2、0.5%羟甲基纤维素钠（CMCNa） 3、层展-显色剂：按照 10:1 比例（V/V）混匀的展开剂（正丁醇、冰醋酸和蒸馏水 的混合液（80:10:10,V/V/V） ）和 0.1%茚三酮溶液。 仪器及器材：1、层析版（6cm×15cm） 2、小烧杯 3、量筒（10ml） 4、刻度尺 5、铅笔 6、毛细玻璃管 7、层析缸 8、烘箱 9、天平 10、药匙实验步骤： 实验流程： 步骤操作步骤： 操作 ①调浆：称取硅胶 3g，加入 0.5%羟甲基纤维素钠 8ml，调成均匀的糊状 ②涂布：取洁净的干燥玻璃板涂层并涂抹震荡均匀 ③干燥：将玻璃板水平放置，室温下放置 0.5h，自然晾干至表面没有明显水渍 ④活化：70°C 烘干 60min（1） 制板（2） 点样①标记：用铅笔距底边 2cm 水平线上均匀确定 4 个点并做好标记。每个样品间相距 1cm ②点样：用毛细玻璃管分别吸取 0.01mol/L 丙氨酸、精氨酸、甘氨酸、混合氨基酸溶液，轻轻接触薄层表面点样。加样原点扩散直径不超过 2mm（3） 层析 将薄层板点样端浸入展层-显色剂，展层-显色剂液面应低于点样线。盖好层析缸盖， 上行展层。当层展剂前沿到达薄板二分之一时，停止展层，取出薄板，用铅笔描出溶 剂的前沿界线。 （4） 显色 90℃下烘干 30min，即可显出各层斑点注意事项：1、玻璃板要清洁平整无油污；2、去掉玻璃板侧缘的硅胶粉，否则层析时会有较强的边缘效应； 3、点样时轻触疾起，避免重复点样和斑点过大产生交叉和拖尾；4、毛细玻璃管用完放回原来的烧 杯里；5、避免用手接触层析板，避免用手握层析板的下半部分；6、层析板放入层析缸时底端应放 置水平，以防倾斜放置使展层方向与薄板下缘不垂直，不好处理数据；7、样点不能浸入到溶液中； 8、层析缸盖应作密封处理防止挥发。【实验报告第二部分（实验记录） ：①主要实验条件（如材料的来源、质量；试剂的规 格、用量、浓度；实验时间、操作要点中的技巧、失误等，以便总结实验时进行核对和 作为查找成败原因的参考依据） ；②实验中观察到的现象（如加入试剂后溶液颜色的变 化） ；③原始实验数据。评分（满分 20 分） ：XX】二、实验记录（一共做了两组实验，以作对照） 主要实验条件： 材料：1、硅胶（C.P.） 2、玻璃板。要求干净干燥。 试剂：1、0.5%的羧甲基纤维素钠 8ml 2、0.01mol/L 丙氨酸、精氨酸、甘氨酸、混合氨基酸溶液。各取毛细管 2cm 高左右， 扩散不超 2mm 3、展层-显色液，层析缸内深度 1-2cm 操作要点：1、制板时，尽量快地将混合匀浆倒在玻璃板上，易于铺匀。 2、层析板晾干时尽量保持水平，避免强风猛吹，否则制作的板厚薄不均。 3、活化时烘干以背面无水渍为准。 4、点样时要轻触疾起。 5、点样完毕将层析板放入层析缸时，要保持层析板下缘水平。 6、展层-显色剂液面应低于点样线，展层剂前沿大概跑到 1/2 处时取出7、避免手触碰层析板和点样端边缘。 实验现象： 第一组：1、制板后，约 60min 晾干。 2、点样时，第三个点点得较轻，其他点扩散后大小适中，不超 2mm。 3、因层析缸不平整，浸入展层-显色液时层析板有些倾斜。 4、在层析约 45min 后溶剂前沿到达层析板的 1/2 处左右， 取出并烘干。 溶剂前沿是 一条凹陷明显的曲线。 5、在利用烤箱烘干后， 层析板上出现 5 个倾斜的蓝紫色斑点， 第一和第三个点相对 模糊。第一个点有拖尾现象，第三个点明显较其他点小，显色不明显。 6、板的周缘边出现有明显蓝紫色丝带。 如图：第二组：1、制板后，约 30min 晾干。 2、点样时，点扩散后大小适中，不超 2mm。 3、层展-显色剂前沿在前 20min 水平几乎无凹陷， 之后开始出现细小凹陷。 至 25min 时前沿到达层析板的 1/2 处左右， 取出并烘干。 溶剂前沿是一条有轻微凹陷的曲线。 4、在利用烤箱烘干后，层析板上出现 5 个明显的蓝紫色斑点。第三个颜色较浅。 5、板的周缘边出现些许蓝紫色丝带。 如图：原始实验数据：每个数据测量三次，取平均数。第一组：表1样品第一组原始数据记录表色斑中心至样品原点中心距离（cm） 溶剂前缘至原点中心距离（cm） 测量 1 测量 2 1.19 2.45 2.51 1.16 2.51 测量 3 1.20 2.45 2.48 1.18 2.51 平均数 1.20 2.45 2.48 1.18 2.51 测量 1 4.50 4.90 5.00 5.14 5.14 测量 2 4.50 5.00 5.08 5.16 5.16 测量 3 4.50 4.95 5.04 5.15 5.15 平均数 4.50 4.95 5.04 5.15 5.15精氨酸 丙氨酸 甘氨酸 混合 1 混合 21.21 2.45 2.45 1.20 2.50说明：1、由于薄层板点样端浸入展层-显色剂时，板与液面有倾斜，故选取经过点 样起点和止点的连线作为样品原点中心距离，再延长和前沿线的交点作为前缘至原 点中心距离，得出的实验数据，以减少实验误差。 2、溶液前缘到样品原点的距离是指对应的溶液前缘到样品原点的距离。第二组表2样品第二组原始数据记录表色斑中心至样品原点中心距离（cm） 溶剂前缘至原点中心距离（cm） 测量 1 测量 2 0.98 1.72 1.32 0.98 1.97 测量 3 0.99 1.74 1.29 0.99 1.99 平均数 0.98 1.74 1.32 0.98 1.98 测量 1 3.96 3.74 3.79 4.05 4.05 测量 2 4.00 3.75 3.85 4.11 4.11 测量 3 3.98 3.73 3.82 4.08 4.08 平均数 3.98 3.74 3.82 4.08 4.08精氨酸 丙氨酸 甘氨酸 混合 1 混合 20.97 1.76 1.35 0.98 1.99【实验报告第三部分（结果与讨论） ：①结果（定量实验包括计算） ：应把所得的实验结 果（如观察现象）和数据进行整理、归纳、分析、对比，尽量用图表的形式概括实验的 结果；②讨论：不应是实验结果的重述，而是以结果为基础的逻辑推论。③结论：简单 扼要，说明本次实验所获得的结果。 （包括思考题） 。评分（满分 45 分） ：XX】三、结果与讨论 结果：根据 Rf 斑点中心到样品原点的 距离 计算。 对应溶剂前沿到样品原 点的距离第一组： 样品 精氨酸 丙氨酸 甘氨酸 混合点 1 混合点 2 Rf 值 0.267 0.495 0.492 0.229 0.487 推断 精氨酸 -只能在误差允许范围内，认为混合氨基酸中含有精氨酸。现有数据不能确定混合点 2 的氨基酸种类，本组实验认定为失败。 第二组： 样品 精氨酸 丙氨酸 甘氨酸 混合点 1 Rf 值 0.246 0.465 0.346 0.241 推断 精氨酸混合点 20.485丙氨酸在误差允许的范围内，确定混合点 1 是精氨酸，混合点 2 是丙氨酸。混合氨基酸由 精氨酸与丙氨酸组成。 讨论：对比两组实验，可以发现，操作是否达到要求严重影响实验结果，甚至决定实验成 败。 项目 层析板晾干 第一组 第二组 分析 根据溶剂前缘曲直程度 可以看出第一组的板明 显厚薄不均，较第二组 差别很大。 晾干时间 边缘效应 烘烤时间 约 60min 十分明显，影响很大 长 约 30min 大有改善，不明显 短 不倾斜 第一组倾斜，导致展层显色剂展层方向与层析 板方向有偏差，数据无 法使用。 显色效果 模糊，颜色不明显 清晰，颜色明显 点样时第二次较第一次 有经验，点样较成功。 综上讨论：1、实验时一定要严格按照实验要求操作。 2、多做才能熟能生巧。 3、做实验时要有耐心，欲速则不达。 欲速则不达，应严格按 照实验要求操作。空调猛吹，晾干时板不 自然晾干 水平层 析 板 在 层 倾斜 析缸中位置4、实验时要根据实际情况随机应变，不能墨守成规。 （第二组时，层展-显色剂前沿在前 20min 水平几乎无凹陷，之后开始出现细小凹陷。此 时前沿已接近层析板二分之一处，应及时取出，避免因厚薄不均引起更 大的数据误差） 结论： 实验结论 实验条件严格达到要求的情况下，测得混合的氨基酸溶液中，存在有精氨酸和 丙氨酸两种氨基酸。 思考题1、硅胶的吸附力与含水量的问题。 答：硅胶的活性可分为 5 个等级，活性等级越大，硅胶的吸附性能越小。该活性与 水的含量有关。在一定的温度下，加热以除去水分可以提高活性和吸附，这就是所谓的活化。然而，温度应在一定的限度，因为高温可以改变吸附剂的内部结构和不可逆地降低的吸附。 （硅胶活性级别与含水量关系：Ⅰ:0%;Ⅱ:5%;Ⅲ:15%;Ⅳ:25%; Ⅴ:38）即，吸附力越大，含水量越少。2、吸附实验中吸附剂的选择根据。 1) 吸附剂应该具有最大的表面积和吸附力。 2) 吸附剂对不同的物质有不同的吸附作用。 3) 吸附剂不能与溶剂和样品发生化学反应。 4) 吸附剂应均匀，且不能在操作中被损坏。3、氨基酸纸层析，两者有何区别。 1) 吸附剂：薄层层析使用硅胶,纸层析使用纸张。2) 分辨率：薄层层析具有的分辨率比纸层析高。 3) 速度：薄层层析比纸层析更加的快。