实验二 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
一．实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。还原糖（葡萄糖、果糖、麦芽糖而蔗糖、纤维素、淀粉不是） + 斐林试剂～砖红色沉淀 脂 肪 + 苏丹III ～橘黄色
脂 肪 + 苏丹IV Ⅲ～ 红色，橘红色 蛋白质 + 双缩脲试剂 ～紫色反应（在碱性溶液中，Cu 2＋与蛋白质发生反应，鉴定肽键）
三、实验过程
1、还原糖的检测
（1）材料的选取：苹果或梨匀浆（无色，含糖量高，颜色为白色或近于白色。植物叶片有液泡，内含色素，干扰试验）
（2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH 溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用，水浴。
（3）步骤：取样液2mL 于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL （斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→50~65°温水大烧杯中温水浴加热2min 左右→观察颜色变化（浅蓝色→棕色→砖红色）
2、脂肪的检测
（1）材料的选取：选择富含脂肪的种子（实验前浸泡3-4h ）如花生子叶。
（2）步骤： 制作切片（切片越薄越好，透光便于观察）将最薄的花生切片放在载玻片中央 （花生切片细胞一部分清晰一部分模糊说明切片薄厚不均） ↓
染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min 后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）
↓
制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片） ↓
镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒。先用低倍镜，找到子叶最薄处，并移到视野中央，再换高倍镜，调整细焦螺旋观察，可见已着色的脂肪颗粒）
3、蛋白质的检测
（1）试剂：双缩脲试剂（A 液：0.1g/mL的NaOH 溶液，B 液：0.01g/mL的CuSO4溶液）
（2）步骤：选材（豆浆或鸡蛋蛋白, 若用鸡蛋实验则用水稀释，防止粘在试管内壁，利于清洗）→ 取组织样液加入试管中试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A 液1mL ，摇匀→加双缩尿 试剂B 液4滴，摇匀→观察颜色变化(紫色)
4. 淀粉的检测和观察
（1）材料选取：淀粉遇碘变蓝。
（2）步骤：选用富含淀粉的植物组织（如马铃薯） → 将组织样液注入试管→滴加碘液→观察颜色反应。
实验二 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
一．实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。还原糖（葡萄糖、果糖、麦芽糖而蔗糖、纤维素、淀粉不是） + 斐林试剂～砖红色沉淀 脂 肪 + 苏丹III ～橘黄色
脂 肪 + 苏丹IV Ⅲ～ 红色，橘红色 蛋白质 + 双缩脲试剂 ～紫色反应（在碱性溶液中，Cu 2＋与蛋白质发生反应，鉴定肽键）
三、实验过程
1、还原糖的检测
（1）材料的选取：苹果或梨匀浆（无色，含糖量高，颜色为白色或近于白色。植物叶片有液泡，内含色素，干扰试验）
（2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH 溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用，水浴。
（3）步骤：取样液2mL 于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL （斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→50~65°温水大烧杯中温水浴加热2min 左右→观察颜色变化（浅蓝色→棕色→砖红色）
2、脂肪的检测
（1）材料的选取：选择富含脂肪的种子（实验前浸泡3-4h ）如花生子叶。
（2）步骤： 制作切片（切片越薄越好，透光便于观察）将最薄的花生切片放在载玻片中央 （花生切片细胞一部分清晰一部分模糊说明切片薄厚不均） ↓
染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min 后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）
↓
制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片） ↓
镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒。先用低倍镜，找到子叶最薄处，并移到视野中央，再换高倍镜，调整细焦螺旋观察，可见已着色的脂肪颗粒）
3、蛋白质的检测
（1）试剂：双缩脲试剂（A 液：0.1g/mL的NaOH 溶液，B 液：0.01g/mL的CuSO4溶液）
（2）步骤：选材（豆浆或鸡蛋蛋白, 若用鸡蛋实验则用水稀释，防止粘在试管内壁，利于清洗）→ 取组织样液加入试管中试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A 液1mL ，摇匀→加双缩尿 试剂B 液4滴，摇匀→观察颜色变化(紫色)
4. 淀粉的检测和观察
（1）材料选取：淀粉遇碘变蓝。
（2）步骤：选用富含淀粉的植物组织（如马铃薯） → 将组织样液注入试管→滴加碘液→观察颜色反应。