286
新疆医科大学学报JOURNAI。OFXINJIANGMEDICAl。UNIVERSITY
2010
Mar.,33(3)
分光光度法测定维吾尔药核桃分心木中总皂苷的含量
韩艳春p,阿布都热合曼・合力力2,阿依吐伦・斯马义P’
(1新疆医科大学药学院,2新疆维吾尔自治区维吾尔医院,新疆乌鲁木齐830000)
摘要:目的研究维吾尔药核桃分心木总皂苷的含量测定方法。方法用95%乙醇提取,水饱和正丁醇萃
取的方法提取纯化核桃分心木中总皂苷。高氯酸显色,紫外分光光度法测定核桃分心木中总皂苷的含量。结呆
以人参皂苷Rbl为标准品作标准曲线。A一0.0593C+oj057
6,r=0.999
7,样品检测量在0.2086~o.327
8
mg的范围内与吸光度线性关系良好,回收率为89.11%,测得核桃分心木总皂苷的含量为4.187%。结论定方法简便、快速、灵敏、准确,可作为维吾尔药核桃分心木中总皂苷含量测定方法的参考依据。
关键词:核桃分心木;总皂苷;分光光度法中图分类号:R27.11
文献标识码:A
文章编号:1009—5551(2009)03—0286—02
此测
SpectrophotometricdeterminationoftotalsaponinsinUygur
medicineofdiaphragma
juglandis
fructus
HANYan-chun,Abdurahman・Holly,Aytulun・Simayil
(PharmacyCollege,Xinjiang
Medical
University,Urumqi830011,China)
content
Abstract:Objective
Toestablish
a
methodfordeterminingtheoftotalsaponinsinUygurherbal
medicineofdiaphragmajuglandisfructus.MethodsTotalsaponinswasextractedby95%ethanolandpu—
tO
rifledbywater—saturatingn—butan01.Themethodofperchloricacidspectrophotometrywasusedminetotalsaponins.Results
GinsenosideRblwastaken
as
deter—
thestandard
to
makethestandardcurve:A=
rate
0.0593C+0.0576,r=0.9997,thelinearrangewas0.2086"-0.3278mg.Theaveragerecoverywas
89.11%.The
are
contents
oftotalsaponinsindiaphragmajuglandisfructuswas4.187%.Conclusion
Thesemethods
simple,accurateandsuitableforthequalitycontrolofthetotalsaponinsindiaphragma
juglandisfructus.
Key
words:diaphragmajuglandisfructus;totalsaponins;spectrophotometry;assay
维吾尔药核桃分心木(diaphragmajuglandisfructus)是胡桃科核桃属植物核桃的果核内木质隔膜,体轻、质脆、易折断…。分心木味苦、涩,性平;归脾、肾经。维吾尔医用于治疗肾虚遗精疗效显著[2_4]。目前国内外核桃属植物[51及核桃楸各药用部位的研究较多[6],但对于分心木的研究较少。对分心木的药用价值没有充分地认识,导致该药用资源的严重浪费。本文主要针对核桃分心木中总皂苷的含量进行初步测定,以期指导皂苷类成分的进一步研究。
鉴定为胡桃科核桃属植物核桃的果核内木质隔膜。
UV-2550紫外光谱仪(日本岛津),EYEI。AABl04一N型多功能电子天平(Toledo
hai
SB:
1000型旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司),
Instr.Shang—
Ltd.),SK2510HP超声清洗仪(上海科导超声
清洗仪有限公司),DH@-9053A型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)等。正丁醇,95%乙醇,甲醇(天津市富宇精细化工有限公司,分析纯),高氯酸,浓硫酸(北京北细精细化学品有限责任公司,分析纯),人参皂苷Rbl标准品(中国药品生物制品检定所提供,批号110704-200420)等。
1主要仪器与试药
核桃分心木采自新疆和田地区,经新疆医科大学药学院天然药物化学教研室帕丽达・阿布利孜教授
2实验方法与结果
2.1样品溶液的制备Ⅲ
精密称取5.0g药材粉
作者简介:韩艳春(1983--),女,在读硕士。研究方向:新疆地方药用植物的研究。
通讯作者:阿依吐伦・斯马义,女(乌孜别克族),教授,硕士生导师,研究方向:药物分析和天然药物化学,E—mail:aytulunss@126.com。
万方数据
新疆医科大学学报JOURNAI。OFXINJIANGMEDICAI,UNIVERSITY
2010Mar.,33(3)287
末,置索氏提取器内,加95%乙醇50ml在80℃回流提取至无色,溶液回收95%乙醇至干,加蒸馏水
10
ml超声溶解,用等量的水饱和正丁醇萃取4次,
合并水饱和正丁醇部分萃取液,正丁醇饱和水洗涤,水浴蒸干,残渣用甲醇溶液定容至50ml,制得样品溶液。
2.2标准品溶液的制备
精密称定人参皂苷Rbl
标准品14.9mg,置100ml容量瓶中,加入10ml甲醇使溶解,用甲醇稀释至刻度,摇匀。配制浓度为
0.149mg/ml的人参皂苷Rbl标准品溶液。2.3
吸收波长的确定
取人参皂苷Rbl标准品溶
液、样品溶液各1ml,分别置具塞试管中,挥去溶剂,精密加入loml高氯酸,旋涡混匀1min,于70℃水浴加热反应15min,立即于冰水中终止反应。以高氯酸为空白对照,在分光光度计上200~
700am进行扫描,结果样品溶液和标准品溶液均在250
am有最大吸收,故确定吸收波长为250
nm。
2.4标准曲线的制备精密吸取人参皂苷Rbl标
准品溶液1.4、1.6、1.8、2.0、2.2ml于具塞试管中,其余步骤按“2.3”项下操作,于250am处测定吸光度,不同体积标准品溶液的吸光度值见表l。回归方程为A一0.059
3C+0.0576,r一0.9997,样品
检测量在0.2086~o.327
8
mg的范围内与吸光度
线性关系良好,其标准曲线见图1。
表1
250
nnl下不同体积标准品溶液的吸光度值
样品编号
1
2
3
4
5
吸光度值(A)0.1790.2330.2930.3540.415检测浓度(“g/m1)
20.86
23.84
26.82
29.80
32.78
图1标准曲线图
2.5精密度试验精密吸取人参皂苷Rbl标准品溶液1.2m1,按“2.3”项下操作6次,测定吸光度。相对标准偏差(RSD);O.30%,表明本法精密度良好。2.6重复性试验取同批分心木6份,按“2.1”项下样品溶液的制备方法和“2.3”项下的显色方法测定吸光度,RSD为0.41%。
2.7显色稳定性试验精密吸取人参皂苷Rbl标
万方数据
准品溶液1.0ml,按“2.3”项下显色方法显色后,分
别在0、0.5、1、1.5、2h测定吸光度,结果表明在2h
内,测定结果较稳定,RSD为0.44%。
2.8样品含量测定精密吸取样品液0.06ml,按“2.3”项下的显色方法后,在250nm下测定其吸光度,以人参皂苷Rbl为标准品计算得分心木总皂苷的含量为4.187%,含量均以干燥品计。
2.9加样回收率实验精密称取分心木粉末12.5mg平行6份,并分别精密加入人参皂苷Rbl溶液
0.3
ml,按“2.1”项下样品溶液的制备方法和“2.3”
项下的显色方法测定吸光度,计算回收率。平均回收率为89.11%,RSD为7.68%,结果见表2。
表2回收率实验
3
结论
用紫外分光光度法测定总皂苷含量的方法常利
用皂苷与芳香醛一硫酸或高氯酸的显色反应进行比色定量。目前较常用的方法有3种,即高氯酸法口]、香草酸一冰醋酸一高氯酸法[8]、茴香醛一浓硫酸法。本实验中采用高氯酸法,最大波长明显,反应相对稳定。
本文所采用高氯酸显色检测核桃分心木总皂苷
含量的方法,速度快、操作方便、结果准确、灵敏度高,且重现性好,可为维吾尔药核桃分心木药材及其制剂的质量控制提供一定的参考依据。
.参考文献:
[1]
茹克娅・沙德克.维吾尔医常用药材学(维吾尔文):下册[M].乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社。1993:323.
[23吐尔洪・吾买尔.维吾尔医药植物学(维吾尔文)IM].乌鲁木
齐:新疆人民出版社,2004:122.[3]
阿巴拜克热・热合曼.维吾尔医常用生药(维吾尔文)[M].乌鲁木齐:新疆人民卫生出版社,2004:772.
[4]穆塔力甫・艾力,阿吉・艾米提.维吾尔医常用草药(维吾尔
文)[M].乌鲁木齐:新疆人民卫生出版社,2005:695.
[5]李福双,申健.谭桂山.胡桃属植物化学成分及药理作用研究
进展[J].中成药,2007,29(i0);1490—1495.
[6]于海玲.核桃楸的研究进展[J].延边大学医学学报,2005,28
(2):154—156.
[7]周桂芬。吕圭源.麦冬茎叶的总皂苷含量测定及采收时间[J].江西中医药,2008,39(302):46—47.
[8]董平.薛长湖,盛文静。等.海参中总皂苷含量测定方法的研
究[J].中国海洋药物杂志,2008,27(1):28・32.
[收稿日期:2009—11—10]
286
新疆医科大学学报JOURNAI。OFXINJIANGMEDICAl。UNIVERSITY
2010
Mar.,33(3)
分光光度法测定维吾尔药核桃分心木中总皂苷的含量
韩艳春p,阿布都热合曼・合力力2,阿依吐伦・斯马义P’
(1新疆医科大学药学院,2新疆维吾尔自治区维吾尔医院,新疆乌鲁木齐830000)
摘要:目的研究维吾尔药核桃分心木总皂苷的含量测定方法。方法用95%乙醇提取,水饱和正丁醇萃
取的方法提取纯化核桃分心木中总皂苷。高氯酸显色,紫外分光光度法测定核桃分心木中总皂苷的含量。结呆
以人参皂苷Rbl为标准品作标准曲线。A一0.0593C+oj057
6,r=0.999
7,样品检测量在0.2086~o.327
8
mg的范围内与吸光度线性关系良好,回收率为89.11%,测得核桃分心木总皂苷的含量为4.187%。结论定方法简便、快速、灵敏、准确,可作为维吾尔药核桃分心木中总皂苷含量测定方法的参考依据。
关键词:核桃分心木;总皂苷;分光光度法中图分类号:R27.11
文献标识码:A
文章编号:1009—5551(2009)03—0286—02
此测
SpectrophotometricdeterminationoftotalsaponinsinUygur
medicineofdiaphragma
juglandis
fructus
HANYan-chun,Abdurahman・Holly,Aytulun・Simayil
(PharmacyCollege,Xinjiang
Medical
University,Urumqi830011,China)
content
Abstract:Objective
Toestablish
a
methodfordeterminingtheoftotalsaponinsinUygurherbal
medicineofdiaphragmajuglandisfructus.MethodsTotalsaponinswasextractedby95%ethanolandpu—
tO
rifledbywater—saturatingn—butan01.Themethodofperchloricacidspectrophotometrywasusedminetotalsaponins.Results
GinsenosideRblwastaken
as
deter—
thestandard
to
makethestandardcurve:A=
rate
0.0593C+0.0576,r=0.9997,thelinearrangewas0.2086"-0.3278mg.Theaveragerecoverywas
89.11%.The
are
contents
oftotalsaponinsindiaphragmajuglandisfructuswas4.187%.Conclusion
Thesemethods
simple,accurateandsuitableforthequalitycontrolofthetotalsaponinsindiaphragma
juglandisfructus.
Key
words:diaphragmajuglandisfructus;totalsaponins;spectrophotometry;assay
维吾尔药核桃分心木(diaphragmajuglandisfructus)是胡桃科核桃属植物核桃的果核内木质隔膜,体轻、质脆、易折断…。分心木味苦、涩,性平;归脾、肾经。维吾尔医用于治疗肾虚遗精疗效显著[2_4]。目前国内外核桃属植物[51及核桃楸各药用部位的研究较多[6],但对于分心木的研究较少。对分心木的药用价值没有充分地认识,导致该药用资源的严重浪费。本文主要针对核桃分心木中总皂苷的含量进行初步测定,以期指导皂苷类成分的进一步研究。
鉴定为胡桃科核桃属植物核桃的果核内木质隔膜。
UV-2550紫外光谱仪(日本岛津),EYEI。AABl04一N型多功能电子天平(Toledo
hai
SB:
1000型旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司),
Instr.Shang—
Ltd.),SK2510HP超声清洗仪(上海科导超声
清洗仪有限公司),DH@-9053A型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)等。正丁醇,95%乙醇,甲醇(天津市富宇精细化工有限公司,分析纯),高氯酸,浓硫酸(北京北细精细化学品有限责任公司,分析纯),人参皂苷Rbl标准品(中国药品生物制品检定所提供,批号110704-200420)等。
1主要仪器与试药
核桃分心木采自新疆和田地区,经新疆医科大学药学院天然药物化学教研室帕丽达・阿布利孜教授
2实验方法与结果
2.1样品溶液的制备Ⅲ
精密称取5.0g药材粉
作者简介:韩艳春(1983--),女,在读硕士。研究方向:新疆地方药用植物的研究。
通讯作者:阿依吐伦・斯马义,女(乌孜别克族),教授,硕士生导师,研究方向:药物分析和天然药物化学,E—mail:aytulunss@126.com。
万方数据
新疆医科大学学报JOURNAI。OFXINJIANGMEDICAI,UNIVERSITY
2010Mar.,33(3)287
末,置索氏提取器内,加95%乙醇50ml在80℃回流提取至无色,溶液回收95%乙醇至干,加蒸馏水
10
ml超声溶解,用等量的水饱和正丁醇萃取4次,
合并水饱和正丁醇部分萃取液,正丁醇饱和水洗涤,水浴蒸干,残渣用甲醇溶液定容至50ml,制得样品溶液。
2.2标准品溶液的制备
精密称定人参皂苷Rbl
标准品14.9mg,置100ml容量瓶中,加入10ml甲醇使溶解,用甲醇稀释至刻度,摇匀。配制浓度为
0.149mg/ml的人参皂苷Rbl标准品溶液。2.3
吸收波长的确定
取人参皂苷Rbl标准品溶
液、样品溶液各1ml,分别置具塞试管中,挥去溶剂,精密加入loml高氯酸,旋涡混匀1min,于70℃水浴加热反应15min,立即于冰水中终止反应。以高氯酸为空白对照,在分光光度计上200~
700am进行扫描,结果样品溶液和标准品溶液均在250
am有最大吸收,故确定吸收波长为250
nm。
2.4标准曲线的制备精密吸取人参皂苷Rbl标
准品溶液1.4、1.6、1.8、2.0、2.2ml于具塞试管中,其余步骤按“2.3”项下操作,于250am处测定吸光度,不同体积标准品溶液的吸光度值见表l。回归方程为A一0.059
3C+0.0576,r一0.9997,样品
检测量在0.2086~o.327
8
mg的范围内与吸光度
线性关系良好,其标准曲线见图1。
表1
250
nnl下不同体积标准品溶液的吸光度值
样品编号
1
2
3
4
5
吸光度值(A)0.1790.2330.2930.3540.415检测浓度(“g/m1)
20.86
23.84
26.82
29.80
32.78
图1标准曲线图
2.5精密度试验精密吸取人参皂苷Rbl标准品溶液1.2m1,按“2.3”项下操作6次,测定吸光度。相对标准偏差(RSD);O.30%,表明本法精密度良好。2.6重复性试验取同批分心木6份,按“2.1”项下样品溶液的制备方法和“2.3”项下的显色方法测定吸光度,RSD为0.41%。
2.7显色稳定性试验精密吸取人参皂苷Rbl标
万方数据
准品溶液1.0ml,按“2.3”项下显色方法显色后,分
别在0、0.5、1、1.5、2h测定吸光度,结果表明在2h
内,测定结果较稳定,RSD为0.44%。
2.8样品含量测定精密吸取样品液0.06ml,按“2.3”项下的显色方法后,在250nm下测定其吸光度,以人参皂苷Rbl为标准品计算得分心木总皂苷的含量为4.187%,含量均以干燥品计。
2.9加样回收率实验精密称取分心木粉末12.5mg平行6份,并分别精密加入人参皂苷Rbl溶液
0.3
ml,按“2.1”项下样品溶液的制备方法和“2.3”
项下的显色方法测定吸光度,计算回收率。平均回收率为89.11%,RSD为7.68%,结果见表2。
表2回收率实验
3
结论
用紫外分光光度法测定总皂苷含量的方法常利
用皂苷与芳香醛一硫酸或高氯酸的显色反应进行比色定量。目前较常用的方法有3种,即高氯酸法口]、香草酸一冰醋酸一高氯酸法[8]、茴香醛一浓硫酸法。本实验中采用高氯酸法,最大波长明显,反应相对稳定。
本文所采用高氯酸显色检测核桃分心木总皂苷
含量的方法,速度快、操作方便、结果准确、灵敏度高,且重现性好,可为维吾尔药核桃分心木药材及其制剂的质量控制提供一定的参考依据。
.参考文献:
[1]
茹克娅・沙德克.维吾尔医常用药材学(维吾尔文):下册[M].乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社。1993:323.
[23吐尔洪・吾买尔.维吾尔医药植物学(维吾尔文)IM].乌鲁木
齐:新疆人民出版社,2004:122.[3]
阿巴拜克热・热合曼.维吾尔医常用生药(维吾尔文)[M].乌鲁木齐:新疆人民卫生出版社,2004:772.
[4]穆塔力甫・艾力,阿吉・艾米提.维吾尔医常用草药(维吾尔
文)[M].乌鲁木齐:新疆人民卫生出版社,2005:695.
[5]李福双,申健.谭桂山.胡桃属植物化学成分及药理作用研究
进展[J].中成药,2007,29(i0);1490—1495.
[6]于海玲.核桃楸的研究进展[J].延边大学医学学报,2005,28
(2):154—156.
[7]周桂芬。吕圭源.麦冬茎叶的总皂苷含量测定及采收时间[J].江西中医药,2008,39(302):46—47.
[8]董平.薛长湖,盛文静。等.海参中总皂苷含量测定方法的研
究[J].中国海洋药物杂志,2008,27(1):28・32.
[收稿日期:2009—11—10]