摘要：社会发展使食品质量问题逐步突出，在所有不安全因素中，兽药残留是首要的危险因素，本文以蜂产品中残留抗生素为例，研究其分析方法，主要包括柱切换直接进样-高效液相色谱法和固相萃取-高效液相色谱法。以下对这两种方法的相关实验项目进行研究。 关键词：蜂产品 抗生素残留 色谱分析 社会的进步，给人们提供了巨大的便利，也使人们对食品质量和安全的要求越来越高，食品安全问题已经不容忽视。在所有导致动物源性食品不安全性因素中，最主要的就是兽药残留。兽药残留中又以抗生素残留为主，人类长期接触这类动物产品，会存在诸多不可预知的危险性，加强对其研究已经成为迫切需求。其中蜂产品中残留抗生素就是典型例子，本文将以食品安全性就基础对其分析方法进行研究分析。 1.、食品安全质量与抗生素残留 古有言：民以食为天。食品的质量安全是人们赖以生存的基础课题，随着近年来人类科学技术的发展，社会经济正在不断进步，人们对食品安全的呼声越来越高，但是社会工业化所带来的生态环境恶化、化学物质在日常生活中的逐步充斥以及农药化肥和食物添加剂的使用使食品安全面临着巨大威胁。食品安全对食品质量提出了较高要求，也要求食品要具备良好的营养，其强调重点主要体现在杜绝食品内含有有害于人类健康的物质和因素的研究。在畜牧业中，动物的养殖都是密集圈养的，人们会使用抗生素以达到防治病虫害、保护动物健康、控制疫情等目的。但是在目前的兽药使用过程中存在许多不合理现象，导致可食用的动物产品中残留了部分药物。抗生素过度使用，会在动物体内形成大量的耐药致病菌，人类食用这些动物产品后极易感染，而且还会有耐药性细菌产生，使人类遭受各种毒副作用。以上可知，检测药物残留是一项必不可少的分析工作。 2.、柱切换直接进样-高效液相色谱法测定蜂产品中抗生素残留 在蜂群中常发一种疾病叫蜂群幼虫腐臭病，为了防治这一疾病，人们常用土霉素、金霉素或四环素，这些药物价格低廉而且效果比较好，但是如果使用过程中用量过度就会导致蜂产品中出现抗生素残留，对人类健康产生危害。在四环素族抗生素残留检测方面，发展最快的要数液相色谱法，固相萃取技术更是完善了这一检测方法。近些年，越来越多的进样分析应用都会借助于柱切换阀的多维液相色谱，主要应用于医疗，如尿液、血浆和血清中的药物分析。这些方法虽然取得了良好发展，但是其需要的仪器相对复杂，一般的实验室根本不能实现其配置。下面将采用柱切换技术，通过在HPLC系统中加设一个柱切换阀，来实现净化样品和分析过程的分离。 2.1 实验部分 2.1.1 仪器、试剂和样品 实验仪器：美国Agilent公司生产的HP1100高效液相色谱仪系统。标样：TC、OTC、CTC，其纯度分别为97.1%、96.2%和84.4%，自行制备100mg/L的标准储备溶液，在-18℃温度下保存；乙腈和甲醇的选择要使用HPLC专用；磷酸氢二钠、二水草酸和柠檬酸；自制的二次蒸馏水。样品：蜂蜜样品。 2.1.2 试验方法 在50mL的具塞离心管内放置2.00g蜂蜜样品，将2mL磷酸氢二钠/柠檬酸缓冲溶解加入其中进行溶解，放置在快速混匀器上振动30s，通过超声波处理十分钟，以3000rpm离心十分钟，抽滤后的滤液直接进行色谱分析。 2.2 结果与讨论 2.2.1 结果 流动相洗脱了大部分杂质，而四环素抗生素则被白柳在了预柱中。因为流路不会再分析柱经过，所以避免了来自于高浓度糖分对自身的破坏，还使柱头压力得以减小，保护了四元泵和分析柱。柱对接后，流动相B会将四环素抗生素转移进分析柱进行分离分析。蜂蜜样品中添加四环素族抗生素的回收率见下表1。 2.2.2 结论 在线净化可以使样品处理的步骤得以最大程度的简化，使有机试剂的用量减少；而且色谱分析具有高灵敏度、稳定的回收率以及良好的结果重现性。 3、.固相萃取-高效液相色谱法测定蜂产品中抗生素残留 下面将研究蜂产品中抗生素残留测定的另一种方法，采用C18SPE小柱净化样品，高效液相色谱-紫外检测法分析蜂王浆中抗生素残留。 3.1 实验部分 3.1.1 实验仪器、试剂和样品 仪器：美国生产的HP1100高效液相色谱仪。C18固相萃取小柱。试剂：一级色谱纯的甲醇和乙腈，均为分析纯的柠檬酸、无水磷酸氢二钠、氢氧化钠二水草酸、盐酸和乙二胺四乙酸二钠。购买于Sigma公司的TC、OTC、CTC标准品，其纯度分别为97.1%、96.2%和84.4%。Mcllvaine缓冲溶液。Na2EDTA-Mcllvaina缓冲溶液。甲醇草酸溶液。自制二次蒸馏水。样品：蜂王浆。 3.1.2 试验方法 首先对样品进行前处理，主要包括提取缓冲溶液、净化固相萃取两方面。 3.2 结果 当流动相B的配比为7：2：1时，等度洗脱即可完全分离三种四环素族抗生素。蜂王浆中添加四环素族抗生素的回收率见下表2。 4.、小结 本文主要通过研究柱切换直接进样-高效液相色谱法和固相萃取-高效液相色谱法测定蜂产品中的抗生素残留，这两种分析方法在抗生素残留分析方面取得了较大进展。 参考文献： [1] 蒋生祥，陈立仁，赵明方.多维高效液相色谱法分析石油中微量石油磺酸盐.分析化学，1992，20（6）：677-679 [2] 庞国芳，张进杰，李学敏等.高效液相色谱法测定蜂蜜中四环素族抗生素.中国养蜂，2003，54Supplement：25-28 [3] 汤瑶，何华，吴斌，陈慧兰，蒋原.固相萃取-HPLC法测定蜂蜜中残留的10种磺胺类药物.分析测试学报，2005，24（1）：96-99
摘要：社会发展使食品质量问题逐步突出，在所有不安全因素中，兽药残留是首要的危险因素，本文以蜂产品中残留抗生素为例，研究其分析方法，主要包括柱切换直接进样-高效液相色谱法和固相萃取-高效液相色谱法。以下对这两种方法的相关实验项目进行研究。 关键词：蜂产品 抗生素残留 色谱分析 社会的进步，给人们提供了巨大的便利，也使人们对食品质量和安全的要求越来越高，食品安全问题已经不容忽视。在所有导致动物源性食品不安全性因素中，最主要的就是兽药残留。兽药残留中又以抗生素残留为主，人类长期接触这类动物产品，会存在诸多不可预知的危险性，加强对其研究已经成为迫切需求。其中蜂产品中残留抗生素就是典型例子，本文将以食品安全性就基础对其分析方法进行研究分析。 1.、食品安全质量与抗生素残留 古有言：民以食为天。食品的质量安全是人们赖以生存的基础课题，随着近年来人类科学技术的发展，社会经济正在不断进步，人们对食品安全的呼声越来越高，但是社会工业化所带来的生态环境恶化、化学物质在日常生活中的逐步充斥以及农药化肥和食物添加剂的使用使食品安全面临着巨大威胁。食品安全对食品质量提出了较高要求，也要求食品要具备良好的营养，其强调重点主要体现在杜绝食品内含有有害于人类健康的物质和因素的研究。在畜牧业中，动物的养殖都是密集圈养的，人们会使用抗生素以达到防治病虫害、保护动物健康、控制疫情等目的。但是在目前的兽药使用过程中存在许多不合理现象，导致可食用的动物产品中残留了部分药物。抗生素过度使用，会在动物体内形成大量的耐药致病菌，人类食用这些动物产品后极易感染，而且还会有耐药性细菌产生，使人类遭受各种毒副作用。以上可知，检测药物残留是一项必不可少的分析工作。 2.、柱切换直接进样-高效液相色谱法测定蜂产品中抗生素残留 在蜂群中常发一种疾病叫蜂群幼虫腐臭病，为了防治这一疾病，人们常用土霉素、金霉素或四环素，这些药物价格低廉而且效果比较好，但是如果使用过程中用量过度就会导致蜂产品中出现抗生素残留，对人类健康产生危害。在四环素族抗生素残留检测方面，发展最快的要数液相色谱法，固相萃取技术更是完善了这一检测方法。近些年，越来越多的进样分析应用都会借助于柱切换阀的多维液相色谱，主要应用于医疗，如尿液、血浆和血清中的药物分析。这些方法虽然取得了良好发展，但是其需要的仪器相对复杂，一般的实验室根本不能实现其配置。下面将采用柱切换技术，通过在HPLC系统中加设一个柱切换阀，来实现净化样品和分析过程的分离。 2.1 实验部分 2.1.1 仪器、试剂和样品 实验仪器：美国Agilent公司生产的HP1100高效液相色谱仪系统。标样：TC、OTC、CTC，其纯度分别为97.1%、96.2%和84.4%，自行制备100mg/L的标准储备溶液，在-18℃温度下保存；乙腈和甲醇的选择要使用HPLC专用；磷酸氢二钠、二水草酸和柠檬酸；自制的二次蒸馏水。样品：蜂蜜样品。 2.1.2 试验方法 在50mL的具塞离心管内放置2.00g蜂蜜样品，将2mL磷酸氢二钠/柠檬酸缓冲溶解加入其中进行溶解，放置在快速混匀器上振动30s，通过超声波处理十分钟，以3000rpm离心十分钟，抽滤后的滤液直接进行色谱分析。 2.2 结果与讨论 2.2.1 结果 流动相洗脱了大部分杂质，而四环素抗生素则被白柳在了预柱中。因为流路不会再分析柱经过，所以避免了来自于高浓度糖分对自身的破坏，还使柱头压力得以减小，保护了四元泵和分析柱。柱对接后，流动相B会将四环素抗生素转移进分析柱进行分离分析。蜂蜜样品中添加四环素族抗生素的回收率见下表1。 2.2.2 结论 在线净化可以使样品处理的步骤得以最大程度的简化，使有机试剂的用量减少；而且色谱分析具有高灵敏度、稳定的回收率以及良好的结果重现性。 3、.固相萃取-高效液相色谱法测定蜂产品中抗生素残留 下面将研究蜂产品中抗生素残留测定的另一种方法，采用C18SPE小柱净化样品，高效液相色谱-紫外检测法分析蜂王浆中抗生素残留。 3.1 实验部分 3.1.1 实验仪器、试剂和样品 仪器：美国生产的HP1100高效液相色谱仪。C18固相萃取小柱。试剂：一级色谱纯的甲醇和乙腈，均为分析纯的柠檬酸、无水磷酸氢二钠、氢氧化钠二水草酸、盐酸和乙二胺四乙酸二钠。购买于Sigma公司的TC、OTC、CTC标准品，其纯度分别为97.1%、96.2%和84.4%。Mcllvaine缓冲溶液。Na2EDTA-Mcllvaina缓冲溶液。甲醇草酸溶液。自制二次蒸馏水。样品：蜂王浆。 3.1.2 试验方法 首先对样品进行前处理，主要包括提取缓冲溶液、净化固相萃取两方面。 3.2 结果 当流动相B的配比为7：2：1时，等度洗脱即可完全分离三种四环素族抗生素。蜂王浆中添加四环素族抗生素的回收率见下表2。 4.、小结 本文主要通过研究柱切换直接进样-高效液相色谱法和固相萃取-高效液相色谱法测定蜂产品中的抗生素残留，这两种分析方法在抗生素残留分析方面取得了较大进展。 参考文献： [1] 蒋生祥，陈立仁，赵明方.多维高效液相色谱法分析石油中微量石油磺酸盐.分析化学，1992，20（6）：677-679 [2] 庞国芳，张进杰，李学敏等.高效液相色谱法测定蜂蜜中四环素族抗生素.中国养蜂，2003，54Supplement：25-28 [3] 汤瑶，何华，吴斌，陈慧兰，蒋原.固相萃取-HPLC法测定蜂蜜中残留的10种磺胺类药物.分析测试学报，2005，24（1）：96-99