液相色谱柱日常维护

色谱柱的寿命除了与分析的样品和流动相以及使用频率有关外，最主要的是与日常维护密切相关。由于衡量其寿命主要看柱效和柱压，因此消除引起柱效降低和柱压升高的因素成为延长色谱柱寿命的关键。具体维护注意如下：

1，流动相的PH：由于色谱柱硅胶基质填料中存在Si-C和

Si-O键，流动相的PH值超出范围会导致基质溶解和碳链断裂，使得柱效下降，并且无法恢复，因此需严格控制流动相的PH。

2，去除样品和流动相中的固体颗粒：固体颗粒会堵塞色谱

柱筛板，不仅会导致柱压升高，同时由于堵塞会引起液流不均匀，导致色谱峰拖尾，变宽，分叉等现象，从而使柱效下降。因此分析前对样品和流动相的超声和过滤处理是必须的步骤。尤其对加了缓冲盐的流动相更要注意。

3，正确使用缓冲盐：缓冲盐可以提供离子平衡的反离子，

并使流动相保持一定的离子强度和PH值，减少拖尾。缓冲盐易溶于水，不溶于有机溶剂，因此不当使用会致其析出，堵塞色谱柱，同时阻碍键合硅胶的碳链自由舒展，使色谱柱保留能力下降，柱效降低。正确使用缓冲盐目的就是防析出，总结成一句就是---使用前要过渡，

使用后要冲洗。

具体操作就是使用前先用过渡流动相（有机相和水相的

组成与分析流动相相同，但不含缓冲盐）20-30倍柱体积

冲洗色谱柱，然后再用分析流动相；使用后同样先用过

渡流动相冲洗30倍柱体积，再用纯有机相冲洗。

另外缓冲液使用最好现用现配，因为其往往是良好的菌

类培养液；对PH值要把控好；冲洗色谱柱和流路时最

好提温到30度；

若发现流路接头处有结晶析出，在不装柱的情况下用

10%硝酸冲洗30ML，再用水冲洗，可有效避免流路堵塞。

4，防止强保留物质存留在色谱柱中：强保留物质和大分子化

合物对色谱柱的影响是个累积过程，因此对使用后的色谱

柱最后都要用纯甲醇或乙腈冲洗并保留其中。

5，色谱柱的再生：我们一般用的反相柱可以用乙腈：水（5：

95）→四氢呋喃→乙腈：水（95：5）顺序冲洗30倍柱体

积。