赵树清.人体12对脑神经标本的解剖制作
··311
[2][3][4][5][6]
李仲购,游惠民.用层次解剖分拆复位法制作十二对脑神经标本[J].中国临床解剖学杂志,2007,25(3):4-5.詹朝双,郭家松,李忠华,等.综合性脑神经标本的设计与制作[J].四川解剖学杂志,2004,12(2):177-178.黄振文.十二对脑神经颅外段标本的设计与制作[J].解剖学研究,2005,27(2):153-154.
谢晓东,闫广照,郝嘉南,等.显示12对脑神经标本的制作新方法[J].吉林医药学院学报,2006,27(3):152-153.陆卓琼,雷林忠,谢华.脑神经标本的设计与制作[J].解剖学杂志,2007,30(4):508-509.
朱涛,崔英健.脑神经标本制作方法及体会[J].中国现代医药杂志,2007,9(9):25-25.
传统水浸泡的标本质地更柔软，且能明显地减少甲醛对人体的刺激，还可以使标本色泽还原；(5)以往报道[7]脑神经标本制作仅停留在神经分支显露上，而本文在解剖前通过注入红色和蓝色颜料胶，一方面可以使脑神经及其分支在操作中容易与周围血管及组织区别，另一方面可以更好地显露神经与血管的毗邻关系，用于实验教学可加深学生对脑神经行程与毗邻关系的理解。
[参考文献]
[1]
赵树清.显露三叉神经分支及面神经鼓索的一种新方法[J].交通医学,2007,21(5):609-610.
[7]
[收稿日期]2011-05-30
改良多聚-L-赖氨酸法防脱片载玻片的制备
徐
婷1，钟声旺2，邱冬梅2，孙
萍3，沈长久4
(1江苏省海门市人民医院病理科，海门226100；2南通大学；3海安县皮肤病医院；4南通市第二人民医院)
[摘要]目的：探索一种经济实用效果良好的防脱片载玻片的制备方法。方法：将市售普通载玻片进行改良多聚-
L-赖氨酸防脱片载玻片的制备处理和传统重铬酸钾洗涤法及防脱片制备处理后，与市售防脱片载玻片成品进行相同的
临床病理组织学切片制备。结果：改良防脱制备法效果稳定可靠，明显优于传统防脱片处理法，并可与市售防脱片处理的成品载玻片媲美。结论：改良多聚-L-赖氨酸防脱片载波片的制备法方便可靠，经济实用。
[关键词]改良多聚-L-赖氨酸防脱片；重铬酸钾洗涤法；市售防脱片
[中图分类号]R446.8[文献标志码]B[文章编号]1674-7887（2011）04-0311-02
在生物及病理组织学切片制备，如石蜡切片、冰冻切片或细胞涂片及常规染色中，组织掉片或脱片现象较普遍存在，特别在实验步骤较多的免疫组织化学及原位杂交时尤其严重，对临床病理诊断工作造成困难，延误诊断时间，甚至导致漏诊、误诊等不利影响。所以，对病理切片制备过程中存在组织掉片或脱片现象更应该采取措施，以预防脱片。我科建立了一种改良多聚-L-赖氨酸防脱片载玻片的制备方法，其效果较好，现介绍如下。
的塑料面盆中，使载玻片的表面与水充分接触；(2)将载玻片从水中捞出，投入热的5%洗衣粉水溶液的塑料桶中，盖上闷热1h；待5%洗衣粉水溶液的温度用手可触及时(40~45℃)，用棉布条将载玻片逐一擦洗后再投入流水中清洗10min；(3)取出沥干，入无水乙醇2~4h；(4)取出直接投入清洁液过夜；(5)取出流水冲洗10min，加以翻动至残留清洁液由红褐色变成无色；再入3%洗衣粉洗涤，投入流水不断翻动洗
10min，再入蒸馏水2次，取出沥水晾干待涂胶；(6)载
玻片的磨砂面向上，平放在干净的纸上或桌面；在载玻片的表面滴加1∶10的多聚赖氨酸工作液，用另一载玻片覆盖其上，呈夹心式结构；过夜待自然干燥
11.1
材料与方法材料洗涤用具试剂及耗材
1.1.11.1.2
(1)毛巾；(2)电水壶；(3)塑料面盆(1)无水乙醇；(2)清洁液；(3)5%热
后，揭开上方的载玻片，并将其涂胶面朝上再放置2h使充分晾干；(7)收集涂胶载玻片，用笔标记涂胶面并至于切片盒中，放置阴凉、干燥处待用。
及水桶；(4)橡胶手套；(5)烧杯和玻璃棒。
水(55~65℃)：洗衣粉为20∶1；(4)多聚-L-赖氨酸防脱片工作液多聚赖氨酸∶双蒸水为1∶10；(5)市售载玻片。
1.3注意事项(1)新鲜清洁液呈红褐色，频繁使用
后呈绿褐色，提示清洁液效力下降或失效；(2)配制清洁液加入浓硫酸时要注意安全，戴上眼镜、口罩等防护用品，预防意外；(3)此法系单面涂胶，务必注意涂胶面的记号，漂片贴片时，将组织蜡膜贴敷于涂胶
1.2制备方法取市售普通载玻片分别用改良昂
脱片制备(1000张)，传统重铬酸钾处理及防脱片制备[1](500张)。(1)将市售普通载玻片依次投入盛有水
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南通大学学报(医学版)2011∶31（4）
面；(4)当载玻片从水中被提起后，其整个清洁面上应可见滞留的水膜存在(不洁区域则没有)，否则为不合格，应将其重新处理或剔除；(5)涂胶量的多少，以两张载波片叠加时不溢出且无空泡为最佳。两载玻片清洁面的涂胶，主要是清洁面部分面对面重叠涂胶，呈握手状；(6)在冬季，气温低，流水步骤后应加一道温水清洗程序，以利于洗洁液的彻底清除。
可加强脱脂去脂的作用，降低表面粗糙度。然后，再用酸处理载玻片，去除表面残留杂质及各种吸附污染物，从而使其表面粗糙度进一步降低。酸处理后使用碱性洗涤可再次消除残留的油脂，使玻璃表面的光学性能得到进一步改善，最终使玻璃表面层的杂质厚度下降到最小。这样，就为防脱片剂的涂胶与载玻片表面的连接提供了可靠保证。经热洗涤和无水乙醇即清洁液处理前和涂胶前蒸馏水清洗过程中，当载玻片从水中被提起，其整个清洁面上可见滞留的水膜存在[3]，它们是检查洗涤处理是否合格的肉眼检查指标，如不合格，应将其剔除或重新处理。
因多聚-L-赖氨酸防脱片剂是水溶性溶液，故载玻片上杂质油脂不去除干净会成为载玻片表面与多聚-L-赖氨酸防脱片剂间的接触障碍，这样很难保证后续玻片涂胶质量。还要注意：化学清洗对提高玻璃表面的质量(如光洁度等)是相当有效的。但必须控制好酸碱度及清洗时间，避免清洗过度影响玻璃表面的光学质量。也不要轻易省略其后续的碱性液洗涤。
本文采用了载玻片+多聚-L-赖氨酸+载玻片的夹心式涂胶法[4]，此法能使防脱片剂在载玻片有效贴片表面形成一种较长时间的潴留，有利于防脱片剂与干净载玻片有效贴片表面的紧密接触和延长其互相作用的时间，与经典浸泡式涂胶法相比[5]，不但操作方法简便易学，而且既有效保证了涂胶质量又节约了试剂，达到了市售防脱片载玻片的优良效果。
[参考文献]
[1][2][3][4]
章丽霞,木尔扯尔,张丽华.洗洁精法和重铬酸钾清洁液清洗载玻片方法的比较[J].中外医疗,2007(21):39-39.顾铮,梁培辉,张伟清,等.化学清洗对玻璃表面层光学特性的影响[J].中国激光,2004,31(3):367-370.
凌启波.实用病理特殊染色和组化技术[M].广州:广东高等教育出版社,1989:316-318.
吴共发,张彦,薛小磊,等.四种防脱载玻片使用效果的比较[J].中国组织化学与细胞化学杂志,2011,20(2):
1.4统计学方法采用SPSS统计软件进行统计学
分析。采用χ2检验，P
2结果
本文取普通市售载玻片1500张制备防脱片载玻片，其中改良方法1000张，传统方法500张，并与市售涂有多聚赖氨酸的载玻片400张一同用于制作临床病理组织切片，并对脱片现象(组织10%甚至全部脱离载玻片的现象)进行记录和统计，结果载玻片洁净程度和及其防脱片剂的使用方式与病理切片组织的脱落程度相关(P
表1
组别
改良方法防脱片传统方法防脱片市售防脱片
3种载玻片应用中掉片率的比较
脱片数/张
总数/张
脱片率/‰
20217
1000500400
20.042.0*17.5
注：与改良方法相比，*P
3讨论
在石蜡组织切片制备的过程，如切片的脱蜡、脱水、水洗和染色等实验操作中经常出现切片脱落的现象是长期困扰组织学实验技术者的一个棘手问题。笔者认为在实验操作中，诸多组织切片脱片因素中，作为组织切片载体的载玻片是最关键因素之一，不可疏忽。
市售新的载玻片由于加工过程中难免其表面附着灰尘、杂质或油脂，须处理后方可使用。未经酸、碱洗涤的玻璃表面凹凸不平，其表面层的厚度和表面粗糙度大[2]。因此，要较好地完成多聚-L-赖氨酸防脱片载玻片的制备，首先要彻底清除载波片上的杂质、灰尘及油脂。在清洁液酸处理前先用热的碱性洗涤液和无水乙醇处理(尤其在冬季更不能省略)，其中热的碱性祛污剂有除脂、去污的双重作用，无水乙醇
[5]
201-202.
张功学,方淑玲,郭世刚,等.一种节约型叠加法防脱玻片的制作方法[J].中国民族民间医药,2009,18(24):202-
202.
[收稿日期]2011-05-23
赵树清.人体12对脑神经标本的解剖制作
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[2][3][4][5][6]
李仲购,游惠民.用层次解剖分拆复位法制作十二对脑神经标本[J].中国临床解剖学杂志,2007,25(3):4-5.詹朝双,郭家松,李忠华,等.综合性脑神经标本的设计与制作[J].四川解剖学杂志,2004,12(2):177-178.黄振文.十二对脑神经颅外段标本的设计与制作[J].解剖学研究,2005,27(2):153-154.
谢晓东,闫广照,郝嘉南,等.显示12对脑神经标本的制作新方法[J].吉林医药学院学报,2006,27(3):152-153.陆卓琼,雷林忠,谢华.脑神经标本的设计与制作[J].解剖学杂志,2007,30(4):508-509.
朱涛,崔英健.脑神经标本制作方法及体会[J].中国现代医药杂志,2007,9(9):25-25.
传统水浸泡的标本质地更柔软，且能明显地减少甲醛对人体的刺激，还可以使标本色泽还原；(5)以往报道[7]脑神经标本制作仅停留在神经分支显露上，而本文在解剖前通过注入红色和蓝色颜料胶，一方面可以使脑神经及其分支在操作中容易与周围血管及组织区别，另一方面可以更好地显露神经与血管的毗邻关系，用于实验教学可加深学生对脑神经行程与毗邻关系的理解。
[参考文献]
[1]
赵树清.显露三叉神经分支及面神经鼓索的一种新方法[J].交通医学,2007,21(5):609-610.
[7]
[收稿日期]2011-05-30
改良多聚-L-赖氨酸法防脱片载玻片的制备
徐
婷1，钟声旺2，邱冬梅2，孙
萍3，沈长久4
(1江苏省海门市人民医院病理科，海门226100；2南通大学；3海安县皮肤病医院；4南通市第二人民医院)
[摘要]目的：探索一种经济实用效果良好的防脱片载玻片的制备方法。方法：将市售普通载玻片进行改良多聚-
L-赖氨酸防脱片载玻片的制备处理和传统重铬酸钾洗涤法及防脱片制备处理后，与市售防脱片载玻片成品进行相同的
临床病理组织学切片制备。结果：改良防脱制备法效果稳定可靠，明显优于传统防脱片处理法，并可与市售防脱片处理的成品载玻片媲美。结论：改良多聚-L-赖氨酸防脱片载波片的制备法方便可靠，经济实用。
[关键词]改良多聚-L-赖氨酸防脱片；重铬酸钾洗涤法；市售防脱片
[中图分类号]R446.8[文献标志码]B[文章编号]1674-7887（2011）04-0311-02
在生物及病理组织学切片制备，如石蜡切片、冰冻切片或细胞涂片及常规染色中，组织掉片或脱片现象较普遍存在，特别在实验步骤较多的免疫组织化学及原位杂交时尤其严重，对临床病理诊断工作造成困难，延误诊断时间，甚至导致漏诊、误诊等不利影响。所以，对病理切片制备过程中存在组织掉片或脱片现象更应该采取措施，以预防脱片。我科建立了一种改良多聚-L-赖氨酸防脱片载玻片的制备方法，其效果较好，现介绍如下。
的塑料面盆中，使载玻片的表面与水充分接触；(2)将载玻片从水中捞出，投入热的5%洗衣粉水溶液的塑料桶中，盖上闷热1h；待5%洗衣粉水溶液的温度用手可触及时(40~45℃)，用棉布条将载玻片逐一擦洗后再投入流水中清洗10min；(3)取出沥干，入无水乙醇2~4h；(4)取出直接投入清洁液过夜；(5)取出流水冲洗10min，加以翻动至残留清洁液由红褐色变成无色；再入3%洗衣粉洗涤，投入流水不断翻动洗
10min，再入蒸馏水2次，取出沥水晾干待涂胶；(6)载
玻片的磨砂面向上，平放在干净的纸上或桌面；在载玻片的表面滴加1∶10的多聚赖氨酸工作液，用另一载玻片覆盖其上，呈夹心式结构；过夜待自然干燥
11.1
材料与方法材料洗涤用具试剂及耗材
1.1.11.1.2
(1)毛巾；(2)电水壶；(3)塑料面盆(1)无水乙醇；(2)清洁液；(3)5%热
后，揭开上方的载玻片，并将其涂胶面朝上再放置2h使充分晾干；(7)收集涂胶载玻片，用笔标记涂胶面并至于切片盒中，放置阴凉、干燥处待用。
及水桶；(4)橡胶手套；(5)烧杯和玻璃棒。
水(55~65℃)：洗衣粉为20∶1；(4)多聚-L-赖氨酸防脱片工作液多聚赖氨酸∶双蒸水为1∶10；(5)市售载玻片。
1.3注意事项(1)新鲜清洁液呈红褐色，频繁使用
后呈绿褐色，提示清洁液效力下降或失效；(2)配制清洁液加入浓硫酸时要注意安全，戴上眼镜、口罩等防护用品，预防意外；(3)此法系单面涂胶，务必注意涂胶面的记号，漂片贴片时，将组织蜡膜贴敷于涂胶
1.2制备方法取市售普通载玻片分别用改良昂
脱片制备(1000张)，传统重铬酸钾处理及防脱片制备[1](500张)。(1)将市售普通载玻片依次投入盛有水
··312
南通大学学报(医学版)2011∶31（4）
面；(4)当载玻片从水中被提起后，其整个清洁面上应可见滞留的水膜存在(不洁区域则没有)，否则为不合格，应将其重新处理或剔除；(5)涂胶量的多少，以两张载波片叠加时不溢出且无空泡为最佳。两载玻片清洁面的涂胶，主要是清洁面部分面对面重叠涂胶，呈握手状；(6)在冬季，气温低，流水步骤后应加一道温水清洗程序，以利于洗洁液的彻底清除。
可加强脱脂去脂的作用，降低表面粗糙度。然后，再用酸处理载玻片，去除表面残留杂质及各种吸附污染物，从而使其表面粗糙度进一步降低。酸处理后使用碱性洗涤可再次消除残留的油脂，使玻璃表面的光学性能得到进一步改善，最终使玻璃表面层的杂质厚度下降到最小。这样，就为防脱片剂的涂胶与载玻片表面的连接提供了可靠保证。经热洗涤和无水乙醇即清洁液处理前和涂胶前蒸馏水清洗过程中，当载玻片从水中被提起，其整个清洁面上可见滞留的水膜存在[3]，它们是检查洗涤处理是否合格的肉眼检查指标，如不合格，应将其剔除或重新处理。
因多聚-L-赖氨酸防脱片剂是水溶性溶液，故载玻片上杂质油脂不去除干净会成为载玻片表面与多聚-L-赖氨酸防脱片剂间的接触障碍，这样很难保证后续玻片涂胶质量。还要注意：化学清洗对提高玻璃表面的质量(如光洁度等)是相当有效的。但必须控制好酸碱度及清洗时间，避免清洗过度影响玻璃表面的光学质量。也不要轻易省略其后续的碱性液洗涤。
本文采用了载玻片+多聚-L-赖氨酸+载玻片的夹心式涂胶法[4]，此法能使防脱片剂在载玻片有效贴片表面形成一种较长时间的潴留，有利于防脱片剂与干净载玻片有效贴片表面的紧密接触和延长其互相作用的时间，与经典浸泡式涂胶法相比[5]，不但操作方法简便易学，而且既有效保证了涂胶质量又节约了试剂，达到了市售防脱片载玻片的优良效果。
[参考文献]
[1][2][3][4]
章丽霞,木尔扯尔,张丽华.洗洁精法和重铬酸钾清洁液清洗载玻片方法的比较[J].中外医疗,2007(21):39-39.顾铮,梁培辉,张伟清,等.化学清洗对玻璃表面层光学特性的影响[J].中国激光,2004,31(3):367-370.
凌启波.实用病理特殊染色和组化技术[M].广州:广东高等教育出版社,1989:316-318.
吴共发,张彦,薛小磊,等.四种防脱载玻片使用效果的比较[J].中国组织化学与细胞化学杂志,2011,20(2):
1.4统计学方法采用SPSS统计软件进行统计学
分析。采用χ2检验，P
2结果
本文取普通市售载玻片1500张制备防脱片载玻片，其中改良方法1000张，传统方法500张，并与市售涂有多聚赖氨酸的载玻片400张一同用于制作临床病理组织切片，并对脱片现象(组织10%甚至全部脱离载玻片的现象)进行记录和统计，结果载玻片洁净程度和及其防脱片剂的使用方式与病理切片组织的脱落程度相关(P
表1
组别
改良方法防脱片传统方法防脱片市售防脱片
3种载玻片应用中掉片率的比较
脱片数/张
总数/张
脱片率/‰
20217
1000500400
20.042.0*17.5
注：与改良方法相比，*P
3讨论
在石蜡组织切片制备的过程，如切片的脱蜡、脱水、水洗和染色等实验操作中经常出现切片脱落的现象是长期困扰组织学实验技术者的一个棘手问题。笔者认为在实验操作中，诸多组织切片脱片因素中，作为组织切片载体的载玻片是最关键因素之一，不可疏忽。
市售新的载玻片由于加工过程中难免其表面附着灰尘、杂质或油脂，须处理后方可使用。未经酸、碱洗涤的玻璃表面凹凸不平，其表面层的厚度和表面粗糙度大[2]。因此，要较好地完成多聚-L-赖氨酸防脱片载玻片的制备，首先要彻底清除载波片上的杂质、灰尘及油脂。在清洁液酸处理前先用热的碱性洗涤液和无水乙醇处理(尤其在冬季更不能省略)，其中热的碱性祛污剂有除脂、去污的双重作用，无水乙醇
[5]
201-202.
张功学,方淑玲,郭世刚,等.一种节约型叠加法防脱玻片的制作方法[J].中国民族民间医药,2009,18(24):202-
202.
[收稿日期]2011-05-23