石蜡切片基本步骤
FAA固定液固定材料至少24h
【第一天】 70%酒精冲洗三次,每次2h,过夜
【第二天】 85%酒精(2h)→95%酒精(加少许番红,2h)→100%酒精(1.5h)→100%酒精(1.5h)→1/2酒精+1/2二甲苯(2h)→二甲苯(1.5h)→二甲苯(1.5h)→二甲苯+石蜡(生蜡粉),在40℃温箱过夜(不开盖)
【第三天】 掀开盖子置于60℃温箱(4h),以下都置于60℃温箱内→纯蜡(4h)→纯蜡(2h)→纯蜡(2h)→纯蜡(2h)→包埋
【第四天】 切片
【第五天】 染色 二甲苯(脱蜡,时间不定,一般30min)→二甲苯(3min)→1/2酒精+1/2二甲苯(3min)→100%酒精(3min)→100%酒精(3min)→95%酒精(3min)→85%酒精(3min)→70%酒精(3min)→50%酒精(3min)→1%番红(50%酒精配制,12h以上)
【第六天】 染色 50%酒精(10-30s)→70%酒精(2min)→85%酒精(2min)→95%酒精(2min)→1%固绿(95%酒精配制)(10-20s)→95%酒精(2min)→100%酒精(2min)→100%酒精(2min)→1/2酒精+1/2二甲苯(2min)→二甲苯(2min)→二甲苯(2min)→封片
石蜡切片基本步骤
FAA固定液固定材料至少24h
【第一天】 70%酒精冲洗三次,每次2h,过夜
【第二天】 85%酒精(2h)→95%酒精(加少许番红,2h)→100%酒精(1.5h)→100%酒精(1.5h)→1/2酒精+1/2二甲苯(2h)→二甲苯(1.5h)→二甲苯(1.5h)→二甲苯+石蜡(生蜡粉),在40℃温箱过夜(不开盖)
【第三天】 掀开盖子置于60℃温箱(4h),以下都置于60℃温箱内→纯蜡(4h)→纯蜡(2h)→纯蜡(2h)→纯蜡(2h)→包埋
【第四天】 切片
【第五天】 染色 二甲苯(脱蜡,时间不定,一般30min)→二甲苯(3min)→1/2酒精+1/2二甲苯(3min)→100%酒精(3min)→100%酒精(3min)→95%酒精(3min)→85%酒精(3min)→70%酒精(3min)→50%酒精(3min)→1%番红(50%酒精配制,12h以上)
【第六天】 染色 50%酒精(10-30s)→70%酒精(2min)→85%酒精(2min)→95%酒精(2min)→1%固绿(95%酒精配制)(10-20s)→95%酒精(2min)→100%酒精(2min)→100%酒精(2min)→1/2酒精+1/2二甲苯(2min)→二甲苯(2min)→二甲苯(2min)→封片