一级结构测定思考题

1、 一个含有13个氨基酸残基的十三肽的氨基酸组成为:Ala,

Arg,2 Asp, 2Glu, 3Gly, Leu, 3Val。部分酸水解后得到以下肽段,其序列由Edman 降解确定,试推断原始寡肽的序列。 (a )Asp - Glu - Val - Gly - Gly - Glu - Ala

(b )Val - Asp - Val - Asp - Glu

(c )Val - Asp - Val

(d )Glu - Ala -Leu - Gly -Arg

(e )Val - Gly - Gly - Glu - Ala - Leu

(f )Leu - Gly – Arg

2、 下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中:

CNBr ;异硫氰酸苯酯; DNFB; 脲; 6mol/L HCl; β-巯基乙醇;水合茚三酮; 过甲酸 ;胰蛋白酶 ;胰凝乳蛋白酶 ; 其中哪一个最适合完成以下各项任务?

(a )测定小肽的氨基酸序列。

(b )鉴定肽的氨基末端残基。

(c )不含二硫键的蛋白质的可逆变性。若有二硫键存在时还需加什么试剂?

(d )在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。

(e )在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。

(f )在赖氨酸和精氨酸残基侧水解肽键。

3、 由下列信息求八肽的序列。

(a )酸水解得 Ala,Arg ,Leu ,Met ,Phe ,Thr ,2Val

(b )Sanger 试剂处理得DNP-Ala 。

(c )胰蛋白酶处理得两个肽段:Ala ,Arg ,Thr 和 Leu,Met ,Phe ,2Val 。当以Sanger 试剂处理时分别得到DNP-Ala 和DNP-Val 。

(d )溴化氰处理得 Ala,Arg ,高丝氨酸内酯,Thr ,2Val ,和 Leu ,Phe ,当用Sanger 试剂处理时,分别得DNP-Ala 和DNP-Leu 。

4、有一个A 肽,经酸水解分析得知由Lys 、His 、Asp 、2Glu 、Ala 、Val 、Tyr 和两个NH3分子组成 。当A 肽与DNFB 反应后,得DNP-Asp ,当用羧肽酶处理后得游离Val 。如果我们在实验中将A 肽用胰蛋白酶降解时,得到两个肽,其中一种(Lys、Glu 、Ala 、Asp 、 Tyr) 在pH6.4时净电荷为零,另一种(His、Glu 、Val) 可给出DNP-His ,在pH6.4时带正电荷 。此外,A 肽用糜蛋白酶降解时,也得以两种肽,一种(Ala 、Asp 、 Tyr) 在pH6.4时呈中性,另一种在pH6.4 (Lys、 时带正电荷 ,问A 肽的序列如何。

5、氨基酸的侧链对多肽或蛋白质的结构和生物学功能非常重要。用三字母和单字母缩写形式列出其侧链为如下要求的氨基酸: (a )含有一个羟基。

(b )含有一个氨基。

(c )含有一个具有芳香族性质的基团。

(d )含有分支的脂肪族烃链。

(e )含有硫。

1、

2、 答:(a )异硫氰酸苯酯。(b )DNFB 。(c )脲;β-巯基乙醇还原二硫键。(d )胰凝乳蛋白酶。(e )CNBr 。 (f )胰蛋白酶

3、 答:Ala-Thr-Arg-Val-Val-Met-Leu-Phe

4、 答:Asn-Ala-Tyr-Glu-Lys-His-Gln-Val

5、答:(a )Ser (S ), Thr(T ),Tyr (Y )

(b )Asn (N ), Gln(Q ),Arg (R ),Lys (K )

(c )Phe (F ), Trp(W ), Tyr(Y ),

(d )Ile (I ), Leu(L ), Val(V )

(e )Cys (C ), Met(M )

1、 一个含有13个氨基酸残基的十三肽的氨基酸组成为:Ala,

Arg,2 Asp, 2Glu, 3Gly, Leu, 3Val。部分酸水解后得到以下肽段,其序列由Edman 降解确定,试推断原始寡肽的序列。 (a )Asp - Glu - Val - Gly - Gly - Glu - Ala

(b )Val - Asp - Val - Asp - Glu

(c )Val - Asp - Val

(d )Glu - Ala -Leu - Gly -Arg

(e )Val - Gly - Gly - Glu - Ala - Leu

(f )Leu - Gly – Arg

2、 下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中:

CNBr ;异硫氰酸苯酯; DNFB; 脲; 6mol/L HCl; β-巯基乙醇;水合茚三酮; 过甲酸 ;胰蛋白酶 ;胰凝乳蛋白酶 ; 其中哪一个最适合完成以下各项任务?

(a )测定小肽的氨基酸序列。

(b )鉴定肽的氨基末端残基。

(c )不含二硫键的蛋白质的可逆变性。若有二硫键存在时还需加什么试剂?

(d )在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。

(e )在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。

(f )在赖氨酸和精氨酸残基侧水解肽键。

3、 由下列信息求八肽的序列。

(a )酸水解得 Ala,Arg ,Leu ,Met ,Phe ,Thr ,2Val

(b )Sanger 试剂处理得DNP-Ala 。

(c )胰蛋白酶处理得两个肽段:Ala ,Arg ,Thr 和 Leu,Met ,Phe ,2Val 。当以Sanger 试剂处理时分别得到DNP-Ala 和DNP-Val 。

(d )溴化氰处理得 Ala,Arg ,高丝氨酸内酯,Thr ,2Val ,和 Leu ,Phe ,当用Sanger 试剂处理时,分别得DNP-Ala 和DNP-Leu 。

4、有一个A 肽,经酸水解分析得知由Lys 、His 、Asp 、2Glu 、Ala 、Val 、Tyr 和两个NH3分子组成 。当A 肽与DNFB 反应后,得DNP-Asp ,当用羧肽酶处理后得游离Val 。如果我们在实验中将A 肽用胰蛋白酶降解时,得到两个肽,其中一种(Lys、Glu 、Ala 、Asp 、 Tyr) 在pH6.4时净电荷为零,另一种(His、Glu 、Val) 可给出DNP-His ,在pH6.4时带正电荷 。此外,A 肽用糜蛋白酶降解时,也得以两种肽,一种(Ala 、Asp 、 Tyr) 在pH6.4时呈中性,另一种在pH6.4 (Lys、 时带正电荷 ,问A 肽的序列如何。

5、氨基酸的侧链对多肽或蛋白质的结构和生物学功能非常重要。用三字母和单字母缩写形式列出其侧链为如下要求的氨基酸: (a )含有一个羟基。

(b )含有一个氨基。

(c )含有一个具有芳香族性质的基团。

(d )含有分支的脂肪族烃链。

(e )含有硫。

1、

2、 答:(a )异硫氰酸苯酯。(b )DNFB 。(c )脲;β-巯基乙醇还原二硫键。(d )胰凝乳蛋白酶。(e )CNBr 。 (f )胰蛋白酶

3、 答:Ala-Thr-Arg-Val-Val-Met-Leu-Phe

4、 答:Asn-Ala-Tyr-Glu-Lys-His-Gln-Val

5、答:(a )Ser (S ), Thr(T ),Tyr (Y )

(b )Asn (N ), Gln(Q ),Arg (R ),Lys (K )

(c )Phe (F ), Trp(W ), Tyr(Y ),

(d )Ile (I ), Leu(L ), Val(V )

(e )Cys (C ), Met(M )


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