无机离子对淀粉酶活性的影响_聂国兴

水 利 渔 业           2004年第24卷第4期・26・(总第134期)            

无机离子对淀粉酶活性的影响

聂国兴1,2, 明 红1, 胡建业1, 丁 辉1

(1河南师范大学生命科学学院, 新乡 453002; 2上海水产大学渔业学院)

  摘要:Na+、K +、Mg 2+浓度在一定范围内, 对淀粉酶活性有激活作用, 其中以K +激活作用最显著, 当

K +浓度为1. 00mg/mL , 酶活达到213. 98%;Mn 2+、Zn 2+、Co 2+、Fe 2+、Cu 2+浓度在一定范围内对淀粉酶活性

有抑制作用, 其中以Cu 2+、Mn 2+抑制作用最显著; I -、Ca 2+在不同浓度条件下有不同的作用。

关键词:无机离子; 淀粉酶; 激活; 抑制

中图分类号:S912,S963173  文献标识码:A  文章编号:1003-1278(2004) 04-0026-04

  淀粉酶作为饲料添加剂, 合理应用可以提高畜禽及水产动物的生产性能, 增加养殖效益, 减少排泄物对环境的污染, 同时也可以开辟新的饲料资源, 降低饲料成本。淀粉酶的催化效率极高, 将1t 仅需1000g 淀粉酶。精及少量葡萄糖, 料中添加淀粉酶淀粉酶的不足, 。

催化活性, 其中之一即为无机离子。在本实验中, 我们通过探讨无机离子对淀粉酶活性的影响, 建立了无机离子浓度与淀粉酶活性的关系, 以期为饲料工业生产和利用淀粉酶奠定理论基础, 使淀粉酶在饲料工业中能够得到高效利用。

1. 3. 2 碘贮液(1moL/L )  5g 碘酸钾和22. 4. 5mL 浓盐

酸, , 贮于棕色瓶中, (0. 1moL/L )  取碘贮液用去离子水稀释10倍, 贮存在棕色瓶中, 现配现用。

2 实验方法

2. 1 粗酶制剂浸提

称取0. 5g 酶粉, 置于一小烧杯中加30mL 去离子水, 在40℃水中搅拌30min , 溶出酶蛋白, 过滤定容至50

mL 。按照表1添加不同浓度的无机离子, 然后在40℃水

浴中保温30min 。

表1 无机离子添加方案[1~3]

无机离子

Na +K +Fe

2+

mg/mL 5

61. 251. 200. 500. 301. 201. 201. 200. 303. 750. 40

1 实验材料

1. 1 仪器设备

[1**********]

20. 250. 400. 100. 060. 400. 400. 400. 060. 750. 08

30. 500. 600. 200. 120. 600. 600. 600. 121. 500. 16

40. 750. 800. 300. 180. 800. 800. 800. 182. 250. 24

1. 001. 000. 400. 241. 001. 001. 000. 243. 000. 32

电子分析天平, 恒温水浴锅, 分光光度计。

1. 2 样品

Mn 2+Cu

2+

供试酶样由商丘福源集团韦斯迪生物技术公司提供。

1. 3 试剂

1. 3. 1 底物缓冲液 精确称取9. 0gNaCl 、22. 6l g 无水

Zn 2+Mg +Co 2+Ca 2+-2

磷酸二氢钠和12. 5g 无水磷酸二氢钾置于500mL 去离子水中, 加热至沸腾溶解, 称取0. 4g 可溶性淀粉于一小烧杯中, 加入10mL 去离子水, 使其混匀后加入上述沸腾溶液中, 冷却至室温后加入5mL 、37%甲醛溶液, 再用去离子水稀释到1000mL , 此即为p H 7. 0、浓度为0. 4g/L 的底物缓冲液。

  收稿日期:2003-11-07

基金项目:河南省自然科学基金资助项目(NO 0311030200) , 河南师范大学青年骨干教师资助项目

(NO200310306)

作者简介:聂国兴, 男,1971年4月生, 河南长垣人, 上海水产大学在读博士生, 研究方向为水产动物营养与饲料科学、饲用

2. 2 酶活性测定[4~6]

按表2分别加入底物缓冲液、酶稀释液、碘稀释液和去离子水, 混匀, 于660nm 波长处以去离子水调吸光度为0, 并读取各管吸光值。

表2 淀粉酶活性测定方案

加入物

底物缓冲液(40℃预温5min )

酶稀释液(混匀40℃水浴7. 5min )

碘稀释液去离子水

滴定管/mL

1. 00. 21. 06. 0

1. 06. 2

空白管/mL

1. 0

酶制剂与营养免疫。

2. 3 酶活性计算

2004年第24卷第4期            水 利 渔 业          (总第134期) ・27・

淀粉酶活性=[(A B -A U ) /A B ]×800。式中:AB 表示空白管吸光度;A U 表示测试管吸光度。

淀粉酶活性定义:100mL 酶滤液中(1g 酶粉) 的酶在

40℃和底物淀粉作用30min , 水解产生10mg 淀粉为1个

Mn 2+浓度的增加, 相对酶活基本稳定在同一水平上, 抑制

作用不变。

3. 4 Zn 2+对淀粉酶活性的影响

由图4可知,Zn 2+对淀粉酶有抑制作用。在0. 00~

2. 00mg/mL 范围内,Zn 2+的抑制作用随着浓度的增加而

淀粉酶活性单位。

2. 4 相对酶活计算

增强。其中在0. 00~0. 80mg/mL 范围内, 抑制作用随着浓度增加而显著增强; 在0. 80~2. 00mg/mL 范围内, 相对酶活缓慢下降

以不加离子的淀粉酶活性为对照, 对照组的酶活设定为100%。

相对酶活=(添加无机离子组的酶活性/对照组酶活性) ×100%

3 结果和分析

3. 1 Na +对淀粉酶活性的影响

由图1可知,Na +对淀粉酶有激活作用。在0. 00~

0. 25mg/mL 范围内,Na +对淀粉酶的激活随着浓度增加

而增强, 达到0. 1mg/mL 时, 相对酶活可达到116. 23%。浓度在0. 25~1. 25mg/mL 时, 水平。

3. 2 K +图

3 锰离子对淀粉酶活性的影响

由图2可知+,0. 00~

1. 00mg/mL 的增加而增大, 在0. ~1. 00mg/mL 浓度范围内, 相对酶活最高可达213. 98%。1. 00~1. 25mg/mL 范围内相对酶活显著下降。

图4 锌离子对淀粉酶活性的影响

3. 5 Mg 2+对淀粉酶活性的影响

由图5可知,Mg 2+对淀粉酶有较强的激活作用。在

0. 00~1. 20mg/mL 范围内, 对淀粉酶的激活作用随着浓

度的增加而增强, 其中在0. 40~0. 80mg/mL 范围内, 相对酶活保持在一个水平上。当Mg 2+浓度增大至1. 20

mg/mL 时, 相对酶活最大, 为134. 69%。在1. 20~2. 00

图1 钠离子对淀粉酶活性的影响

mg/mL 范围内, 相对酶活逐渐下降, 但仍为激活作用。

图5 镁离子对淀粉酶活性的影响

图2 钾离子对淀粉酶活性的影响

3. 3 Mn 2+对淀粉酶活性的影响

3. 6 Co 2+对淀粉酶活性的影响

由图6可知,Co 2+对淀粉酶具有抑制作用。在0. 00~0. 30mg/mL 范围内,Co 2+对淀粉酶抑制作用随着浓度的增加而增强。其中在0. 12~0. 18mg/mL 范围内, 其相对酶活基本保持在同一水平上, 抑制作用不变。

3. 7 Fe 2+对淀粉酶活性的影响

由图3可知,Mn 2+对淀粉酶有极强的抑制作用。在

0. 00~0. 24mg/mL 范围内,Mn 2+对淀粉酶活性的抑制

作用随着浓度增加而增强, 其中在0. 00~0. 06mg/mL 时, 相对酶活显著下降; 在0. 06~0. 24mg/mL 范围内相对酶活下降缓慢。而在0. 24~0. 30mg/mL 范围内, 随着

由图7可知, Fe 2+对淀粉酶的活性有抑制作用。在

水 利 渔 业           2004年第24卷第4期・28・(总第134期)            

0. 00~1. 20mg/mL 范围内, 对淀粉酶的抑制作用随着浓

度增加而增大。在1. 20~2. 0mg/mL 范围内, 相对酶活基本保持在同一水平上, 抑制作用不变

图9 

碘离子对淀粉酶活性的影响

图6 钴离子对淀粉酶活性的影响

3. 8 Ca 2+对淀粉酶活性的影响

由图8可知, 在0. 00~1. 50mg/mL 时, Ca 2+对淀粉酶活性具有激活作用, 而在1. 50~3. 75mg/mL 时, Ca 2+对淀粉酶活性有抑制趋势, 并随着Ca 2+浓度增加而增大。

Ca 2+在2. 25~3. 00mg/mL 时, 相对酶活基本保持在同一

水平上, 抑制作用不变

10 铜离子对淀粉酶活性的影响

4 结论与分析

淀粉酶是动物营养学发展过程中较早用作添加剂的酶制剂。本研究表明:Na+、K +、Mg 2+在一定浓度范围内对淀粉酶具有激活作用。其中以K +激活作用最显著,

K +浓度在1. 00mg/mL 时相对酶活最高, 为213. 98%, 其

图7 

亚铁离子对淀粉酶活性的影响

次为Mg 2+、Na +; 而Mn 2+、Zn 2+、Co 2+、Fe 2+、Cu 2+在一定浓度范围内对淀粉酶具有抑制作用, 其中以Cu 2+、

Mn 2+抑制作用显著。Ⅰ-、Ca 2+在不同浓度条件下呈现

出不同的作用效果, 其中Ca 2+在0. 00~1. 50mg/mL 范围内对淀粉酶活性有激活作用, 在1. 50~3. 75mg/mL 范围内具有抑制作用; Ⅰ-在0. 00~0. 08mg/mL 范围内有抑制作用, 在0. 08~0. 40mg/mL 范围内具有激活作用。

无机离子对淀粉酶活性的影响国内外已有相关报

图8 钙离子对淀粉酶活性的影响

3. 9 Ⅰ-对淀粉酶活性的影响

道。Egas 认为,Ca 2+、Cu 2+抑制淀粉酶的活性[7]; Martins 认为,Ca 2+抑制淀粉酶的活性[8]; 李卫芬也有同样的研究结果:Ca2+对淀粉酶具有抑制作用, 但抑制作用较小, 残余酶活为86. 77%。而梁颖等研究发现, 0. 5~5. 0

mmoL/L 的Ca 2+可增强水稻种子萌发时的α-淀粉酶活

由图9可知, 在0. 00~0. 08mg/mL 范围内, Ⅰ-对淀粉酶活性具有抑制作用; 在0. 08~0. 40mg/mL 范围内, 对淀粉酶的活性具有激活作用, 并随着浓度的增加而增强, 当浓度达到0. 32mg/mL 时, 相对酶活达124. 6%。在0. 32~0. 40mg/mL 范围内, 相对酶活开始缓慢下降, 激活作用不变。

3. 10 Cu 2+对淀粉酶活性的影响

性[9]。无机离子对淀粉酶活性的影响机理很复杂, 一般认为, 无机离子是通过改变酶蛋白的构象来影响酶的活性的。洪法水等认为:低浓度重金属离子对淀粉酶活性有激活作用, 高浓度则严重抑制淀粉酶活性, 在高浓度下,Ce 3+、Cd 2+和Pb 2+不仅可能完全占据Ca 2+与淀粉酶的结合位点, 而且还可能在Ca 2+的结合位点以外的氨基酸残基上结合, 从而导致酶的构象改变, 使淀粉酶的活性发生改变[10]。李卫芬等研究发现:在Mg 2+、Zn 2+、

Mn 2+、Cu 2+、Mn 2+5种离子中, 除Mg 2+对淀粉酶有一定

由图10可知,Cu 2+对淀粉酶的活性有极强的抑制作用。在0. 00~2. 00mg/mL 范围内,Cu 2+对淀粉酶活性的抑制作用随着浓度的增加而增大, 其中在0. 00~0. 40

mg/mL 范围内, 随着Cu 2+浓度的增加而显著下降, 0. 40

~2. 00mg/mL 范围内, 相对酶活缓慢下降

2004年第24卷第4期            水 利 渔 业          (总第134期) ・29・

的激活作用外, Zn 2+和Mn 2+具有强烈的抑制作用, 残余酶活仅为对照的8. 92%和4. 86%,Cu 2+和Fe 2+残余酶活分别为69. 35%和76. 27%[1]。

以上各研究结果也存在不一致, 原因可能有两点:一是设定离子浓度的标准不同; 二是淀粉酶的来源不同。

从本研究中我们可以得到这样的启发:在应用淀粉酶作为饲料添加剂时, 要尽可能避免抑制淀粉酶活性的离子与酶相互作用, 最大程度保持酶的生物学效价, 提高使用效果; 另一方面, 在不影响养殖动物健康的情况下, 可运用对淀粉酶活性有促进作用的无机离子, 开发生产淀粉酶稳定剂, 将其作为饲料添加剂, 解决目前饲用酶制剂使用过程中易失活的问题, 促进绿色饲料添加剂———酶制剂在饲料工业中的应用。

本文只是在单因素水平上研究了10种不同无机离子与淀粉酶活性的关系, 离子之间的互作对淀粉酶活性的影响、同种离子对不同来源的淀粉酶活性的影响、无机离子对淀粉酶活性影响的机理等尚需进一步研究。

参考文献:

[1] 李卫芬, 孙建义, 鲍康. [3] 陈营, 桂远明, 胡光源. 几种离子及有机物对蜡样芽

胞杆蛋白酶活性的影响[J].中国微生态学杂志,

2001,13(3) :146~148.

[4] 孙祖莉. 发酵饲料中淀粉酶活性分析[J].饲料工

业,1994,15(12) :23~25.

[5] 荣俊, 杨带建, 伍晓雄, 等. 加酶饲料中淀粉酶总活

性的测定—碘淀粉比色法[J].饲料工业,1994,15

(3) :40~42.

[6] 周景祥, 王桂芹, 余涛. 蛋白酶和淀粉酶活性检测

[J].中国饲料,2001,23(11) :23~24.

[7] M C V Egas , M S Costa , et al. Extracellular amylase

from Thermus filiformis Ork A2:purification and bio 2chemical characterization [J]., 1998, 2(1) :~32.

[8]Rita F al. Starch -hy 2

soda lakes[J], Ex 2,5(2) :135~144.

9], 王三根. Ca 2+对水稻种子活力和抗寒力的影

响[J].西南农业大学学报,1996,18(5) :491~495.

[10] 洪法水, 王雪峰. 重金属离子对猪胰α-淀粉酶活

影响[J].(2) 43.

[2] 张丽萍, , 等. 性影响的作用机理研究[J].高等学校化学学报,

2001,22(12) :1979~1983.

性的影响[J].,2000,17(4) :235~

238.

(责任编辑 张俊友)

“通威”商标荣膺中国驰名商标称号

  国家工商行政管理总局商标局于日前公布了新认定的26件驰名商标, 通威股份有限公司金榜题名“, 通威”商标荣获“中国驰名商标”称号。据悉, 通威股份是本次评选中唯一一家饲料企业, 也是我国饲料加工行业第二家获得驰名商标的企业。至此, 中国驰名商标已超过300件。

通威股份是中国最大的水产饲料和主要的畜禽饲料生产企业, 水产饲料连续六年全国销量第一, 目前在全国有30余家饲料生产和销售分、子公司, 年饲料生产能力超过300万吨。通威商标被国家商标局评为中国驰名商标, 既得益于通威强烈的品牌意识, 更是对通威十多年来稳健快速发展的充分肯定。

十多年来, 通威以严格的质量管理、强大的研发实力、先进的管理理念、周到的服务意识和务实的创新精神, 积极、稳健、快速发展, 获得了社会各界的广泛赞誉和高度认同。1995年, 通威集团被国家工商局评为中国500家最大私营企业第二位、1997年被列为四川省31户重点民营企业、1998年被列为四川省37户重点扩张型企业, 于1998、1999、2000年连续三年获得“四川省维护消费者权益十佳单位”、1999年初获得国家批准的首批私营企业进出口权并获得国家经贸委的“全国300户重点联系非

公有制企业”, 同年被中国农业银行评为AAA 资信等级;

2000年集团通过ISO9001国际质量体系认证, 并获得“中

国企业标准化国内先进水平”最高称号,2002年集团又被中国农业银行评为“最佳诚信客户”。自1999年来, 通威已连续多年荣获四川省名牌产品和四川省著名商标称号, 先后10多次荣获国家级新产品、新技术金奖及星火科技金奖。

新闻背景:何为驰名商标?

驰名商标, 又称周知商标, 是企业形象的重要载体, 它既具有一般商标的特性, 又有很强的竞争力, 知名度高, 信誉好, 影响范围广, 已经被消费者、经营者所熟知和信赖, 并须经权威机构认定, 驰名商标作为所有者的无形资产, 是其商品或服务在质量与信誉上的象征, 看似“无形”实为“有形”的知识产权, 具有巨大的含金量。驰名商标是名牌市场桂冠上的明珠, 是名牌中的名牌, 拥有驰名商标的企业称为驰名商标企业, 这是产品品牌向企业品牌的升华。在全球经济一体化的今天, 品牌竞争已成为市场竞争的焦点, 中国企业已进入品牌竞争时代。据报道, 美国可口可乐公司在全球的企业如果一夜之间不存在的话, 那么它的价值350亿美元的商标将能够在一周内帮助其筹措到足够的恢复生产的资金及其他条件。

水 利 渔 业           2004年第24卷第4期・26・(总第134期)            

无机离子对淀粉酶活性的影响

聂国兴1,2, 明 红1, 胡建业1, 丁 辉1

(1河南师范大学生命科学学院, 新乡 453002; 2上海水产大学渔业学院)

  摘要:Na+、K +、Mg 2+浓度在一定范围内, 对淀粉酶活性有激活作用, 其中以K +激活作用最显著, 当

K +浓度为1. 00mg/mL , 酶活达到213. 98%;Mn 2+、Zn 2+、Co 2+、Fe 2+、Cu 2+浓度在一定范围内对淀粉酶活性

有抑制作用, 其中以Cu 2+、Mn 2+抑制作用最显著; I -、Ca 2+在不同浓度条件下有不同的作用。

关键词:无机离子; 淀粉酶; 激活; 抑制

中图分类号:S912,S963173  文献标识码:A  文章编号:1003-1278(2004) 04-0026-04

  淀粉酶作为饲料添加剂, 合理应用可以提高畜禽及水产动物的生产性能, 增加养殖效益, 减少排泄物对环境的污染, 同时也可以开辟新的饲料资源, 降低饲料成本。淀粉酶的催化效率极高, 将1t 仅需1000g 淀粉酶。精及少量葡萄糖, 料中添加淀粉酶淀粉酶的不足, 。

催化活性, 其中之一即为无机离子。在本实验中, 我们通过探讨无机离子对淀粉酶活性的影响, 建立了无机离子浓度与淀粉酶活性的关系, 以期为饲料工业生产和利用淀粉酶奠定理论基础, 使淀粉酶在饲料工业中能够得到高效利用。

1. 3. 2 碘贮液(1moL/L )  5g 碘酸钾和22. 4. 5mL 浓盐

酸, , 贮于棕色瓶中, (0. 1moL/L )  取碘贮液用去离子水稀释10倍, 贮存在棕色瓶中, 现配现用。

2 实验方法

2. 1 粗酶制剂浸提

称取0. 5g 酶粉, 置于一小烧杯中加30mL 去离子水, 在40℃水中搅拌30min , 溶出酶蛋白, 过滤定容至50

mL 。按照表1添加不同浓度的无机离子, 然后在40℃水

浴中保温30min 。

表1 无机离子添加方案[1~3]

无机离子

Na +K +Fe

2+

mg/mL 5

61. 251. 200. 500. 301. 201. 201. 200. 303. 750. 40

1 实验材料

1. 1 仪器设备

[1**********]

20. 250. 400. 100. 060. 400. 400. 400. 060. 750. 08

30. 500. 600. 200. 120. 600. 600. 600. 121. 500. 16

40. 750. 800. 300. 180. 800. 800. 800. 182. 250. 24

1. 001. 000. 400. 241. 001. 001. 000. 243. 000. 32

电子分析天平, 恒温水浴锅, 分光光度计。

1. 2 样品

Mn 2+Cu

2+

供试酶样由商丘福源集团韦斯迪生物技术公司提供。

1. 3 试剂

1. 3. 1 底物缓冲液 精确称取9. 0gNaCl 、22. 6l g 无水

Zn 2+Mg +Co 2+Ca 2+-2

磷酸二氢钠和12. 5g 无水磷酸二氢钾置于500mL 去离子水中, 加热至沸腾溶解, 称取0. 4g 可溶性淀粉于一小烧杯中, 加入10mL 去离子水, 使其混匀后加入上述沸腾溶液中, 冷却至室温后加入5mL 、37%甲醛溶液, 再用去离子水稀释到1000mL , 此即为p H 7. 0、浓度为0. 4g/L 的底物缓冲液。

  收稿日期:2003-11-07

基金项目:河南省自然科学基金资助项目(NO 0311030200) , 河南师范大学青年骨干教师资助项目

(NO200310306)

作者简介:聂国兴, 男,1971年4月生, 河南长垣人, 上海水产大学在读博士生, 研究方向为水产动物营养与饲料科学、饲用

2. 2 酶活性测定[4~6]

按表2分别加入底物缓冲液、酶稀释液、碘稀释液和去离子水, 混匀, 于660nm 波长处以去离子水调吸光度为0, 并读取各管吸光值。

表2 淀粉酶活性测定方案

加入物

底物缓冲液(40℃预温5min )

酶稀释液(混匀40℃水浴7. 5min )

碘稀释液去离子水

滴定管/mL

1. 00. 21. 06. 0

1. 06. 2

空白管/mL

1. 0

酶制剂与营养免疫。

2. 3 酶活性计算

2004年第24卷第4期            水 利 渔 业          (总第134期) ・27・

淀粉酶活性=[(A B -A U ) /A B ]×800。式中:AB 表示空白管吸光度;A U 表示测试管吸光度。

淀粉酶活性定义:100mL 酶滤液中(1g 酶粉) 的酶在

40℃和底物淀粉作用30min , 水解产生10mg 淀粉为1个

Mn 2+浓度的增加, 相对酶活基本稳定在同一水平上, 抑制

作用不变。

3. 4 Zn 2+对淀粉酶活性的影响

由图4可知,Zn 2+对淀粉酶有抑制作用。在0. 00~

2. 00mg/mL 范围内,Zn 2+的抑制作用随着浓度的增加而

淀粉酶活性单位。

2. 4 相对酶活计算

增强。其中在0. 00~0. 80mg/mL 范围内, 抑制作用随着浓度增加而显著增强; 在0. 80~2. 00mg/mL 范围内, 相对酶活缓慢下降

以不加离子的淀粉酶活性为对照, 对照组的酶活设定为100%。

相对酶活=(添加无机离子组的酶活性/对照组酶活性) ×100%

3 结果和分析

3. 1 Na +对淀粉酶活性的影响

由图1可知,Na +对淀粉酶有激活作用。在0. 00~

0. 25mg/mL 范围内,Na +对淀粉酶的激活随着浓度增加

而增强, 达到0. 1mg/mL 时, 相对酶活可达到116. 23%。浓度在0. 25~1. 25mg/mL 时, 水平。

3. 2 K +图

3 锰离子对淀粉酶活性的影响

由图2可知+,0. 00~

1. 00mg/mL 的增加而增大, 在0. ~1. 00mg/mL 浓度范围内, 相对酶活最高可达213. 98%。1. 00~1. 25mg/mL 范围内相对酶活显著下降。

图4 锌离子对淀粉酶活性的影响

3. 5 Mg 2+对淀粉酶活性的影响

由图5可知,Mg 2+对淀粉酶有较强的激活作用。在

0. 00~1. 20mg/mL 范围内, 对淀粉酶的激活作用随着浓

度的增加而增强, 其中在0. 40~0. 80mg/mL 范围内, 相对酶活保持在一个水平上。当Mg 2+浓度增大至1. 20

mg/mL 时, 相对酶活最大, 为134. 69%。在1. 20~2. 00

图1 钠离子对淀粉酶活性的影响

mg/mL 范围内, 相对酶活逐渐下降, 但仍为激活作用。

图5 镁离子对淀粉酶活性的影响

图2 钾离子对淀粉酶活性的影响

3. 3 Mn 2+对淀粉酶活性的影响

3. 6 Co 2+对淀粉酶活性的影响

由图6可知,Co 2+对淀粉酶具有抑制作用。在0. 00~0. 30mg/mL 范围内,Co 2+对淀粉酶抑制作用随着浓度的增加而增强。其中在0. 12~0. 18mg/mL 范围内, 其相对酶活基本保持在同一水平上, 抑制作用不变。

3. 7 Fe 2+对淀粉酶活性的影响

由图3可知,Mn 2+对淀粉酶有极强的抑制作用。在

0. 00~0. 24mg/mL 范围内,Mn 2+对淀粉酶活性的抑制

作用随着浓度增加而增强, 其中在0. 00~0. 06mg/mL 时, 相对酶活显著下降; 在0. 06~0. 24mg/mL 范围内相对酶活下降缓慢。而在0. 24~0. 30mg/mL 范围内, 随着

由图7可知, Fe 2+对淀粉酶的活性有抑制作用。在

水 利 渔 业           2004年第24卷第4期・28・(总第134期)            

0. 00~1. 20mg/mL 范围内, 对淀粉酶的抑制作用随着浓

度增加而增大。在1. 20~2. 0mg/mL 范围内, 相对酶活基本保持在同一水平上, 抑制作用不变

图9 

碘离子对淀粉酶活性的影响

图6 钴离子对淀粉酶活性的影响

3. 8 Ca 2+对淀粉酶活性的影响

由图8可知, 在0. 00~1. 50mg/mL 时, Ca 2+对淀粉酶活性具有激活作用, 而在1. 50~3. 75mg/mL 时, Ca 2+对淀粉酶活性有抑制趋势, 并随着Ca 2+浓度增加而增大。

Ca 2+在2. 25~3. 00mg/mL 时, 相对酶活基本保持在同一

水平上, 抑制作用不变

10 铜离子对淀粉酶活性的影响

4 结论与分析

淀粉酶是动物营养学发展过程中较早用作添加剂的酶制剂。本研究表明:Na+、K +、Mg 2+在一定浓度范围内对淀粉酶具有激活作用。其中以K +激活作用最显著,

K +浓度在1. 00mg/mL 时相对酶活最高, 为213. 98%, 其

图7 

亚铁离子对淀粉酶活性的影响

次为Mg 2+、Na +; 而Mn 2+、Zn 2+、Co 2+、Fe 2+、Cu 2+在一定浓度范围内对淀粉酶具有抑制作用, 其中以Cu 2+、

Mn 2+抑制作用显著。Ⅰ-、Ca 2+在不同浓度条件下呈现

出不同的作用效果, 其中Ca 2+在0. 00~1. 50mg/mL 范围内对淀粉酶活性有激活作用, 在1. 50~3. 75mg/mL 范围内具有抑制作用; Ⅰ-在0. 00~0. 08mg/mL 范围内有抑制作用, 在0. 08~0. 40mg/mL 范围内具有激活作用。

无机离子对淀粉酶活性的影响国内外已有相关报

图8 钙离子对淀粉酶活性的影响

3. 9 Ⅰ-对淀粉酶活性的影响

道。Egas 认为,Ca 2+、Cu 2+抑制淀粉酶的活性[7]; Martins 认为,Ca 2+抑制淀粉酶的活性[8]; 李卫芬也有同样的研究结果:Ca2+对淀粉酶具有抑制作用, 但抑制作用较小, 残余酶活为86. 77%。而梁颖等研究发现, 0. 5~5. 0

mmoL/L 的Ca 2+可增强水稻种子萌发时的α-淀粉酶活

由图9可知, 在0. 00~0. 08mg/mL 范围内, Ⅰ-对淀粉酶活性具有抑制作用; 在0. 08~0. 40mg/mL 范围内, 对淀粉酶的活性具有激活作用, 并随着浓度的增加而增强, 当浓度达到0. 32mg/mL 时, 相对酶活达124. 6%。在0. 32~0. 40mg/mL 范围内, 相对酶活开始缓慢下降, 激活作用不变。

3. 10 Cu 2+对淀粉酶活性的影响

性[9]。无机离子对淀粉酶活性的影响机理很复杂, 一般认为, 无机离子是通过改变酶蛋白的构象来影响酶的活性的。洪法水等认为:低浓度重金属离子对淀粉酶活性有激活作用, 高浓度则严重抑制淀粉酶活性, 在高浓度下,Ce 3+、Cd 2+和Pb 2+不仅可能完全占据Ca 2+与淀粉酶的结合位点, 而且还可能在Ca 2+的结合位点以外的氨基酸残基上结合, 从而导致酶的构象改变, 使淀粉酶的活性发生改变[10]。李卫芬等研究发现:在Mg 2+、Zn 2+、

Mn 2+、Cu 2+、Mn 2+5种离子中, 除Mg 2+对淀粉酶有一定

由图10可知,Cu 2+对淀粉酶的活性有极强的抑制作用。在0. 00~2. 00mg/mL 范围内,Cu 2+对淀粉酶活性的抑制作用随着浓度的增加而增大, 其中在0. 00~0. 40

mg/mL 范围内, 随着Cu 2+浓度的增加而显著下降, 0. 40

~2. 00mg/mL 范围内, 相对酶活缓慢下降

2004年第24卷第4期            水 利 渔 业          (总第134期) ・29・

的激活作用外, Zn 2+和Mn 2+具有强烈的抑制作用, 残余酶活仅为对照的8. 92%和4. 86%,Cu 2+和Fe 2+残余酶活分别为69. 35%和76. 27%[1]。

以上各研究结果也存在不一致, 原因可能有两点:一是设定离子浓度的标准不同; 二是淀粉酶的来源不同。

从本研究中我们可以得到这样的启发:在应用淀粉酶作为饲料添加剂时, 要尽可能避免抑制淀粉酶活性的离子与酶相互作用, 最大程度保持酶的生物学效价, 提高使用效果; 另一方面, 在不影响养殖动物健康的情况下, 可运用对淀粉酶活性有促进作用的无机离子, 开发生产淀粉酶稳定剂, 将其作为饲料添加剂, 解决目前饲用酶制剂使用过程中易失活的问题, 促进绿色饲料添加剂———酶制剂在饲料工业中的应用。

本文只是在单因素水平上研究了10种不同无机离子与淀粉酶活性的关系, 离子之间的互作对淀粉酶活性的影响、同种离子对不同来源的淀粉酶活性的影响、无机离子对淀粉酶活性影响的机理等尚需进一步研究。

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[5] 荣俊, 杨带建, 伍晓雄, 等. 加酶饲料中淀粉酶总活

性的测定—碘淀粉比色法[J].饲料工业,1994,15

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[7] M C V Egas , M S Costa , et al. Extracellular amylase

from Thermus filiformis Ork A2:purification and bio 2chemical characterization [J]., 1998, 2(1) :~32.

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soda lakes[J], Ex 2,5(2) :135~144.

9], 王三根. Ca 2+对水稻种子活力和抗寒力的影

响[J].西南农业大学学报,1996,18(5) :491~495.

[10] 洪法水, 王雪峰. 重金属离子对猪胰α-淀粉酶活

影响[J].(2) 43.

[2] 张丽萍, , 等. 性影响的作用机理研究[J].高等学校化学学报,

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性的影响[J].,2000,17(4) :235~

238.

(责任编辑 张俊友)

“通威”商标荣膺中国驰名商标称号

  国家工商行政管理总局商标局于日前公布了新认定的26件驰名商标, 通威股份有限公司金榜题名“, 通威”商标荣获“中国驰名商标”称号。据悉, 通威股份是本次评选中唯一一家饲料企业, 也是我国饲料加工行业第二家获得驰名商标的企业。至此, 中国驰名商标已超过300件。

通威股份是中国最大的水产饲料和主要的畜禽饲料生产企业, 水产饲料连续六年全国销量第一, 目前在全国有30余家饲料生产和销售分、子公司, 年饲料生产能力超过300万吨。通威商标被国家商标局评为中国驰名商标, 既得益于通威强烈的品牌意识, 更是对通威十多年来稳健快速发展的充分肯定。

十多年来, 通威以严格的质量管理、强大的研发实力、先进的管理理念、周到的服务意识和务实的创新精神, 积极、稳健、快速发展, 获得了社会各界的广泛赞誉和高度认同。1995年, 通威集团被国家工商局评为中国500家最大私营企业第二位、1997年被列为四川省31户重点民营企业、1998年被列为四川省37户重点扩张型企业, 于1998、1999、2000年连续三年获得“四川省维护消费者权益十佳单位”、1999年初获得国家批准的首批私营企业进出口权并获得国家经贸委的“全国300户重点联系非

公有制企业”, 同年被中国农业银行评为AAA 资信等级;

2000年集团通过ISO9001国际质量体系认证, 并获得“中

国企业标准化国内先进水平”最高称号,2002年集团又被中国农业银行评为“最佳诚信客户”。自1999年来, 通威已连续多年荣获四川省名牌产品和四川省著名商标称号, 先后10多次荣获国家级新产品、新技术金奖及星火科技金奖。

新闻背景:何为驰名商标?

驰名商标, 又称周知商标, 是企业形象的重要载体, 它既具有一般商标的特性, 又有很强的竞争力, 知名度高, 信誉好, 影响范围广, 已经被消费者、经营者所熟知和信赖, 并须经权威机构认定, 驰名商标作为所有者的无形资产, 是其商品或服务在质量与信誉上的象征, 看似“无形”实为“有形”的知识产权, 具有巨大的含金量。驰名商标是名牌市场桂冠上的明珠, 是名牌中的名牌, 拥有驰名商标的企业称为驰名商标企业, 这是产品品牌向企业品牌的升华。在全球经济一体化的今天, 品牌竞争已成为市场竞争的焦点, 中国企业已进入品牌竞争时代。据报道, 美国可口可乐公司在全球的企业如果一夜之间不存在的话, 那么它的价值350亿美元的商标将能够在一周内帮助其筹措到足够的恢复生产的资金及其他条件。


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