应用 EXCEL 绘制 ELISA 标准曲线及计算样本浓度
整体思路： 整体思路：在 ELISA 实验结束后，我们得到的是经酶标仪读出的标准品以及样 本的 OD 值。其中，标准品的浓度已知，我们可以利用标准品的 OD 值及其相对 应的浓度，以 OD 值为横坐标，浓度为纵坐标，做一条标准曲线，并用公式表示 出来。这样，我们把样本的 OD 值以 X 值代入，便可求出 Y 值，即样本浓度。 下面我们就一步步来实现这个目标:
1. 首先， 将数据整理好输入 Excel， 分别为经酶标仪读出标准品的 OD 值及其对应的浓度值。
2. 拖动鼠标选取完成的数据区，并点击图表向导，在图表类型中选“XY 散点图” ， 并选择子 图表类型的“散点图” 第一个没有连线的） （ 。如下图所示。
3. 点击“下一步” 出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改， ， 如 果是纵向列表就改选“列” 。
在做 ELISA 标准曲线，并通过此曲线求样本浓度时，因样本 OD 值是已知的， 因此， 我们需要将 OD 值设为 X。 根据上图我们可以看到， 横坐标 X 值为 OD 值， 纵坐标 Y 为标准品浓度，这正是我们想要的。
4.有时需要我们手动选择 X 值，这时可以点击“系列”来更改，如下图。
如果要对横坐标和纵坐标进行掉换，我们可以就点击 X 值和 Y 值文本框右边的 小图标，结果如下图：
出现上图后，拖动鼠标选取正确的数据区域以调整 X 或 Y。
5.调好之后，然后点击“下一步”出现图表选项界面，如下图。
6.点击“下一步” 在弹出的窗口再点击“完成”现在一张带标准值的完整散点图 ， 就已经完成，如下图。
7.到了这一步，散点图便完成了。我们可能会问，曲线在哪里啊？ 其实很简单，先点击图上的标准值点（记住一定要点选上)，然后单击右键，点 击“添加趋势线” 如下图: 。
8.弹出趋势线类型选择对话框，有线性，对数，多项等选项，如下图。
9.在选择之前，我们先对上图做一下肉眼观察，如果那些点能连成一条直线，或 接近直线，我们就选择“线性” ，意思就是出来的趋势线是一条直线，相应的该 直线的方程就是 y=ax+b 的形式。不过，一般的 ELISA 都不会是所有的标准点呈 完全的线性关系的， 也就是说不是一条完全的直线， 这时我们可以选择 “多项式” ， 多项式后面还有“阶数”的选项，也就是说求出来的方程是几次方，我们一般选 “2 阶” ，即出来的方程为 y=ax2+bx+c.
选择完毕后，弹出以下窗口
10.趋势线也就是标准曲线在此便显示出来了。接下来，我们需要将公式显示出 来，以根据样本的 OD 值计算其浓度值。在鼠标点选该线（一定要选中，选中后 出现下图
的样子即线由很多点标识出来） ，单击鼠标右键，选择趋势线格式
11.我们在弹出的窗口中选择“选项”选项卡，出现下图，我们选择显示公式， 显示 R 方，即相关系数，这时公式与 R 方值便都显示出来了。
我们将样本的 OD 值作为 X 代入上述方程，求出来的便为浓度值了，哈哈。 一般 ELISA 的标准曲线的相关系数要达到 0.99 以上， 本例中为 0.9999,非常不错 的曲线，这样就保证了由该曲线及其方程求出的样本浓度具有很强的可信性。
应用 EXCEL 绘制 ELISA 标准曲线及计算样本浓度
整体思路： 整体思路：在 ELISA 实验结束后，我们得到的是经酶标仪读出的标准品以及样 本的 OD 值。其中，标准品的浓度已知，我们可以利用标准品的 OD 值及其相对 应的浓度，以 OD 值为横坐标，浓度为纵坐标，做一条标准曲线，并用公式表示 出来。这样，我们把样本的 OD 值以 X 值代入，便可求出 Y 值，即样本浓度。 下面我们就一步步来实现这个目标:
1. 首先， 将数据整理好输入 Excel， 分别为经酶标仪读出标准品的 OD 值及其对应的浓度值。
2. 拖动鼠标选取完成的数据区，并点击图表向导，在图表类型中选“XY 散点图” ， 并选择子 图表类型的“散点图” 第一个没有连线的） （ 。如下图所示。
3. 点击“下一步” 出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改， ， 如 果是纵向列表就改选“列” 。
在做 ELISA 标准曲线，并通过此曲线求样本浓度时，因样本 OD 值是已知的， 因此， 我们需要将 OD 值设为 X。 根据上图我们可以看到， 横坐标 X 值为 OD 值， 纵坐标 Y 为标准品浓度，这正是我们想要的。
4.有时需要我们手动选择 X 值，这时可以点击“系列”来更改，如下图。
如果要对横坐标和纵坐标进行掉换，我们可以就点击 X 值和 Y 值文本框右边的 小图标，结果如下图：
出现上图后，拖动鼠标选取正确的数据区域以调整 X 或 Y。
5.调好之后，然后点击“下一步”出现图表选项界面，如下图。
6.点击“下一步” 在弹出的窗口再点击“完成”现在一张带标准值的完整散点图 ， 就已经完成，如下图。
7.到了这一步，散点图便完成了。我们可能会问，曲线在哪里啊？ 其实很简单，先点击图上的标准值点（记住一定要点选上)，然后单击右键，点 击“添加趋势线” 如下图: 。
8.弹出趋势线类型选择对话框，有线性，对数，多项等选项，如下图。
9.在选择之前，我们先对上图做一下肉眼观察，如果那些点能连成一条直线，或 接近直线，我们就选择“线性” ，意思就是出来的趋势线是一条直线，相应的该 直线的方程就是 y=ax+b 的形式。不过，一般的 ELISA 都不会是所有的标准点呈 完全的线性关系的， 也就是说不是一条完全的直线， 这时我们可以选择 “多项式” ， 多项式后面还有“阶数”的选项，也就是说求出来的方程是几次方，我们一般选 “2 阶” ，即出来的方程为 y=ax2+bx+c.
选择完毕后，弹出以下窗口
10.趋势线也就是标准曲线在此便显示出来了。接下来，我们需要将公式显示出 来，以根据样本的 OD 值计算其浓度值。在鼠标点选该线（一定要选中，选中后 出现下图
的样子即线由很多点标识出来） ，单击鼠标右键，选择趋势线格式
11.我们在弹出的窗口中选择“选项”选项卡，出现下图，我们选择显示公式， 显示 R 方，即相关系数，这时公式与 R 方值便都显示出来了。
我们将样本的 OD 值作为 X 代入上述方程，求出来的便为浓度值了，哈哈。 一般 ELISA 的标准曲线的相关系数要达到 0.99 以上， 本例中为 0.9999,非常不错 的曲线，这样就保证了由该曲线及其方程求出的样本浓度具有很强的可信性。