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Vo.l圆 怨N o 苑. 怨缘源 远耀园园
ODI:员 园. 猿苑源圆/ S. P. 员员圆J猿. 圆园员员 . 园园缘怨源
特
别策: 食划品全检安测专·论综与
述基
因检技术在食测物种品鉴中的应用定(
国中验检疫检学研究科院,京 北员园员圆园 猿) 要 :摘食品 安全关国计系生民, 品物种食定鉴食品 是安全 链 重的要 环 。 节基因 检 测技 术 的 发展 食使 品物 种 鉴 定变 得更加 快、速准确 、灵敏 。本文近对年十来国外内用采 基 因检 测 技 术 行 食进品 物 种 鉴 定 的 究研 和应用 情 进 行况 了 结总分和, 析括包基检测技术的因特、点主 方法要及其 在 动物 源性 食 品 植、物 源 食 品、性 高附值加品食和深加工 品分食中析应用以及的未的发来展 关键词 。:基 检测技因术 物种鉴;定 食;品 图分类中 号:O 缘远愿 摇 摇摇 献文标码识: A 摇 摇 文章编摇 号:员园园园 愿员苑猿( 圆员园 员 园)苑 缘园怨 源园苑
陈 摇颖 摇, 亚君吴
Ap
lpcaitino ofg enedet etcion tehcnologyin foo dpseciesidenti fcitaion
CEHN iYgn WU ,Yjuan(
C hnies ecaAdey mofIn pescion atn duaQratnne iB,ejiin g园员园员猿 ,圆Chian)
Astbart c:t is criItcali o dttermine the eiboolgicl aidneitt ofy laling rdieetsn nif oodto enurs ets iaseft yna dualqti.yM dernog ee dntecetiont echnlooy mgkes apecsei sdinetifciaitoni nfoo mdoer accruate ,snsitive and earpid .Aco prmeehnisvere iewv no it csrurnt eaplipaticos innt he asltd eacd aned he tuftrue prspeceitvein fodo sepces ideniiftication i presesnet ,idcnlduinga riebf ntriduocton io fgeende teticno etmhosd an, dthei rpaplcitions a
in lanptoirgnitadef oo ,adnmail rigionteadfood ,hi g hvlueaaddd eoofdan d hihgy lprcoeseds ofod.K yewo rds:g ne detectione tecnhology;s epcis eiendtfiiacton ifoo;d摇 摇 当 , 食源性前病菌原染污 农药及、药兽留残等是 水平的活日提高益 未,的食来安品问全题更多地表 为 对 食现品 的 质 量 品、质 、 养营 性等 的监 控。 其 ,中 食对物品的种鉴是关系食定品安、全质量、 质品营和养性 各方面等控制的要科重问学。题然自生界种物 类不其计数,许多 会给 类 或人者 特 定 消 费 群 体 的 健康带 来重威严胁,如 各种敏致原 、毒植有或者遭物到疫 污病的染禽畜等 一份物,来源种不的明物食带会 巨来的食大品 全安 风 险。即 便 是 全 安的 品食 原,料 也因为会种的物不同而营养成在分口感方面存在 和大巨差的异, 可在能长食用期过程中消费给者, 其 尤 摇 摇此除之, 伴外随品掺食所假产生商业的欺诈 市 、是婴幼和青儿少的年康健带来不影利。响 掺假的手和花 段样 在 也 断不地 翻 新 因 。此 ,一面 方需要定严格制的律法规来法约生束者和产营者的 行经,为另一 方面需 借要 助 科 的学检 测 法 来方 保障 监 管的有 效行执从 传 统。 的 验经判 断、 感鉴别到官经 典生化的分、 析现仪器分析代方法 再,分到生子物 学技术 ,食品对的测 检 针 从对 表观 形 态 发 展到生 化 水 , 平再到基水平,因 法 方的准 确 性、 灵度敏稳和定性越 来越高。同时 这,说也明现食品代加工业的发工展 ,对 测或检别技鉴术的解能读提力更出高的要求。 摇摇 本文对近十年 来食品物种定中广鉴泛用应的 并基该领域的对来发未方向展行进探了。 讨因检技术的测研究 和 用 应 况状进 行 了 分 析 和总 ,结
食品
全安中们最人遍关注普的问。题随着人而生们
员摇
基检因技测
(术 deoxryboinuceil caidc,D N A 的形式存在)于有所组织 和 细胞中。 由 于 遗 传 信息 直 接 决 定 物 生的本 摇摇基因是生 物遗传 信 的息载 体 ,以脱氧核 核糖酸
乱象场、贸 易纠纷 等问 题同 不 样 容 忽视。从 两 千 年前多的古社代会 今 天 的 到现 化代 会, 社论无政府是还 是民与食间掺品 假 斗的争 从 来 就 没 停有 过止,而
陈摇 颖 ,博,士 究员,研主要研究 方为食品生物安全向 .elT: (园员园 ) 愿 苑缘愿猿
缘愿 苑Email,: yqcyeh n 岳ahooy. cmo cn. . 通联系人讯 基金:目项: 国家 “愿 猿 远划” 计( 园员圆 员A员园A园愿园苑 ) 和国源家量监督质验检检总局科疫计技项划目 ( 圆园园怨 KI猿远员 . 万)数方据收 稿日期 圆园员员: 园 源园
圆 第摇苑
陈期摇 , 等:颖基 因测技术检在食物品种定鉴中的用
应· 怨缘缘
质, ·此通因过因来 鉴基 别 生 物 物 种 是 最具权 威和 科 性学方的。法技 在术 层面 上, 随着上世 纪分末生子 学的发物, 对基因展息信行快进速、 确准析的各分种方 法 不 出断现 ,如聚酶合式链应反( plymoraesec ahnir eactoni ,PRC 、)实 时 荧 光CPR、 子 分指 纹、 基因片、 芯因 测 基序等 。 相应的 仪 器和 商 品化 试剂 发的也展是新 日 异,月 并不 断 朝 更 快、 更 着准确 、更 敏、灵 更动自 化和 能智 的 化方向 发 展 这。 些技 术 的 革不仅显新提高 著 了 食品检 的测效 率 而,进一且步 促食进安品全的念从卫理安全生角的提升到食度 品质、量品 和营养性等方方质面。例面,如采 用因检基 技测可术以速地分辨快食品使中的所有用动物原植 成料, 分对并同一种原料的同不系品行进细区精,分 至甚溯到特追定的 生 物个体。 在 这 个 程过中, 基因 测检技术具以备下 个几独 特的 优势,从 保而了结 接证反映基在序因 列的差 异 上 ,因 可以根此基因组据果的可 靠性 :()员特 异 性 好。 由 于 生物 型 的 差 异直
年诺贝的 化 尔 奖。 PCR 学 术技 经过 大 改 进 产量生 巢 式 PRC 反、 一系列相关了的方法, 包括位 原CRP 、 向CRP 、锚 定PCR 、 重多P RC 、不 对称 CRP 、重 PCR组 标记、PCR 、 免疫PC R等, 这 些术技主要用定 于性检测 随 。着 员怨怨 远 年 时实荧 光 PC R 技 术的推 , 出CPR 现了实从 定 性到 定 量 的 飞 。 跃 该 技术主 要 理原是在应体反中系加 入 荧 光 基 团 ,用荧利光号积信 累测整个监P CR反应的进程 最,后过标通准 曲 对 线未知模板行进量。定中其的光荧料染包括针类探和非 探针类 :针探类是 利用 与 靶 列序 异 特杂 交的 探 针 来指产示的增物, 非加探针则是利类荧用光料或染 特者殊计的设引来指示物产物的增 加 。探针类料 的染信 产号生 是 基 于 荧 光共 振 能 量 迁 移( fuolersecntre onsacn eeenry gratnfes ,FrET R) 原 理,即当 个一
荧光子 分 (供体子分 的荧光光)谱另一个荧光分与 (子受 分体子) 激发光的相重谱时叠,供体 光分荧子自身的荧光强 衰度,减受体 荧分光子荧光强的增度强[
员,圆 ]
。同不区、 基域因 、片段进化的特点来择适合的靶基 选因进鉴行别例如。, 守的保家基看因常用通种于 以上类水平分的鉴上别, 化进中的适基用于因种的鉴别 变,较异快的基 因用 于 亚 、种株 系 的 别, 而针鉴对 基因全组 扫 描 式 的 纹指技 术 可 于用个 的 体 别。鉴 圆() 敏。应用基因灵检测 技 术 可以 发 现含 量 低至 几拷个贝的因基, 使食品 生 物 成 分 分 的 从析常 量 水平进 入痕水平。量在设计法方时的可以候据食品依 加工的程度 选,单择拷贝 或 多 拷 贝的基 因来 满 足 不 同 的展发市场的和张给食品扩测工作检带很大的来 压食分析品中对灵敏度的 要求 。(猿) 快捷 。 食品 产业
摇摇 前实目时 荧 P光R 技 术C 在食 品成 分 检 中 应测(员 ) 异特性 强 。由 非 于 特 异 产 物 不 能性 探与针 杂
得用常非广 泛, 主 要是 因 为 该 技 术 具 源有 大优 点 :交 ,因此 特异其性传比的 P统RC 为提大高。 分 信
子、标 杂交探 针和 新 的 型TaMqn a小沟 结 物 探 针合 以检可出测序列靶 (中mi or gnorvo einbdr eMG,B) 单碱基的个错配、缺 失或 插入 突变。(圆 灵 敏) 度高 。常达 员通 耀 员园园园拷 贝 / m L。 ()猿重 现 性好。 由于 环循阈数值( c ylce hreshtlo ,Cd )t与起始 板模对的数 在存性线系关,而 P C R 环 数循在 达到 C 值 t所在 的 环循数时 ,刚刚进真入正的数指扩期增( 对数期 ),此时微 误小尚差未 放大 ,因此 Ct 值的 重 性现 极 好 即,一模统不同时间扩板增或一时间统不同管扩增内 得到 Ct 的值 是 恒 定。 的()源 有 降 低 效 污染 常。规 PCR 方法繁杂 的 验 步 骤实容 易造 污成染 和 出 假 现性结阳;果 而实荧光 PCR 时法只方在需 样加时 打开 一次盖 子,其 全后闭程管作操 大,大减少了外来酸 造成污核染的机。 会员. 圆摇 基芯片 因 摇摇 因芯片基是 指 D用NA 分 作子为 针探 生的 物芯 片 芯。的片概引念申 自 计 算 机芯 ,片在 个微一的 小目标基因与探过之针的配间反对对目应基标因进行分析 获得,的光号、 电信信或号信号磁检测被器仪 录并记换成数转字 信号输 入 计 算,机由计算机 软件
源自]动分 、 解析读验结果[ 猿 , 。
实力, 尤其要
求口对 岸 的
通 关查 验 和生产 线 的质量 制控建快速立反应机。目制前类各 PRC 仪 基因、分 析、 芯片仪扫描等高 精仪 尖 仪 以器 及各 类 商 品 化 试 盒剂的配使套用大 大 缩 短 了 检测 间,时 在短时间内 较可就完 以成样 品 从 制 备 到结 果 判 读 的 全过 程 同。 时,自动化检测 仅有助于不高操提作的准度精 防, 交止叉污, 染而有利 且于 护 实保 验 人员 免 受 毒 有试剂 伤的。害根 据测检的目和要求择选适合的方。其主要包法括员 员摇 P.CR技 术PC R 、因芯片和基分子纹等 猿指类 方法。摇 该技术是摇一 种 体 模 外拟 然 自NDA 复 制过 程 板, 的一在人工对合的成寡核苷酸物的介导下,引通 过耐温 DNA高聚 合 酶的 酶 促作 , 用速特快异扩地增万 方数 出据定特 的NAD片 。段发者明 ullMsi 因获此得员怨怨猿 摇 摇 采 基用检因 技 测 术 行 进 食品物 种鉴 定时, 需 要
载体
表点面阵式 布排 大 量 可 的寻址 的 探 针 分 , 子通
核酸扩增技
。它是术以 待 扩 增 的 两 D条N 链 为A
模
摇摇基 芯因技术 片 大 的 最 特点 通 量 是高 可,以一 在实验次中成对上千万 的 目 标 因基 进行 检 测 因,此
可 ·缘怨·远
色
谱
第 怨 卷
应用于食圆品复杂成分快速的查筛但由。该技术涉于及 芯片样点( 仪) 、 杂 (交 仪 )、清 洗 仪( 、) 扫 描 仪) 等复(杂的器和操仪步骤作, 数据析分也为复较, 杂 此因目在食前分品领域析尚于处研究段。 阶员 . 摇 猿分指纹子技 术摇摇 分子指 技纹 术 最 应 用 于 遗 传早学 研,究 是用 利列多的性 态 基 础, 其 优 上 点包 括: 员() 态多 高性 变 异类,丰型富理。上, 论DAN 水平遗传多态性的表 为核现苷序酸列任的 差 异,何因 此标记数量的几乎是 限的。无 () 大多圆 数DA 标记是 共N 显性 的 ,所 很以容 易区 分 杂合体 和 纯 合 。体 (猿)稳 定 性 高, 受不环境条件 的影,响没有 组或器织的特异官性,不受个体
除非对近要物缘种 行进 区分,一般 不需要行进基因 检测。加工而品 成 食分 较 复 为杂,无法直 接通过颜 色 气、味 形态或者脂肪、、多糖 生等化分进组行别识,基 检因测技术为物种成定鉴不必少的可段手。 .圆员摇 物源动食品性 摇摇 肉食最品常的见假掺品是的种掺假。内国外针羊 、 、 鸡鸭、 鹅、 火、 鸡、驴 等鹿。多以粒体线细胞的色为 序列靶,检 测方 法 的 敏灵度 一 般 能都 达到 %员或 更 低 ,远超过现实远的检测需。在求测中,检通 直 常使用接动物组织为阳性对照。作对一但
些不常见 动的物分成果难如 获 得 阳以 样 性,本可以 根数据库据 中的 基 因 信 息合 D成A N 为 作阳 性物 质。 常而规 CR 和P实荧光时P CR 是 最 常用 的 检测 方法。 陈 颖
[等 原苑 员园]
因组多基态性特 来征 分区相 近 的品 种或 系品, 并进行 标目状的性因基定 位 。等该 术 建技立 在DN 序
A对动物分的基 成 因 检 测报 道 很,多 主要 涉 及 、猪牛 、 素 B 、圆员 rSNR (A核 体核糖核糖)酸和 Dloo p 区域
发育阶的影响。段 ND 分子A指纹技术种类繁, 多 包限括 制性 片段长 度 多 态性( ertsrcition ragfenmtle gth ponlmoryhipms ,FLPR 、) 单简重复列序( im pls eequsnee recpate ,SS )R、 随扩机多增态性 (arnd moam lipfei poldyormphc DiA ,RNAD P 、 )增长扩度 多 态 (性 mapliifde frgmeant elgnth plymorophism ,AFPL) 、 链单构 象多 态性( single s rand ctnofroamitnop loyorpmish ,SSmC )P、 变性高液 相色效谱( dnetariug hignhp rfeormnace iluqdi hcor matogrpahy D,HLPC )等 技 术。 这些 技 术以 PCR 为 础对基目标因基 进 扩行 , 增分别根据不的同原理对基 因序列 的 态 性 进 行 检 测多 。以S CPS 为例 ,扩 片段经变增剂性或 温 处 高 理后解 链 ,在链单态下状于 一浓度的定变非性丙聚烯酰凝胶中胺电泳其。 迁主取要决 DNA 单 链于移率除 与DNA 度有长关外 所形成的空间,构。象 相同 长 度 的 单 DN链A可 以 因单个碱其基差异的产 生空 间 构 象 的 差, 从而异使 在其凝中胶电的速泳不同度,显 示出带型的差,异即多 态。传型统丙烯的酰 电胺泳 实验 费时 费 力 , 因分基 仪析的用实使了快速、 现准确 、敏灵、高通量 检的测。同时, 激光 诱荧导光检 测 可 器 对 以 源种不 同 荧光 染 同料时进检行,测 因此可通过标以不同染记料对 多种分进行检成。 另测外 ,自动控化制提高工作了效 率 也避免了操作中,的为人差误 从而增,了结果的 稳定加性和复重。性系软统件还校正能毛细管间各 的电差泳, 异大程度最减地了少验实的系统差
误[缘 远]
,报道
了 马、驴 、鹿、 骆 驼 等 成分的 CP 检R测 [
员员]
方
法
, 检测 对象 包 括食 品 饲 料、、 明 胶、 妆 品。化 aMn 等e 建立 了肉 类食 品 中 成鸡分 的 CPR检 测 [
圆员 ]
方
。法在禽类, 中肝鹅因价为格昂贵 ,经常掺杂鸡 或者被 肝鸭 成分。 Rdoírugez等 立建实时荧光了 CRP方 , 对法肝鹅 员中% 耀 缘圆 % 的 成 鸭分进 行 定量。 重 P多C 技R也 被 术 泛广应 用 于 品食 中 种多成 分的 测检 。Matsuagn 等
a[员猿 ]
建 立 了 同 时 测 检、牛 、 鸡猪、
绵羊
、山 和羊马 成分 的 多 重 PCR 方 。法除 此 之外 ,R FL P、 APR 、 D基 因 芯 片技术 也 是 经常使 用的方 法。 hCne等 等 [
员 ]缘 [员源 ]
采
用PCRRFLP 方法对牛牦、 牛、羊 等
动物
的 线 粒体 员圆 rSRA N基 因进 区 分行。Ma haajn等成 分行区分进 。in Y等 等[
苑员]
采
用员圆 S r RA NPCRFLP R法对牛方、 羊、 驼
骆[ 远 员
重 ]PR 方C法 对牦 和 牛牛进 行 区 分。 D b orswk a用采实时荧 P光C R法方掺 对入 奶羊 的 奶牛成 [
员愿 ]
采
用员 S圆 rRNA 基 多因
分进
定性和行定量检测 P。tee 等
建立 r 了食肉品
奶酪和品中制物动成 分 的芯片 检 方测 , 法可同时以检测 源 不同种的 动 成物分 为。了 提 检 高出限, 还 园可郾园 缘 %园 质量分(数)
[员 怨
]以
检 测 短散 布 核 元( SIN件E ),使 检 出限 达 到。 着随疯牛引病的食品 和
饲料风发险到受全世界 的 关, 注食品和饲料中物源 动成分性测检工被作予了赋的内新。目前中涵国已
经。
颁布实
施了动物性源料饲中牛、 、 骆驼羊、 等 员园鹿 种反多刍动物分成 的CP 和实时R荧 光CP 检R 测方 标准法, 这方些法运用出入境在口岸的管监工中, 作为保护国 门 、防动止疫病传播发挥了重要作物。 用摇 相比摇种类较 于少 的 畜禽 类 食,品 产水品品的种则 胜枚不。不同品种之间举价差异很大格 ,假掺、制 假隐患严重。例如市场上 售销的,鱼 通经常去过头
、摇 食圆品成分的物鉴种
定加工品和深食工食品加其中农。产品食和品料往 原万数方据 感 官鉴定 来 识别 物 种 身份 往,以通可过简单 因的 此 摇 食摇根据加品工度程为农产品分 食、品料原、一般
摇 第苑
期
摇陈颖 , :等 因检测基技术在品食物鉴定种中的用应
·缘 苑·
[ 怨猿 ]
去皮或猿切片加失工 去了 原 有 态,形大部 分品产经 还过渍、盐 烟熏烧烤的或加工 只,通过基因检有测能才 实现
准确品种的别鉴。P RCSCP S和 PCRRFPL 是鱼产 品 品 种 定鉴中 应用 多 较的技 术 Co。omlo 等b[
圆 园]
水
牛 山羊、、绵 β羊 酪 白蛋基 的因PC RRLF 检P测 方 , 检出限达法 到园 缘 郾% 。Mauetd等 则荷对斯
[ 猿源 ]尔
奶牛坦系建品了立基 检 因测 法方, 该品奶牛的牛系 乳能不用一些法国于酪奶制的。备 Btteroo 等 采多用 重PRC 技 建 术立 M了zozralela 奶 酪中 牛 和奶检 出为限 %员 。 牛的水细色胞 素B基 因 的 鉴别 方 法, D e
[ 等缘 猿]
使
P用CRSCS 法区P分Eu thnnuysp eamlis
[ 、员圆]
T
uhnuns obsesu、 T . laauga n 、T. alabacres源 种 金鱼。 枪ehRbeni 等s 、o ciApesen rersipcus 和A. selatut 猿 个s 鲟鱼 品 种 。eRheinb
等 [圆 圆
]
员圆猿 和b 两p个列序 PC的RSCSP法鉴别 Huo hs 通过u 线 粒体细 胞 色 素 B 、小清蛋
使
针 对用细 胞 色素B 员员 远b p
利 线用粒 体 Dlopo区 域 序 列建立 了 乳
[ 猿远牛
]
和奶酪中奶牛和 水 牛 来 源 成 分 的 多重 PRC 检 方 测法,检出限为 园 郾 员 %。Da mlssao等 出 限 圆为% 。 采用实 荧时光P R C技术 对 Mo zarelzl 奶a酪 中 牛 奶和水 牛 源 成 来分行了检进测 对水 牛,牛 乳 中 的 奶牛 牛 含 量 的 乳 圆检. 摇 植物圆性源品食
等
熏冷 肉和 鱼 子 酱 中 的 园 员 个鲑鱼 品 种 。eRhbei
[ n猿圆 ]
白生和激长基 素 因园猿 耀园源 远 bp 园 列序 区 生 鱼分 、 通肉细过胞素 B色员 猿圆b p 序列 鉴别 枪金鱼 头罐
来
品种源,并 欧洲在地 区 愿个实 验 室 开 展 了 同协 实
园怨 猿郾 , 其 % Kat中suonuswp elaism 和 ardS asara d个两 种品 在 种 存 内 差 和异产 地 差 异。Re bein h
[等圆 源]
,验 结 缘 个 品果种 和 圆 个 混 品 合 种鉴 准 确别率 为 利 细用胞色 素 B 圆员猿原 猿 缘 bp愿序 鉴 列定 罐头
摇 摇植源物食性的品物种定鉴很一部分大是出于
基因转检测的需要 。针对 转 基因食 ,品 方面一通过物种鉴 判定断食品中 的植物 分 成种类, 而选择相从 的转基因应检体系; 测一另面方过物通种源基内的 因拷数可贝进以行基转成分因定量检测。这的主里 要介与绍品掺假和食过原敏
相关的研情究况。
金枪中 、鱼 鳗、鱼 鲑鱼 大 马、 哈 鱼、鲟 鱼 等 鱼 种, 品结 显果沙示鱼丁、 鲱、鱼金枪鱼和其 品他都有种殊的 SSC特 条P,带源 个鳗 鱼品之间种及猿 个 鲟鱼品种之 间可得 以到区 分。 ehbRen 等
[ 圆i ]缘
摇 摇品 鉴别在种物贸易谷谷物和加工食品类真的
伪鉴别
中 非 常 关键。在 世 界范 围 ,内水 稻 大、 、 小麦麦 等物作品系的非常多 , 不同品系的价而有一定的格 差,异 而且多许家国对 定特名 的称谷 加 物工 品产的 品 系来有源严的 要格求, 此因需借要高分助率的辨基因检 技测进术 行 品 种 别鉴 。 香 米 以为例 , 为大 作市米中的场 “贵 族”, 香价米比格通大普高 米圆 耀猿
采
用 PCRFRL 和
PPCRSSC
P两 种技 术建 立 M.了 poli 、 lM. lbaiud s、 .Maus trlas i、M. bi ilenrias 、M .acenspis M.、p or dutus c等 鳕 品 鱼种鉴 定方 法。 A ensio s
等 圆远[
通]
过
piEenhpeusl guzaa、 Ployprin omeraiancu 和sL aes tilotncui 猿s 品 种 进 个 行鉴 。别Cés pdese等
[苑 ]
圆线粒体员圆 SrNR 圆A愿 bp 园序列 SSCP图谱对鱼 的 通过细片色胞素B 圆员 园b p 列 序鉴别 新 鲜 或 冷
冻倍,
但其和 他其品系的 杂 交子代 往 往 丧失亲 本的 香 方法。测Wu 等
[猿 苑, 愿猿]
味口感和 ,此因要需 对 值 价较高 香的米 品 系 建 立 检 采 用RA DP 技对泰国术茉 莉香 及其近米品种缘 进 行区分, 用其利两中引物建条立 泰了国茉香米 莉品 种 鉴定 和纯 度 检测 方 。 法APRD技 的术优势在于无 需 事 掌先握 样本 的基因 信 , 息 无设需计物引探,针 主依靠对大量要随引机的物筛选来 获得稳定最 、辨分最高的 率系。 体aiJ n等
[猿 怨 ]
平
鱼片的鱼品种, 果发结现S loea sole 、 alPureoectnes lapesta 、Psltichtays hlfseu s和Rei harntids hippogulosoisdes 源 个品种有 均特异 的性 SSCP指 纹 式。 C模oemasn a等
圆愿 ][
采 P用RRCLPF技 术 同 时
[圆怨
]
区分术了大哈马鱼不同品种的 。Aensiso
等
区分了缘 个鱼平品。种Ru ssle l
等
用应相的同 技[
猿园]
利用
用采
多组 SSR I和SS 引物R对度
印Bamsai t香米 立 建 品 了种 鉴 和 定 纯度 检 测 的PRCCESRS方 。 S法RS和 SIS R等技术依据基 因 组 微卫 星 序 长 度列的 多态 性 进 行 缘 品近 的 系 分, 结 果 稳 区,定 分 辨率 。高 另外, 于由国啤我酒酿所使用的制麦主大依靠进要口 而不同国, 家来 源 的 不 同品 系 大 麦 在价 格上 差 很 异,大 易容在口进贸中发生易商欺诈行为, 因业需要 此立高建辨分率品系检测的法。方在麦大和小的品 麦鉴定种中 使,用 的 方法 也 多 上为述 的分 子 纹 指。 法Hydena等 [园 ]采用 S源S 荧R 光标 记 多 重 P RC 术技对 大麦 小 和麦品 系 进行 鉴 定 。Vrahsney [等源 ]员 过通一
多重P CR 技 对 术 鲶 科 Epi鱼enphelsu mraingtus a入掺 尼的 罗 河鲈 鱼 atLs neiloitucs 和oPylrpin o缘愿份中存在 掺假况。除 情 之此外 , 、 蟹虾 、等贝产 品也是水常见 的 鉴伪 对象。 S hiefechnvel 等行进鉴了定。摇 摇 外此 乳,制 品也 是 真 鉴伪别 的 重点 对。象 方西国 奶家酪发达,业 奶酪中对原乳料的来、 甚至源奶牛[ 猿圆 ]万数据 方品都有系严 格 的 定。 规latPh 等 立建 了针对 、牛
[ 猿 员
]
amerciaun 进行s检了,测 从园苑份 片 商 品鱼 发中 现
用
S采SCP 技对术 市 场销 售 的 虾 (C rnaogncra non )g 肉
· 缘怨·
[ 愿圆 源]
色
谱
第圆 卷
怨组
SS R和核 苷 酸单多 态 性( NS P) 记标对大品系 麦多性进行态分了。 析oCvetnr 等y 利亚大麦品 大 系 源在 个愿SNP 位 点 的 多 态 , 性并 验建了证愿愿 个 澳
品
。但由这于类食原品稀缺料 、价昂贵, 格易成为容不法分 掺子假 造 、 假 牟以 取暴利 的 象。 如对 燕窝 常 不法分被用猪子、皮银 耳 、粉淀 、琼、 海脂洋藻植物 或鱼类 类 等 添鳔加 或 伪; 造虫夏草被称冬 为“黄软 ”金, 价格 分昂贵十 不,法子多分亚香用虫草和凉 棒山虫草冒冬充夏虫草由于高。附值加品食的费消群 主体集中要东在方 国家 因,此国上相关际的道报并不 。国内多究研者前目要针对鱼主、翅 窝燕、阿胶等 见的常高附值食加品 立 建 基 因了检 测 方 法, 主要 实采 时荧 PCR 、光 CPRFLPR 技 术。陈 用 的 是CRP、 颖等 [
缘圆
立]相应了的 CRP方 对法 系品 进行 鉴 定 实 时 荧 光 PCR 技术。也被应用于 谷 物 的 鉴 。定 onnS
ant e
等[ 源猿]
对针小微麦 卫星位 点 序 建 立列 了实时 荧光P CR方 法 对硬质粗粒小麦 ,制 作的面 包 通 和心 中 掺粉 杂的 软质小 麦行定量进检。测敏原。 敏过引原发食品的安全问日益题到受达发 国家重视的 美国、 , 加 大、 拿欧盟多个国家和地等制 定了针对食品过区敏的原标标识法签规。例欧盟如 求对不芹菜 、 末芥等 成分 进 行 标 识 ,标 识 低 为 限园员 前目 ,国内针对外 见 植 物 常 性过敏 原 成 分 建 均 了 基因检测立方,法 要主包括实时荧 光PRC法 、 PCR 酶联免 疫吸 法附( PCReznmye lnikd iemmuonsrob net ssaya , CREPLISA ) 多、 重P R 和C芯 片技 等术 。uW等
[ 源 源]
摇摇植 物源食性的品一个另重很的要测目标是检过
用采实时荧光 CR 技P术建立 鲨 鱼了品 种
的检方测, 可以法 异特 性 测 检大青 、 尖鲨吻 斜 牙 锯、鲨 澳半洲沙条鲨不等鲨鱼同品种的分成,而 对犁头鳐 、银兔、 叶 吻鲛银 鲛、 平、鱼龙 俐 鱼、黄 鱼等圆园 个其 他 鱼类 无 扩 增 ,方法 灵的敏 度 为 p员 g μ /L 。 方 该 法 已等[
缘猿
]仅
常见对的 大愿 类 过敏 原 的标 识 做 出 了规 定 ,还 要
m
/g kg, 这 检测方对法灵的敏提度出很了高的求要。
成功被应于用场上市鱼产品的翅快速查。吴亚君 采筛实时用荧光 PR C术技建立 了燕 窝 金中 燕丝 成分的速快检方测 , 法时同用双采向电泳术建技立了 窝燕白质蛋测方法。检合这结种两方法可以燕对窝及其制 品真伪的 进 行 确 准 判,定目前该方法已 制经定成业标准。行 阿在胶 真的 伪检测 中 ,常需通 要对料皮原进 行 CRRFLPP检 测 陈。 颖
[等缘源 ]
用 采SYBR rGeen 时荧实定量光 CR
P术技测深检工食 品加 中 的芹 菜成 分 ,绝对敏灵达 到 园郾 度园园 员%, 对 深 加工 食品 实 的 灵际敏 达度园郾 员园 % 。 还有报采道实时用荧 光PC 技术和常R 规CP 技术 对羽R豆扇 、芹、 芥菜、末 麻芝、麦 等麸过敏食原成品 G分reinmi等 进 行检测 检 , 限出 达到 园 郾园 % 员耀 郾 园园员 %
[园源愿 ] [ 源 缘 源苑 原
]对针驴
和马
细胞色 素B 基因 小 片段 序列 立 了 建实 荧 时光P CR方 法。另市场 外上 鹿 茸 制 品 的掺 假 很也严 重,除了 使猪用 鸡、的成冒分充茸鹿外,还有不同品种 鹿 茸之 的间掺 假 。因 此,陈颖等 W agn等 鉴。定 除 之 外此
, 缘远 ][ 缘[缘
]
。
将肽酸 ( 核PAN )探针 和 PLH C 术
技
立了建时实荧光
行进了桃核分成检测的。与 P CR技术 结合 地方,色特的 工 加 品。 食abMu r等摇 其摇他植的类物食包品括香、料蘑菇 、辣 椒具等
有 [源 怨]
PC
R检测方法 ,用梅于 花 鹿 茸 和 马 茸 鹿 产 品的真 伪 性 PCR 法方 人对 参anPax ginsng e 价中格 较 高的 食 种品类常繁多非, 而且包很多极具地含方特色的小 种, 此相因关检的 测工作 在今 后 很 长 段 一时间 仍是研内人究员临面一的挑个。战圆 .摇源特 深加殊工食 品 摇 摇加深工食品加工艺的工杂复给性种鉴定带物来采 用 远 圆SrRNA 特
异
利用块线粒菌
体leu DNA r 域 区 一 的个 SNP位 点 计 了设PCR RLFP 区法 分 块 罐菌头 的 来 源品 种,其可区分的品 包括 种重 的要 商 业 品 种ubeTr emalospnrum 与 T .o esaituvm 、 T. brumle 、 aT . ndiiucm 猿等 个质品稍 、 价 格差较 低的 品。种 ariMsceh i等
缘[园]
“G mpoung o 品”进种了鉴行定。是由于 高 但加附值
将R PDA
位点
化转为 序 特列 异性 扩 增 区 (间s qeeuce ncahr方 法 ,后 对 a掺ctrieez admlpiifdereg oins ,SACR 入牛至 ) (orngo e) 中的形唇科( La imaece ) 植物a成 进行检分 , 测检 出 限为园郾 缘 % 。 Her ánnezd 等[
缘 ]员
大很难。其困中用食的检油工测很具代表作。橄
榄油由于营性养富 丰 而深受 世 界 各国消 费 的者 欢喜,但 每全年球 的 榄 油橄产 量远 远 于 低 场 市 的 上 通 流量 ,明说掺假 况 情之严 。重 国 际上 针 对 橄 榄 油 展 开很了鉴多研究
[伪 缘苑 原 园远]
利用
两 R个AP 位 D点 对 掺入西 班 牙 特 色食 品 “ Pim n toe ned a Vlra ”e 熏烤辣红中的椒他其品辣种进 椒了行测。 圆检 . 猿摇 附高加值品食摇 摇随着们人生水活的普遍提平和健康理高念转的
,主要集于中不品系同 榄橄 油
品的 种 分,区而 国 内 相关 的 究研工 作 还 很。 W少u [等远员 采用实时荧光 ]CP R法检可测橄 榄油中 油的 橄 成榄分 Zha。g n[等 圆远]根 据 毒性 因基建 立了 棕榈 油中 掺 杂 其 他的油 料 成 分 的常规 CP R和 实时 荧 光PC 检测R 法。 近 年方 来 国 产的 山 油、茶 红 花 油、
葡, 高
变附加食值品类越种来多越,加工工 越来越艺精 万方据 细数 ,价格也越越来,高 逐渐成正名为其实副高端的
食 摇苑期第
陈摇 颖, 等: 基因检测技在食品物术鉴种中的应用定
· 怨缘·
怨萄
油籽高附加值等食油、 用和油产品越来越多, 调 给市场监和管消费 者识 带别 来 难困, 此需要对因类 这品建立产配的检测方法套。 摇 摇用 油食 检测 中 最 大 的瓶 颈是 DN 的 A 提取 ,国内 外究人员研对开展了专 门 此 研 的。 究aPui 等
l 远[源] [远猿
]摇摇 外, 另将现分代生子物技学便捷术 、准确分的子 标能力,识与色 谱 光谱或、谱波方等的良好分离能 法力特有及的结鉴构别 能 力 相 结 , 合借并计算助模 机式别识术或技模 糊 数学 方法进 行 结 果处 理 也,未 是食品物来种鉴技定术体系发的趋势。展
展的方法可从发制粗大豆油中取提 DAN, 并不适 但于用精炼 植 物 。 油Cotas等 利 用改良试的盒剂
[远 缘
]源
摇结论
摇摇 进入 新世以 来,纪我国 品食工业得了举取瞩世目 成绩, 成的为国我民经国济增中长最、 快具最力 和最具活展发力潜的新的济经长增。点食品全是安人 群民最关众心、 最 接直、 现最实 的 利益 问,题 保障而食 安品全国家政是 高 府 度重 视 重点投、入和持支的 工作标目。何将 如最新、 最好的技 术应到食品安用全管理 工作各的环节个,实 现 对“从 农 田到 餐 桌” 的整 个物食的有效链监 管 ,是 一每食个品全工作者 努安力方向的。现代分生物学的子发展带来了因基检 测术技, 使食品成分的全解息读为成能可,为食品 防假打假这 个古而又老与现代国民生息息计关的相事业 带来了全的新貌面和阔的前广。景食真品检伪测从传统的色 气、、 味感等官析分经和典的肪脂、 、 蛋糖 质的化白分学, 析展发到采高用度敏和灵准的基 因分析确术技原料对的 种 物 份 身 行 进 快速鉴 定 使, 过界定模糊去的、经 验 性的 或者 需 要大量 实 才 验 得 能的到结变得更果科具性和学说力服。十近年国来 外食品科内学工者 作开 了 展 量大工 作 ,采 基用检因测技术对 多种品进 行 食 物 种 鉴了定 和 溯 研源究, 建立 的 方中法 有 多 被许采 纳 成 为各 食国品 检 测 标 准方 法 。过基因通检技测进术行品食物种定鉴助于有 对食品分成的伪进真 行鉴 别 、对 食产品的真伪地行进 源溯 对食品、敏过原分成进检测、 行饲料对中动源 物成分性行检测进 参考文。:
献[员] 摇 Che Fn S,G o Z X a,aWgnJ H . Foo daSefytMo in
toirnga d n (福生陈高志贤,王, 建 华 .食 品 安 全 测 与 现 检 代生物 技 术 .圆[] De摇gnX H R,neH F .ouJral ofnCho gqingnTec nolohyga nd Bsuniss eUinersvit yN:turalaSc enie cEitdoni (邓小,任红海芳 重.工庆商大学报:学然自学版)科,圆 园苑园 ,源 (员圆 )圆:怨[ ] 摇猿 oreBvti zJO , Lina D gPl,offe D ue, at. Gelnme Roes, 园园圆猿, 源[ ]摇H ubreM L,soer t ,HiDlerl ,eRta . Anall iBohce m,圆园园 员, 缘[ 摇 ]We S Y nW,nagS Q. Ltetersin Biteocholnogy 文 ( 思,王远[远 摇 Wa]gnW P ,iNK Y,Zh ou GH ,et al. H erdetisa(汪 维,倪 [苑]鹏摇 C henY Wu ,YJ ,u X L ,et Bla Chi.a nBotechniology (陈颖, 吴亚 君 徐, 宝梁, 等 . 国中 生物 工 程杂 志 ),圆园园 源,圆 源坤仪,国周华, 等. 传遗) ,园园圆远, 愿圆 员) :(员苑 员启 升 生物.术通技) ,讯园园猿 ,圆源员(猿) : 圆愿 员圆怨怨(员 :圆) 源猿员 (猿 :缘员) 北猿京:学化业出工社版),圆园 园源:员 圆 怨Mdoen Broitehcnloog. Beyiinj :g Cemihac lIdustnry rePs
s
从法精炼物油植中提取了大豆 DAN, 这国是首次外 报道从炼植物精 中油 检测 大到 豆NA D。覃 文 等eGnScea 等n[
远 远] T
M
对 市 的 售食 用油 进 行 了DNA 提,取利 P用C 技 R术 检测 到 植物 内源 基 因。 Pitn 发o在食用 油 现NAD 取 过 提 中程 磁珠法和,
离心
法柱剂试 相盒 比十六 烷基 三 甲 基 溴化铵 (etycl rithytlammnoiu mrbmioed C,TB A)法和 十烷基硫二酸钠 ( sdoim doudecyls lfuta eS,D S )法 得, 到NDA所 含的污染物 PCR和 抑剂更少。总制,之以橄榄油 为代 的表物 理压 榨 在 油DN A 取提上 较 为 容易 , 可以 进行PC R 、R PDA、 SR 等S后 续 研 究 ;以而豆大油为 代的 表化 学萃 取油 生 过产 中 D程A 降 N 解严重, 且 部分 随 水 相 流大 , 因 此失 残存 于 油 相 的DN A非 常
微少 , 提 取困难 较大。 目 前 食 用 油D N A 提取的 技术要点要包括主 (员)样品的前 理处 ;()圆裂解 分和 NA D的富和纯化集 陈。等 颖离;( )猿究 情况进行总了。
结 [苑远
]相关的对研
猿
摇 望展作
中得到广泛的 应了 用 ,但是由基因的于数水平 量生物和的质量体 平水并 不 等 同 , 多大检数仍测留 在停定性阶段。前,目 内国也外有少不者学尝在试针 特 对定 食品 原料 之间 的 掺 假 展开 量 定研究。 如 Saores
[等远愿 ]
摇摇 虽基因检然技测已经术在各食品物类种鉴定工
采用双重
CPR 术利技线粒体细用色胞
素
B 员圆 S 和RrA 基N建因了立禽中掺肉的入肉的猪
量方法定 ,定 量范围 为 员% 耀苑 缘 %, 论值理与测值 量间之的相关系 为数园 郾怨 。怨另 有 学者 进一 步 探 索 同不物、种不同 织组 材料 的 因 基 量数和 样品 量质 之间 数的学关系,希 找望一种换算到律, 实规从基因现角度 食品对分进成行定检测
[量 怨 ]远
摇。 除此摇外之 ,快速 、简 、 便高通仍量是检方测法的
管细电泳仪 ,不仅能现实通高量、快 速 简、、 便分高辨 的基因片段电率泳 分离 , 而且软在设计上更有件
利
展方向发。以A ilgetn 圆园员 为代表的新一代园片芯
毛
于究研进者行定 量分 。析而 质 谱 术 与技 CR 技P术 的 结也合成为食物品种定鉴中种成分多同时测检 方方万据 法的数发方向之一展。
· 园远·
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摇 ustropMS ,Engda ohAexlsons CS,evsson n U,te a.lEur [ 源苑 摇 ]émNeidE ,jhUlyei G ,eGlnceserE .A tac Alment ,i圆园苑园 ,[源愿 摇] eGminr iA,S cravelal Ei ,eLsginoilF et ,l. EaruFood Re s [怨 源] 摇Mabr u , DDout J e P M,uoto nA ,te al.I nter Jn Food[ 园缘] 摇 Mari ecsihM ,T oerli A l Bia,nhciA ,e ta.lFood C otnr , [缘 ]员 摇 ernHádnez , AAarda E n Ma,rtn í A et a,. J lAgicrFood [ 缘圆 摇 H]n JaX Deng , T ,HTuag nW S,tea l.T heCo llectoino f员 stN tiaoan lnIpestioc ann Qduaantrne icadeAmciC noerf 术报告论集)文 ,圆园员员 愿: 园enec (建韩勋邓婷 ,,黄 婷 文胜等, . 届 全 首 检 国 验检 疫学 Ch me, 园员圆 园,愿 ( 缘圆 圆 :员员远愿愿)圆 员员 ,园圆 (猿 圆/源 :)缘圆 源icMro, 圆园源园 ,源怨( ) 员:猿猿 Tcheon l,园园圆 缘圆,园圆 远员:怨 猿 :远圆员 Fo源doR s eeThncol ,园园愿圆 ,圆远圆:苑 苑员C he ,m圆园愿 园缘,远( 圆员) 源猿圆愿:( )缘:员缘 园猿 Food Ceh ,m圆园园怨 ,缘 ( 苑圆员) :员园 员怨 (员怨 ):园 苑ci S,园圆园 ,远员员 rBedeni g圆,园愿园, 圆 圆:
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澡蚤藻泽灶 藻燥怎则灶葬允 造燥 枣澡则燥悦葬贼燥早皂则责澡葬赠
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ODI:员 园. 猿苑源圆/ S. P. 员员圆J猿. 圆园员员 . 园园缘怨源
特
别策: 食划品全检安测专·论综与
述基
因检技术在食测物种品鉴中的应用定(
国中验检疫检学研究科院,京 北员园员圆园 猿) 要 :摘食品 安全关国计系生民, 品物种食定鉴食品 是安全 链 重的要 环 。 节基因 检 测技 术 的 发展 食使 品物 种 鉴 定变 得更加 快、速准确 、灵敏 。本文近对年十来国外内用采 基 因检 测 技 术 行 食进品 物 种 鉴 定 的 究研 和应用 情 进 行况 了 结总分和, 析括包基检测技术的因特、点主 方法要及其 在 动物 源性 食 品 植、物 源 食 品、性 高附值加品食和深加工 品分食中析应用以及的未的发来展 关键词 。:基 检测技因术 物种鉴;定 食;品 图分类中 号:O 缘远愿 摇 摇摇 献文标码识: A 摇 摇 文章编摇 号:员园园园 愿员苑猿( 圆员园 员 园)苑 缘园怨 源园苑
陈 摇颖 摇, 亚君吴
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in lanptoirgnitadef oo ,adnmail rigionteadfood ,hi g hvlueaaddd eoofdan d hihgy lprcoeseds ofod.K yewo rds:g ne detectione tecnhology;s epcis eiendtfiiacton ifoo;d摇 摇 当 , 食源性前病菌原染污 农药及、药兽留残等是 水平的活日提高益 未,的食来安品问全题更多地表 为 对 食现品 的 质 量 品、质 、 养营 性等 的监 控。 其 ,中 食对物品的种鉴是关系食定品安、全质量、 质品营和养性 各方面等控制的要科重问学。题然自生界种物 类不其计数,许多 会给 类 或人者 特 定 消 费 群 体 的 健康带 来重威严胁,如 各种敏致原 、毒植有或者遭物到疫 污病的染禽畜等 一份物,来源种不的明物食带会 巨来的食大品 全安 风 险。即 便 是 全 安的 品食 原,料 也因为会种的物不同而营养成在分口感方面存在 和大巨差的异, 可在能长食用期过程中消费给者, 其 尤 摇 摇此除之, 伴外随品掺食所假产生商业的欺诈 市 、是婴幼和青儿少的年康健带来不影利。响 掺假的手和花 段样 在 也 断不地 翻 新 因 。此 ,一面 方需要定严格制的律法规来法约生束者和产营者的 行经,为另一 方面需 借要 助 科 的学检 测 法 来方 保障 监 管的有 效行执从 传 统。 的 验经判 断、 感鉴别到官经 典生化的分、 析现仪器分析代方法 再,分到生子物 学技术 ,食品对的测 检 针 从对 表观 形 态 发 展到生 化 水 , 平再到基水平,因 法 方的准 确 性、 灵度敏稳和定性越 来越高。同时 这,说也明现食品代加工业的发工展 ,对 测或检别技鉴术的解能读提力更出高的要求。 摇摇 本文对近十年 来食品物种定中广鉴泛用应的 并基该领域的对来发未方向展行进探了。 讨因检技术的测研究 和 用 应 况状进 行 了 分 析 和总 ,结
食品
全安中们最人遍关注普的问。题随着人而生们
员摇
基检因技测
(术 deoxryboinuceil caidc,D N A 的形式存在)于有所组织 和 细胞中。 由 于 遗 传 信息 直 接 决 定 物 生的本 摇摇基因是生 物遗传 信 的息载 体 ,以脱氧核 核糖酸
乱象场、贸 易纠纷 等问 题同 不 样 容 忽视。从 两 千 年前多的古社代会 今 天 的 到现 化代 会, 社论无政府是还 是民与食间掺品 假 斗的争 从 来 就 没 停有 过止,而
陈摇 颖 ,博,士 究员,研主要研究 方为食品生物安全向 .elT: (园员园 ) 愿 苑缘愿猿
缘愿 苑Email,: yqcyeh n 岳ahooy. cmo cn. . 通联系人讯 基金:目项: 国家 “愿 猿 远划” 计( 园员圆 员A员园A园愿园苑 ) 和国源家量监督质验检检总局科疫计技项划目 ( 圆园园怨 KI猿远员 . 万)数方据收 稿日期 圆园员员: 园 源园
圆 第摇苑
陈期摇 , 等:颖基 因测技术检在食物品种定鉴中的用
应· 怨缘缘
质, ·此通因过因来 鉴基 别 生 物 物 种 是 最具权 威和 科 性学方的。法技 在术 层面 上, 随着上世 纪分末生子 学的发物, 对基因展息信行快进速、 确准析的各分种方 法 不 出断现 ,如聚酶合式链应反( plymoraesec ahnir eactoni ,PRC 、)实 时 荧 光CPR、 子 分指 纹、 基因片、 芯因 测 基序等 。 相应的 仪 器和 商 品化 试剂 发的也展是新 日 异,月 并不 断 朝 更 快、 更 着准确 、更 敏、灵 更动自 化和 能智 的 化方向 发 展 这。 些技 术 的 革不仅显新提高 著 了 食品检 的测效 率 而,进一且步 促食进安品全的念从卫理安全生角的提升到食度 品质、量品 和营养性等方方质面。例面,如采 用因检基 技测可术以速地分辨快食品使中的所有用动物原植 成料, 分对并同一种原料的同不系品行进细区精,分 至甚溯到特追定的 生 物个体。 在 这 个 程过中, 基因 测检技术具以备下 个几独 特的 优势,从 保而了结 接证反映基在序因 列的差 异 上 ,因 可以根此基因组据果的可 靠性 :()员特 异 性 好。 由 于 生物 型 的 差 异直
年诺贝的 化 尔 奖。 PCR 学 术技 经过 大 改 进 产量生 巢 式 PRC 反、 一系列相关了的方法, 包括位 原CRP 、 向CRP 、锚 定PCR 、 重多P RC 、不 对称 CRP 、重 PCR组 标记、PCR 、 免疫PC R等, 这 些术技主要用定 于性检测 随 。着 员怨怨 远 年 时实荧 光 PC R 技 术的推 , 出CPR 现了实从 定 性到 定 量 的 飞 。 跃 该 技术主 要 理原是在应体反中系加 入 荧 光 基 团 ,用荧利光号积信 累测整个监P CR反应的进程 最,后过标通准 曲 对 线未知模板行进量。定中其的光荧料染包括针类探和非 探针类 :针探类是 利用 与 靶 列序 异 特杂 交的 探 针 来指产示的增物, 非加探针则是利类荧用光料或染 特者殊计的设引来指示物产物的增 加 。探针类料 的染信 产号生 是 基 于 荧 光共 振 能 量 迁 移( fuolersecntre onsacn eeenry gratnfes ,FrET R) 原 理,即当 个一
荧光子 分 (供体子分 的荧光光)谱另一个荧光分与 (子受 分体子) 激发光的相重谱时叠,供体 光分荧子自身的荧光强 衰度,减受体 荧分光子荧光强的增度强[
员,圆 ]
。同不区、 基域因 、片段进化的特点来择适合的靶基 选因进鉴行别例如。, 守的保家基看因常用通种于 以上类水平分的鉴上别, 化进中的适基用于因种的鉴别 变,较异快的基 因用 于 亚 、种株 系 的 别, 而针鉴对 基因全组 扫 描 式 的 纹指技 术 可 于用个 的 体 别。鉴 圆() 敏。应用基因灵检测 技 术 可以 发 现含 量 低至 几拷个贝的因基, 使食品 生 物 成 分 分 的 从析常 量 水平进 入痕水平。量在设计法方时的可以候据食品依 加工的程度 选,单择拷贝 或 多 拷 贝的基 因来 满 足 不 同 的展发市场的和张给食品扩测工作检带很大的来 压食分析品中对灵敏度的 要求 。(猿) 快捷 。 食品 产业
摇摇 前实目时 荧 P光R 技 术C 在食 品成 分 检 中 应测(员 ) 异特性 强 。由 非 于 特 异 产 物 不 能性 探与针 杂
得用常非广 泛, 主 要是 因 为 该 技 术 具 源有 大优 点 :交 ,因此 特异其性传比的 P统RC 为提大高。 分 信
子、标 杂交探 针和 新 的 型TaMqn a小沟 结 物 探 针合 以检可出测序列靶 (中mi or gnorvo einbdr eMG,B) 单碱基的个错配、缺 失或 插入 突变。(圆 灵 敏) 度高 。常达 员通 耀 员园园园拷 贝 / m L。 ()猿重 现 性好。 由于 环循阈数值( c ylce hreshtlo ,Cd )t与起始 板模对的数 在存性线系关,而 P C R 环 数循在 达到 C 值 t所在 的 环循数时 ,刚刚进真入正的数指扩期增( 对数期 ),此时微 误小尚差未 放大 ,因此 Ct 值的 重 性现 极 好 即,一模统不同时间扩板增或一时间统不同管扩增内 得到 Ct 的值 是 恒 定。 的()源 有 降 低 效 污染 常。规 PCR 方法繁杂 的 验 步 骤实容 易造 污成染 和 出 假 现性结阳;果 而实荧光 PCR 时法只方在需 样加时 打开 一次盖 子,其 全后闭程管作操 大,大减少了外来酸 造成污核染的机。 会员. 圆摇 基芯片 因 摇摇 因芯片基是 指 D用NA 分 作子为 针探 生的 物芯 片 芯。的片概引念申 自 计 算 机芯 ,片在 个微一的 小目标基因与探过之针的配间反对对目应基标因进行分析 获得,的光号、 电信信或号信号磁检测被器仪 录并记换成数转字 信号输 入 计 算,机由计算机 软件
源自]动分 、 解析读验结果[ 猿 , 。
实力, 尤其要
求口对 岸 的
通 关查 验 和生产 线 的质量 制控建快速立反应机。目制前类各 PRC 仪 基因、分 析、 芯片仪扫描等高 精仪 尖 仪 以器 及各 类 商 品 化 试 盒剂的配使套用大 大 缩 短 了 检测 间,时 在短时间内 较可就完 以成样 品 从 制 备 到结 果 判 读 的 全过 程 同。 时,自动化检测 仅有助于不高操提作的准度精 防, 交止叉污, 染而有利 且于 护 实保 验 人员 免 受 毒 有试剂 伤的。害根 据测检的目和要求择选适合的方。其主要包法括员 员摇 P.CR技 术PC R 、因芯片和基分子纹等 猿指类 方法。摇 该技术是摇一 种 体 模 外拟 然 自NDA 复 制过 程 板, 的一在人工对合的成寡核苷酸物的介导下,引通 过耐温 DNA高聚 合 酶的 酶 促作 , 用速特快异扩地增万 方数 出据定特 的NAD片 。段发者明 ullMsi 因获此得员怨怨猿 摇 摇 采 基用检因 技 测 术 行 进 食品物 种鉴 定时, 需 要
载体
表点面阵式 布排 大 量 可 的寻址 的 探 针 分 , 子通
核酸扩增技
。它是术以 待 扩 增 的 两 D条N 链 为A
模
摇摇基 芯因技术 片 大 的 最 特点 通 量 是高 可,以一 在实验次中成对上千万 的 目 标 因基 进行 检 测 因,此
可 ·缘怨·远
色
谱
第 怨 卷
应用于食圆品复杂成分快速的查筛但由。该技术涉于及 芯片样点( 仪) 、 杂 (交 仪 )、清 洗 仪( 、) 扫 描 仪) 等复(杂的器和操仪步骤作, 数据析分也为复较, 杂 此因目在食前分品领域析尚于处研究段。 阶员 . 摇 猿分指纹子技 术摇摇 分子指 技纹 术 最 应 用 于 遗 传早学 研,究 是用 利列多的性 态 基 础, 其 优 上 点包 括: 员() 态多 高性 变 异类,丰型富理。上, 论DAN 水平遗传多态性的表 为核现苷序酸列任的 差 异,何因 此标记数量的几乎是 限的。无 () 大多圆 数DA 标记是 共N 显性 的 ,所 很以容 易区 分 杂合体 和 纯 合 。体 (猿)稳 定 性 高, 受不环境条件 的影,响没有 组或器织的特异官性,不受个体
除非对近要物缘种 行进 区分,一般 不需要行进基因 检测。加工而品 成 食分 较 复 为杂,无法直 接通过颜 色 气、味 形态或者脂肪、、多糖 生等化分进组行别识,基 检因测技术为物种成定鉴不必少的可段手。 .圆员摇 物源动食品性 摇摇 肉食最品常的见假掺品是的种掺假。内国外针羊 、 、 鸡鸭、 鹅、 火、 鸡、驴 等鹿。多以粒体线细胞的色为 序列靶,检 测方 法 的 敏灵度 一 般 能都 达到 %员或 更 低 ,远超过现实远的检测需。在求测中,检通 直 常使用接动物组织为阳性对照。作对一但
些不常见 动的物分成果难如 获 得 阳以 样 性,本可以 根数据库据 中的 基 因 信 息合 D成A N 为 作阳 性物 质。 常而规 CR 和P实荧光时P CR 是 最 常用 的 检测 方法。 陈 颖
[等 原苑 员园]
因组多基态性特 来征 分区相 近 的品 种或 系品, 并进行 标目状的性因基定 位 。等该 术 建技立 在DN 序
A对动物分的基 成 因 检 测报 道 很,多 主要 涉 及 、猪牛 、 素 B 、圆员 rSNR (A核 体核糖核糖)酸和 Dloo p 区域
发育阶的影响。段 ND 分子A指纹技术种类繁, 多 包限括 制性 片段长 度 多 态性( ertsrcition ragfenmtle gth ponlmoryhipms ,FLPR 、) 单简重复列序( im pls eequsnee recpate ,SS )R、 随扩机多增态性 (arnd moam lipfei poldyormphc DiA ,RNAD P 、 )增长扩度 多 态 (性 mapliifde frgmeant elgnth plymorophism ,AFPL) 、 链单构 象多 态性( single s rand ctnofroamitnop loyorpmish ,SSmC )P、 变性高液 相色效谱( dnetariug hignhp rfeormnace iluqdi hcor matogrpahy D,HLPC )等 技 术。 这些 技 术以 PCR 为 础对基目标因基 进 扩行 , 增分别根据不的同原理对基 因序列 的 态 性 进 行 检 测多 。以S CPS 为例 ,扩 片段经变增剂性或 温 处 高 理后解 链 ,在链单态下状于 一浓度的定变非性丙聚烯酰凝胶中胺电泳其。 迁主取要决 DNA 单 链于移率除 与DNA 度有长关外 所形成的空间,构。象 相同 长 度 的 单 DN链A可 以 因单个碱其基差异的产 生空 间 构 象 的 差, 从而异使 在其凝中胶电的速泳不同度,显 示出带型的差,异即多 态。传型统丙烯的酰 电胺泳 实验 费时 费 力 , 因分基 仪析的用实使了快速、 现准确 、敏灵、高通量 检的测。同时, 激光 诱荧导光检 测 可 器 对 以 源种不 同 荧光 染 同料时进检行,测 因此可通过标以不同染记料对 多种分进行检成。 另测外 ,自动控化制提高工作了效 率 也避免了操作中,的为人差误 从而增,了结果的 稳定加性和复重。性系软统件还校正能毛细管间各 的电差泳, 异大程度最减地了少验实的系统差
误[缘 远]
,报道
了 马、驴 、鹿、 骆 驼 等 成分的 CP 检R测 [
员员]
方
法
, 检测 对象 包 括食 品 饲 料、、 明 胶、 妆 品。化 aMn 等e 建立 了肉 类食 品 中 成鸡分 的 CPR检 测 [
圆员 ]
方
。法在禽类, 中肝鹅因价为格昂贵 ,经常掺杂鸡 或者被 肝鸭 成分。 Rdoírugez等 立建实时荧光了 CRP方 , 对法肝鹅 员中% 耀 缘圆 % 的 成 鸭分进 行 定量。 重 P多C 技R也 被 术 泛广应 用 于 品食 中 种多成 分的 测检 。Matsuagn 等
a[员猿 ]
建 立 了 同 时 测 检、牛 、 鸡猪、
绵羊
、山 和羊马 成分 的 多 重 PCR 方 。法除 此 之外 ,R FL P、 APR 、 D基 因 芯 片技术 也 是 经常使 用的方 法。 hCne等 等 [
员 ]缘 [员源 ]
采
用PCRRFLP 方法对牛牦、 牛、羊 等
动物
的 线 粒体 员圆 rSRA N基 因进 区 分行。Ma haajn等成 分行区分进 。in Y等 等[
苑员]
采
用员圆 S r RA NPCRFLP R法对牛方、 羊、 驼
骆[ 远 员
重 ]PR 方C法 对牦 和 牛牛进 行 区 分。 D b orswk a用采实时荧 P光C R法方掺 对入 奶羊 的 奶牛成 [
员愿 ]
采
用员 S圆 rRNA 基 多因
分进
定性和行定量检测 P。tee 等
建立 r 了食肉品
奶酪和品中制物动成 分 的芯片 检 方测 , 法可同时以检测 源 不同种的 动 成物分 为。了 提 检 高出限, 还 园可郾园 缘 %园 质量分(数)
[员 怨
]以
检 测 短散 布 核 元( SIN件E ),使 检 出限 达 到。 着随疯牛引病的食品 和
饲料风发险到受全世界 的 关, 注食品和饲料中物源 动成分性测检工被作予了赋的内新。目前中涵国已
经。
颁布实
施了动物性源料饲中牛、 、 骆驼羊、 等 员园鹿 种反多刍动物分成 的CP 和实时R荧 光CP 检R 测方 标准法, 这方些法运用出入境在口岸的管监工中, 作为保护国 门 、防动止疫病传播发挥了重要作物。 用摇 相比摇种类较 于少 的 畜禽 类 食,品 产水品品的种则 胜枚不。不同品种之间举价差异很大格 ,假掺、制 假隐患严重。例如市场上 售销的,鱼 通经常去过头
、摇 食圆品成分的物鉴种
定加工品和深食工食品加其中农。产品食和品料往 原万数方据 感 官鉴定 来 识别 物 种 身份 往,以通可过简单 因的 此 摇 食摇根据加品工度程为农产品分 食、品料原、一般
摇 第苑
期
摇陈颖 , :等 因检测基技术在品食物鉴定种中的用应
·缘 苑·
[ 怨猿 ]
去皮或猿切片加失工 去了 原 有 态,形大部 分品产经 还过渍、盐 烟熏烧烤的或加工 只,通过基因检有测能才 实现
准确品种的别鉴。P RCSCP S和 PCRRFPL 是鱼产 品 品 种 定鉴中 应用 多 较的技 术 Co。omlo 等b[
圆 园]
水
牛 山羊、、绵 β羊 酪 白蛋基 的因PC RRLF 检P测 方 , 检出限达法 到园 缘 郾% 。Mauetd等 则荷对斯
[ 猿源 ]尔
奶牛坦系建品了立基 检 因测 法方, 该品奶牛的牛系 乳能不用一些法国于酪奶制的。备 Btteroo 等 采多用 重PRC 技 建 术立 M了zozralela 奶 酪中 牛 和奶检 出为限 %员 。 牛的水细色胞 素B基 因 的 鉴别 方 法, D e
[ 等缘 猿]
使
P用CRSCS 法区P分Eu thnnuysp eamlis
[ 、员圆]
T
uhnuns obsesu、 T . laauga n 、T. alabacres源 种 金鱼。 枪ehRbeni 等s 、o ciApesen rersipcus 和A. selatut 猿 个s 鲟鱼 品 种 。eRheinb
等 [圆 圆
]
员圆猿 和b 两p个列序 PC的RSCSP法鉴别 Huo hs 通过u 线 粒体细 胞 色 素 B 、小清蛋
使
针 对用细 胞 色素B 员员 远b p
利 线用粒 体 Dlopo区 域 序 列建立 了 乳
[ 猿远牛
]
和奶酪中奶牛和 水 牛 来 源 成 分 的 多重 PRC 检 方 测法,检出限为 园 郾 员 %。Da mlssao等 出 限 圆为% 。 采用实 荧时光P R C技术 对 Mo zarelzl 奶a酪 中 牛 奶和水 牛 源 成 来分行了检进测 对水 牛,牛 乳 中 的 奶牛 牛 含 量 的 乳 圆检. 摇 植物圆性源品食
等
熏冷 肉和 鱼 子 酱 中 的 园 员 个鲑鱼 品 种 。eRhbei
[ n猿圆 ]
白生和激长基 素 因园猿 耀园源 远 bp 园 列序 区 生 鱼分 、 通肉细过胞素 B色员 猿圆b p 序列 鉴别 枪金鱼 头罐
来
品种源,并 欧洲在地 区 愿个实 验 室 开 展 了 同协 实
园怨 猿郾 , 其 % Kat中suonuswp elaism 和 ardS asara d个两 种品 在 种 存 内 差 和异产 地 差 异。Re bein h
[等圆 源]
,验 结 缘 个 品果种 和 圆 个 混 品 合 种鉴 准 确别率 为 利 细用胞色 素 B 圆员猿原 猿 缘 bp愿序 鉴 列定 罐头
摇 摇植源物食性的品物种定鉴很一部分大是出于
基因转检测的需要 。针对 转 基因食 ,品 方面一通过物种鉴 判定断食品中 的植物 分 成种类, 而选择相从 的转基因应检体系; 测一另面方过物通种源基内的 因拷数可贝进以行基转成分因定量检测。这的主里 要介与绍品掺假和食过原敏
相关的研情究况。
金枪中 、鱼 鳗、鱼 鲑鱼 大 马、 哈 鱼、鲟 鱼 等 鱼 种, 品结 显果沙示鱼丁、 鲱、鱼金枪鱼和其 品他都有种殊的 SSC特 条P,带源 个鳗 鱼品之间种及猿 个 鲟鱼品种之 间可得 以到区 分。 ehbRen 等
[ 圆i ]缘
摇 摇品 鉴别在种物贸易谷谷物和加工食品类真的
伪鉴别
中 非 常 关键。在 世 界范 围 ,内水 稻 大、 、 小麦麦 等物作品系的非常多 , 不同品系的价而有一定的格 差,异 而且多许家国对 定特名 的称谷 加 物工 品产的 品 系来有源严的 要格求, 此因需借要高分助率的辨基因检 技测进术 行 品 种 别鉴 。 香 米 以为例 , 为大 作市米中的场 “贵 族”, 香价米比格通大普高 米圆 耀猿
采
用 PCRFRL 和
PPCRSSC
P两 种技 术建 立 M.了 poli 、 lM. lbaiud s、 .Maus trlas i、M. bi ilenrias 、M .acenspis M.、p or dutus c等 鳕 品 鱼种鉴 定方 法。 A ensio s
等 圆远[
通]
过
piEenhpeusl guzaa、 Ployprin omeraiancu 和sL aes tilotncui 猿s 品 种 进 个 行鉴 。别Cés pdese等
[苑 ]
圆线粒体员圆 SrNR 圆A愿 bp 园序列 SSCP图谱对鱼 的 通过细片色胞素B 圆员 园b p 列 序鉴别 新 鲜 或 冷
冻倍,
但其和 他其品系的 杂 交子代 往 往 丧失亲 本的 香 方法。测Wu 等
[猿 苑, 愿猿]
味口感和 ,此因要需 对 值 价较高 香的米 品 系 建 立 检 采 用RA DP 技对泰国术茉 莉香 及其近米品种缘 进 行区分, 用其利两中引物建条立 泰了国茉香米 莉品 种 鉴定 和纯 度 检测 方 。 法APRD技 的术优势在于无 需 事 掌先握 样本 的基因 信 , 息 无设需计物引探,针 主依靠对大量要随引机的物筛选来 获得稳定最 、辨分最高的 率系。 体aiJ n等
[猿 怨 ]
平
鱼片的鱼品种, 果发结现S loea sole 、 alPureoectnes lapesta 、Psltichtays hlfseu s和Rei harntids hippogulosoisdes 源 个品种有 均特异 的性 SSCP指 纹 式。 C模oemasn a等
圆愿 ][
采 P用RRCLPF技 术 同 时
[圆怨
]
区分术了大哈马鱼不同品种的 。Aensiso
等
区分了缘 个鱼平品。种Ru ssle l
等
用应相的同 技[
猿园]
利用
用采
多组 SSR I和SS 引物R对度
印Bamsai t香米 立 建 品 了种 鉴 和 定 纯度 检 测 的PRCCESRS方 。 S法RS和 SIS R等技术依据基 因 组 微卫 星 序 长 度列的 多态 性 进 行 缘 品近 的 系 分, 结 果 稳 区,定 分 辨率 。高 另外, 于由国啤我酒酿所使用的制麦主大依靠进要口 而不同国, 家来 源 的 不 同品 系 大 麦 在价 格上 差 很 异,大 易容在口进贸中发生易商欺诈行为, 因业需要 此立高建辨分率品系检测的法。方在麦大和小的品 麦鉴定种中 使,用 的 方法 也 多 上为述 的分 子 纹 指。 法Hydena等 [园 ]采用 S源S 荧R 光标 记 多 重 P RC 术技对 大麦 小 和麦品 系 进行 鉴 定 。Vrahsney [等源 ]员 过通一
多重P CR 技 对 术 鲶 科 Epi鱼enphelsu mraingtus a入掺 尼的 罗 河鲈 鱼 atLs neiloitucs 和oPylrpin o缘愿份中存在 掺假况。除 情 之此外 , 、 蟹虾 、等贝产 品也是水常见 的 鉴伪 对象。 S hiefechnvel 等行进鉴了定。摇 摇 外此 乳,制 品也 是 真 鉴伪别 的 重点 对。象 方西国 奶家酪发达,业 奶酪中对原乳料的来、 甚至源奶牛[ 猿圆 ]万数据 方品都有系严 格 的 定。 规latPh 等 立建 了针对 、牛
[ 猿 员
]
amerciaun 进行s检了,测 从园苑份 片 商 品鱼 发中 现
用
S采SCP 技对术 市 场销 售 的 虾 (C rnaogncra non )g 肉
· 缘怨·
[ 愿圆 源]
色
谱
第圆 卷
怨组
SS R和核 苷 酸单多 态 性( NS P) 记标对大品系 麦多性进行态分了。 析oCvetnr 等y 利亚大麦品 大 系 源在 个愿SNP 位 点 的 多 态 , 性并 验建了证愿愿 个 澳
品
。但由这于类食原品稀缺料 、价昂贵, 格易成为容不法分 掺子假 造 、 假 牟以 取暴利 的 象。 如对 燕窝 常 不法分被用猪子、皮银 耳 、粉淀 、琼、 海脂洋藻植物 或鱼类 类 等 添鳔加 或 伪; 造虫夏草被称冬 为“黄软 ”金, 价格 分昂贵十 不,法子多分亚香用虫草和凉 棒山虫草冒冬充夏虫草由于高。附值加品食的费消群 主体集中要东在方 国家 因,此国上相关际的道报并不 。国内多究研者前目要针对鱼主、翅 窝燕、阿胶等 见的常高附值食加品 立 建 基 因了检 测 方 法, 主要 实采 时荧 PCR 、光 CPRFLPR 技 术。陈 用 的 是CRP、 颖等 [
缘圆
立]相应了的 CRP方 对法 系品 进行 鉴 定 实 时 荧 光 PCR 技术。也被应用于 谷 物 的 鉴 。定 onnS
ant e
等[ 源猿]
对针小微麦 卫星位 点 序 建 立列 了实时 荧光P CR方 法 对硬质粗粒小麦 ,制 作的面 包 通 和心 中 掺粉 杂的 软质小 麦行定量进检。测敏原。 敏过引原发食品的安全问日益题到受达发 国家重视的 美国、 , 加 大、 拿欧盟多个国家和地等制 定了针对食品过区敏的原标标识法签规。例欧盟如 求对不芹菜 、 末芥等 成分 进 行 标 识 ,标 识 低 为 限园员 前目 ,国内针对外 见 植 物 常 性过敏 原 成 分 建 均 了 基因检测立方,法 要主包括实时荧 光PRC法 、 PCR 酶联免 疫吸 法附( PCReznmye lnikd iemmuonsrob net ssaya , CREPLISA ) 多、 重P R 和C芯 片技 等术 。uW等
[ 源 源]
摇摇植 物源食性的品一个另重很的要测目标是检过
用采实时荧光 CR 技P术建立 鲨 鱼了品 种
的检方测, 可以法 异特 性 测 检大青 、 尖鲨吻 斜 牙 锯、鲨 澳半洲沙条鲨不等鲨鱼同品种的分成,而 对犁头鳐 、银兔、 叶 吻鲛银 鲛、 平、鱼龙 俐 鱼、黄 鱼等圆园 个其 他 鱼类 无 扩 增 ,方法 灵的敏 度 为 p员 g μ /L 。 方 该 法 已等[
缘猿
]仅
常见对的 大愿 类 过敏 原 的标 识 做 出 了规 定 ,还 要
m
/g kg, 这 检测方对法灵的敏提度出很了高的求要。
成功被应于用场上市鱼产品的翅快速查。吴亚君 采筛实时用荧光 PR C术技建立 了燕 窝 金中 燕丝 成分的速快检方测 , 法时同用双采向电泳术建技立了 窝燕白质蛋测方法。检合这结种两方法可以燕对窝及其制 品真伪的 进 行 确 准 判,定目前该方法已 制经定成业标准。行 阿在胶 真的 伪检测 中 ,常需通 要对料皮原进 行 CRRFLPP检 测 陈。 颖
[等缘源 ]
用 采SYBR rGeen 时荧实定量光 CR
P术技测深检工食 品加 中 的芹 菜成 分 ,绝对敏灵达 到 园郾 度园园 员%, 对 深 加工 食品 实 的 灵际敏 达度园郾 员园 % 。 还有报采道实时用荧 光PC 技术和常R 规CP 技术 对羽R豆扇 、芹、 芥菜、末 麻芝、麦 等麸过敏食原成品 G分reinmi等 进 行检测 检 , 限出 达到 园 郾园 % 员耀 郾 园园员 %
[园源愿 ] [ 源 缘 源苑 原
]对针驴
和马
细胞色 素B 基因 小 片段 序列 立 了 建实 荧 时光P CR方 法。另市场 外上 鹿 茸 制 品 的掺 假 很也严 重,除了 使猪用 鸡、的成冒分充茸鹿外,还有不同品种 鹿 茸之 的间掺 假 。因 此,陈颖等 W agn等 鉴。定 除 之 外此
, 缘远 ][ 缘[缘
]
。
将肽酸 ( 核PAN )探针 和 PLH C 术
技
立了建时实荧光
行进了桃核分成检测的。与 P CR技术 结合 地方,色特的 工 加 品。 食abMu r等摇 其摇他植的类物食包品括香、料蘑菇 、辣 椒具等
有 [源 怨]
PC
R检测方法 ,用梅于 花 鹿 茸 和 马 茸 鹿 产 品的真 伪 性 PCR 法方 人对 参anPax ginsng e 价中格 较 高的 食 种品类常繁多非, 而且包很多极具地含方特色的小 种, 此相因关检的 测工作 在今 后 很 长 段 一时间 仍是研内人究员临面一的挑个。战圆 .摇源特 深加殊工食 品 摇 摇加深工食品加工艺的工杂复给性种鉴定带物来采 用 远 圆SrRNA 特
异
利用块线粒菌
体leu DNA r 域 区 一 的个 SNP位 点 计 了设PCR RLFP 区法 分 块 罐菌头 的 来 源品 种,其可区分的品 包括 种重 的要 商 业 品 种ubeTr emalospnrum 与 T .o esaituvm 、 T. brumle 、 aT . ndiiucm 猿等 个质品稍 、 价 格差较 低的 品。种 ariMsceh i等
缘[园]
“G mpoung o 品”进种了鉴行定。是由于 高 但加附值
将R PDA
位点
化转为 序 特列 异性 扩 增 区 (间s qeeuce ncahr方 法 ,后 对 a掺ctrieez admlpiifdereg oins ,SACR 入牛至 ) (orngo e) 中的形唇科( La imaece ) 植物a成 进行检分 , 测检 出 限为园郾 缘 % 。 Her ánnezd 等[
缘 ]员
大很难。其困中用食的检油工测很具代表作。橄
榄油由于营性养富 丰 而深受 世 界 各国消 费 的者 欢喜,但 每全年球 的 榄 油橄产 量远 远 于 低 场 市 的 上 通 流量 ,明说掺假 况 情之严 。重 国 际上 针 对 橄 榄 油 展 开很了鉴多研究
[伪 缘苑 原 园远]
利用
两 R个AP 位 D点 对 掺入西 班 牙 特 色食 品 “ Pim n toe ned a Vlra ”e 熏烤辣红中的椒他其品辣种进 椒了行测。 圆检 . 猿摇 附高加值品食摇 摇随着们人生水活的普遍提平和健康理高念转的
,主要集于中不品系同 榄橄 油
品的 种 分,区而 国 内 相关 的 究研工 作 还 很。 W少u [等远员 采用实时荧光 ]CP R法检可测橄 榄油中 油的 橄 成榄分 Zha。g n[等 圆远]根 据 毒性 因基建 立了 棕榈 油中 掺 杂 其 他的油 料 成 分 的常规 CP R和 实时 荧 光PC 检测R 法。 近 年方 来 国 产的 山 油、茶 红 花 油、
葡, 高
变附加食值品类越种来多越,加工工 越来越艺精 万方据 细数 ,价格也越越来,高 逐渐成正名为其实副高端的
食 摇苑期第
陈摇 颖, 等: 基因检测技在食品物术鉴种中的应用定
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油籽高附加值等食油、 用和油产品越来越多, 调 给市场监和管消费 者识 带别 来 难困, 此需要对因类 这品建立产配的检测方法套。 摇 摇用 油食 检测 中 最 大 的瓶 颈是 DN 的 A 提取 ,国内 外究人员研对开展了专 门 此 研 的。 究aPui 等
l 远[源] [远猿
]摇摇 外, 另将现分代生子物技学便捷术 、准确分的子 标能力,识与色 谱 光谱或、谱波方等的良好分离能 法力特有及的结鉴构别 能 力 相 结 , 合借并计算助模 机式别识术或技模 糊 数学 方法进 行 结 果处 理 也,未 是食品物来种鉴技定术体系发的趋势。展
展的方法可从发制粗大豆油中取提 DAN, 并不适 但于用精炼 植 物 。 油Cotas等 利 用改良试的盒剂
[远 缘
]源
摇结论
摇摇 进入 新世以 来,纪我国 品食工业得了举取瞩世目 成绩, 成的为国我民经国济增中长最、 快具最力 和最具活展发力潜的新的济经长增。点食品全是安人 群民最关众心、 最 接直、 现最实 的 利益 问,题 保障而食 安品全国家政是 高 府 度重 视 重点投、入和持支的 工作标目。何将 如最新、 最好的技 术应到食品安用全管理 工作各的环节个,实 现 对“从 农 田到 餐 桌” 的整 个物食的有效链监 管 ,是 一每食个品全工作者 努安力方向的。现代分生物学的子发展带来了因基检 测术技, 使食品成分的全解息读为成能可,为食品 防假打假这 个古而又老与现代国民生息息计关的相事业 带来了全的新貌面和阔的前广。景食真品检伪测从传统的色 气、、 味感等官析分经和典的肪脂、 、 蛋糖 质的化白分学, 析展发到采高用度敏和灵准的基 因分析确术技原料对的 种 物 份 身 行 进 快速鉴 定 使, 过界定模糊去的、经 验 性的 或者 需 要大量 实 才 验 得 能的到结变得更果科具性和学说力服。十近年国来 外食品科内学工者 作开 了 展 量大工 作 ,采 基用检因测技术对 多种品进 行 食 物 种 鉴了定 和 溯 研源究, 建立 的 方中法 有 多 被许采 纳 成 为各 食国品 检 测 标 准方 法 。过基因通检技测进术行品食物种定鉴助于有 对食品分成的伪进真 行鉴 别 、对 食产品的真伪地行进 源溯 对食品、敏过原分成进检测、 行饲料对中动源 物成分性行检测进 参考文。:
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toirnga d n (福生陈高志贤,王, 建 华 .食 品 安 全 测 与 现 检 代生物 技 术 .圆[] De摇gnX H R,neH F .ouJral ofnCho gqingnTec nolohyga nd Bsuniss eUinersvit yN:turalaSc enie cEitdoni (邓小,任红海芳 重.工庆商大学报:学然自学版)科,圆 园苑园 ,源 (员圆 )圆:怨[ ] 摇猿 oreBvti zJO , Lina D gPl,offe D ue, at. Gelnme Roes, 园园圆猿, 源[ ]摇H ubreM L,soer t ,HiDlerl ,eRta . Anall iBohce m,圆园园 员, 缘[ 摇 ]We S Y nW,nagS Q. Ltetersin Biteocholnogy 文 ( 思,王远[远 摇 Wa]gnW P ,iNK Y,Zh ou GH ,et al. H erdetisa(汪 维,倪 [苑]鹏摇 C henY Wu ,YJ ,u X L ,et Bla Chi.a nBotechniology (陈颖, 吴亚 君 徐, 宝梁, 等 . 国中 生物 工 程杂 志 ),圆园园 源,圆 源坤仪,国周华, 等. 传遗) ,园园圆远, 愿圆 员) :(员苑 员启 升 生物.术通技) ,讯园园猿 ,圆源员(猿) : 圆愿 员圆怨怨(员 :圆) 源猿员 (猿 :缘员) 北猿京:学化业出工社版),圆园 园源:员 圆 怨Mdoen Broitehcnloog. Beyiinj :g Cemihac lIdustnry rePs
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从法精炼物油植中提取了大豆 DAN, 这国是首次外 报道从炼植物精 中油 检测 大到 豆NA D。覃 文 等eGnScea 等n[
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对 市 的 售食 用油 进 行 了DNA 提,取利 P用C 技 R术 检测 到 植物 内源 基 因。 Pitn 发o在食用 油 现NAD 取 过 提 中程 磁珠法和,
离心
法柱剂试 相盒 比十六 烷基 三 甲 基 溴化铵 (etycl rithytlammnoiu mrbmioed C,TB A)法和 十烷基硫二酸钠 ( sdoim doudecyls lfuta eS,D S )法 得, 到NDA所 含的污染物 PCR和 抑剂更少。总制,之以橄榄油 为代 的表物 理压 榨 在 油DN A 取提上 较 为 容易 , 可以 进行PC R 、R PDA、 SR 等S后 续 研 究 ;以而豆大油为 代的 表化 学萃 取油 生 过产 中 D程A 降 N 解严重, 且 部分 随 水 相 流大 , 因 此失 残存 于 油 相 的DN A非 常
微少 , 提 取困难 较大。 目 前 食 用 油D N A 提取的 技术要点要包括主 (员)样品的前 理处 ;()圆裂解 分和 NA D的富和纯化集 陈。等 颖离;( )猿究 情况进行总了。
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猿
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中得到广泛的 应了 用 ,但是由基因的于数水平 量生物和的质量体 平水并 不 等 同 , 多大检数仍测留 在停定性阶段。前,目 内国也外有少不者学尝在试针 特 对定 食品 原料 之间 的 掺 假 展开 量 定研究。 如 Saores
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摇摇 虽基因检然技测已经术在各食品物类种鉴定工
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素
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量方法定 ,定 量范围 为 员% 耀苑 缘 %, 论值理与测值 量间之的相关系 为数园 郾怨 。怨另 有 学者 进一 步 探 索 同不物、种不同 织组 材料 的 因 基 量数和 样品 量质 之间 数的学关系,希 找望一种换算到律, 实规从基因现角度 食品对分进成行定检测
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摇。 除此摇外之 ,快速 、简 、 便高通仍量是检方测法的
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利
展方向发。以A ilgetn 圆园员 为代表的新一代园片芯
毛
于究研进者行定 量分 。析而 质 谱 术 与技 CR 技P术 的 结也合成为食物品种定鉴中种成分多同时测检 方方万据 法的数发方向之一展。
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